結腸癌組織與存活素、血管內皮生長因子－C的表達的關系

崔新廠

（山東省東營市第二人民醫(yī)院 山東東營 257335）

本研究為了分析結腸癌組織與存活素、血管內皮生長因子－C（VEGF－C）的表達的關系，特對我院收治的40例患者進行分析，現將分析結果報告如下：

1 一般材料與方法

1．1 一般材料：選取我院2013年2月至2014年12月在我院實行外科切除手術結腸癌標本40例，其中男29例，女11例，年齡27～75歲，中位年齡55．1歲，同時取癌旁組織邊緣5c m之外的非癌組織標本17例為對照組。所選患者均未在手術前進行抗腫瘤治療，均無大腸癌史和家族性腺瘤病，依據PTNM標準進行TNM分期。免抗人存活素多克隆抗體工作的濃度是1：50，其VEGF－C多克隆抗體的工作濃度是1：80，所用SP試劑盒采購于福州買新生物技術開發(fā)有限公司。

1．2 方法：運用SP法進行免疫組化染色，切片脫蠟后水化，在室溫下運用高壓修復模式對3%H2O2孵育5分鐘，并滴加VEGF－C一抗和存活素，二者均要放置在冰箱內，且在4℃環(huán)境下過夜；同時滴加鏈霉親和素（以辣根過氧化酶為標記）和生物素化二抗，顯色DAB。陰性對照則選用PBS為一抗替代物。1．3 評判標準及方法：存活素及血管內皮生長因子染色為呈陽性時，表示腫瘤細胞中胞質內有棕黃色顆粒；對每張切片隨機選取5個高倍視野（x400），運用生物顯微圖像Smartscape2002系統進來對存活素和血管內皮生長因子中的蛋白表達進行處理分析，表示方法采用平均灰度值，當血管內皮生長因子和存活素的透光度強且染色強度弱時，表示其平均灰度值大，此時的蛋白表達就少，相反，則蛋白表達多［1］。

胞漿顏色呈中黃色表示細胞為陽性，選出高倍視野中5個陽性細胞并計算出其所占的比例：30%＞陽性細胞≥5%，為＋；5%＞陽性細胞，為－；60%＞陽性細胞≥30%，為＋＋；60%≤陽性細胞，為＋＋＋；為簡化處理數據，將其中＋、＋＋、＋＋＋均并作陽性［2］。

1．4 統計學方法：所有數據均使用SPSS16．0進行統計學處理，結腸癌組織同癌旁組織中存活素和血管內皮生長因子的表示情況及其同結腸癌病理因素的關系使用t檢驗，標準差用表示，存活素及血管內皮生長因子的相關性使用pearson進行分析處理，比較差異呈現顯著性表示具有統計學意義（P＜0．05）。

2 結果

2．1 結腸癌及癌旁組織中存活素的表達狀況

2．1．1 結腸癌中存活素和VEGF－C表達：癌細胞組織中存活素和VEGF－C中，呈陽性表達率是59．8%和65．71%，癌旁組織中VEGF－C和存活素只在極少的上皮細胞中表達，呈陽性率是13．29%和13．29%，癌細胞組織中存活素和VEGF－C陽性表達率明顯高于癌旁組織（P＜0．05）。

2．1．2 結腸癌中，存活素和VEGF－C中蛋白表達的關系：存活素中蛋白陽性表達中VEGF－C陽性表達率為85．72%，存活素中陰性表達中VEGF－C陽性表達率為35．69%，存活素中陽性表達中VEGF－C陽性表達率明顯高于存活素陰性表達組，差異具有統計學意義（P＜0．05）。觀察Spear man等級分析可知二者呈現出正相關系（P＜0．01）。

2．1．3 存活素和VEGF－C中蛋白表達同臨床病理因素的關系：存活素中蛋白表達同VEGF－C表達相一致，同淋巴結轉移、TNM分期和侵潤深度的相關性很強。VEGF－C和存活素蛋白表達率，侵潤深度方面明顯高于（P＜0．05）；淋巴結轉移組陽性率為82．8%和75．9%，淋巴結非無轉移組的陽性率均為18．2%，比較差異具有統計學意義（P＜0．05）；spear man等級分析：存活素和VEGF－C同淋巴結轉移呈現出正相關系（P＜0．01）；TNM分期方面，Ⅲ＋Ⅳ的陽性表達率分別是80%和88%明顯高于Ⅰ＋Ⅱ期的26．7%和33．3%，比較差異具有統計學意義（P＜0．01）。此外，存活素和VEGF－C同患者的年齡、性別和組織分化程度等方面均無明顯關系（P＞0．05）。具體數據如表1。

表1 結腸癌中存活素和VEGF－C表達同臨床病理因素關系狀況

3 討論

存活素屬于近幾年來發(fā)現的凋亡抑制蛋白細胞中的一種，在成熟分化組織中存活素的表達通常很低或者無表達，在許多惡性腫瘤組織中則呈現出高表達，其同惡性腫瘤的發(fā)生及發(fā)展狀況極為密切相關。存活素同腫瘤細胞的生長失控、腫瘤的發(fā)生轉移、發(fā)展和預后的關系也異常密切。VEGF－C在淋巴內皮細胞中的表達能夠刺激生成腫瘤淋巴管，其在腫瘤淋巴管的生成和轉移中發(fā)揮著重要作用。VEGF－C對腫瘤細胞生長起著促進作用，其表達能夠促使腫瘤細胞快速增殖，對腫瘤組織血管發(fā)生卻無任何影響；其促進腫瘤細胞生長與腫瘤細胞中淋巴管內生長相關。研究證實［3］，在淋巴結轉移方面，存活素同VEGF－C的表達明顯高于淋巴結無轉移中的表達；存活素和VEGF－C呈現的高表達同淋巴結轉移為正相關系；同TNM分期和浸潤度的關系較為密切，因為患者的生存率同TNM分期關系密切，加上唯一影響預后的因素是淋巴結轉移。研究中存活素同血管內皮生成因子－C表達呈現出正相關系，P＜0．01，表明淋巴結轉移和擴散中，存活素和VEGF－C起著共同促進的作用。

綜上所述，對存活素和血管內皮生成因子－C表達進行臨床聯合檢測能夠對結腸癌癌變程度、治療及預后等提供理論上的重要依據。

［1］ 蘇永強；鄧述愷．血管內皮生長因子及受體在腫瘤發(fā)病機制中的研究進展 ［J］現代醫(yī)藥衛(wèi)生．2014，（02）：235－237．

［2］ 陳玲．結腸癌組織中Bmi－1表達變化及意義．［J］現代診斷與治療．2014，（160）：3810－3812．

［3］ 陳偉斌．結腸癌血管內皮生長因子－C及血管內皮細胞生長因子受體－3的表達與淋巴結轉移的關系 ［J］．實用臨床醫(yī)學，2014，（04）：32－34＋139．