中藥單體及復(fù)方治療酒精性肝損傷的研究進(jìn)展

胡曉陽，孫爽，李響，趙啟騰，郭鐘秀，樸圣愛

(1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150040)

ALD是長期大量飲酒導(dǎo)致的肝臟疾病,包括脂肪肝、酒精性肝炎、肝纖維化和肝硬化等[1]。肝臟可以耐受輕度飲酒，但隨著飲酒量的增加，它會導(dǎo)致肝臟代謝功能紊亂。初始階段包括脂肪在肝細(xì)胞中的積聚，通常稱為脂肪肝或脂肪變性。如果這個(gè)階段不停止飲酒，有時(shí)會導(dǎo)致酒精性肝炎。隨著酒精的持續(xù)攝入，酒精性肝病會發(fā)展為嚴(yán)重?fù)p害肝細(xì)胞的“酒精性肝硬化”[2]。酗酒導(dǎo)致全球每年約250萬人死亡，占總死亡率的4%盡管酒精中毒與60多種疾病有關(guān)，但酒精中毒的大多數(shù)死亡率是由ALD引起的[3]。ALD的發(fā)病機(jī)制在概念上可分為(1)乙醇介導(dǎo)的肝損傷;(2)對損傷的炎癥免疫反應(yīng);(3)腸道通透性和微生物組分的變化[4]。相關(guān)研究表明ALD的發(fā)病機(jī)制及疾病進(jìn)展可能與酒精及其代謝產(chǎn)物乙醛對肝臟的毒性作用、炎性介質(zhì)、氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡、免疫介導(dǎo)和細(xì)胞因子等多種因素有關(guān)[5]。

中醫(yī)認(rèn)為ALD的病因主要包括飲酒因素，體質(zhì)因素，飲食因素，情志因素等。其病機(jī)主要包括脾胃受損、濕熱內(nèi)盛、氣滯血瘀、氣血失運(yùn)、邪氣日久、入血傷陽[6]。在治療上，西醫(yī)多對癥處理、戒酒、保肝治療等等，但尚無特異性的治療藥物，這些治療方法可以緩解臨床癥狀，而中藥單體及復(fù)方在治療ALD方面具有明顯的優(yōu)勢和特點(diǎn)[7]。大量研究表明，中藥的活性成分對ALD具有潛在的治療益處，而其潛在機(jī)制有助于炎癥、氧化應(yīng)激和促凋亡信號通路的調(diào)節(jié)[8]。本文就近年來中藥單體及復(fù)方治療ALD的作用機(jī)制及實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展進(jìn)行如下論述。

1 中藥單體及其提取物的實(shí)驗(yàn)研究

許多研究已證實(shí),大量單味中藥對ALD具有較好的防治作用，例如葛根[9]、五味子[10]、雞血藤[11]、鱉甲[12]、黃芩[13]、三七[14]、白芥子[15]、烏藥[16]、枸杞[17]、丹參[18]、蛇床子[19]、厚樸[20]和桔梗[21]等。

1.1 黃芪

黃芪性味甘，微溫。歸脾，肺經(jīng)。具有補(bǔ)氣升陽、固表止汗、利水消腫等功效?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證實(shí)黃芪具有保護(hù)心血管、增強(qiáng)免疫力、抗衰老、保護(hù)肝腎等作用[22]。曹洪敏[23]研究黃芪粗提物對小鼠急性ALD的保護(hù)作用，檢測小鼠體內(nèi)的肝臟指數(shù)，血清中天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 (AST)和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 (ALT)，肝臟中總膽固醇(TG)和甘油三酯(TC)的含量，并通過HE染色法觀察小鼠體內(nèi)脂肪變性和肝臟損傷情況。結(jié)果顯示黃芪提取物能夠起到對小鼠ALD的保護(hù)功能。

1.2 白芍

白芍性味苦、酸，微寒。歸肝、脾經(jīng)。具有養(yǎng)血調(diào)經(jīng)，平抑肝陽，柔肝止痛等功效。研究表明白芍具有保肝，增強(qiáng)應(yīng)激能力，抑菌等藥理作用。Zhou Y等[24]采用長期酒精灌胃法誘導(dǎo)小鼠ALD，并檢測肝損傷相關(guān)指標(biāo)。病理結(jié)果表明，白芍多酚可減輕酒精性肝細(xì)胞損傷。定量聚合酶鏈反應(yīng)(qPCR)和Western blot結(jié)果顯示，白芍多酚上調(diào)神經(jīng)元型一氧化氮合酶(nNOS)、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)、錳超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、銅鋅超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)、過氧化氫酶(CAT)和下調(diào)誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)表達(dá)的mRNA(信使核糖核酸)和蛋白表達(dá)。

1.3 尖葉假龍膽

尖葉假龍膽Gentianellaacuta(Michx.) Hulten是龍膽科一年生草本植物, 又名苦龍膽。其全草入藥, 味苦、性涼, 具有清熱利濕，利膽退黃的功效[25]。研究發(fā)現(xiàn),尖葉假龍膽中的主要化學(xué)成分環(huán)烯醚萜類化合物具有保肝、抗炎等藥理活性[26]。胡曉陽等[27]采用酒精灌胃法建立大鼠ALD模型，用不同劑量尖葉假龍膽提取液灌胃, 于實(shí)驗(yàn)?zāi)y定大鼠肝體比值, 血清中AST、ALT活性, 肝勻漿中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)活性。結(jié)果顯示尖葉假龍膽對慢性ALD有明顯的防治作用。

1.4 琴葉榕

陸陽存等[28]研究琴葉榕對大鼠急性ALD的保護(hù)作用與機(jī)制研究。結(jié)果顯示琴葉榕具有降酶保肝、促進(jìn)脂質(zhì)代謝及抗氧化應(yīng)激和硝化應(yīng)激等藥理作用。分子機(jī)制結(jié)果提示琴葉榕可以抑制核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)炎癥信號通路中關(guān)鍵蛋白的表達(dá)，起到抗炎的藥理作用。

1.5 短穗兔耳草

單佳鈴等[29]探討藏藥短穗兔耳草提取物抗慢性ALD大鼠的作用機(jī)制，測定各組大鼠血清中AST，ALT，TC， TG及肝臟GSH水平；酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)檢測大鼠血清中白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)水平；蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測肝臟中Toll樣受體(TLR2)，髓樣分化因子88(MyD88)，NF-κB和 NOD樣受體蛋白3(NALP3)蛋白的表達(dá)；蘇木素-伊紅(HE)染色觀察肝臟病理學(xué)形態(tài)改變。結(jié)果顯示藏藥短穗兔耳草對酒精誘導(dǎo)的慢性ALD大鼠具有保護(hù)作用，其機(jī)制可能與TLR/MyD88/NF-κB和NALP3信號通路有關(guān)。

1.6 玉米黑粉菌多糖

張永紅等[30]觀察了玉米黑粉菌多糖對小鼠急性ALD的保護(hù)作用。按 12 mL/kg 50%酒精灌胃建立大鼠急性ALD模型，造模成功后禁食不禁水 16 h，檢測血清中ALT、AST、堿性磷酸酶(AKP)的含量及病理切片。結(jié)果顯示玉米黑粉菌多糖可有效保護(hù)肝細(xì)胞，可降低酒精對肝細(xì)胞的損傷。

1.7 槲皮素

槲皮素是植物性食物中一種黃酮類物質(zhì), 具有抗氧化、抗炎、抗癌、保護(hù)ALD等生物學(xué)效應(yīng)[31]。周曉娟等[32]研究槲皮素對大鼠慢性ALD的保護(hù)作用。將大鼠隨機(jī)分為對照組、模型組和槲皮素低、中、高劑量組，采用白酒灌胃的方法建立大鼠ALD模型，給予不同劑量槲皮素混懸液保護(hù)。12周后測定大鼠血清TG、ALT和AST及肝組織勻漿中SOD 、GSH 和丙二醛 (MDA)，觀察肝臟組織學(xué)變化。結(jié)果表明槲皮素對ALD具有保護(hù)作用，其機(jī)制與槲皮素減輕活性自由基介導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，提高抗氧化系統(tǒng)的能力有關(guān)。鐘瑾等[33]發(fā)現(xiàn)槲皮素可通過誘導(dǎo)I型血紅素氧合酶生成以及抑制炎癥介質(zhì)產(chǎn)生來預(yù)防和治療ALD。

1.8 四氫葉酸

趙超等[34]探討四氫葉酸對小鼠慢性ALD的保護(hù)作用。造模成功后，計(jì)算小鼠肝的臟器系數(shù)，檢測血清中AST以及ALT含量，測量肝組織中MDA含量及SOD活性，光鏡下觀察肝臟組織病理學(xué)改變。結(jié)果顯示四氫葉酸作為一碳單位轉(zhuǎn)移酶系的輔酶，可以減輕和改善慢性ALD。

2 中藥復(fù)方的實(shí)驗(yàn)研究

大量研究表明，例如肝脾調(diào)補(bǔ)方[35]、茵芩清肝湯[36]、八寶丹[37]、加味茵陳蒿湯[38]、解酒護(hù)肝方[39]、加味四逆散[40]、柔肝固腸方[41]、菊杞保肝膠囊[42]、梔子大黃湯[43]、五味子護(hù)肝片[44]、醒酒護(hù)肝口服液[45]和復(fù)方銀杏制劑[46]等在臨床和實(shí)驗(yàn)研究方面對ALD均具有較好的防治作用。

2.1 健脾疏肝解毒方

孟愛紅等[47]研究健脾疏肝解毒方(生黃芪、白術(shù)、澤瀉、茵陳、柴胡、川楝子、片姜黃、丹參、枳椇子、葛根、半夏)抗ALD作用研究，造模成功后檢測血清中血清AST、ALT、TC、TG水平以及肝臟中MDA含量、谷胱甘肽過氧化物酶 (GSH-PX)活力的影響。結(jié)果顯示健脾疏肝解毒方能通過增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化能力，減少脂質(zhì)過氧化而減輕酒精引起的肝組織損傷。

2.2 三七護(hù)肝膠囊

呂曉君等[48]采用灌胃50%乙醇的方法建立小鼠急性ALD模型，研究不同劑量(1.35、0.90和0.45 g/kg)的三七護(hù)肝膠囊(三七、西洋參、葛根)對ALD小鼠血清中ALT、AST含量，以及肝勻漿中MDA、SOD、GSH、TG含量，并觀察肝臟病理組織形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果表明三七護(hù)肝膠囊能抑制脂肪在肝細(xì)胞內(nèi)堆積, 改善小鼠肝細(xì)胞脂肪變性程度，對抗肝臟自由基的脂質(zhì)過氧化，對ALD具有較好的保護(hù)作用。

2.3 枳葛解酒保肝方

陳豐等[49]將大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、陽性藥組(0.36 g/kg)和枳葛解酒保肝方(葛根、枳椇子)高、中、低劑量(18、9、1.8 g/kg)組。以濃度為50%的無水乙醇 (以蒸餾水稀釋) 灌胃6周，建立大鼠ALD模型，以復(fù)方蛋氨酸膽堿片為陽性藥，各給藥組分別給予相應(yīng)藥物干預(yù)。檢測血清及肝組織中MDA、GSH含量, SOD活性。結(jié)果顯示枳葛解酒保肝方具有一定的增強(qiáng)SOD、GSH等內(nèi)源性抗氧化酶的抗氧化能力，抑制自由基介導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)對肝臟損傷的作用。

2.4 七味凈肝靈

張可鋒等[50]研究七味凈肝靈(牛大力、黑老虎、葉下珠、地耳草、白花蛇舌草、甘草和蟲牙藥)對ALD大鼠的保護(hù)作用及作用機(jī)制。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，七味凈肝靈對ALD有明顯的保護(hù)作用，其保肝作用可能與抑制氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)和調(diào)控, 兔抗白細(xì)胞分化抗原14(CD14)、NF-κB蛋白表達(dá)有關(guān)。

2.5 保肝顆粒

張英莉等[51]研究保肝顆粒(葛根、五味子)對小鼠急性ALD的保護(hù)作用，檢測小鼠血清ALT、AST、總膽紅素(TBIL)、TG、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白 (LDL)及肝臟組織石蠟切片HE染色觀察組織病理學(xué)改變。結(jié)果顯示保肝顆粒對小鼠血清中ALT、AST、TG和LDL的含量抑制明顯，但對TBIL的含量抑制不明確，能有效促進(jìn)HDL生成，改善肝細(xì)胞水腫及炎性浸潤，從而能達(dá)到對ALD的保護(hù)。

2.6 九味肝泰膠囊

閆嘉茵等[52]研究九味肝泰膠囊(三七、姜黃、五味子、大黃、黃芩、郁金、蜈蚣、山藥、蒺藜) 對急性ALD小鼠的保護(hù)作用及其機(jī)制。結(jié)果表明九味肝泰膠囊中、高劑量組，能夠顯著降低小鼠肝指數(shù)，降低肝臟脂肪變性情況，小鼠血清中的ALT、AST、堿性磷酸酶(ALP)和血清谷酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)都有明顯回落,高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量升高，TC、TG和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的含量降低,肝組織中SOD、GSH-Px和谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶 (GST) 活性顯著提高,MDA含量下降明顯。此外，九味肝泰膠囊還抑制了小鼠肝組織中腫瘤壞死因子-α(TNF-α),IL-1β(白介素-1β)mRNA的表達(dá)，降低了肝組織勻漿中TNF-α和IL-1β的含量。九味肝泰膠囊對小鼠ALD有防治作用，可能與其調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，抗脂質(zhì)過氧化,減少肝組織促炎因子的表達(dá)有關(guān)。

2.7 苦參素膠囊

方慧等[53]研究苦參素膠囊對小鼠急性ALD的保護(hù)作用。測定血清中ALT、AST、TC、TG、ALP、乳酸脫氫酶(LDH)含量。測定肝組織中SOD活性、MDA含量。其作用機(jī)制可能與清除自由基抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)有關(guān)，通過增強(qiáng)體內(nèi)氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)之間的動態(tài)平衡，提高細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，從而達(dá)到保護(hù)肝細(xì)胞的目的。

2.8 仁和解酲湯

汪丙柱等[54]研究仁和解酲湯(葛花、枳椇子、人參、豆蔻、砂仁、白術(shù)、茯苓、六神曲、陳皮、黃連、生姜、丁香、生甘草)對小鼠急性酒精中毒肝損傷的干預(yù)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，仁和解酲湯能明顯改善灌酒后小鼠的行為，降低血清ALT、AST水平,增強(qiáng)SOD、GSH-Px、乙醇脫氫酶(ADH)和乙醛脫氫酶(ALDH)活性,降低MDA的含量，明顯改善ALD后的組織結(jié)構(gòu)，降低NF-κB蛋白的表達(dá)。提示仁和解酲湯對小鼠急性ALD的保護(hù)作用與穩(wěn)定細(xì)胞膜、增加抗氧化能力、減少脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的產(chǎn)物、增強(qiáng)乙醇代謝酶活性，從而減輕炎癥反應(yīng)相關(guān)。

有關(guān)研究表明，除中藥及提取物和中藥復(fù)方制劑外水飛薊素類治療、還原型谷胱甘肽治療、硫普羅寧聯(lián)合其他藥物治療等都能有效治療ALD[55]。

3 總結(jié)

中藥單體及復(fù)方可結(jié)合體質(zhì)，在辨病、辨證思想指導(dǎo)下對ALD進(jìn)行分期論治、動態(tài)治療,利用中藥多靶點(diǎn)、多層次、多作用、多途徑的特點(diǎn),充分發(fā)揮其安全、低毒、高效的優(yōu)勢。中藥可能是未來防治ALD新藥開發(fā)的良好資源。近年來醫(yī)學(xué)工作者進(jìn)行了大量的有關(guān)中藥抗ALD作用的研究，發(fā)現(xiàn)了許多作用于ALD的中藥單體及復(fù)方，并經(jīng)研究證實(shí)其對ALD有明顯的干預(yù)和治療效果，但中藥單體及復(fù)方的作用靶點(diǎn)和作用機(jī)制需要進(jìn)一步深入探索和研究?？梢韵嘈胚M(jìn)一步的研究不僅能夠更完整、系統(tǒng)、深刻地揭示中藥單體及復(fù)方的作用機(jī)理，而且還提供了中藥與現(xiàn)代科學(xué)交流融合的平臺，從而能夠提高中藥單體及復(fù)方治療ALD的臨床療效，發(fā)揮中藥“簡便、價(jià)優(yōu)、副作用少”等優(yōu)勢和特點(diǎn)，更好傳承和發(fā)展中醫(yī)藥理論，為社會創(chuàng)造良好的經(jīng)濟(jì)效益。