攝食不同餌料對翹嘴鱖生長、體成分和消化酶活性的影響

班賽男，朱傳忠，楊新冬，陳偉軍，李 棟，夏冬梅，楊生燦，陳 晶，孫云章，易敢峰

(1.福建大北農水產科技集團股份有限公司，福建詔安 363500；2.北京大北農科技集團股份有限公司，北京 100190；3.集美大學水產學院，福建廈門 361021)

鱖(Sinipercachuatisi)隸屬于鱸形目暖鱸科鱖亞科，其生長速度快，肉質細嫩，味道鮮美，營養(yǎng)豐富，具有較高的經濟價值，是我國著名的四大淡水名魚之一，被國際水產品市場譽稱“河鮮魚之王”[1]。鱖生性兇殘，是典型的肉食性魚類，終生以活魚蝦為餌料。養(yǎng)殖期間必須配套養(yǎng)殖餌料魚，這樣既增加了養(yǎng)殖成本，又產生很多弊端：一是有些地區(qū)容易造成秋冬餌料魚短缺；二是活餌容易攜帶致病源，引起爆發(fā)性流行性疾病[2-4]。因此，研究出適應鱖的高效健康型配合飼料迫在眉睫。早在上個世紀八十年代，吳遵林等[5]就開始從事鱖人工飼料養(yǎng)殖的研究，突破了鱖魚主動攝食人工飼料技術關鍵，測定了鱖飼料營養(yǎng)適宜量。姚國成等[1]和Ya等[6]團隊不僅成功攻克了鱖育種，馴化鱖攝食冰鮮和配合飼料的難關，而且利用多種方法系統(tǒng)地研究了鱖的攝食機制，為其馴化提供了科學指導。之后關于馴化鱖攝食冰鮮魚和配合飼料的研究也越來越多。趙曉臨等[7]研究發(fā)現(xiàn)，斑鱖(Sinipercascherzeri)攝食魚粉和植物蛋白組合的飼料后，其餌料系數(shù)、生長速度等優(yōu)于攝食冰鮮雜魚、魚粉蛋白飼料和鮮魚糜飼料組。Li等[2,8]分別用活餌、冰鮮魚和配合飼料等來飼喂雜交鱖(Sinipercachuatsi♀×Sinipercascherzeri♂)，結果表明鱖攝食配合飼料可維持一定的生長，但若要用配合飼料完全取代鮮活餌料，還需做更多更深入的研究。

目前，關于鱖攝食餌料魚和飼料的研究很多，但是因為研究的品種不同、攝食的餌料不同，鱖攝食配合飼料后，肌肉的營養(yǎng)變化等問題依然有待解決。我國主要鱖養(yǎng)殖品種有翹嘴鱖、大眼鱖(Sinipercakneri)和斑鱖(S.scherzeri)，其中翹嘴鱖因其生長速度快，養(yǎng)殖周期短，深受養(yǎng)殖戶喜愛[1]。本實驗以翹嘴鱖為研究對象，進行攝食活餌料魚、冰鮮餌料魚和配合飼料的飼養(yǎng)效果對比實驗，分析翹嘴鱖的生長性能、體成分和消化酶活性。以期為研發(fā)優(yōu)化翹嘴鱖的配合飼料提供更多的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗餌料

實驗用冰鮮餌料魚和活餌料魚均為鯪(Cirrhinusmolitorella)，冰鮮餌料魚在冰箱-20 ℃保存。實驗飼料為鱖專用配合粉料(福建大北農水產科技集團提供)，粉料與水按20∶9的比例攪拌混勻，用軟顆粒機加工制成長條狀，在冰箱-20 ℃保存。冰鮮餌料魚和飼料喂食時，提前室溫解凍。餌料魚和配合飼料的主要營養(yǎng)組成見表1。

表1 配合飼料和餌料魚鯪魚的主要營養(yǎng)成分Tab.1 The main nutritional components of compound diet and C.molitorella %

1.2 實驗設計及養(yǎng)殖管理

實驗前翹嘴鱖在室內水泥池中穩(wěn)定兩周，穩(wěn)定期間每天投喂足量的餌料魚。之后開始馴化攝食配合飼料，馴化結束后停食24 h，挑選馴化好的翹嘴鱖900尾，進行分組實驗，初始體質量為(113.56±11.82)g。

將實驗用翹嘴鱖隨機分為3組，每組三個平行，每個平行100條魚，各組初始體重沒有顯著差異(ANOVA，P>0.05)。三組實驗用翹嘴鱖分別投喂冰鮮餌料魚、活的餌料魚和軟顆粒飼料，依次標記為冰鮮組、活餌組和飼料組。每天16:30投喂1次，前期投喂量約為初始體重的3%，后期飽食投喂。養(yǎng)殖實驗周期共60 d。

整個養(yǎng)殖實驗在9個網(wǎng)箱(1 m×0.6 m×0.8 m)中進行，網(wǎng)箱放到室內水泥池(7.4 m×4.5 m×1.5 m)中，自然光周期。養(yǎng)殖期間，水溫(28±2.0) ℃，pH 7.2±0.30，水中溶解氧大于5 mg/L，每天換水約30%，透明度40～50 cm，硫化氫控制在0.1 mg/L以下，氨氮含量控制在0.5 mg/L以下。

1.3 樣品采集

飼養(yǎng)實驗結束后，翹嘴鱖禁食24 h，用丁香酚(30 mg/L)對魚進行麻醉處理，統(tǒng)計各網(wǎng)箱中魚的數(shù)量，稱取總質量。每個網(wǎng)箱隨機取3尾魚，分別測量體質量、體長后用于全魚常規(guī)營養(yǎng)成分的測定。每個網(wǎng)箱隨機取3尾魚，分別測量體重、體長，解剖，取內臟，稱重，剝離出肝臟，稱重，用于翹嘴鱖形體指標分析。取腸道和肝臟組織，用于消化酶的測定。取魚的背肌用于肌肉氨基酸和脂肪酸的分析。所有樣品取出后立即放入液氮中凍存，并轉入-80 ℃冰箱中保存，等待分析。

1.4 指標檢測

1.4.1 翹嘴鱖生長指標

分別按下列公式計算生長性能指標：

增重率(WGR)=100%×(Wt-W0)/W0

特定生長率(SGR)=100%×(lnWt-lnW0)/t

餌料系數(shù)(FC)=F/(Wt-W0)

蛋白質效率(PER)=100%×(Wt-W0)/(F×CP)

肥滿度(CF)=100×Wt/L3

成活率(S)=100%×(N0-Nt)/N0

肝體比(HSI)=100%×Wh/Wb

臟體比(VSI)=100%×Wv/Wb

式中：W0為魚的初始均體重(g)；Wt為魚的終末均體重(g)；t為飼養(yǎng)天數(shù)(d)；CP(%)為飼料中粗蛋白含量；L為體長(cm)；N0為初始魚數(shù)；Nt為終末魚數(shù)；Wh為每尾魚終末肝臟重(g)；Wv為每尾魚終末內臟重(g)；Wb為每尾魚終末體重(g)。F為每尾魚的平均總攝食量(g)。

1.4.2 翹嘴鱖體成分的分析

配合飼料、餌料魚和翹嘴鱖常規(guī)成分的分析參照AOAC(2005)方法。肌肉中氨基酸含量和脂肪酸的相對含量分別按照GB5009.124-2016和GB5009.168-2016測定。

1.4.3 肝臟和腸道消化酶活性測定

翹嘴鱖肝臟和腸道勻漿組織上清液中總蛋白量、淀粉酶(AMS)和脂肪酶(LPS)的活性均采用南京建成生物工程研究所試劑盒進行測定。具體的測定方法按照試劑盒的說明進行操作，蛋白質的含量測定采用考馬斯亮藍法。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

結果數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標準差表示，采用SPSS20.0軟件進行數(shù)據(jù)處理和單因素方差分析，Duncan法進行多重比較，P<0.05為具有顯著性差異。

2 結果

2.1 翹嘴鱖的生長性能

不同餌料對翹嘴鱖生長性能的影響見表2，冰鮮組、活餌組和飼料組翹嘴鱖的增重率、特定生長率、蛋白質效率和成活率均無顯著性差異。飼料組翹嘴鱖的餌料系數(shù)顯著小于活餌組，肥滿度顯著小于其他兩組，肝體比和臟體比顯著大于其他兩組。

表2 不同餌料對翹嘴鱖生長性能的影響Tab.2 Effects of diet type on growth performances of S.chuatisi (n=6)

注：冰鮮組和活餌組中餌料系數(shù)均為濕重條件下計算。飼料組餌料系數(shù)以粉料重量為計算基礎。

2.2 翹嘴鱖的體成分分析

由表3可知，三種不同的餌料對于翹嘴鱖體成分中的水分、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分含量均沒有顯著性的影響。

表3 不同餌料對翹嘴鱖營養(yǎng)成分的影響Tab.3 Effects of diet type on nutritional components of S.chuatisi (n=3) %

冰鮮組、活餌組和飼料組翹嘴鱖肌肉中共檢測出16種氨基酸(表4)，氨基酸總量達23.85% ～ 28.70%。各氨基酸含量在三組翹嘴鱖肌肉中的高低順序均相同，依次是：活餌組>飼料組>冰鮮組。其中氨基酸含量最高的為谷氨酸，其次為亮氨酸。統(tǒng)計分析結果顯示，各種氨基酸含量在三組之間均沒有顯著性差異。常見的鮮味氨基酸天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸和丙氨酸的含量均是活餌組比較高。同樣的，活餌組總氨基酸量也高于其他兩組，∑EAA/∑TAA和∑EAA/∑NEAA的值均小于其他兩組(如表4所示)。三組翹嘴鱖肌肉∑EAA/∑TAA的值在45.69%～46.08%，∑EAA/∑NEAA的值在90.87% ～ 92.65%。

活餌組翹嘴鱖肌肉丁酸和ARA比例顯著高于飼料組，飼料組油酸和亞油酸顯著高于冰鮮組。飼料組翹嘴鱖肌肉中不飽和脂肪酸棕櫚油酸、油酸、亞油酸、花生烯酸、EPA、神經酸和DHA的含量均高于其他兩組。而且飼料組翹嘴鱖肌肉中的總飽和脂肪酸，總單不飽和脂肪酸量，總多不飽和脂肪酸的量均顯著高于其他兩組(表5)。

2.3 翹嘴鱖肝臟和腸道消化酶活性

翹嘴鱖肝臟脂肪酶活性、腸道淀粉酶活性在冰鮮組、活餌組和飼料組之間均沒有顯著性差異。冰鮮組翹嘴鱖肝臟淀粉酶和腸道脂肪酶活性顯著高于其他兩組(表6)。翹嘴鱖攝食三組不同的餌料后，冰鮮組翹嘴鱖脂肪酶和淀粉酶平均值高于其他兩組，且攝食相同餌料的翹嘴鱖，肝臟中的淀粉酶和脂肪酶活性明顯高于腸道。

表4 不同餌料對翹嘴鱖肌肉氨基酸含量的影響Tab.4 Effects of diet type on amino acids composition in muscles of S.chuatisi (n=3) g/100 g，wet

注：TAA表示氨基酸，EAA表示必需氨基酸， HEAA表示半必需氨基酸，NEAA表示非必需氨基酸， DAA和*表示鮮味氨基酸。色氨酸在酸解過程中被破壞，胱氨酸未能檢出。

表5 不同餌料對翹嘴鱖肌肉脂肪酸含量的影響Tab.5 Effects of diet type on fatty acid composition in muscles of S.chuatisi (n=3)

注：SFA表示飽和脂肪酸，MUFA表示單不飽和脂肪酸，PUFA表示多不飽和脂肪酸

表6 不同餌料對翹嘴鱖消化酶活性影響Tab.6 Effects of diet type on digestive enzymes activities of S.chuatisi (n=3) U/g prot

3 討論

3.1 不同餌料對翹嘴鱖生長性能的影響

食物的適口性、營養(yǎng)水平等不僅會影響到魚類的生長發(fā)育，還決定著水產動物的養(yǎng)殖成功與否[9]。本實驗結果顯示：冰鮮組和飼料組的增重率、特定生長率和蛋白質效率均高于活餌組，但差異不顯著。另外，飼料組的餌料系數(shù)顯著低于其他組，表明鱖攝食配合飼料時相較于冰鮮魚和活餌具有更高的飼料效率，對翹嘴鱖生長有一定的促進作用，這與陳代宇等[10]對月鱧(Channaasiatica)的研究結果一致。趙月月等[11]研究不同餌料對稀有鮈鯽(Gobiocyprisrarus)生長的影響時結果發(fā)現(xiàn)，活餌組的生長性能優(yōu)于飼料組，這與本實驗結果相反。分析原因可能是翹嘴鱖在捕食活餌料魚時會消耗自身的能量，所以即使攝食相同重量的餌料魚，在生長性能上活餌組也會低于冰鮮組[12]；而且不同的餌料中營養(yǎng)組成及比例也有很大的差別，配合飼料中蛋白含量較高，并且添加了一些魚類生長所需的物質，在一定程度上可以提升其生長性能[10]。冰鮮組和活餌組的肥滿度顯著高于飼料組，說明冰鮮和活餌組的翹嘴鱖體形更為肥滿。冰鮮組和活餌組的肝體比和臟體比顯著低于飼料組，與張麗等[13]研究加州鱸(Micropterussalmoides)攝食不同餌料后的分析結果一致，分析原因可能是翹嘴鱖配合飼料中的淀粉含量相對較高，而肉食性魚類對碳水化合物的利用率較低，引起蛋白消化或糖代謝障礙等，使脂肪在肝臟沉積，進而肝體比增大[14]；但是也有研究認為影響魚類脂肪沉積的因素有很多，比如：食物脂肪的含量、脂肪酸的組成、魚類生長發(fā)育的階段、養(yǎng)殖環(huán)境和抗脂肪肝因子等[15]，因此翹嘴鱖攝食配合飼料后脂肪沉積問題還需要進一步的研究。

3.2 不同餌料對翹嘴鱖體成分的影響

魚體蛋白質和水分含量會隨餌料蛋白質水平的升高而逐漸升高，同時體脂肪含量會逐漸下降[16]。本實驗中所用配合飼料粗蛋白水平明顯低于餌料魚，粗脂肪水平高于餌料魚。結果發(fā)現(xiàn)，飼料組翹嘴鱖體成分中粗脂肪含量高于冰鮮組和活餌組，粗蛋白水平介于兩組之間。這可能是因為養(yǎng)殖魚類生長階段及飼料組成的不同造成的，因為有研究發(fā)現(xiàn)魚體體成分中粗蛋白和粗灰分的含量主要與魚類的生長階段有關，粗脂肪含量主要與飼料組成、投喂模式等有關[17,18]。

水產品特別是魚類，具有較高價值的必需氨基酸和不飽和脂肪酸[19]。實驗中各氨基酸在三組之間均沒有顯著性差異，說明三組不同攝食的翹嘴鱖氨基酸代謝生理狀態(tài)比較接近[20]，翹嘴鱖攝食冰鮮餌料魚和配合飼料不會引起肌肉氨基酸組成的變化。李志斐等[21]研究發(fā)現(xiàn)大口黑鱸(M.salmoides)分別攝食冰鮮和配合飼料后，冰鮮組中17種氨基酸含量均高于飼料組。施永海等[22]用配合飼料和活餌飼喂刀鱭(Coilianasus)，結果發(fā)現(xiàn)配合飼料組刀鱭肌肉中18種氨基酸含量均高于活餌組。綜合以上研究我們發(fā)現(xiàn)不同魚類攝食飼料對肌肉氨基酸的含量影響結果不同，同種魚類不同的攝食也會影響肌肉氨基酸的含量[23]。動物蛋白質的鮮美與其鮮味氨基酸的組成與含量有關，Glu和Asp為呈鮮味的特征性氨基酸，其中Glu的鮮味最強，Gly和Ala是呈甘味的特征性氨基酸[24]。實驗中，三組翹嘴鱖肌肉中Glu含量最高，Asp、Gly和Ala含量相對較高，與嚴安生等[24]研究鱖魚肉營養(yǎng)價值和魏廣蓮[25]研究不同餌料養(yǎng)殖刀鱭幼魚結果相似，說明攝食冰鮮餌料和配合飼料不會對肌肉風味有很大的影響。根據(jù)聯(lián)合國糧農組織/世界衛(wèi)生組織(FAO/WHO)理想模式，優(yōu)質蛋白的EAA/TAA值在40%左右，EAA/NEAA應達到60%以上。三組翹嘴鱖肌肉氨基酸的EAA/TAA值和EAA/NEAA值均符合上述要求，因此，三組不同攝食的翹嘴鱖肌肉均屬于優(yōu)質蛋白。

林永賀等[26]用活餌和配合飼料分別飼喂青石斑魚(Epinephelusawoara)，結果發(fā)現(xiàn)配合飼料組多不飽和脂肪酸含量顯著高于活餌組。王躍斌等[20]用配合飼料和冰鮮橈足類飼喂大黃魚(Pseudosciaenacrocea)稚魚，結果發(fā)現(xiàn)配合飼料組和混合組稚魚脂肪酸組成明顯優(yōu)于橈足類組。與上述研究一致，本研究中飼料組翹嘴鱖肌肉中飽和脂肪酸C14∶0、C16∶0、C18∶0，單不飽和脂肪酸(MUFA)，多不飽和脂肪酸C18∶2、C20∶5(EPA)和C22:6(DHA)均高于冰鮮組和活餌組，說明配合飼料有利于魚體脂肪酸的積累，提高了翹嘴鱖肌肉的營養(yǎng)價值。這可能與配合飼料中原料的多樣性，添加的魚油中不飽和脂肪酸含量較高等有關[26]。

3.3 不同餌料對翹嘴鱖肝臟和腸道消化酶活性的影響

消化酶對于營養(yǎng)物質的消化吸收具有關鍵作用，不同的魚類，其組織中消化酶的活性分布不同。翹嘴鱖攝食同種餌料后，肝臟中的淀粉酶和脂肪酶活性明顯高于腸道中的酶活性。餌料的營養(yǎng)成分構成了魚體消化酶的底物，魚類具有適應于不同的餌料而調整消化酶分泌的能力[27]。本實驗中，翹嘴鱖肝臟和腸道中的淀粉酶一直處于較低的水平，這可能是由于肉食性魚類本身對淀粉等碳水化合物的利用率很低，從而導致三組不同攝食的翹嘴鱖組織中淀粉酶活性較低[14,28]。對比三組結果我們發(fā)現(xiàn)，飼料組翹嘴鱖肝臟淀粉酶和脂肪酶均小于冰鮮組和活餌組，腸道淀粉酶高于其他兩組，出現(xiàn)這種結果可能是攝食的餌料中淀粉和脂肪水平差異引起的。 飼料組腸道淀粉酶高可能是因為攝食的飼料中淀粉含量要高于鯪，需要分泌較多的酶來消化吸收；而肝臟中脂肪酶和淀粉酶活性低，說明翹嘴鱖對飼料的脂肪和淀粉營養(yǎng)代謝能力較差。結合前面的生長數(shù)據(jù)，翹嘴鱖配合飼料還需要進一步的優(yōu)化使之更好的代謝吸收。