美國國家禽流感監(jiān)測計(jì)劃
——第一部分：監(jiān)測體系概述（一）

譯校│王慧強(qiáng)（北京市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心）翟新驗(yàn) 張倩（中國動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心）

一、禽流感描述

禽流感（AI）病毒屬于正黏病毒科病毒（Webster等，1992）。根據(jù)病毒核蛋白（NP）和基質(zhì)蛋白（M）抗原及其基因特性的不同，流感病毒可分為A型、B型和C型。所有的禽流感病毒和大多數(shù)哺乳類動(dòng)物感染的流感病毒都屬于A型。根據(jù)流感病毒血凝素（HA）和神經(jīng)氨酸酶（NA）兩個(gè)表面蛋白，將A型流感病毒進(jìn)一步劃分為不同的亞型。流感病毒粒子包裹有來源于宿主細(xì)胞膜的磷脂雙分子層包膜，包膜上還嵌入了HA、NA和M2基質(zhì)蛋白。目前，流感病毒可分為16個(gè)HA亞型和9個(gè)NA亞型。

可通過直接接觸感染的禽類或間接接觸污染的設(shè)備和材料傳播AI，AI病毒經(jīng)感染禽的糞便，以及鼻、口和眼睛分泌物排出。

AI病毒感染家禽的臨床癥狀可能不明顯，危害程度從溫和的一過性癥狀到急性，甚至引起100%發(fā)病和/或死亡，這主要取決于病毒的致病力（Swayne和Suarez，2000）。除了致病力，家禽的遺傳因素、營養(yǎng)、與其他病原混合感染等因素都可以影響臨床表現(xiàn)。AI臨床癥狀可從呼吸、腸道、心血管或繁殖等方面表現(xiàn)出來。低致病性毒株感染通常沒有癥狀或是癥狀溫和，但可引起死亡率升高、食欲下降、呼吸道癥狀（如流鼻涕、咳嗽、打噴嚏）和產(chǎn)蛋量下降（Dunn等，2003）。感染低致病性禽流感（LPAI）病毒可零星地引起病毒從胃腸道排出，而亞臨床病例，同一禽群可能會(huì)少量排毒或表現(xiàn)為不一致或不完全的血清轉(zhuǎn)化（抗體產(chǎn)生），需要關(guān)注此種AI的監(jiān)測和控制。相反，感染高致病性禽流感（HPAI）病毒的家禽有發(fā)病率很高并表現(xiàn)出一個(gè)或者多個(gè)上面提及和下述的臨床癥狀：突發(fā)死亡，精神不振，食欲廢絕，產(chǎn)軟殼蛋或畸形蛋，雞冠或肉髯腫脹發(fā)紫，共濟(jì)失調(diào)和腹瀉（Elbers等，2005）。

HPAI隨著傳染性增強(qiáng)會(huì)引起更高水平的排毒，盡管感染HPAI病毒后4～10天內(nèi)引起快速死亡，但其傳染期并未縮短，除非禽只急速死亡。實(shí)際上HPAI傳染期比LPAI傳染期更長。以前感染過LPAI的禽群，HPAI病毒傳播明顯減弱（van der Goot等，2003）。

水禽和濱鳥是LPAI病毒的天然儲(chǔ)存庫，野生水禽通常不表現(xiàn)臨床癥狀，通過糞便長期排毒，可同時(shí)感染多種亞型，但通常檢測不到抗體。季節(jié)性感染AI病毒與易感幼禽的孵化、出殼和羽毛生長有關(guān)聯(lián)（Halvorson D.A.等，2002）。A型流感病毒在野鳥中通常不引起死亡，但保持進(jìn)化狀態(tài)。

2005 年，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）為成員國更新了禽流感一章，修改了AI監(jiān)測指南（OIE，2005）。為家禽產(chǎn)品貿(mào)易而開展的監(jiān)測，OIE給出必須報(bào)告的禽流感（NAI定義）為：由A型AI病毒H5/H7亞型，或其他達(dá)到特定毒力（如致病指數(shù)）或具有特定血凝素受體蛋白氨基酸序列的亞型，引起的禽類感染。

通過體內(nèi)試驗(yàn)和分子序列（如，血凝素前體蛋白HAO裂解位點(diǎn)上多個(gè)堿性氨基酸的插入）以及HA亞型分析致病性，官方控制就是基于AI病毒的致病性診斷。OIE指南規(guī)定，6周齡雞靜脈接種致病指數(shù)（IVPI）大于1.2，或靜脈接種4～8周齡雞能導(dǎo)致至少75%的死亡率，則判定為必須報(bào)告的HPAI病毒。

除了兩株H10亞型分離株，按照OIE定義鑒定為HPAI病毒之外，從歷史上看，世界上所有HPAI病毒都是H5或H7亞型禽流感病毒。若H5或H7亞型禽流感毒株對雞沒有較高的致病性，也沒有類似于HPAI病毒HAO裂解位點(diǎn)的氨基酸序列，則可定義為必須報(bào)告的LPAI病毒。LPAI H5/H7亞型病毒在家禽中流行一段時(shí)間后，有可能突變?yōu)镠PAI病毒，則會(huì)引起家禽業(yè)巨大的經(jīng)濟(jì)損失（OIE，2005）。

需要注意的是，OIE定義的NAI是指由官方獸醫(yī)監(jiān)管控制的特定AI病毒亞型，OIE將“低致病性禽流感（LPAI）”定義為除H5和H7亞型AI病毒外，其他AI毒株為低致病性毒株。盡管LPAI在商業(yè)家禽業(yè)可以引起一定的發(fā)病，甚至更為嚴(yán)重的死亡，但是除了HPAI H5和H7外，其他亞型的LPAI病毒一般不需要向OIE報(bào)告。

2004年發(fā)生AI流行事件，AI病毒宿主范圍從鵝發(fā)展到鴨可能是一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。流行病學(xué)研究表明，通過在農(nóng)場和稻田廣泛傳播的病毒感染陸地家禽，家鴨發(fā)揮了重要作用。

這些病毒帶來的影響是毀滅性的，導(dǎo)致了家禽和廣泛的野生鳥類及哺乳動(dòng)物大規(guī)模的發(fā)病，以及人類感染致死事件。就感染數(shù)量和傳播地理范圍而言，這仍然是經(jīng)歷過的最嚴(yán)重的HPAI疫情（Sims等，2005）。從流行病學(xué)觀點(diǎn)看，亞洲HPAI H5N1病毒特征類似其他HPAI病毒。通過研究1997年在中國香港活禽市場中流行的H5N1病毒可知，7種不同種類的鳥感染該H5N1毒株10天內(nèi)可引起75%～100%的死亡率（Perkins和Swayne，2001）。用該病毒接種雞后，最早及最急劇的疫病發(fā)展進(jìn)程，平均最短的死亡時(shí)間為1.5天（一般為1.5～2.0天），這表明該病毒有種群適應(yīng)性，并對該種群具最大致病性。

病毒感染部位包括羽毛囊上皮細(xì)胞，通過接觸家禽的毛屑或掉落的羽毛而感染禽流感可能是重要的流行病學(xué)傳播方式（Perkins和Swayne，2001）。

以前的流行病學(xué)調(diào)查顯示，AI在野生鳥類造成顯著死亡的只有一次（Capua和Alexander，2006；Songserm等，2006），目前尚不清楚亞洲HPAI H5N1在歐亞野生鳥類中是作為長期的病毒儲(chǔ)存庫，還是僅僅是從家禽中傳播出來的個(gè)例。多個(gè)基因型的亞洲HPAI H5N1病毒還在持續(xù)進(jìn)化（Capua和Alexander 2006）。

二、國家禽流感監(jiān)測體系的目的

亞洲HPAI H5N1除了引起家禽高死亡率外，還具有潛在的人畜共患病后果，極為重要的是要阻止它傳入美國，并且可以在它傳入美國后能盡快地檢測到。然而，對所有易感家禽的監(jiān)測技術(shù)應(yīng)當(dāng)具備相當(dāng)?shù)拿舾行圆⑶铱梢宰鳛橐环N早期預(yù)警系統(tǒng)，以能確定所有可能出現(xiàn)的HPAI病毒，以及其他NAI病毒毒株。當(dāng)只是小范圍少量家禽被感染時(shí)，早期監(jiān)測是控制和遏制疫情的關(guān)鍵。一個(gè)失控的AI疫情暴發(fā)后，可能會(huì)非常迅速地在高密度家禽養(yǎng)殖區(qū)域傳播開來，同時(shí)關(guān)系到人類健康安全，加大政府和行業(yè)的治理成本。

國家禽流感監(jiān)測計(jì)劃（NAISS）4個(gè)主要目的：一是快速檢測所有家禽類HPAI，特別是亞洲HPAI H5N1病毒毒株；二是在傳入家禽之前，快速檢測野生遷徙水鳥NAI，特別是亞洲HPAI H5N1病毒；三是確保H5/H7 LPAI不會(huì)傳入家禽并在家禽中流行，以免其可能發(fā)展和突變?yōu)镠PAI病毒毒株；四是與貿(mào)易目的相關(guān)的國際監(jiān)測指南一致。

三、監(jiān)測目的理由分析

1.目的（1）和（2）的理由：公共衛(wèi)生安生。20 世紀(jì)90 年代末，東南亞AI疫情表明，亞洲HPAI H5N1可導(dǎo)致嚴(yán)重的人類疾?。–ox和Subbarao，2000），而且目前又再一次暴發(fā)，直接接觸受感染家禽是人類感染病例發(fā)生的主要傳播路徑。然而，禽流感病毒有可能變異或突變成一種可以人傳染人的流感病毒，這是人們擔(dān)憂的公共衛(wèi)生安全問題。NAI高致病性亞型，特別是HPAI H5N1更是對人類公共衛(wèi)生安全構(gòu)成重大威脅。也有證據(jù)表明有其他AI病毒可以感染人類，但其一般只能引起輕微的臨床癥狀（Kaye和Pringle，2005）。AI傳播速度和病毒繁殖速度非?？?，因此在家禽中預(yù)防、快速檢測和控制其暴發(fā)是必須的，以最大可能地減小對公共衛(wèi)生的危害，降低經(jīng)濟(jì)損失。

2.目的（1）至（4）的理由：疫病控制和貿(mào)易限制的經(jīng)濟(jì)成本。

HPAI暴發(fā)可能嚴(yán)重影響當(dāng)?shù)丶仪萑汉蜕a(chǎn)者，但聯(lián)邦動(dòng)物衛(wèi)生機(jī)構(gòu)和行業(yè)一般會(huì)做出快速響應(yīng)，通過限制疫病傳播以降低總生產(chǎn)和經(jīng)濟(jì)損失。盡管必須報(bào)告LPAI疫情，不會(huì)導(dǎo)致同樣高的死亡率，但是來自貿(mào)易損失的經(jīng)濟(jì)影響是大的，快速識(shí)別和響應(yīng)同樣會(huì)減少對經(jīng)濟(jì)的影響。進(jìn)一步說，防止LPAI病毒在家禽中長期流行，極大地降低了它們變異為HPAI病毒的概率。

在美國，三大家禽產(chǎn)業(yè)類型中，肉雞產(chǎn)業(yè)是最大和最有價(jià)值的產(chǎn)業(yè)。2005年，肉雞產(chǎn)業(yè)農(nóng)場收入為209億美元；蛋雞產(chǎn)業(yè)（雞和雞蛋）農(nóng)場收入估價(jià)是53億美元；火雞產(chǎn)業(yè)產(chǎn)值為32億美元；其他家禽相關(guān)產(chǎn)業(yè)產(chǎn)值約為6450萬美元。2004年，肉雞在國內(nèi)銷售額為430億美元，而出口額為17億美元；火雞產(chǎn)業(yè)出口額為2.52億美元；蛋雞產(chǎn)業(yè)的出口額為2.49億美元（國家農(nóng)業(yè)統(tǒng)計(jì)局，2006b；世界農(nóng)業(yè)展望委員會(huì)，2006；USDA/經(jīng)濟(jì)研究局，2006a；美國家禽和禽蛋聯(lián)合會(huì)，2006）。

如果美國發(fā)生亞洲HPAI H5N1，與其他HPAI病毒株一樣，給美國家禽業(yè)造成同樣的影響。然而，由于亞洲HPAI H5N1有可能傳染給人類，并且可能會(huì)變異成容易在人與人之間直接傳播的毒株，所以對亞洲HPAI H5N1監(jiān)測有利于防止其造成在人類中大流行。

大多數(shù)美國家禽生產(chǎn)都是采用生物安全和集約化管理，但是庭院養(yǎng)殖，包括寵物、特種禽、狩獵用和興趣愛好養(yǎng)殖，這種飼養(yǎng)方式有可能導(dǎo)致不同地域的人與潛在受感染禽類的直接接觸。在美國對禽群開展全面的NAI監(jiān)測，可以排查亞洲HPAI H5N1，減少人類與可能存在的亞洲HPAI H5N1病毒接觸的機(jī)會(huì)，以避免由于人類與受感染家禽接觸后造成AI病毒在人類中流行而帶來的巨大經(jīng)濟(jì)損失。國會(huì)預(yù)算辦公室（CBO）估算，每年的流感大流行對美國經(jīng)濟(jì)的影響少則1870億美元，多則6230億美元。CBO認(rèn)為，即使是在家禽中大規(guī)模流行HPAI疫情，也不會(huì)比亞洲HPAI H5N1在人類流行帶來的經(jīng)濟(jì)損失嚴(yán)重（CBO，2006）。

關(guān)于禽群監(jiān)測和亞洲HPAI H5N1產(chǎn)生影響方面，另一個(gè)需要考慮的因素是，那些缺乏生物安全防護(hù)的小規(guī)模但高價(jià)值的家禽和非商業(yè)用途的家禽養(yǎng)殖戶，會(huì)給美國整個(gè)家禽業(yè)帶來高風(fēng)險(xiǎn)。如果HPAI發(fā)生在小規(guī)模但高價(jià)值的家禽和非商業(yè)用途的家禽養(yǎng)殖場戶，商業(yè)家禽養(yǎng)殖者會(huì)受到禽肉消費(fèi)減少帶來的影響（短期內(nèi)可能會(huì)減少20%甚至更多），并且會(huì)導(dǎo)致失去出口市場。非商業(yè)的或小規(guī)模的養(yǎng)殖戶所受到的經(jīng)濟(jì)影響一般不會(huì)這么快，因?yàn)槠鋬r(jià)值不是與家禽產(chǎn)品銷售完全相關(guān)的。

一旦暴發(fā)NAI疫情，盡管行業(yè)和政府采取了快速行動(dòng)，但失去出口市場，失去出口市場會(huì)對國內(nèi)整個(gè)家禽業(yè)造成非常消積的影響。在過去，盡管只是在局部地區(qū)（某個(gè)農(nóng)場，市場或者縣域）暴發(fā)HPAI或NAI疫情，國內(nèi)或州內(nèi)貿(mào)易伙伴都會(huì)采取貿(mào)易限制措施。最近OIE AI指南做出了新的修改，更清晰地定義了各國為保護(hù)家禽養(yǎng)殖業(yè)，免受各種NAI亞型病毒帶來的影響，所應(yīng)采取的適宜措施。生物安全隔離區(qū)和區(qū)域化管理可以減少對出口貿(mào)易和家禽行業(yè)所造成的經(jīng)濟(jì)損失。盡管從歷史上看，美國消費(fèi)者像歐洲一些國家的消費(fèi)者那樣對由于動(dòng)物疫病帶來的不利影響做出負(fù)面反應(yīng)，但是幾乎沒有對美國消費(fèi)者需求減少采取保護(hù)措施。因此，考慮到HPAI或必須報(bào)告LPAI所造成的經(jīng)濟(jì)影響，開展監(jiān)測，迅速發(fā)現(xiàn)疫病，幫助商業(yè)伙伴了解在商業(yè)或非商業(yè)家禽中疫病狀況，提升信心，對整個(gè)美國家禽業(yè)來說非常重要。

3.目的（1）和（3）的理由：庭院散養(yǎng)、活禽交易市場（LBMS）和其他小規(guī)模禽場的監(jiān)測。由于對生物安全的重視程度比較低，與大型的商業(yè)養(yǎng)殖場相比，庭院散養(yǎng)、LBMS和其他小規(guī)模禽場面臨更大的感染AI風(fēng)險(xiǎn)。LBMS被認(rèn)為是AI病毒的儲(chǔ)存庫，并扮演著放大器的角色（Bulaga等，2003a；Bulaga等，2003b；Mullaney，2003；Nguyen等，2005；Trock等，2003；Webster和Hulse，2005），這些市場中的禽類來源和種類不同，甚至包括水禽，這里持續(xù)存在著活禽，有的在房屋里、有的使用不達(dá)標(biāo)的衛(wèi)生設(shè)施。1996年以來，在商業(yè)禽場中暴發(fā)了5起LPAI H7N2疫情，這都與美國東北部的活禽交易市場有關(guān)（Senne等，2003）。1983年以來，賓夕法尼亞州發(fā)現(xiàn)4起LPAI，其中2起追溯到與活禽交易市場相關(guān)（Dunn等，2003）。

因?yàn)轲B(yǎng)殖戶采取不同的生物安全措施以及與商業(yè)養(yǎng)殖場距離比較近的原因，庭院散養(yǎng)這種模式使美國商業(yè)家禽業(yè)面臨較高的感染風(fēng)險(xiǎn)（NAHMS，2004）。因此，在商品化規(guī)模養(yǎng)殖場暴發(fā)AI疫情之前，庭院散養(yǎng)中就已發(fā)現(xiàn)AI，這并不奇怪（Kinde等，2003）。釋放在禁獵區(qū)中處于半野外條件下飼養(yǎng)的獵禽，感染了之前在野生水禽中檢測的LPAI病毒株（Groocock，1994）。

除了上述這些養(yǎng)殖禽群對美國商業(yè)家禽業(yè)造成威脅，由于活禽交易市場和庭院散養(yǎng)一般較少限制人類接觸家禽，這些禽類中存在的病毒可能感染人類引起公共衛(wèi)生安全風(fēng)險(xiǎn)，因此有理由對這些禽群進(jìn)行監(jiān)測。

如果任由上述幾類禽類養(yǎng)殖自由發(fā)展下去，那么LPAI H5/H7亞型病毒將有可能變得對家禽更為致命。在LPAI病毒突變?yōu)镠PAI病毒之前，它們在禽群中會(huì)流行11天到2年多的時(shí)間（Senne等，2006）。國際上越來越重視AI病毒株突變的情況，一旦在美國活禽市場和庭院散養(yǎng)禽中檢測到LPAI H5/H7，貿(mào)易合作伙伴就會(huì)對美國家禽出口進(jìn)行限制（Hall，2004）。

4.目的（2）的理由：對野生禽類的早期檢測。若受感染的野生鳥類，它們的生態(tài)環(huán)境或所處的位置靠近家禽養(yǎng)殖場，就需要加大對附近高風(fēng)險(xiǎn)家禽的監(jiān)測。遷徙中的野生鳥類已經(jīng)被稱為是AI病毒的儲(chǔ)存庫，并且能導(dǎo)致AI病毒的傳播（Chen等，2006）。例如，2000—2002年，加利福尼亞州雞群中暴發(fā)LPAI H6N2的時(shí)間正好是正常水禽遷徙時(shí)期（Woolcock等，2003）。同樣，1978—2002年明尼蘇達(dá)州一些放養(yǎng)火雞與野鳥接觸，然后再接觸舍養(yǎng)的火雞，引發(fā)了季節(jié)性LPAI（Halvorson D.A.等，1997）。其間，傳入了108起疫情，波及了1100個(gè)雞群（Halvorson，2002），其中20起是LPAI H5或H7亞型。20世紀(jì)80～90年代早期，當(dāng)時(shí)在明尼蘇達(dá)州只有2%的火雞放養(yǎng)，這些半封閉飼養(yǎng)的火雞提供了將AI病毒傳入商品化火雞業(yè)的途徑。隨著養(yǎng)殖者停止采用這種半開放的飼養(yǎng)方式，改為全封閉的飼養(yǎng)方式，其結(jié)果是該州從野生鳥類和半開放飼養(yǎng)火雞將AI病毒傳播到封閉飼養(yǎng)火雞的風(fēng)險(xiǎn)得以顯著降低（Senne等，2006）。