圍孕期葉酸水平、亞甲基四氫葉酸還原酶基因突變與不良出生結(jié)局的關(guān)系

張運(yùn)霖

(樂安縣人民醫(yī)院婦產(chǎn)科,江西 撫州 344300)

不良出生結(jié)局包括胎兒先天畸形、自然流產(chǎn)、死胎、人工流產(chǎn)等，臨床發(fā)生率高，占所有妊娠者的5%～20%[1]。近年來，出生缺陷率持續(xù)上升，影響人口素質(zhì)。葉酸即維生素B9，屬于水溶性維生素，從菠菜葉中提出、純化，經(jīng)還原酶作用產(chǎn)生活性四氫葉酸，參與磷脂脫氧核糖核酸、蛋白質(zhì)的代謝，具有預(yù)防神經(jīng)管畸形和貧血的作用。亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)是參與葉酸轉(zhuǎn)運(yùn)的重要酶，酶基因突變會(huì)引起活性葉酸水平、代謝及利用能力的改變，與不良出生結(jié)局密切相關(guān)[2]。本文旨在對(duì)圍孕期服用葉酸與不良出生結(jié)局的關(guān)系進(jìn)行探討。

1 資料與方法

1.1 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：1)經(jīng)B超、婦科檢查確定無生殖系統(tǒng)解剖畸形；2)有唇腭裂、自然流產(chǎn)、腦癱、神經(jīng)管缺陷、先天性心臟病、腦積水等不良出生結(jié)局病史；3)自愿參加本研究，簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：1)甲狀腺功能異常、糖尿病等內(nèi)分泌系統(tǒng)疾??；2)家族遺傳史；3)全身性疾病、惡性腫瘤；4)Rh、ABO血型無溶血。

1.2 一般資料

選取樂安縣人民醫(yī)院婦產(chǎn)科2015年6月至2017年6月收治的160例有不良出生結(jié)局史的育齡婦女。按隨機(jī)數(shù)字表法將其分為觀察組和對(duì)照組，每組80例。對(duì)照組，年齡20～39歲，平均(28.3±3.1)歲；BMI 19～25 kg·m-2，平均(22.1±1.5)kg·m-2。觀察組，年齡21～39歲，平均(27.9±2.9)歲；BMI 18～26 kg·m-2，平均(21.9±1.4)kg·m-2。2組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.3 葉酸服用方法

對(duì)照組在圍孕期服用普通葉酸(愛樂維，拜耳醫(yī)藥保健有限公司啟東分公司，規(guī)格:每片含葉酸0.8 mg)，1 片·次-1，1 次·d-1。觀察組在圍孕期服用活性葉酸(甲基葉酸片，天津飛鷹玉川藥業(yè)有限公司，規(guī)格：0.4 mg·片-1)，1 片·次-1，2 次·d-1。2組均從備孕前開始服用，直到妊娠12周。

1.4 觀察指標(biāo)

觀察2組不良出生結(jié)局發(fā)生率、再次妊娠率。

采用熒光定量多態(tài)性聚合酶鏈反應(yīng)(PCR法)分析MTHFR基因位點(diǎn)多態(tài)性。設(shè)置條件：95 ℃預(yù)變性3 min，92 ℃變性15 s，60 ℃退化1 min，75 ℃延伸45 s，反復(fù)30個(gè)循環(huán)，75 ℃延伸10 min。采用美國(guó)2700型測(cè)序級(jí)擴(kuò)增儀測(cè)定MTHFR基因C677擴(kuò)增產(chǎn)物相應(yīng)基因片段。采集外周靜脈血進(jìn)行葉酸水平測(cè)定。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 16.00統(tǒng)計(jì)軟件處理所得數(shù)據(jù)。計(jì)量資料的組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料的組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組不良出生結(jié)局發(fā)生率、再次妊娠率比較

觀察組不良出生結(jié)局發(fā)生率低于對(duì)照組，再次妊娠率明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，見表1。

表1 2組不良出生結(jié)局發(fā)生率、再次妊娠率比較

2.2 2組MTHFR C677基因類型的葉酸水平、不良出生結(jié)局比較

MTHFR C677 T/T基因類型的葉酸水平明顯低于C/C、T/C基因類型，不良出生結(jié)局發(fā)生率更高(P<0.05)，見表2。

表2 MTHFR C677基因類型的葉酸水平、不良出生結(jié)局比較

*P<0.05與C/C、T/C基因類型比較。

3 討論

葉酸屬于人體必需氨基酸、重要的甲基供體，對(duì)細(xì)胞繁殖、生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，是胎兒生長(zhǎng)發(fā)育必需的營(yíng)養(yǎng)素[3]。在體內(nèi)為四氫葉酸，參與嘧啶核苷酸、嘌呤核酸的合成及轉(zhuǎn)化，在制造脫氧核糖核酸、核糖核酸方面具有重要作用。同時(shí)參與蛋白質(zhì)代謝，與維生素B12促進(jìn)紅細(xì)胞、微生物增殖、成熟，預(yù)防治療貧血。妊娠前期缺乏葉酸可能會(huì)引起胎兒神經(jīng)管發(fā)育缺陷、唇腭裂、先天性心臟等，所以WHO建議備孕女性每天補(bǔ)充葉酸。我國(guó)飲食文化存在地域差異，孕婦體內(nèi)葉酸水平普遍低于非妊娠正常女性，且隨著孕周的增加，葉酸缺乏越嚴(yán)重[4]。

本文結(jié)果顯示，圍孕期服用活性葉酸的觀察組不良出生結(jié)局發(fā)生率明顯低于服用普通葉酸的對(duì)照組(P<0.05)，且再妊娠率明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，提示活性葉酸對(duì)提高妊娠率、降低不良出生結(jié)局有積極作用。普通葉酸經(jīng)小腸吸收進(jìn)入體內(nèi)，經(jīng)過復(fù)雜的代謝才能形成具有活性的5-甲基四氫葉酸[5]。部分女性的相應(yīng)酶活性低，對(duì)普通葉酸的利用度低，導(dǎo)致對(duì)神經(jīng)血管缺陷預(yù)防作用降低[6]?；钚匀~酸無須經(jīng)過體內(nèi)酶的催化作用，直接補(bǔ)充5-甲 基四氫葉酸，穩(wěn)定性、生物利用度均比普通葉酸高，不易被破壞，機(jī)體吸收率高，對(duì)神經(jīng)血管缺陷的預(yù)防效果較好。MTHFR基因是葉酸代謝過程中的一種關(guān)鍵酶，包括20多種多態(tài)性突變位點(diǎn)，其中C677T多態(tài)性突變最具臨床意義[7]。本文結(jié)果顯示，在C677 T/T、C/C、T/C 3個(gè)基因型中，T/T型較其他2型婦女體內(nèi)葉酸水平低(P<0.05)，且不良出生結(jié)局發(fā)生率較高(P<0.05)。

總之，對(duì)育齡婦女加強(qiáng)葉酸代謝基因多態(tài)性檢測(cè)，圍孕期服用活性葉酸能直接補(bǔ)充5-甲基四氫葉酸，降低不良出生結(jié)局發(fā)生率。