信前胡化學(xué)成分的研究

涂林鋒，肖春榮，張睿增，劉定平，羅永明

（江西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，江西 南昌 330004）

信前胡是前胡的主流商品藥材來(lái)源，主產(chǎn)于江西上饒，以根條粗壯、柔軟、皮黑肉黃、氣香味濃等特點(diǎn)著稱(chēng)，是著名道地藥材之一，為傘形科植物白花前胡Peucedanum praeruptorumDunn，藥用部位為干燥根，具有降氣化痰、散風(fēng)清熱之功效，用于痰熱喘滿(mǎn)、咳痰黃稠、風(fēng)熱咳嗽痰多，是中醫(yī)臨床呼吸系統(tǒng)疾病的主要用藥之一。但由于信前胡野生資源日漸減少，目前市場(chǎng)上流通的藥材以安徽產(chǎn)的寧前胡，以及浙江、福建產(chǎn)白花前胡為主。前期研究表明，信前胡與其他產(chǎn)地前胡的化學(xué)成分有較大差異，前者以含有白花前胡甲素等吡喃香豆素類(lèi)化合物為主，而后者以白花前胡乙素為主［1］。藥理研究表明，白花前胡甲素不僅具有舒張腸管平滑肌、鈣拮抗作用，而且還對(duì)心肌細(xì)胞有多種作用［2-6］，顯示出廣闊的開(kāi)發(fā)應(yīng)用前景。因此，為了配合信前胡的仿野生栽培研究，挖掘這一傳統(tǒng)特產(chǎn)藥材資源，本實(shí)驗(yàn)對(duì)其正丁醇部位的化學(xué)成分進(jìn)行研究，得到8 個(gè)香豆素和1 個(gè)酯類(lèi)化合物，其中化合物1～2、9 為首次從該植物中分離得到。

1 材料

AVANCE ⅢHD 600 MHz 型核磁共振波譜儀（瑞士Bruker 公司）；Triple TOF5600＋型高分辨飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國(guó)AB Sciex 公司）；Waters 2695-2998 型高效液相色譜儀、Waters 515 制備型液相色譜儀（美國(guó)Waters 公司）；YMC-Pack ODSA 半制備色譜柱（250 mm×10 mm，5 μm，日本YMC 公司）；中壓制備液相色譜儀（瑞士Buchi 公司）；ODS 反相色譜填料（50 μm，日本YMC 公司）；AB-104N 型分析天平（瑞士Mettler-Toledo 公司）。GF254薄層硅膠板（青島海洋化工廠(chǎng)）。色譜甲醇（上海星可生化有限公司）；其他試劑均為分析純（西隴科學(xué)股份有限公司）；娃哈哈純凈水（杭州娃哈哈集團(tuán)有限公司）。

白花前胡采收于江西上饒，經(jīng)江西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院張金蓮教授鑒定為傘形科前胡屬植物白花前胡Peucedanum praeruptorumDunn的根，標(biāo)本（20170109）保存于江西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥化學(xué)科研室。

2 提取與分離

干燥的前胡根切段、粉碎得粗粉，采用冷浸提取法，料液比為1∶4，分別用95%乙醇冷浸提取3次，70%、50%乙醇各1 次，每次1 周（其間每天攪拌3 次），抽濾，合并提取液，減壓濃縮至膏狀，得白花前胡總浸膏3 656.6 g。將總浸膏分散于水中制成混懸液，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分別減壓濃縮后得相應(yīng)部位1 200、61、25、135.2 g。正丁醇部位浸膏經(jīng)D101大孔樹(shù)脂分離（梯度依次為水，20%、40%、60%、95%乙醇）得到組分P1～P5。P1 組分（25.1 g）經(jīng)中壓制備，甲 醇-水（20%、30%、40%）洗脫，TLC 檢測(cè)合并相同組分，凝膠色譜分離，HPLC 制備得化合物4～7；P2 組分（12 g）經(jīng)中壓制備，甲醇-水（20%、30%、40%）洗脫，TLC 檢測(cè)合并相同組分，凝膠色譜分離，HPLC 制備得化合物2～3、8；P4 組 分（2.1 g）經(jīng)MCI，乙 醇-水（10%、30%、50%）洗脫，TLC 檢測(cè)合并相同組分，HPLC 制備得化合物1、9。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：淡黃色針狀結(jié)晶（甲醇），紫外燈365 nm 下呈藍(lán)色斑點(diǎn)。HR-ESI-MSm／z：409.123 4［M＋Na］＋，分子式C21H22O7。1H-NMR（600 MHz，methanol-d4）δ：7.88（1H，d，J＝9.5 Hz，H-4），7.56（1H，d，J＝8.7 Hz，H-5），6.88（1H，d，J＝8.7 Hz，H-6），6.57（1H，d，J＝4.8 Hz，H-4′），6.27（1H，d，J＝9.5 Hz，H-3），6.22（1H，m，-C＝CH），5.41（1H，d，J＝4.8 Hz，H-3′），2.08（3H，s，-COCH3），1.96（3H，dd，J＝7.3，1.7 Hz，＝CHCH3），1.88（3H，t，J＝1.7 Hz，-CH3），1.49（3H，s，2′-CH3），1.46（3H，s，2′-CH3）；13C-NMR（150 MHz，methanol-d4）δ：171.8（-COCH3，-C＝O），167.9（-COC＝CH，-C＝O），162.2（C-2），158.2（C-7），155.3（C-9），145.8（C-4），141.0（＝CHCH3，＝CH），131.2（C-5），128.4（＝CCH3，＝C），115.8（C-6），114.2（C-3），113.7（C-10），108.2（C-8），78.9（C-2′），71.6（C-3′），62.5（C-4′），25.4（2′-CH3），23.1（2′-CH3），20.9（＝CHCH3，-CH3），20.8（-COCH3，-CH3），16.2（＝CCH3，-CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7］基本一致，故鑒定為（3′S，4′S）-3′-acetoxy-4′-angeloyloxy-3′，4′-dihydroseselin。

化合物2：白色粉末（氯仿-甲醇），紫外燈365 nm 下呈藍(lán)色斑點(diǎn)。HR-ESI-MSm／z：383.044 1［M＋K-2H］－，347.018 9［M＋H］＋，分子式C18H18O7。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：7.97（1H，d，J＝9.5 Hz，H-4），7.58（1H，d，J＝8.6 Hz，H-5），6.81（1H，d，J＝8.6 Hz，H-6），6.34（1H，d，J＝4.8 Hz，H-4′），6.27（1H，d，J＝9.5 Hz，H-3），4.39（1H，d，J＝4.8 Hz，H-3′），2.00（6H，s，-COCH3×2），1.41（3H，s，2′-CH3），1.33（3H，s，2′-CH3）；13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：20.8（-COCH3×2，-CH3），24.1（2′-CH3），24.3（2′-CH3），61.6（C-4′），72.1（C-3′），79.0（C-2′），107.2（C-8），112.1（C-10），112.3（C-3），113.9（C-6），129.5（C-5），144.6（C-4），153.5（C-9），156.5（C-7），159.7（C-2），169.2（-COCH3×2，-C＝O）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］基本一致，故鑒定為trans-3′，4′-diacetylkhellacton。

化合物3：白色無(wú)定型粉末（甲醇）。紫外燈365 nm 下呈藍(lán)色斑點(diǎn)。HR-ESI-MSm／z：449.139 5［M＋K］＋，425.144 4［M-H］－，分子式 C20H26O10。1HNMR（600 MHz，methanol-d4）δ：7.84（1H，d，J＝9.6 Hz，H-4），7.36（1H，d，J＝8.9 Hz，H-5），6.83（1H，d，J＝8.9 Hz，H-6），6.19（1H，d，J＝9.6 Hz，H-3），4.16（1H，d，J＝5.8 Hz，G-1），4.06（1H，dd，J＝7.4，5.8 Hz，H-2′），3.76（1H，dd，J＝12.2，2.9 Hz，G-6b），3.60（dd，J＝11.5，5.2 Hz，1H，G-6a），3.25（1H，dd，J＝9.3，3.2 Hz，G-4），3.18（1H，dd，J＝9.2，3.0 Hz，G-3），3.16（1H，dd，J＝14.9，3.1 Hz，H-1′b），3.14（1H，dd，J＝14.4，3.0 Hz，H-1′a），3.13（1H，dd，J＝9.2，4.8 Hz，G-2），3.10（1H，m，G-5），1.32（3H，d，J＝3.4 Hz，3′-CH3），1.23（3H，d，J＝3.4 Hz，3′-CH3）；13CNMR（150 MHz，methanol-d4）δ：24.7（3′-CH3），26.2（3′-CH3），26.3（C-1′），62.7（G-6），71.6（G-4），74.1（C-3′），75.1（G-2），77.9（G-3），78.1（G-5），86.1（C-2′），103.7（G-1），112.4（C-3），113.7（C-10），113.8（C-6），114.6（C-8），128.6（C-5），146.6（C-4），155.6（C-9），160.8（C-7），163.8（C-2）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］基本一致，故鑒定為praeroside Ⅵ。

化合物4：黃色針晶（氯仿-甲醇），紫外燈365 nm 下呈藍(lán)色斑點(diǎn)。HR-ESI-MSm／z：193.049 3［M＋H］＋，191.036 4［M-H］－，分子式C10H8O4。1HNMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：10.33（1H，s，-OH），7.91（1H，d，J＝9.4 Hz，H-4），7.21（1H，s，H-5），6.78（1H，s，H-8），6.21（1H，d，J＝9.4 Hz，H-3），3.81（3H，s，-OCH3）；13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：56.0（-OCH3），102.8（C-8），109.6（C-5），110.6（C-10），111.7（C-3），144.6（C-4），145.3（C-6），149.5（C-9），151.2（C-7），160.8（C-2）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］基本一致，故鑒定為scopoletin。

化合物5：淡黃色針晶（氯仿-甲醇），紫外燈365 nm 下呈藍(lán)色斑點(diǎn)。HR-ESI-MSm／z：163.039 0［M ＋ H］＋，161.063 7［M-H］－，分子式C9H6O3。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：10.64（1H，s，-OH），7.92（1H，d，J＝9.4 Hz，H-4），7.52（1H，d，J＝8.5 Hz，H-5），6.78（1H，dd，J＝8.4，2.2 Hz，H-6），6.71（1H，d，J＝2.1 Hz，H-8），6.19（1H，d，J＝9.4 Hz，H-3）；13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：102.2（C-8），111.3（C-10），111.4（C-6），113.2（C-3），129.7（C-5），144.6（C-4），155.5（C-7），160.5（C-9），161.4（C-2）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［10］基本一致，故鑒定為umbelliferone。

化合物6：白色粉末（甲醇），紫外燈365 nm下呈藍(lán)色斑點(diǎn)。HR-ESI-MSm／z：447.125 6［M＋Na］＋，分子式 C20H24O10。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：7.91（1H，d，J＝9.5 Hz，H-4），7.18（1H，s，H-5），6.22（1H，d，J＝9.5 Hz，H-3），5.30（1H，d，J＝7.5 Hz，G-1），4.69（1H，t，J＝8.7 Hz，H-2′），1.20（3H，s，4′-CH3），1.14（3H，s，4′-CH3）；13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：25.3（C-4′-CH3），26.0（C-4′-CH3），29.0（C-3′），60.7（G-6），69.8（G-4），70.1（C-4′），73.9（G-2），76.9（G-3），77.4（G-5），91.5（C-2′），101.5（G-1），111.5（C-3），113.0（C-10），117.5（C-5），126.8（C-6），127.1（C-8），145.0（C-4），146.0（C-9），152.8（C-7），160.3（C-2）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11］基本一致，故鑒定為rutarin。

化合物7：白色粉末（氯仿-甲醇），紫外燈365 nm 下呈藍(lán)色斑點(diǎn)。HR-ESI-MSm／z：423.129 8［MH］－，463.099 8［M ＋K］＋，分子式C20H24O10。1HNMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：7.89（1H，d，J＝9.5 Hz，H-4），6.98（1H，s，H-5），6.19（1H，d，J＝9.5 Hz，H-3），4.79（1H，t，J＝8.9 Hz，H-2′），4.44（1H，d，J＝7.8 Hz，G-1），1.27（3H，s，4′-CH3），1.24（3H，s，4′-CH3）；13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：21.9（4′-CH3），23.4（4′-CH3），29.8（C-3′），60.8（G-6），70.0（G-4），73.6（G-2），76.5（G-3），76.9（G-5），77.0（C-4′），89.9（C-2′），97.4（G-1），111.1（C-3），113.1（C-10），114.1（C-5），125.6（C-6），128.4（C-8），143.9（C-4），145.3（C-9），151.3（C-7），160.5（C-2）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11］基本一致，故鑒定為isorutarin。

化合物8：白色粉末（氯仿-甲醇），紫外燈365 nm 下呈藍(lán)色斑點(diǎn)。HR-ESI-MSm／z：261.076 8［MH］－，263.091 0［M＋H］＋，285.073 0［M＋Na］＋，分子式C14H14O5。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：7.87（1H，d，J＝9.5 Hz，H-4），6.97（1H，s，H-5），6.17（1H，d，J＝9.5 Hz，H-3），4.66（1H，t，J＝8.6 Hz，H-2′），3.17（2H，m，H-3′），1.14（3H，s，4′-CH3），1.13（3H，s，4′-CH3）；13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：24.9（4′-CH3），26.1（4′-CH3），29.7（C-3′），70.3（C-4′），90.8（C-2′），111.1（C-2），113.1（C-10），114.2（C-5），125.6（C-6），128.4（C-8），144.0（C-9），145.4（C-4），151.6（C-7），160.7（C-2）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［12］基本一致，故鑒定為rutaretin。

化合物9：黃色油狀物（氯仿）。ESI-MSm／z：279.2［M＋H］＋，分子式C16H22O4。1H-NMR（600 MHz，CDCl3）δ：7.71（2H，dd，J＝5.7，3.3 Hz，H-2，5），7.53（2H，dd，J＝5.7，3.3 Hz，H-3，4），4.30（4H，t，J＝6.7 Hz，-OCH2），1.72（2H，dq，J＝9.1，6.8 Hz，-CH2），1.44（4H，m，-CH2），0.96（6H，t，J＝7.4 Hz，-CH3）；13C-NMR（150 MHz，CDCl3）δ：13.9（2-CH3），19.3（2-CH2），30.7（2-CH2），65.7（2-OCH2），129.0（C-3，6），131.1（C-4，5），132.5（C-1，2），167.9（2-COO）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［13］基本一致，故鑒定為dibutyl phthalate。

4 討論

研究表明，前胡中香豆素類(lèi)成分具有抗心肌缺血、抗心衰、擴(kuò)血管、降血壓等多種藥理作用［14-19］。信前胡藥用部位為傘形科前胡屬植物的干燥根，藥用歷史悠久，潛在價(jià)值大，本課題組對(duì)其所含香豆素類(lèi)化合物進(jìn)行了系統(tǒng)研究，共分離得到8 個(gè)，后續(xù)將對(duì)這些成分進(jìn)行活性篩選，以期為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)該藥材提供依據(jù)。