化妝品中植物原料組分檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展

李國(guó)萍，孟憲雙，馬 麟,3，陳 萌，連顯會(huì),4，白 樺，雷海民，馬 強(qiáng)*

(1.中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院，北京 100176；2.北京中醫(yī)藥大學(xué) 中藥學(xué)院，北京 102488；3.北京中醫(yī)藥大學(xué) 東方學(xué)院，河北 廊坊 065001；4.大連理工大學(xué) 生命與醫(yī)藥學(xué)院，遼寧 盤(pán)錦 124221)

化妝品是一種通過(guò)噴灑、涂擦或其他方法，散布于人體表面，以達(dá)到清潔、護(hù)膚和修飾效果的日用化學(xué)工業(yè)產(chǎn)品。起初，化妝品的作用比較單一，主要以清潔和護(hù)膚為目的，隨著近年來(lái)人民生活水平的提高以及消費(fèi)理念的轉(zhuǎn)變，“崇尚綠色”、“回歸自然”已成為當(dāng)今社會(huì)的潮流。植物原料溫和、多效、副作用小，符合人們對(duì)綠色、健康、安全的追求，因此，含植物原料的天然化妝品受到廣大消費(fèi)者的青睞，在化妝品市場(chǎng)上占有的份額也越來(lái)越高。

需要指出的是，并不是所有的植物原料都是安全的，某些植物原料物質(zhì)因具有毒性，被禁止或限量添加于化妝品中，如烏頭、半夏、白芷中的歐前胡內(nèi)酯、檳榔中的檳榔堿、麻黃根中的麻黃堿等。因此，為提高化妝品的功效和質(zhì)量安全，切實(shí)保障消費(fèi)者健康，許多分析工作者建立了一系列分析方法來(lái)檢測(cè)化妝品中的植物原料組分(功效成分、禁用物質(zhì)和限用物質(zhì))。本文將對(duì)化妝品中廣泛使用的安全植物原料和禁限用植物原料做介紹，并對(duì)其相關(guān)檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行綜述，以期對(duì)植物資源的有效開(kāi)發(fā)利用和化妝品的質(zhì)量安全提供理論指導(dǎo)和技術(shù)支持。

1 植物原料在化妝品中的應(yīng)用

1.1 已在化妝品中使用的植物原料

植物化妝品是以植物為原料，經(jīng)過(guò)提取、分離制備植物提取物或單體，再與其他原料復(fù)配而成的各種化妝品[1]。早在我國(guó)古代就已將植物作為護(hù)膚、美容用的化妝品，《神農(nóng)本草經(jīng)》、《肘后備急方》和《黃帝內(nèi)經(jīng)》等歷代古書(shū)中都有關(guān)于植物調(diào)理肌膚、美容的記載。我國(guó)植物資源豐富，目前已有許多植物作為原料添加于化妝品中，在《已使用化妝品原料名稱目錄》(2015版)中花類植物有232種，藥妝食同源植物有87種，海洋和藻類植物有65種。表1列舉了化妝品中一些常見(jiàn)的植物原料。

表1 已用于化妝品中的常見(jiàn)植物原料Table 1 Some common plant materials used in cosmetics

2014年6月，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局公布了8 783種已使用化妝品原料，其中植物原料有2 000多種。從數(shù)據(jù)看，雖然植物原料在化妝品原料中占比較高，但相對(duì)植物資源總量來(lái)說(shuō)仍偏少，我國(guó)化妝品的豐富植物資源有待進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用。我國(guó)在開(kāi)發(fā)化妝品植物資源方面有以下優(yōu)勢(shì)：第一，自然條件適宜于多種類型植物生長(zhǎng)，為天然化妝品的開(kāi)發(fā)提供了自然資源條件；第二，天然化妝品市場(chǎng)需求大；第三，我國(guó)醫(yī)學(xué)寶庫(kù)中積累了豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)，在植物的用量、配伍、副作用等方面有許多驗(yàn)證記載，有利于開(kāi)發(fā)療效好的植物資源。

目前，由于地域性差異大以及商家以次充好，追求利益最大化等，導(dǎo)致化妝品市場(chǎng)上的植物原料品質(zhì)良莠不齊，因此，化妝品植物原料的質(zhì)量控制變得尤為重要。第一，監(jiān)管部門(mén)需要完善植物資源的質(zhì)量監(jiān)督管理體系；第二，化妝品植物原料的生產(chǎn)廠家應(yīng)建立原料產(chǎn)地篩選系統(tǒng)；第三，相關(guān)研究機(jī)構(gòu)應(yīng)盡快建立相關(guān)檢測(cè)技術(shù)方法，切實(shí)保障化妝品植物原料的品質(zhì)地道和綠色健康。

1.2 化妝品中禁用植物原料

化妝品原料分為人工合成和天然原料，雖然相較于以化學(xué)合成物質(zhì)為原料的化妝品而言，以植物為原料的化妝品安全性較高，但并不是所有的植物原料都是絕對(duì)安全的。在可用于化妝品的植物資源中，中藥占很大一部分，但在其保存和制備中，原料及提取物中的農(nóng)藥殘留、重金屬和溶劑殘留等都會(huì)帶來(lái)安全風(fēng)險(xiǎn)；同時(shí)，有些植物及提取物不能作為化妝品原料使用，《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》(2015年版)中規(guī)定了92種禁用植物組分，如補(bǔ)骨脂、商陸、半夏、白芷等。除此之外，有些植物原料雖然具有很好的功效，但含有一些有害(光敏性、刺激性等)成分。如狼毒、芫花等一些瑞香科植物，雖然具有美白、抗氧化、防曬等功效，但由于自身毒性，被禁止添加于化妝品中。白芷是一種美容佳品，在美容古方中應(yīng)用最多，具有美白、防紫外線和防曬的作用。研究表明，白芷可以改善人體微循環(huán)，促進(jìn)皮膚新陳代謝，延緩皮膚衰老，消除在組織中過(guò)度堆積的色素，達(dá)到美白祛斑的效果[2]。但白芷中含有香豆素類成分，其中呋喃香豆素是一種致敏成分，能夠增強(qiáng)皮膚對(duì)紫外線的敏感性，使黑色素的生成速度加快。在紫外燈照射下，歐前胡素會(huì)與蛋白質(zhì)中的酸性基團(tuán)發(fā)生反應(yīng)，使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，出現(xiàn)脫皮現(xiàn)象[3]；蒼耳子、雪蓮、麝香、石竹等植物藥，應(yīng)用于化妝品中會(huì)導(dǎo)致接觸性皮炎；補(bǔ)骨脂、防風(fēng)、毛莨、無(wú)花果、蕓香等應(yīng)用于化妝品會(huì)引起日光性皮炎。

因此，這些用于化妝品中的可能具有毒副作用的植物原料，應(yīng)引起研究者和消費(fèi)者們對(duì)植物性化妝品安全性問(wèn)題的重視，在研究開(kāi)發(fā)和使用植物性化妝品過(guò)程中注意有效性和安全性的統(tǒng)一，在追求有效性的同時(shí)，不能忽略植物原料的安全性問(wèn)題。目前，天然化妝品在化妝品市場(chǎng)中炙手可熱，但其發(fā)展要基于加強(qiáng)對(duì)植物原料的質(zhì)量管理和控制，建立統(tǒng)一的生產(chǎn)規(guī)范和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，使天然化妝品更安全健康，以得到更多消費(fèi)者的認(rèn)可和青睞。

2 植物活性成分在化妝品中的應(yīng)用

植物中含有的一些有效成分和活性成分構(gòu)成了天然化妝品美白、保濕、防曬、抗衰老等的功效基礎(chǔ)。如植物甾醇、多糖、多肽、氨基酸、植物油脂、磷脂、多元醇粘液質(zhì)等就是大多數(shù)植物性保濕化妝品中的功效成分[4]；巖藻聚糖是一種大分子聚糖結(jié)構(gòu)，可在皮膚上形成高度含水膜，具有長(zhǎng)效的保濕效果；霍霍巴油是適合各種肌膚的最好的護(hù)膚油，可與皮脂完全混合，將其涂抹在皮膚上時(shí)，可形成非常薄的無(wú)油膜，促進(jìn)皮膚表層呼吸，調(diào)節(jié)皮膚濕度，同時(shí)能明顯減少表皮水分流失，是一種優(yōu)異的保濕劑；一些黃酮類化合物如槲皮素、蘆丁、芹菜黃素等對(duì)紫外線具有較強(qiáng)的吸收作用，因而可以作為防曬成分添加于化妝品中防護(hù)因紫外線引起的損傷。郝慶紅團(tuán)隊(duì)[5]實(shí)驗(yàn)表明，和厚樸酚能增強(qiáng)抗氧化酶活性，降低體內(nèi)丙二醛含量，并通過(guò)清除體內(nèi)產(chǎn)生的過(guò)多自由基，使細(xì)胞氧化過(guò)程受到抑制，作為化妝品添加劑時(shí)可起到延緩衰老的作用；賈越光等[6]研究發(fā)現(xiàn)人參皂苷可以抑制酪氨酸酶,說(shuō)明人參皂苷具有美白作用；王虹等[7]發(fā)現(xiàn)迷迭香酸可以通過(guò)提高抗氧化酶活性，清除自由基，減少脂質(zhì)過(guò)氧化物的生成而達(dá)到抗衰老的目的。

近年來(lái)，全球各大化妝品公司都在重點(diǎn)研發(fā)天然原料，用以配制化妝品的活性成分。其中絕大多數(shù)為植物性原料，并且已有許多植物活性成分被添加于化妝品中。如佰草集清爽化妝水添加了金銀花浸膏和黃芩提取液，殺菌的同時(shí)增強(qiáng)了毛孔通透性；雅詩(shī)蘭黛中添加的栗子提取物、酵母提取物、桑葚提取物及黃芩成分，可調(diào)整皮膚類質(zhì)氧化，縮小可見(jiàn)肌膚毛孔；屈臣氏生姜修護(hù)焗油添加的生姜提取液和小麥水解蛋白，有助于修復(fù)鱗片，增加頭發(fā)營(yíng)養(yǎng)。表2按照植物活性成分的類別列舉了一些已用于化妝品的植物活性成分。

表2 常見(jiàn)的已用于化妝品中的植物活性成分Table 2 Common plant active ingredients used in cosmetics

(續(xù)表2)

Main categorySubcategoryRepresentative active componentsBiological activity植物多酚花色素、兒茶酸、表兒茶酸、綠原酸、橙皮苷、沒(méi)食子酸、鞣花酸、紫薯花色素、白藜蘆醇、番石榴酸、番石榴單寧、櫟精、異紅草苷、牡荊苷、花色素、熊果苷、石榴多酚、樟多酚美白;收斂;防曬;保濕;抗皮膚過(guò)氧化與延緩衰老;保健植物類黃酮銀杏黃酮、兒茶素、葛根素、牧荊苷、異牧荊苷、大豆異黃酮、橘皮苷、黃芩苷、槲皮素、芩黃素、川陳皮素、金絲桃苷、金圣草黃素、苦參黃素、次苦參黃素、芹菜黃素、紅景天苷、竹茹黃酮抗皮膚過(guò)氧化與延緩衰老;美白;抗輻射與防曬;抗炎抗過(guò)敏;抑菌;收斂和保濕;祛紅血絲植物有機(jī)酸蘋(píng)果酸、草酸、檸檬酸、阿魏酸、異阿魏酸、曲酸、甘草酸、鞣花酸、土槿皮酸、咖啡酸、漆樹(shù)酸、亞麻酸、水楊酸、L-抗壞血酸、乳酸、α-醇酸新陳代謝;滋養(yǎng)皮膚;延緩皮膚衰老植物甾醇β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇、燕麥甾醇皮膚細(xì)胞促進(jìn)劑;抗炎劑;傷口愈合劑;非離子乳化劑

3 化妝品中植物原料組分的檢測(cè)技術(shù)

目前，化妝品中植物原料組分的檢測(cè)技術(shù)主要有高效液相色譜法、高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法，另外，也有研究人員采用實(shí)時(shí)直接分析質(zhì)譜法、拉曼光譜法及毛細(xì)管電泳法等對(duì)植物原料進(jìn)行高效檢測(cè)，下面將一一進(jìn)行介紹。

3.1 高效液相色譜及高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

高效液相色譜法(High-performance liquid chromatography,HPLC)是一種應(yīng)用廣泛的分析手段，具有高效、高速、高靈敏度的特點(diǎn)。高效液相色譜根據(jù)各組分在兩相之間的分配系數(shù)不同達(dá)到分離的目的，分離后的組分再經(jīng)檢測(cè)器檢測(cè)，從而達(dá)到定性定量的目的。目前，高效液相色譜技術(shù)已成為最為常規(guī)和廣泛使用的分析技術(shù)被應(yīng)用于化妝品檢測(cè)。超高效液相色譜(Ultra-high performance liquid chromatography,UHPLC)屬于液相色譜的最新技術(shù)，色譜柱為亞二微米填料，相較于高效液相色譜，超高效液相色譜往往具有更高靈敏度、更高分離度、更快分析速度及更少溶劑消耗量的優(yōu)勢(shì)。表3列舉了近年來(lái)該技術(shù)在化妝品中植物原料組分檢測(cè)中的典型應(yīng)用實(shí)例。

表3 (超)高效液相色譜技術(shù)在化妝品中植物原料組分檢測(cè)中的應(yīng)用實(shí)例Table 3 Application examples of HPLC and UHPLC for the analysis of plant ingredients in cosmetics

(續(xù)表3)

Plant ingredientExtraction methodDetection techniqueRecovery(%)(RSD,%)Referenceα-紅沒(méi)藥醇試樣加四氫呋喃渦旋2 min,以8 000 r/min離心3 min,上清液過(guò)0.22 μm濾膜HPLC/DAD96.8～103.2<3.0[14]甘草苷、異甘草苷、甘草素、甘草酸、甘草查爾酮A、光甘草定、甘草次酸試樣加幾滴飽和氯化鈉溶液及甲醇(7∶3)溶液至20 mL,超聲30 min,以5 000 r/min離心15 min。同法提取兩次,取上清液,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至1～5 mL,甲醇定容至10 mL,以5 000 r/min離心10 min,上清液過(guò)0.45 μm濾膜HPLC/DAD92.5～103.00.09～1.8[15]雙香豆素、7-羥基-6-甲氧基香豆素、8-羥基補(bǔ)骨脂素、香豆素、6,7-二甲氧基香豆素、二氫香豆素、7-甲氧基香豆素、7-甲基香豆素、補(bǔ)骨脂素、8-甲氧基補(bǔ)骨脂素、5-甲氧基補(bǔ)骨脂素、4-甲基-7-乙氧基香豆素、2',4,8-三甲基補(bǔ)骨脂素、歐前胡素、異歐前胡素、二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯、環(huán)香豆素試樣加甲醇混勻,超聲提取30 min,以8 000 r/min離心15 min,上清液過(guò)0.45 μm濾膜HPLC/DAD86.0～106.00.3～3.6[16]鞣花酸試樣加50%甲醇溶解,超聲30 minHPLC/UV100.2<2.0[17]8-甲氧基補(bǔ)骨脂素、5-甲氧基補(bǔ)骨脂素、三甲沙林、歐前胡內(nèi)酯試樣加甲醇,渦旋,超聲提取20 min,以12 000 r/min離心5 min,上清液經(jīng)0.45 μm濾膜過(guò)濾HPLC/UV89.9～105.20.2～1.1[18]槲皮素、山萘素、異鼠李素試樣加甲醇渦旋,定容至10 mL,超聲提取20 min,加入氯化鈉渦旋分散,取2 mL 提取液,以13 000 r/min離心5 min,上清液過(guò)0.22 μm濾膜HPLC/UV83.5～102.81.6～6.5[19]毛蕊異黃酮葡萄糖苷試樣(水劑、霜?jiǎng)?加甲醇溶解,渦旋,超聲提取20 min,甲醇定容至25 mL,超聲提取10 min,渦旋,以4 000 r/min離心10 min,取上清液25 mL,30 ℃氮吹至近干,加甲醇1 mL,渦旋,經(jīng)0.25 μm針式過(guò)濾器過(guò)濾HPLC/DAD88.9～105.6<3.0[20]

在以上應(yīng)用中，由于化妝品基質(zhì)往往比較復(fù)雜，采用紫外檢測(cè)器可能存在基質(zhì)干擾；示差折光檢測(cè)器則對(duì)壓力、溫度要求高，穩(wěn)定性差；二極管陣列檢測(cè)器靈敏度較低;同時(shí)，這些檢測(cè)器都無(wú)法獲得化合物的具體結(jié)構(gòu)信息。質(zhì)譜(Mass spectrometry,MS)是液相色譜的理想檢測(cè)器，可以提供大量豐富的結(jié)構(gòu)信息，并且具有高靈敏度。液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)結(jié)合了液相色譜的高分離性能和質(zhì)譜的高鑒別能力，可對(duì)復(fù)雜的樣品進(jìn)行實(shí)時(shí)分析。相比較于單級(jí)質(zhì)譜，多級(jí)串聯(lián)質(zhì)譜(Tandem mass spectrometry,MS/MS)具有更高的靈敏度和選擇性，在對(duì)化妝品進(jìn)行分析時(shí)，可在很大程度上消除基質(zhì)干擾，提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性，因而得到了廣泛應(yīng)用。液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)化妝品中植物原料組分的實(shí)例見(jiàn)表4。

表4 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)化妝品中植物原料組分的實(shí)例Table 4 Application examples of HPLC-MS for the analysis of plant ingredients in cosmetics

(續(xù)表4)

Plant ingredientExtraction methodDetection techniqueRecovery(%)RSD(%)Reference秋水仙堿、蘿芙堿、藜蘆定、西伐丁、麥角胺、麥角克堿試樣加0.1%甲酸水-乙腈(1∶3),渦旋30 s,超聲提取15 min,取1.5 mL 以10 000 r/min離心2 min,取1.0 mL通過(guò)Cleanert PCX萃取柱,用甲醇淋洗,5%氨化甲醇洗脫,洗脫液氮吹至近干,0.1%甲酸水-乙腈(9∶1)定容至1 mL,渦旋,過(guò)0.22 μm有機(jī)系濾膜HPLC-MS/MS83.9～101.10.7～6.6[23]人參皂甙Rg1、Rb1、Re、甘草次酸、光甘草定試樣加甲醇渦旋1 min,超聲提取15 min,以10 000 r/min離心5 min后,取2 mL上清液,加純凈水,5%氨水淋洗,甲醇-水、2%甲酸-甲醇洗脫。洗脫液于65 ℃水浴中氮吹,加甲醇復(fù)溶,過(guò)濾UPLC-Q-TOF MS71.9～94.2<15.4[24]甜菜堿試樣用水溶解并定容至100 mLHPLC-Q-TOF MS98.0～102.00.4[25]黃芩苷、白鮮堿試樣加磷酸緩沖溶液(pH 2.5),渦旋混合,加入1.0 g氯化鈉,渦旋1 min,超聲提取15 min,上清液以10 000 r/min離心5 min,過(guò)濾UPLC-Q-TOF MS92.2～103.1<4.0[26]歐前胡素、異歐前胡素試樣加10 mL甲醇,渦旋2 min,45 ℃水浴超聲提取30 min,以4 500 r/min離心10 min,上清液冷凍2 h,取1.0 mL用甲醇-水(80∶20)稀釋至2.0 mL,以12 000 r/min離心5 min,上清液過(guò)0.2 μm濾膜。取100 μL用甲醇-水(80∶20)定容至10 mLHPLC-MS/MS82.2～105.080.0～103.02.7～4.91.8～4.6[27]

3.2 氣相色譜及氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

氣相色譜(Gas chromatography,GC)是一種以氣體為流動(dòng)相的色譜技術(shù)，可對(duì)易于揮發(fā)而不發(fā)生分解或經(jīng)衍生化后轉(zhuǎn)化為易揮發(fā)性化合物的物質(zhì)進(jìn)行分離與分析。目前，氣相色譜使用的檢測(cè)器有很多種，其中氫火焰離子化檢測(cè)器(Flame ionization detector,FID)應(yīng)用最為廣泛，幾乎所有揮發(fā)性有機(jī)物在此檢測(cè)器中均有響應(yīng)。氣相色譜應(yīng)用于化妝品檢測(cè)時(shí)，主要是對(duì)其中揮發(fā)性強(qiáng)、極性弱的低分子量化合物及溶劑殘留進(jìn)行檢測(cè),應(yīng)用范圍較小，定性分析時(shí)需標(biāo)準(zhǔn)樣品對(duì)照，一般可與其他檢測(cè)技術(shù)聯(lián)合使用。氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(Gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)可通過(guò)檢索標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)在短時(shí)間內(nèi)對(duì)被測(cè)物質(zhì)進(jìn)行定性分析，因此特別適合于測(cè)定化合物的分子量、判斷化合物的結(jié)構(gòu)、對(duì)未知組分進(jìn)行定性定量分析。近年來(lái)，已有分析工作者針對(duì)化妝品中的揮發(fā)性植物原料組分建立了氣相色譜檢測(cè)方法，其典型應(yīng)用實(shí)例見(jiàn)表5。

表5 氣相色譜和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)化妝品中植物原料組分的實(shí)例Table 5 Examples of determination of plant ingredients in cosmetics by GC and GC-MS

(續(xù)表5)

Plant ingredientExtraction methodDetection techniqueRecovery(%)RSD(%)Reference香豆素、二氫香豆素、7-甲基香豆素、7-甲氧基香豆素、4-甲基-7-乙氧基香豆素、補(bǔ)骨脂素、8-甲氧基補(bǔ)骨脂素試樣加5 mL無(wú)水乙醇溶解并定容至10 mL,以5 000 r/min離心10 min,上清液經(jīng)0.45 μm濾膜過(guò)濾GC/FID80.9～112.41.9～11.4[32]6-甲基香豆素試樣加5 mL甲醇,渦旋,超聲提取20 min,甲醇稀釋至10 mL,以5 000 r/min離心5 min。上清液經(jīng)3 g無(wú)水硫酸鈉脫水、0.45 μm 濾膜過(guò)濾GC/FID97.3～103.30.5～4.9[33]膽固醇、羊毛甾醇、二氫羊毛甾醇試樣加入2 mL二氯甲烷,渦旋10 s,加入1 mL水,離心5 min后除去水相。在二氯甲烷萃取物中加入1.2 mL的10%甲醇鈉的甲醇溶液,渦旋10 s,置于超聲浴中30 min,再靜置30 min。加入飽和氯化鈉溶 2 mL,離心5 min后除去上層相,用1 mL 2%檸檬酸水溶液重復(fù)洗滌,過(guò)濾GC-MS86.0～113.0<10[34]曲酸、壬二酸、熊果苷試樣加 二甲基甲酰胺5 mL超聲溶解,定容至10 mL容量瓶,0.45 μm濾膜過(guò)濾。再加入二甲基甲酰胺 200 μL、五氯苯溶液50 μL、三氟乙酰胺100 μL GC-MS1.3～4.8<5[35]7-甲氧基香豆素、二氫香豆素、7-甲基香豆素、醋硝香豆素、7-乙氧基-4-甲基香豆素試樣加入2 mL無(wú)水乙醇,渦旋10 min,以4 000 r/min離心5 min,取上清液過(guò)0.2 μm濾膜GC-MS85.4～107.65.6～11.0[36]

3.3 實(shí)時(shí)直接分析質(zhì)譜法

實(shí)時(shí)直接分析(Direct analysis in real time,DART)離子源是一種非表面接觸型解吸/離子化質(zhì)譜分析離子源技術(shù)。其工作原理是在敞開(kāi)的大氣壓下，中性或惰性氣體(如氮?dú)饣蚝?經(jīng)放電產(chǎn)生激發(fā)態(tài)原子，在樣品區(qū)域待測(cè)化合物或其表面的標(biāo)志性化合物被解吸并瞬間離子化，再通過(guò)質(zhì)譜檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)樣品的實(shí)時(shí)直接分析[37]。該技術(shù)可進(jìn)行直接分析，極大地縮短了樣品的分析時(shí)間；且無(wú)需制備流動(dòng)相，減少了試劑的耗費(fèi)，交叉污染很??；同時(shí)，對(duì)樣品極性無(wú)特殊要求；分析時(shí)也不會(huì)產(chǎn)生加合離子或多電荷離子，易于解析。這些優(yōu)點(diǎn)使得實(shí)時(shí)直接分析質(zhì)譜法在司法[38-39]、食品藥品[40-41]、安全環(huán)境檢測(cè)[42]、公共衛(wèi)生安全[43-44]等方面獲得了廣泛應(yīng)用。

目前，已有研究人員將實(shí)時(shí)直接分析質(zhì)譜技術(shù)應(yīng)用于植物源性化妝品的檢測(cè)中，滿足了樣品高通量分析的需求，實(shí)現(xiàn)了原位、直接、快速篩查、定性的目的。如谷婕等[45]首次建立了實(shí)時(shí)直接分析質(zhì)譜快速檢測(cè)進(jìn)口霜狀化妝品中瑞香科植物提取物中禁用物質(zhì)的方法。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，實(shí)際樣品和芫花提取液的正離子全掃描圖譜中均有明顯的芫花素(m/z285.1)和羥基芫花素(m/z301.1)的[M+H]+離子；實(shí)測(cè)樣品與了哥王提取液的正離子全掃描圖譜中均有明顯的西瑞香素(m/z353.1)和芫花素(m/z285.1)的[M+H]+離子；邵澤輝等[25]利用實(shí)時(shí)直接分析質(zhì)譜對(duì)化妝品用原料甜菜堿進(jìn)行了快速定性，采用電噴霧電離源，毛細(xì)管電壓設(shè)為4 000 V，離子輸送管溫度為350 ℃。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，質(zhì)譜圖中m/z118.086 43為甜菜堿的精確分子量，m/z235.165 74為甜菜堿的二聚體，實(shí)現(xiàn)了甜菜堿的精準(zhǔn)定性；Haruo等[46]將超聲霧化與實(shí)時(shí)直接分析質(zhì)譜技術(shù)相結(jié)合，提出了一種同時(shí)檢測(cè)乳霜、乳液中多種成分的新方法。實(shí)驗(yàn)檢測(cè)到普通的實(shí)時(shí)分析質(zhì)譜未能檢測(cè)到的高溫下不穩(wěn)定的甘草酸的脫質(zhì)子分子離子(m/z821)峰，為熱不穩(wěn)定化合物的檢測(cè)提供了一種分析新思路。

3.4 拉曼光譜法

拉曼光譜(Raman spectroscopy,RS)又稱拉曼效應(yīng)，是一種能夠表征分子振動(dòng)能級(jí)的光譜。它由分子極化率的改變產(chǎn)生，可用于氣體、液體、固體等的檢測(cè)，同時(shí)對(duì)于樣品制備要求較少，無(wú)需或只需少量制樣。表面增強(qiáng)拉曼光譜(Surface-enhanced Raman spectroscopy,SERS)技術(shù)是將分析物吸附于金屬材料(如金、銀、銅等)表面，從而增強(qiáng)拉曼信號(hào)的一種光譜檢測(cè)技術(shù)。分析物吸附到金屬材料表面后，拉曼信號(hào)一般會(huì)增強(qiáng)104～1014倍[47]。表面增強(qiáng)拉曼光譜靈敏度高、分析速率快、無(wú)損檢測(cè)、原位取樣，可在分子水平上提供物質(zhì)的組成以及結(jié)構(gòu)的變化等信息，因此在環(huán)境、食品、石油化工等多個(gè)領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用[48-50]。

目前，在化妝品領(lǐng)域，拉曼光譜主要用于重金屬含量測(cè)定[51]、抗氧化穩(wěn)定性評(píng)價(jià)[52]、非法添加物檢測(cè)[53]、未知成分分析[54]、皮膚吸收度監(jiān)測(cè)[55]、化妝品無(wú)損鑒別[56]等。陳蓉等[57]利用表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)建立了快速測(cè)定化妝品中香豆素含量的方法，實(shí)驗(yàn)以銀納米粒子作為基底，結(jié)合正交實(shí)驗(yàn)，優(yōu)化得到了香豆素的最佳檢測(cè)條件：反應(yīng)溫度50 ℃，測(cè)定體系pH 5.0，激光照射時(shí)間16 s，體積混合比例1∶2。將建立的方法用于化妝品中香豆素的檢測(cè)，加標(biāo)回收率為84%～105%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.85%～7.23%。相較于其他香豆素檢測(cè)方法，具有樣品用量少、檢出限低、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。

3.5 毛細(xì)管電泳法

毛細(xì)管電泳(Capillary electrophoresis,CE)以高壓電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力，毛細(xì)管為分離通道，基于待測(cè)樣品中各個(gè)組分的差異性(電荷、質(zhì)量、等電點(diǎn)等特性)導(dǎo)致的在毛細(xì)管中遷移速度的不同實(shí)現(xiàn)快速、高效分離。毛細(xì)管電泳技術(shù)在化妝品植物活性物質(zhì)的分離及分析中應(yīng)用廣泛。

亓慧等[58]在10 mmol/L 磷酸氫二鈉溶液、25 kV電壓和210 nm波長(zhǎng)條件下完成了對(duì)化妝品中煙酸和煙酰胺的簡(jiǎn)單快速分離檢測(cè)，檢出限分別為0.35、0.67 μg/mL，加標(biāo)回收率為97.9%～107.7%；曲曉明[59]利用高效毛細(xì)管電泳法對(duì)含果酸的護(hù)膚品進(jìn)行了檢測(cè)，定量檢出乳酸含量850 μg/g；某些化妝品中的植物活性成分還可用膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳檢測(cè),Lin等[60]采用此方法同時(shí)分析了化妝品中的熊果苷、曲酸、對(duì)苯二酚，回收率均大于99%；鄧光輝等[61]用動(dòng)態(tài)pH聯(lián)接-掃集毛細(xì)管電泳法測(cè)定化妝品中迷迭香酸的含量，檢出限為0.036 μg/mL，回收率為92.5%～103.0%；鄭振山等[62]采用膠束電動(dòng)色譜在線Sweeping技術(shù)測(cè)定化妝品中的水楊酸，該方法提高了分析的靈敏度，彌補(bǔ)了毛細(xì)管電泳在測(cè)定痕量組分方面的不足；陳興國(guó)等[63]首次將流動(dòng)注射-毛細(xì)管電泳方法用于化妝品中維生素C、維生素C葡萄糖苷和曲酸的分離測(cè)定,克服了由于不連續(xù)進(jìn)樣導(dǎo)致的進(jìn)樣頻率與準(zhǔn)確度降低的問(wèn)題，分析速度遠(yuǎn)超傳統(tǒng)電泳和其他方法。

4 結(jié) 論

當(dāng)前，以植物為原料的化妝品順應(yīng)了回歸大自然的發(fā)展潮流和人們的消費(fèi)需求，但植物原料的成分復(fù)雜，一方面，許多成分仍然未知，另一方面，并非所有已知成分都絕對(duì)安全，一些有毒有害成分已被禁止或限制添加于化妝品中。在已報(bào)道的檢測(cè)技術(shù)中，色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)具有靈敏度高，定性能力強(qiáng)等特點(diǎn)；實(shí)時(shí)直接分析作為一種新型電離技術(shù)，具有快速、簡(jiǎn)單、綠色環(huán)保的優(yōu)點(diǎn)，可在短時(shí)間內(nèi)對(duì)被分析物進(jìn)行快速無(wú)損分析。與色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)相比較，實(shí)時(shí)直接分析可直接對(duì)分析物進(jìn)行分離，溶劑消耗低，分析時(shí)間快，在高通量篩查和快速定性鑒別方面具有很好的應(yīng)用前景，但在如何快速、簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確定量等方面仍需進(jìn)一步提高；使用拉曼光譜的檢測(cè)中，一些物質(zhì)需經(jīng)修飾才會(huì)有拉曼效應(yīng)，其前處理過(guò)程往往會(huì)降低便捷性。另外，拉曼光譜在靈敏度、分辨率、穩(wěn)定性等方面仍有待提升；毛細(xì)管電泳技術(shù)具有高效、簡(jiǎn)單、快速、生物兼容性好等特點(diǎn),但因窄內(nèi)徑所致的載樣量低、靈敏度低及樣品制備困難等缺點(diǎn)，限制了其應(yīng)用范圍。相信隨著現(xiàn)代分析儀器技術(shù)的飛速發(fā)展，將會(huì)出現(xiàn)更加快速、靈敏、低成本、高通量的檢測(cè)技術(shù)，為化妝品中植物原料組分提供更加高效便捷的分析方法，切實(shí)保障化妝品中植物原料的質(zhì)量安全，為消費(fèi)者健康安全保駕護(hù)航。