枯草芽孢桿菌Czk1與化學(xué)殺菌劑復(fù)配對(duì)橡膠樹(shù)炭疽病菌的抑菌活性

謝立 賀春萍 梁艷瓊 李銳 鞏佳莉 翟純鑫 吳偉懷 易克賢

摘要：【目的】探究枯草芽孢桿菌與化學(xué)殺菌劑協(xié)同防治橡膠炭疽病的可行性，構(gòu)建由生防菌與化學(xué)殺菌劑組成的菌藥復(fù)配劑，為橡膠炭疽病的可持續(xù)防治提供科學(xué)依據(jù)。【方法】以6種化學(xué)殺菌劑（咪鮮胺、百菌清、根康、嘧霉胺、丙環(huán)唑和嘧菌酯）及2株菌株（枯草芽孢桿菌Czk1和橡膠膠孢炭疽菌RC178）為試驗(yàn)材料，采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定6種化學(xué)殺菌劑對(duì)RC178的室內(nèi)毒力，稀釋平板涂布法測(cè)定6種殺菌劑與Czk1的相容性，抑菌圈法測(cè)定Czk1對(duì)RC178的室內(nèi)毒力，Horsfall法明確菌藥的復(fù)配方案?！窘Y(jié)果】室內(nèi)毒力測(cè)定研究結(jié)果顯示，6種殺菌劑中咪鮮胺對(duì)RC178的抑菌效果最好，其有效抑制中濃度（EC50）僅為0.0778 μg/mL，其次為百菌清和根康，EC50分別為0.4694和0.4733 μg/mL。化學(xué)殺菌劑與Czk1的相容性測(cè)定結(jié)果表明，嘧霉胺、嘧菌酯、丙環(huán)唑、根康和咪鮮胺與Czk1的相容性均較好，其中根康在中高濃度下還能促進(jìn)Czk1菌落數(shù)量的增長(zhǎng)。將濃度為4.75×107 CFU/mL的Czk1分別與濃度為10.4733 μg/mL的根康和濃度為0.0778 μg/mL的咪鮮胺混配，Czk1∶根康=7∶3（v/v）時(shí)對(duì)RC178抑制的增效作用最強(qiáng)，增效比率（IR）為1.36;Czk1∶咪鮮胺=8∶2（v/v）時(shí)對(duì)RC178抑制的增效作用最強(qiáng)，IR為1.65?！窘Y(jié)論】枯草芽孢桿菌Czk1與咪鮮胺和根康具有較好的相容性，Czk1發(fā)酵液分別與咪鮮胺和根康復(fù)配對(duì)橡膠炭疽病菌RC178的抑菌活性具有明顯增效作用，具有開(kāi)發(fā)成菌藥制劑的潛力。

關(guān)鍵詞： 枯草芽孢桿菌;橡膠炭疽病;化學(xué)殺菌劑;協(xié)同防治

中圖分類號(hào)： S476;S435.76? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：2095-1191（2020）10-2480-08

Antimicrobial activity of Bacillus subtilis Czk1 compounded with chemical fungicides against Colletotrichum gloeosporioides

XIE Li1，2， HE Chun-ping1*， LIANG Yan-qiong1， LI Rui1，? GONG Jia-li3，

ZHAI Chun-xin3， WU Wei-huai1，YI Ke-xian1

（1Environment and Plant Protection Institute， Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences/Key Laboratory of Integrated Pest Management on Tropical Grops， Ministry of Agriculture and Rural Affairs/Hainan Key Laboratory for Monitoring and Control of Tropical Agricultural Pests， Haikou? 571101， China; 2Institute of Forestry， Hainan University，Haikou? 570228， China; 3China College of Plant Protection， Nanjing Agricultural University， Nanjing? 210095， China）

Abstract：【Objective】To explore the feasibility of synergistic control of rubber anthracnose by Bacillus subtilis and chemical fungicides， and construct a bacteria-fungicide compound composed of bio-control bacteria and chemical fungicides to provide a basis for the sustainable control of rubber anthracnose. 【Method】Six chemical fungicides， prochloraz， chlorothalonil， Genkang， pyrimethanil， propiconazole and azoxystrobin， and two strains of B. subtilis Czk1 and Colletotrichum gloeosporioides RC178 were used as test materials. The hypha growth rate method was used to determine the indoor toxicity of six chemical fungicides to RC178， the dilution plate coating method was used to determine the compatibility of six fungicides with Czk1， the inhibition zone method was used to determine the indoor toxicity of Czk1 to RC178， Horsfall method to clarify the compound plan of bacteria and medicine. 【Result】The results of laboratory toxicity testing showed that prochloraz had the best antibacterial effect on RC178 among the six fungicides， with an median effect concentration（EC50） of only 0.0778 μg/mL， followed by chlorothalonil and Genkang with EC50 of 0.4694 and 0.4733 μg/mL.Compatibility test results of chemical fungicides and Czk1 showed that pyrimethanil， azoxystrobin， propiconazole， Gen-kang and prochloraz had good compatibility with Czk1. Genkang at medium to high concentrations promoted the growth of the number of Czk1 colonies. Mixing Czk1 at? concentration of 4.75×107 CFU/mL with Genkang at concentration of 10.4733 and mixing 4.75×107 CFU/mL ber of Czk1 and prochloraz at 0.0778 μg/mL. When Czk1∶Genkang=7∶3（v/v）， the synergistic effect on the inhibition of RC178 was the strongest， the synergistic ratio（IR） was 1.36; when Czk1∶prochlorazide=8∶2（v/v）， the synergistic effect on the inhibition of RC178 was the highest， and IR was 1.65. 【Conclusion】B. subtilis Czk1 has good compatibility with prochloraz and Genkang. Czk1 fermentation liquor with prochloraz and with Genkang have obvious synergistic effect on the antibacterial activity of C. gloeosporioides RC178， which have the potential to develop a bacterial medicine preparation potential.

Key words： Bacillus subtilis; rubber anthracnose; chemical fungicide; synergistic control

Foundation item： National Key Research and Development Program of China（2018YFD0201100）; National Natural Rubber Industry Technical System Construction Special Project（CARS-33-BC1）

0 引言

【研究意義】橡膠樹(shù)炭疽病主要由膠孢炭疽菌（Colletortrichum gloeosporioides Penz. Sace）和尖孢炭疽菌（C. acutatum Simmons）引起，是橡膠樹(shù)上的一種主要葉部病害（李繼鋒，2010）。橡膠炭疽病在世界各植膠區(qū)普遍發(fā)生（Zheng，2007），1906年在斯里蘭卡首次報(bào)道。我國(guó)于1962年在海南大豐農(nóng)場(chǎng)開(kāi)割膠樹(shù)上首次發(fā)現(xiàn)該病，其造成膠樹(shù)整年落葉而不能割膠，經(jīng)濟(jì)損失嚴(yán)重（王紹春和馮淑芬，2001）。橡膠炭疽病菌侵染可引起橡膠樹(shù)葉片脫落、嫩梢回枯和果實(shí)腐爛，對(duì)橡膠的質(zhì)量和產(chǎn)量帶來(lái)嚴(yán)重影響，造成重大的經(jīng)濟(jì)損失?，F(xiàn)階段對(duì)該病害的防治仍以化學(xué)防治為主，農(nóng)業(yè)防治為輔。長(zhǎng)期使用化學(xué)藥劑防治會(huì)引起病菌抗藥性及環(huán)境污染等問(wèn)題，農(nóng)業(yè)防治只是在膠樹(shù)越冬期至抽芽初期及在病害流行末期通過(guò)施用硫酸銨速效肥以促進(jìn)膠樹(shù)快速恢復(fù)生長(zhǎng)，從而提高其抗病能力（古鑫，2012），但長(zhǎng)期施用化肥會(huì)導(dǎo)致土壤肥力下降，生產(chǎn)成本增加，環(huán)境污染和橡膠品質(zhì)下降等。因此，篩選防治橡膠炭疽病的高效低毒殺菌劑，開(kāi)展生物—化學(xué)協(xié)同防治研究，對(duì)橡膠炭疽病的可持續(xù)防治具有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】目前，國(guó)內(nèi)外針對(duì)橡膠炭疽病的研究主要集中在橡膠炭疽病菌生物學(xué)特性、侵染特征（馮淑芬等，1998;崔昌華，2006;Liu et al.，2018），以及殺菌劑對(duì)橡膠炭疽病菌的毒力測(cè)定和殺菌劑篩選試驗(yàn)方面，利用化學(xué)防治橡膠炭疽病的方法主要有化學(xué)殺菌劑、煙霧劑（范會(huì)雄等，1996）和熱霧劑防治（蔡志英和黃貴修，2011;許麗月等，2012）。王蘭英等（2010）開(kāi)展8種殺菌劑對(duì)橡膠炭疽菌的抑制活性試驗(yàn)，證明百菌清、抑霉唑和嘧菌酯對(duì)橡膠炭疽病的抑制效果較好。鄭肖蘭等（2014）通過(guò)開(kāi)展戊唑醇與苯醚甲環(huán)唑混配對(duì)橡膠樹(shù)炭疽病菌的聯(lián)合毒力測(cè)定試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)戊唑醇與苯醚甲環(huán)唑以1∶3混配對(duì)膠孢炭疽菌的抑制作用增效明顯。至今，針對(duì)該病害開(kāi)展生物防治方面的研究鮮見(jiàn)報(bào)道。樊蘭艷（2013）研究發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌Czk1抗菌活性物質(zhì)為脂肽類粗提物，其對(duì)橡膠炭疽病有一定的抑制及抗性誘導(dǎo)作用。生物—化學(xué)協(xié)同防治在煙草青枯病、油茶炭疽病和芒果炭疽病等多種植物病害防治研究中均有良好效果（黃小琴等，2015;李昕，2015）。韓麗等（2013）開(kāi)展了枯草芽孢桿菌B26與化學(xué)藥劑協(xié)同防治木材藍(lán)變研究，結(jié)果表明，枯草芽孢桿菌B26與戊唑醇按體積比6∶4復(fù)配時(shí)對(duì)藍(lán)變菌的抑制有明顯增效作用。谷春艷等（2018）用解淀粉芽胞桿菌WH1G與咪鮮胺復(fù)配協(xié)同防治草莓炭疽病，室內(nèi)生物測(cè)定結(jié)果表明，當(dāng)咪鮮胺∶WH1G配比為5∶5（v/v）時(shí)對(duì)病菌抑制的增效作用和防治效果最佳，毒性比率為1.432，防效為69.94%;復(fù)配劑對(duì)草莓炭疽病的田間防效達(dá)67.91%，二者復(fù)配不僅可提高對(duì)草莓炭疽病的防效，還能有效減少化學(xué)藥劑的使用量。謝立等（2020）用枯草芽孢桿菌Czk1與化學(xué)殺菌劑協(xié)同防治橡膠樹(shù)根病，當(dāng)Czk1∶根康配比為7∶3（v/v）時(shí)，對(duì)紅根病菌的增效比率（IR）為1.86，對(duì)褐根病菌的IR為1.51，增效作用最佳?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】前期研究發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌Czk1對(duì)橡膠炭疽病菌具有較好的抑制作用，亦可誘導(dǎo)橡膠植株產(chǎn)生系統(tǒng)抗性（趙璐璐，2011），具有開(kāi)發(fā)成為微生物農(nóng)藥的潛力，但單一的生物防治缺乏防治效果的穩(wěn)定性和長(zhǎng)久性，且在大田防效上不顯著。目前，關(guān)于橡膠炭疽病的生物—化學(xué)協(xié)同防治研究尚未見(jiàn)報(bào)道。【擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題】篩選生產(chǎn)中常用防治橡膠炭疽病且能與枯草芽孢桿菌Czk1具有很好相容性的化學(xué)殺菌劑并與Czk1進(jìn)行復(fù)配，測(cè)定復(fù)配劑對(duì)橡膠炭疽病菌的抑菌活性，構(gòu)建由生防菌與化學(xué)殺菌劑組成的菌藥復(fù)配劑，為橡膠炭疽病的可持續(xù)防治提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 試驗(yàn)材料

1. 1. 1 供試殺菌劑 咪鮮胺、百菌清、根康、嘧霉胺、丙環(huán)唑和嘧菌酯。6種化學(xué)殺菌劑的劑型、含量、生產(chǎn)廠家及供試濃度見(jiàn)表1。

1. 1. 2 供試培養(yǎng)基 PDA培養(yǎng)基、LB培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基的制備參照謝立等（2020）的方法。

1. 1. 3 供試菌株 枯草芽孢桿菌（Bacillus subti-lis）Czk1和橡膠膠孢炭疽菌RC178均由中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)研究所分離和保存。

1. 2 試驗(yàn)方法

1. 2. 1 6種化學(xué)殺菌劑對(duì)RC178的毒力測(cè)定 采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定6種化學(xué)殺菌劑對(duì)RC178的室內(nèi)毒力。參照謝立等（2020）的方法，配制含不同濃度供試6種化學(xué)殺菌劑的PDA培養(yǎng)基，接入RC178菌餅，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，測(cè)定并計(jì)算不同殺菌劑對(duì)RC178的平均抑制率。

1. 2. 2 Czk1與6種化學(xué)殺菌劑的生物相容性測(cè)定

采用稀釋平板涂布法測(cè)定6種殺菌劑與Czk1的相容性。將實(shí)驗(yàn)室保存的Czk1菌液平板劃線純化分離后獲得Czk1單菌落，取Czk1菌株單菌落1 μL接入99 mL已滅菌的LB液體培養(yǎng)基中，于37 ℃恒溫條件下培養(yǎng)12 h備用。參照謝立等（2020）的方法，配制含不同濃度供試6種化學(xué)殺菌劑的LB培養(yǎng)基，平板稀釋涂布法將100 μL Czk1稀釋菌懸液均勻涂布在LB含藥培養(yǎng)基表面，置于37 ℃下恒溫培養(yǎng)。分別于培養(yǎng)第2、5和10 d檢測(cè)Czk1菌體情況，取樣涂片用尼康生物顯微鏡NI-E檢查孢子萌發(fā)情況，孢子分離取樣參照張?bào)忝返龋?016）的方法。每處理5次重復(fù)，以加等量無(wú)菌水為空白對(duì)照（CK）。

1. 2. 3 單劑Czk1對(duì)橡膠樹(shù)炭疽病菌的毒力測(cè)定

采用抑菌圈法測(cè)定Czk1對(duì)RC178的室內(nèi)毒力。根據(jù)1.2.2方法，將單劑Czk1搖菌12 h后，配制其含菌量濃度分別為1.00×104、1.00×105、1.00×106、1.00×107、1.00×108和1.00×109 CFU/mL。參照謝立等（2020）平板對(duì)峙法的濾紙片法，計(jì)算其平均抑制率、有效抑制中濃度（EC50）、有效抑制75%真菌生長(zhǎng)所需的濃度（EC75）和相關(guān)系數(shù)（r）。

1. 2. 4 復(fù)配劑對(duì)橡膠炭疽病菌的毒力測(cè)定 根據(jù)單劑毒力測(cè)定結(jié)果，以對(duì)橡膠炭疽菌抑制效果較佳且與Czk1具有較好相容性的殺菌劑進(jìn)行菌藥復(fù)配，單劑EC50為基礎(chǔ)，配制兩單劑的有效抑制中濃度藥液，并按體積比Czk1∶殺菌劑=0∶10、1∶9、2∶8、3∶7、4∶6、5∶5、6∶4、7∶3、8∶2、9∶1和10∶0不同配比進(jìn)行復(fù)配。參照謝立等（2020）的方法，計(jì)算平均抑制率、理論抑菌率;并采用Horsfall法計(jì)算聯(lián)合毒力增效（尹敬芳，2006）。

1. 3 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 11.0、Excel 2019.0和JMP 10.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，采用Duncans新復(fù)極差法進(jìn)行數(shù)據(jù)差異顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2. 1 6種化學(xué)殺菌劑對(duì)RC178的室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果

6種化學(xué)殺菌劑對(duì)RC178均具有不同程度的抑制作用，且隨著藥劑質(zhì)量濃度增加其毒力不斷增強(qiáng)，但不同化學(xué)殺菌劑對(duì)RC178的抑制效果存在明顯差異（表2）。6種殺菌劑中咪鮮胺對(duì)橡膠炭疽菌的抑菌效果最好，其EC50僅為0.0778 μg/mL，其次為百菌清和根康，EC50分別為0.4694和0.4733 μg/mL;嘧霉胺和丙環(huán)唑的抑菌效果一般;嘧菌酯的EC50最大，為3.8388 μg/mL，在6種供試殺菌劑中其抑菌效果最差。

2. 2 Czk1與殺菌劑的相容性測(cè)定結(jié)果

由表3可知，Czk1與6種化學(xué)殺菌劑的相容性存在差異，在化學(xué)殺菌劑較低濃度（0.05～0.10 μg/mL）時(shí)Czk1均能正常生長(zhǎng);當(dāng)化學(xué)殺菌濃度≥0.25 μg/mL時(shí)百菌清出現(xiàn)明顯的抑制效果，基本抑制Czk1的生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)，不能與Czk1很好相容;嘧菌酯、嘧霉胺、丙環(huán)唑和根康4種殺菌劑無(wú)論在高濃度或低濃度條件下，Czk1均能正常生長(zhǎng)，相容性較好，且根康在中高濃度條件下還會(huì)促進(jìn)Czk1菌落數(shù)量的增長(zhǎng);咪鮮胺與Czk1的相容性也較好，但當(dāng)濃度達(dá)1.00 μg/mL時(shí)會(huì)輕微抑制Czk1生長(zhǎng)。綜合6種化學(xué)殺菌劑的毒力測(cè)定及與Czk1相容性測(cè)定結(jié)果，分別選擇咪鮮胺和根康作為菌藥復(fù)配因子。

2. 3 根康和咪鮮胺與Czk1復(fù)配劑對(duì)RC178的毒力測(cè)定結(jié)果

2. 3. 1 單劑Czk1對(duì)RC178的毒力測(cè)定 由表4可知，隨著Czk1菌落數(shù)量的增加，Czk1對(duì)RC178的生長(zhǎng)抑制效果越明顯，Czk1菌落數(shù)量在1.00×109 CFU/mL時(shí)對(duì)RC178的抑制率達(dá)60.25%，而菌落數(shù)量稀釋至1.00×104 CFU/mL時(shí)其抑制率只有11.89%。通過(guò)毒力回歸方程測(cè)定Czk1菌液對(duì)RC178的EC50為4.75×107 CFU/mL。

2. 3. 2 復(fù)配劑對(duì)橡膠炭疽病菌的聯(lián)合毒力測(cè)定

根據(jù)以上試驗(yàn)結(jié)果，將濃度為0.0778 μg/mL的咪鮮胺與濃度為4.75×107 CFU/mL的Czk1發(fā)酵液按不同體積比進(jìn)行復(fù)配，聯(lián)合毒力測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表5。Czk1與咪鮮胺以體積比1∶9、5∶5、6∶4、7∶3和8∶2復(fù)配時(shí)對(duì)RC178的抑制效果有明顯增效作用，實(shí)際抑菌效果分別為56.54%、75.39%、65.97%、65.45%和81.15%，對(duì)應(yīng)的IR為1.35、1.64、1.40、1.36和1.65;其中復(fù)配比例為8∶2時(shí)的IR最大，增效作用最強(qiáng)，防效最好，因此選取Czk1∶咪鮮胺=8∶2作為最佳復(fù)配比。

將濃度為4.75×107 CFU/mL的Czk1發(fā)酵液與濃度為0.4733μg/mL的根康以不同體積比進(jìn)行復(fù)配，Czk1與根康體積比分別為4∶6、5∶5、6∶4、7∶3和8∶2時(shí)對(duì)RC178的抑制效果具有明顯增效作用，實(shí)際抑菌效果分別為74.78%、76.37%、82.54%、88.32%和80.60%，對(duì)應(yīng)的IR分別為1.26、1.25、1.31、1.36和1.21;其中復(fù)配比例為7∶3時(shí)的IR最大，增效作用最強(qiáng)，防效最好，因此選取Czk1∶根康=7∶3為最佳復(fù)配比。

3 討論

膠孢炭疽菌可通過(guò)風(fēng)雨、昆蟲等媒介傳播，從植株傷口、氣孔和表皮等途徑入侵，一旦感病暴發(fā)流行不易控制，嚴(yán)重影響橡膠的產(chǎn)量和質(zhì)量（孟祥春等，2018）?，F(xiàn)階段防治橡膠炭疽病仍以化學(xué)防治為主，但化學(xué)防治藥劑品種較單一，長(zhǎng)期施用同一殺菌劑易使病菌產(chǎn)生抗藥性。羅大全等（2003）、曹學(xué)仁等（2015）對(duì)海南墾區(qū)橡膠炭疽病菌對(duì)多菌靈抗性室內(nèi)測(cè)定結(jié)果表明，長(zhǎng)期施用多菌靈的農(nóng)場(chǎng)炭疽菌對(duì)多菌靈的敏感性明顯降低，產(chǎn)生一定抗藥性。林春花等（2017）測(cè)定了我國(guó)2種橡膠樹(shù)炭疽病菌對(duì)咪鮮胺的敏感性，發(fā)現(xiàn)我國(guó)4個(gè)植膠區(qū)2種類型橡膠炭疽病菌對(duì)咪鮮胺的敏感性無(wú)明顯差異，對(duì)橡膠炭疽病菌抑菌效果較好，可作為生產(chǎn)上的防治藥劑。本研究通過(guò)6種常見(jiàn)化學(xué)殺菌劑對(duì)橡膠炭疽病菌的毒力測(cè)定表明，內(nèi)吸式殺菌劑咪鮮胺對(duì)RC178的抑菌效果最好，廣譜性殺菌劑百菌清次之，三唑類殺菌劑根康對(duì)RC178的抑菌效果也較好。這與生產(chǎn)中主要采用咪鮮胺和百菌清等藥劑防治橡膠炭疽病害結(jié)果一致（Guyot et al.，2001）。

本研究通過(guò)化學(xué)殺菌劑與Czk1的相容性測(cè)定，發(fā)現(xiàn)嘧霉胺、嘧菌酯、丙環(huán)唑、根康和咪鮮胺與生防菌Czk1的相容性均較好，其中咪鮮胺在較高化學(xué)濃度下仍能使Czk1正常生長(zhǎng)，對(duì)其無(wú)明顯抑制;同時(shí)發(fā)現(xiàn)中高濃度的根康不僅未抑制Czk1生長(zhǎng)，還會(huì)促進(jìn)Czk1菌落數(shù)量的增長(zhǎng)。根康對(duì)橡膠紅根病和褐根病的防治效果顯著，田間平均防效可達(dá)78%以上（賀春萍，2016），選用根康與枯草芽孢桿菌進(jìn)行復(fù)配，篩選出最佳復(fù)配組合，有望獲得兼治橡膠根病和炭疽病等多種病害復(fù)配劑組合，起到一藥多效的作用。本研究通過(guò)室內(nèi)毒力測(cè)定及相容性測(cè)定，最終選用咪鮮胺和根康分別與Czk1混配。唐文（2016）進(jìn)行枯草芽孢桿菌對(duì)橡膠樹(shù)體內(nèi)的定殖及防病促生機(jī)理研究，結(jié)果表明，Czk1不僅能誘導(dǎo)橡膠樹(shù)產(chǎn)生系統(tǒng)抗性防治橡膠炭疽病害，還對(duì)橡膠生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用。本研究發(fā)現(xiàn)，Czk1菌落數(shù)量在1.00×109 CFU/mL時(shí)對(duì)RC178的抑制率達(dá)60.25%，表明Czk1與咪鮮胺、根康具有開(kāi)發(fā)成菌藥制劑的潛力。

本研究結(jié)果突破防治橡膠樹(shù)炭疽病以化學(xué)藥劑為主要防治手段的局限性，采用生物與化學(xué)協(xié)同防治新策略，在提高防效的同時(shí)有效減少了化學(xué)農(nóng)藥使用量，不僅能發(fā)揮化學(xué)殺菌劑抑菌效果快、防治效果穩(wěn)定的優(yōu)勢(shì)，還彌補(bǔ)了微生物在生防防治過(guò)程中存在易受環(huán)境影響、抗菌譜窄、防效緩慢等不足，從而延緩病原菌對(duì)化學(xué)殺菌劑的抗藥性，提高生防菌抑菌效果的穩(wěn)定性（陳志誼等，2002;邱雪迎等，2019）?；瘜W(xué)藥劑能降低習(xí)居微生物（包括病原菌）對(duì)生防微生物的排斥作用，使其能順利定殖、生長(zhǎng)，并逐步發(fā)展成優(yōu)勢(shì)種群微生物，更好地發(fā)揮生物防治的作用（劉曉妹等，2013;Ogbebor et al.，2015）。通過(guò)菌藥復(fù)配協(xié)同作用達(dá)到菌藥優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)、化學(xué)農(nóng)藥用量減少、田間防效增加的目的，實(shí)現(xiàn)對(duì)多種病害的兼治作用與持續(xù)效果，具有廣闊的推廣應(yīng)用前景（畢秋艷等，2018）。由于本研究?jī)H針對(duì)室內(nèi)復(fù)配研究，室外環(huán)境因子如溫度、濕度和光照對(duì)RC178的孢子定殖、生長(zhǎng)以及對(duì)枯草芽孢桿菌在植株上的定殖、生長(zhǎng)影響明顯，因此，需進(jìn)一步對(duì)盆栽和大田試驗(yàn)進(jìn)行防效驗(yàn)證，以便更好地為復(fù)配劑的使用提供科學(xué)依據(jù)。

4 結(jié)論

枯草芽孢桿菌Czk1與咪鮮胺和根康具有較好的相容性，Czk1發(fā)酵液分別與咪鮮胺和根康按體積比8∶2和7∶3進(jìn)行復(fù)配時(shí)對(duì)橡膠炭疽病菌RC178的抑菌效果最佳，混劑的防治效果明顯優(yōu)于單劑Czk1、根康和咪鮮胺，增效作用明顯，具有開(kāi)發(fā)成菌藥制劑的潛力。

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（責(zé)任編輯 麻小燕）