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    抗苗勒氏管激素在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用研究進展

    2020-01-10 06:16:45農(nóng)建宏
    黑龍江醫(yī)藥 2020年5期
    關(guān)鍵詞:儲備卵泡胚胎

    農(nóng)建宏,何 敏,劉 欣,柳 青

    廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生健康委生殖中心,南寧 530021

    抗苗勒氏管激素(AMH)又可稱為苗勒管抑制物(MIS),是轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)家族中的成員,由兩個完全相同的72KD單體通過二硫鍵連接組成的二聚體糖蛋白,人類AMH 19號染色體(19p13.3)短臂上,借助卵泡部分自行分泌與從旁分泌渠道,與其Ⅱ級受體(AMHRⅡ)融合發(fā)揮生物學(xué)作用,僅表達于性腺。在男性身體之中,從胚胎形成期開始分泌AMH,促使苗勒氏管退化,形成男性生殖系統(tǒng)正常結(jié)構(gòu);在女性體內(nèi),自從母親妊娠32孕周胎兒期開始到絕經(jīng)期,AMH由卵巢顆粒細胞分泌,最開始表達于初級卵泡的顆粒細胞,并最終發(fā)育成為輸卵管、子宮、陰道上段等女性生殖功能相關(guān)的臟器,持續(xù)整個卵泡發(fā)育過程。卵巢顆粒細胞產(chǎn)生AMH保持相對于男性較低的一個水平,在血清中可以檢測到的范圍為:2~6.8 ng/ml,其水平的高低與正在發(fā)育的卵泡數(shù)成一定比例。因此AMH在反映卵巢健康狀態(tài),預(yù)測卵巢儲備功能,監(jiān)測卵泡生長狀態(tài)等方面有重要的應(yīng)用價值[1]。目前廣泛應(yīng)用于婦科內(nèi)分泌疾病、婦科腫瘤、生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域、性別異常分化和自身免疫性疾病等臨床診斷和治療,特別是AMH與輔助生殖技術(shù)(ART)是近幾年研究的熱點。本文就AMH在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用最新進展進行綜述。

    1 AMH與卵巢儲備功能

    卵巢儲備功能(OR)是指人體卵巢皮質(zhì)區(qū)里的原始卵泡生長、發(fā)育、發(fā)展成為可受精卵母細胞的功能,即為卵巢中所剩的卵子的數(shù)目和質(zhì)量[2],代表卵巢產(chǎn)生卵母細胞及雌激素的能力,是反饋育齡女性生育能力的重要指標(biāo)之一。如果卵巢皮質(zhì)區(qū)卵泡之中卵母細胞儲藏數(shù)量減少或質(zhì)量不高,則說明卵巢功能衰退或者卵巢儲備功能不全,容易引起育齡女性自然受孕困難或者卵巢早衰,甚至引起絕經(jīng)年齡提前等,導(dǎo)致卵巢儲備功能快速減退的原因很多,如婦科惡性腫瘤放療化療治療、卵巢腫瘤手術(shù)治療后損傷其組織、病毒引起卵巢炎、免疫性卵巢損害、過度肥胖和神經(jīng)性厭食癥等。臨床上診斷及評估卵巢儲備功能有多種方法,可通過女性實際年齡來判斷,也可以借助超聲診斷技術(shù)進行卵巢功能評估,亦可以來評估卵巢儲備功能。年齡是臨床上最早也最為廣泛用于評估卵巢儲備功能的重要指標(biāo),但是往往女性實際年齡與卵巢生物年齡有些差異;基礎(chǔ)內(nèi)分泌激素中卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)、雌二醇(E2)、催乳素(PRL)、孕酮(PROG)、睪酮(TESTO)等性激素,俗稱“性激素六項”,加上“FSH/LH”比值是評價卵巢儲備功能的傳統(tǒng)指標(biāo),但是受到下丘腦-垂體-卵巢軸的相互調(diào)節(jié)相互影響,整個月經(jīng)周期結(jié)果波動較大,需要患者在特定的時間來就診,給患者帶來不便;同樣氯米芬實驗也可用來評估卵巢儲備功能,但是用藥一段時間后需停藥才能檢測,整個觀察時間也較長,需要患者依從性高積極配合才能進行,且使用不當(dāng)容易引起卵巢過度刺激綜合征(OHSS),目前使用不多;GnRH-a興奮試驗也稱垂體興奮試驗,給患者一次性靜脈注射GnRH-a100 mg,分別在用藥前、后的0.5 h、1 h、1.5 h抽取患者靜脈血檢測FSH和LH,如果用藥后LH上升3倍而FSH不變,提示垂體功能正常,如果LH沒有增高說明垂體功效的異常;如果FSH和LH均有上升趨勢,說明垂體功能正常,而卵巢儲備功能衰退的跡象。INHB是a亞單位和b亞單位組成的異二聚體蛋白質(zhì)激素,男性由睪丸支持細胞分泌,女性由中、小竇卵泡的顆粒細胞產(chǎn)生,主要體現(xiàn)為脈沖型分泌,隨后INHB進至卵泡液在部分凸顯出自行分泌與從旁分泌功能并自卵巢靜脈進至循環(huán)[3]。卵巢功能衰退早期,血清INHB水平即有所改變,比FSH更早體現(xiàn)出來,用于早期評估卵巢儲備功能變化較為準確,但同樣也給患者帶來不便。AFC是利用超聲探查雙側(cè)卵巢里所含的所有直徑大于2~10 mm的竇狀卵泡個數(shù)總和,研究者發(fā)現(xiàn),在早卵泡期超聲檢查中如AFC小于6個,提示著卵巢儲備功能的下降[4],是臨床上常用來評估卵巢儲備功能的重要指標(biāo),當(dāng)然,常規(guī)婦科超聲AFC計數(shù)受患者體位、脂肪等影響,經(jīng)陰道超聲檢查計數(shù)較為準確,各種評估方法各有利弊,作者認為多種指標(biāo)聯(lián)合評估更能客觀反應(yīng)卵巢儲備功能。

    AMH是目前評估卵巢儲備功能中穩(wěn)定的、客觀的臨床指標(biāo)。在女性身體中,AMH由卵巢顆粒細胞分泌,并能抑制原始卵泡的募集和調(diào)控竇卵泡生長發(fā)育,與卵巢儲備功能關(guān)系密切,最先凸顯在初級卵泡之中的顆粒細胞層,并為顆粒細胞分散至血而監(jiān)測出來,其濃度與成長卵泡總量緊密關(guān)聯(lián)[5]。在生育期女性身體中,AMH是借助從旁分泌渠道與部分自行分泌后的卵泡之中顆粒細胞膜表層的AMH受體Ⅱ加以融合發(fā)揮生物學(xué)作用,阻礙原始卵泡產(chǎn)生的初始匯集,降低原始卵泡的耗費,還能夠減弱成長卵泡對于FSH刺激產(chǎn)生的反應(yīng)性,影響到優(yōu)良卵泡的篩選,從而影響卵巢的儲備功能[6-7]。采集育齡期婦女的外周血既可以檢測到AMH,是至今為止,外周血可以檢測到的卵泡最早產(chǎn)生的物質(zhì),且AMH不受HPO軸影響,在月經(jīng)周期內(nèi)幾乎沒有變化,取材方便,易被患者接受,較其他檢測指標(biāo)更能精確評估卵巢儲備[7]。

    2 AMH與卵泡生長發(fā)育

    卵泡呈圓形泡狀,位于卵巢皮質(zhì),是哺乳動物卵巢中卵母細胞發(fā)生與發(fā)育的基本功能單位,女性卵泡發(fā)育始于胎兒期,終于絕經(jīng)期,大部分女性進入性成熟期后每個月由一側(cè)的卵巢產(chǎn)生一個成熟卵泡并排放,兩側(cè)卵巢交替進行,亦有少數(shù)女性每個月有兩個或者數(shù)個卵泡發(fā)育成熟,同時也會不斷有卵泡凋亡。隨著卵巢機能的退化進入老年絕經(jīng)期后不再有卵泡發(fā)育。卵泡發(fā)育包括原始卵泡募集和周期募集兩個過程,原始卵泡募集誘發(fā)始基卵泡發(fā)育,周期募集引發(fā)一群小竇狀卵泡生長,長勢不佳的小卵泡逐漸閉鎖,優(yōu)勢卵泡被篩選出來,發(fā)育成熟后,在卵泡雌激素和黃體生成素共同作用下排卵。AMH與相鄰原始卵泡顆粒細胞膜表面的AMH受體Ⅱ結(jié)合,抑制始基卵泡的募集,干擾生長卵泡發(fā)揮功能,影響其對FSH的反應(yīng)性,進一步限制或者調(diào)控生長卵泡的生長、發(fā)育和成熟。AMH的特殊表達方式可能參與上述生理過程,而AMH如何通過調(diào)節(jié)人卵巢對FSH的敏感性發(fā)揮卵泡生長發(fā)育作用機理目前闡述不是很清楚[8]。有實驗證實:重組AMH的培養(yǎng)基體外培養(yǎng)人卵巢組織,AMH可發(fā)揮抑制卵泡募集的作用[9]。將來可以利用外源性AMH建立動物模型進行深入研究。

    3 AMH與胚胎發(fā)育潛能

    隨著社會的發(fā)展,環(huán)境以及人類生活習(xí)慣的改變,不孕不育的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢,輔助生殖技術(shù)(ART)已成為解決不孕不育的主要手段,其中體外受精-胚胎移植(IVF-ET)是輔助生殖技術(shù)的核心,如何獲得足夠數(shù)量的優(yōu)質(zhì)卵子并與高質(zhì)量精子授精培養(yǎng)成優(yōu)質(zhì)胚胎是決定IVF-ET成功率的關(guān)鍵。胚胎形態(tài)學(xué)評估是傳統(tǒng)方法,一直沿用至今,近幾年興起的延時攝像(time-lapse)技術(shù)可以通過全程連續(xù)監(jiān)測胚胎的形態(tài)發(fā)育過程,更直觀觀察胚胎整個發(fā)育過程,有效地預(yù)測卵裂期胚胎的發(fā)育潛能[10];植入前PGD是近年來廣泛應(yīng)用于輔助生殖技術(shù),利用顯微操作技術(shù)獲取胚胎遺傳信息,通過PCR、FISH等進行特定基因或染色體畸變的檢測,其可以對攜帶遺傳性致病基因的夫婦或者患者夫婦進行孕前診斷,在胚胎移植前挑選表型正常的胚胎,并無攜帶遺傳性疾病基因的優(yōu)質(zhì)胚胎進行移植[11],為早期產(chǎn)前診斷開辟一條新路子;體外胚胎組培養(yǎng)液代謝組學(xué)測定也是近年研究的熱點[12]。另外,Yamanaka等[13]研究發(fā)現(xiàn),通過測定胚胎的呼吸率可挑選出具有高發(fā)育潛能的囊胚。血清AMH水平因其月經(jīng)周期變化不大,已廣泛應(yīng)用來評估卵巢儲備功能,但AMH與IVF-ET臨床妊娠結(jié)局的相關(guān)性存在爭議,Honnma H[14-16]等研究表明:血清AMH水平與IVF-ET周期中獲卵數(shù)量和優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)之間有一定關(guān)系,提示AMH水平可能與IVF-ET的臨床妊娠結(jié)局存在相關(guān)性;Silverberg K[17-19]等部分學(xué)者認為基礎(chǔ)血清AMH水平可以預(yù)測妊娠結(jié)局。Lin WQ[20]等學(xué)者對IVF-ET助孕的妊娠女性和未獲得妊娠女性進行比較分析,研究結(jié)果表明:妊娠女性的血清AMH水平、受精率與卵裂數(shù)都顯著高于未獲得妊娠的女性,并進一步說明AMH與卵母細胞數(shù)目、胚胎和囊胚的質(zhì)量具有一定相關(guān)性。Arce JC等研究也表明[21],在使用拮抗劑助孕的女性中血清AMH的水平越高,臨床妊娠率和活產(chǎn)率越高。另外,部分學(xué)者認為IVF-ET過程中,AMH可以預(yù)測卵巢反應(yīng)性,而卵巢反應(yīng)性是控制性超促排卵(COH)過程中,卵巢對于外源性促性腺激素的反應(yīng)能力,目前沒有特異性方法預(yù)測卵巢反應(yīng)性,年齡、FSH水平、AFC等在臨床上預(yù)測卵巢儲備及卵巢反應(yīng)應(yīng)用較多的指標(biāo),AFC雖直觀,但無法評估卵巢反應(yīng)性,F(xiàn)SH隨月經(jīng)周期波動較大,不是理想預(yù)測指標(biāo)。在行IVF-ET期間如何獲得一定數(shù)量的優(yōu)質(zhì)卵子是提高臨床妊娠率的關(guān)鍵,王冬雪[22]等對AMH與臨床結(jié)局相關(guān)性進行研究表明:Gn5和誘發(fā)排卵日(HCG注射日)與促排卵臨床結(jié)局相關(guān)性最強。而陳藝[23]等用血清抗苗勒氏管激素水平預(yù)測IVF-ET妊娠結(jié)局,結(jié)果認為患者的血清AMH水平與IVF-ET臨床結(jié)局并無相關(guān)性。AMHIVF-ET期間與胚胎質(zhì)量、發(fā)育潛能、卵巢反應(yīng)性以及卵巢過度刺激綜合征(OHSS)等預(yù)測價值研究結(jié)果差異較大,總之,ANH水平能否評估卵母細胞及胚胎質(zhì)量,是否可以預(yù)測IVF-ET的臨床結(jié)局仍然存在爭議,血清AMH水平在囊胚發(fā)育中的預(yù)測價值仍待后續(xù)研究來證實。

    4 血清AMH在垂體降調(diào)節(jié)及促排卵期間變化規(guī)律

    利用人工藥物干預(yù)調(diào)節(jié)垂體功能,達到治療生殖內(nèi)分泌疾病的方式即為降調(diào)節(jié),通過垂體降調(diào)節(jié)抑制或減少自發(fā)性LH峰的出現(xiàn),避免自發(fā)排卵,是IVF-ET周期中重要環(huán)節(jié),目前常用降調(diào)節(jié)方案主要分為:超長方案、長方案、短方案、超短方案;從降調(diào)節(jié)開始到取卵手術(shù)的過程中,血清AMH是否變化是生殖醫(yī)學(xué)專家關(guān)注的焦點,劉曼琳等[24]學(xué)者對降調(diào)后是否影響AMH水平進行研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在使用長效或短效GnRHa降調(diào)節(jié)后第14天,檢測發(fā)現(xiàn)患者血清AMH水平呈現(xiàn)上升趨勢,提示卵泡池由靜態(tài)向動態(tài)轉(zhuǎn)化,從而獲得適量的卵子數(shù)。葉云等[25]研究也表明:GnRHa降調(diào)節(jié)后AMH水平會呈現(xiàn)“歸中趨勢”,即高向低走,低向高走。楊曉菁等[26]通過比較基礎(chǔ)及促性腺激素刺激第6天血清AMH水平后發(fā)現(xiàn):降調(diào)后的AMH水平可預(yù)測獲卵數(shù),且Gn使用總量與AMH也有一定的線性關(guān)系,月經(jīng)期第2~5天的AMH水平及Gn刺激第6天的AMH水平均可較準確地預(yù)測卵巢反應(yīng)和獲卵數(shù)。AnckaertE等[27]研究結(jié)果顯示Gn5血清AMH和控制性超促排卵(COH)結(jié)局相關(guān)性顯著,亦有學(xué)者[28]認為血清AMH水平在利用GnRHa垂體降調(diào)期間變化不大,多數(shù)學(xué)者認為血清AMH水平在IFV-ET期間是有變化的,特別是降調(diào)節(jié)后水平有所下降,可以根據(jù)其變化來預(yù)測胚胎質(zhì)量、發(fā)育潛能、卵巢反應(yīng)性等,聯(lián)合AMH、FSH、AFC等多種指標(biāo)來預(yù)測IVF-ET臨床結(jié)局更有臨川應(yīng)用價值??傊?,對于GnRHa降調(diào)后AMH水平的變化尚無統(tǒng)一結(jié)論,有待更多的實驗數(shù)據(jù)進一步驗證。

    5 AMH與性異常分化

    研究表明:性分化異常與生殖器原基形態(tài)異常、睪丸激素包括AMH分泌不足有關(guān)。持續(xù)性苗勒氏管綜合征(PMDS)患者由于AMH其受體基因編碼發(fā)生突變,導(dǎo)致睪丸支持細胞功能不全,成年后除了具有男性外生殖器,同時還具有輸卵管和子宮。50%的隱睪癥、單側(cè)隱睪癥和大多數(shù)陰囊型尿道下裂患者血清AMH正常,隱睪癥患者血清AMH明顯低于單睪癥患者,性腺發(fā)育不全患者血清AMH明顯低于尿道下裂患者[29],AMH分別由卵巢顆粒細胞和睪丸支持細胞特異性分泌。因此,嬰兒出生時若性別模糊,需檢測睪丸組織和AMH水平,若AMH水平很低或未檢測出,則高度懷疑無睪丸組織。

    6 結(jié)語

    目前有待解決的問題:(1)實驗室不同檢測方法結(jié)果差異較大,缺少校準衡量值,需建立相關(guān)行業(yè)標(biāo)準和參考范圍;(2)實驗室處理標(biāo)本過程中各種影響因素及內(nèi)源性干擾物質(zhì)影響檢測結(jié)果有待研究證實;(3)不同時間點及季節(jié)變化對AMH是否有影響需進一步證實;(4)垂體降調(diào)節(jié)及促排卵藥物使用對AMH水平變化需進一步明確;(5)抗癌藥物及服藥史對AMH影響有待研究;(6)POSS及肥胖患者減肥后對AMH影響需進一步研究。關(guān)于AMH各種影響因素的研究剛剛起步,一些影響因素在生殖領(lǐng)域的意義還不明確,有待更多同仁進一步研究,以利于為相關(guān)疾病診斷提供更準確的依據(jù),為臨床治療提供參考。

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