EGLN3 在腫瘤發(fā)生發(fā)展中作用的研究進(jìn)展

蔡鳳琳 綜述，鄧靖宇 審校

（天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院胃部腫瘤科，國(guó)家腫瘤臨床醫(yī)學(xué)研究中心，天津市“腫瘤防治”重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津市惡性腫瘤臨床醫(yī)學(xué)研究中心，天津300060）

細(xì)胞感知氧濃度、維持氧穩(wěn)態(tài)的能力是自然界高度進(jìn)化的產(chǎn)物。在低氧反應(yīng)中，機(jī)體通過(guò)增加糖酵解、促進(jìn)紅細(xì)胞和血管生成以維持細(xì)胞活性。其中，缺氧誘導(dǎo)因子（hypoxiainduciblefactors，HIFs）在這一適應(yīng)性反應(yīng)過(guò)程中起著關(guān)鍵作用。由于低氧狀態(tài)在腫瘤內(nèi)的普遍存在以及HIFs 在維持氧穩(wěn)態(tài)過(guò)程中發(fā)揮的核心作用，氧感知通路的分子調(diào)控在腫瘤研究領(lǐng)域引起了廣泛關(guān)注。許多研究已經(jīng)闡明了HIFs及相關(guān)通路因子在調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移以及血管生成中的機(jī)制。脯氨酸羥化酶（prolyl hydroxylases，EGLNs）對(duì)HIF 亞基中特定的脯氨酸殘基具有氧依賴性羥化作用，控制參與細(xì)胞生存、代謝和血管生成的基因的轉(zhuǎn)錄[1]。脯氨酸羥化酶3（EGLN3）作為一種獨(dú)特且功能多樣的EGLN 亞型，成為近年來(lái)惡性腫瘤等多種疾病研究的熱點(diǎn)。本文就EGLN3 在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中作用的研究進(jìn)展做一綜述。

1 EGLN3 及重要家族成員的結(jié)構(gòu)與功能

EGLN3，也稱為PHD3/HIFPH3，是一種Fe(Ⅱ)依賴型雙加氧酶，屬于EGLN 家族中HIF-P4Hs（hypoxia inducible factor-prolyl 4-hydroxylases, HIFP4Hs）亞家族[1]。已知在哺乳動(dòng)物中該亞家族包括4個(gè)成員：EGLN1/PHD2/HIFPH2、EGLN2/PHD1/HIFPH1、EGLN3/PHD3/HIFPH3 以及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)跨膜脯氨酸羥化酶（transmembrane prolyl 4-hydroxylase,P4H-TM）[2]。其中P4H-TM 的催化位點(diǎn)位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)，與其他3 種EGLNs 幾乎沒(méi)有序列同源性，主要在促紅細(xì)胞生成的調(diào)節(jié)中發(fā)揮作用[2]。目前普遍認(rèn)知的細(xì)胞氧傳感器包括EGLN1-3，它們通過(guò)催化HIF-1α 蛋白中脯氨酸殘基羥基化，參與氧感知途徑。

1.1 羥基化功能結(jié)構(gòu)域與靶蛋白結(jié)合域 EGLNs的C 端催化結(jié)構(gòu)域具有高度的序列同源性，但它們的N 端結(jié)構(gòu)域卻截然不同，表明N 末端結(jié)構(gòu)可能決定了3 種EGLN3 的功能特異性。人類基因表達(dá)的EGLN3 包含239個(gè)氨基酸殘基，與EGLN1 和EGLN2（分別由426、407個(gè)氨基酸殘基組成）相比，其N 末端長(zhǎng)度較短[3]。研究發(fā)現(xiàn)，EGLN1 和EGLN2 的N 末端含有限制它們與E3 泛素連接酶Siah2 直接相互作用的結(jié)構(gòu)域，而EGLN3 缺乏這種N 端延伸結(jié)構(gòu)，使Siah2 優(yōu)先對(duì)EGLN3 進(jìn)行靶向降解[4]。

常氧狀態(tài)下，EGLNs 的羥化結(jié)構(gòu)域識(shí)別位于HIFα 亞基中氧依賴降解區(qū)（oxygen-dependent degr adation domains，ODDD） 內(nèi) 的特定序列LXXLAP（Leu-X-X-Leu-Ala-Pro），催化兩個(gè)高度保守的脯氨酸殘基Pro402 和Pro564 羥基化來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)HIF-1α 的調(diào)控，使HIF-1α 被E3 泛素連接酶（von Hippel-Lindau,VHL）識(shí)別和泛素化修飾，進(jìn)而經(jīng)蛋白酶體水解，以維持HIF-1α 的蛋白表達(dá)水平[5-6]。而缺氧環(huán)境下的EGLNs 失去其催化活性，導(dǎo)致HIF-1α 積累并異位至核內(nèi)與組成型表達(dá)的HIF-1β 亞基結(jié)合形成異源二聚體，最后通過(guò)結(jié)合缺氧反應(yīng)元件（HRE）激活下游靶基因的轉(zhuǎn)錄[5-6]。

EGLNs 在參與調(diào)節(jié)HIFα 亞基（HIF-1α 和HIF-2α）時(shí)具有傾向性，研究顯示定位于細(xì)胞質(zhì)中的EGLN1 是調(diào)控HIF-1α 最有效的關(guān)鍵酶，EGLN2 局限于細(xì)胞核中，對(duì)HIF-2α 的催化作用比HIF-1α更為活躍，而EGLN3 在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中均勻分布，對(duì)HIF-2α 的羥化作用強(qiáng)于HIF-1α[7]。EGLNs 對(duì)HIFα亞基的C 端氧依賴降解域（C-terminal oxygen-dependent degradation domains，CODD）與N 端氧依賴降解域（N-terminal oxygen-dependent degradation domains，NODD）的脯氨酸殘基也具有不同的親和力，表現(xiàn)在EGLNs 在CODD 上的催化活性更強(qiáng)，特別是EGLN3 對(duì)CODD 具有絕對(duì)選擇優(yōu)勢(shì)，而在NODD上實(shí)際無(wú)羥化作用[8]。

1.2 反應(yīng)底物與輔助因子 EGLNs 以氧和2-酮戊二酸（2-oxoglutarate，2-OG）作為反應(yīng)底物，亞鐵離子和抗壞血酸作為輔助因子，對(duì)氧濃度高度敏感。當(dāng)2-OG 水平異常或細(xì)胞中的氧化還原狀態(tài)改變時(shí)，EGLN3 的酶活性會(huì)受到顯著影響。

（1）分子氧：氧濃度是控制EGLNs 催化羥基化反應(yīng)最主要的因素。O2分子在羥基化反應(yīng)中有兩條消耗途徑：與受體脯氨酸殘基的羥基結(jié)合，以及與2-OG 經(jīng)氧化脫羧反應(yīng)生成琥珀酸[9]。

（2）2-酮戊二酸：2-OG 是EGLNs 的重要底物之一，也是三羧酸循環(huán)的關(guān)鍵中間產(chǎn)物，能夠抑制EGLN3 的表達(dá)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，將異種移植瘤小鼠每日給予酯化2-酮戊二酸治療，可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡并抑制腫瘤生長(zhǎng)，該效應(yīng)依賴于EGLN3 的存在，而與HIF-1α 無(wú)關(guān)[10]。

（3）亞鐵離子Fe（Ⅱ）與抗壞血酸：亞鐵離子是EGLNs 羥化作用的輔助因子，對(duì)活性氧簇等強(qiáng)氧化劑敏感。低氧時(shí)活性氧簇水平增加可提高HIFs 的穩(wěn)定性，因?yàn)镕e（Ⅱ）氧化狀態(tài)限制了EGLNs 的羥化活性[11]。EGLNs 這種強(qiáng)烈的Fe（Ⅱ）依賴性也有力地佐證了抗壞血酸對(duì)脯氨酸羥化作用的積極意義?？箟难釋?duì)氧化的鐵離子具有還原性，因此在Fe（Ⅱ）氧化的情況下能夠恢復(fù)EGLNs 的酶活性。

2 EGLN3 的表達(dá)調(diào)控

2.1 HIFs 依賴性通路的調(diào)控 EGLN3 與其他兩種EGLN 蛋白在HIF 依賴性氧感知通路的調(diào)節(jié)中均起著重要作用，這種調(diào)節(jié)在很大程度上取決于它們?cè)谔囟ㄅ囵B(yǎng)條件下的相對(duì)豐度。這一現(xiàn)象在Appelhoff等[5]設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)中得到了有力的說(shuō)明。標(biāo)準(zhǔn)常氧培養(yǎng)條件下細(xì)胞EGLN1 表達(dá)最豐富，而EGLN3 水平相對(duì)較低。但低氧信號(hào)誘導(dǎo)EGLN3 表達(dá)的效應(yīng)比EGLN1更明顯，且通過(guò)siRNA 抑制EGLN3 對(duì)HIFs 調(diào)節(jié)系統(tǒng)有著顯著的影響。有文獻(xiàn)指出，缺氧引起的EGLN3上調(diào)是通過(guò)HIFs 與含有核心序列[A/G]CGT 的功能性HRE 結(jié)合而導(dǎo)致的轉(zhuǎn)錄反式激活[9]。缺氧環(huán)境使EGLN3 催化活性降低的同時(shí)，蓄積的HIFα、β 亞基異源聚合形成功能性轉(zhuǎn)錄因子，該異二聚體結(jié)合HRE，反向激活EGLN3 并調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、促紅細(xì)胞生成素（EPO）、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（GLUT）-1 和GLUT-3 和糖酵解酶等基因的轉(zhuǎn)錄，參與細(xì)胞增殖、分化、代謝、遷移以及血管形成[6]。

2.2 HIF 非依賴性通路的調(diào)控 EGLN3 主要通過(guò)HIF 依賴性羥基化作用實(shí)現(xiàn)對(duì)下游靶基因的調(diào)控。然而除經(jīng)典的HIF 羥化作用之外，EGLN3 也能夠不依賴羥化酶活性，通過(guò)其他方式參與某些信號(hào)通路中樞蛋白的調(diào)節(jié)，例如競(jìng)爭(zhēng)性抑制核因子κB（nuclear factor-κB，NF-κB）抑制蛋白（IκB）激酶β(IKKβ)的活化影響NF-κB 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)[12]；作為支架蛋白介導(dǎo)早期內(nèi)吞銜接子如Eps15 和epsin1 向表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）募集，調(diào)節(jié)EGFR 的內(nèi)吞內(nèi)化過(guò)程[13]；通過(guò)旁路抑制血小板源性生長(zhǎng)因子（PDGF）-C 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑[14]。HIF 非依賴性調(diào)控通路的發(fā)現(xiàn)進(jìn)一步補(bǔ)充了EGLN3 的信號(hào)調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)，表明EGLN3 具有羥化作用之外的功能特性。

3 EGLN3 在腫瘤中作用的研究進(jìn)展

缺氧影響著腫瘤發(fā)生、發(fā)展的全過(guò)程，EGLN3 的主要靶蛋白——HIFs 在腫瘤低氧環(huán)境下激活多種致癌途徑的基因表達(dá)，包括增強(qiáng)丙酮酸激酶同工型PKM2 表達(dá)，參與糖酵解代謝重編程，使腫瘤細(xì)胞獲得缺氧環(huán)境中的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)；刺激VEGF 和EPO 的分泌，促進(jìn)腫瘤血管生成；誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF）α，促進(jìn)腫瘤上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）獲得侵襲表型[15]。EGLN3 在多種腫瘤中呈低表達(dá)，表現(xiàn)出抑癌特性，通過(guò)HIF 依賴性與非依賴性調(diào)控通路影響腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。但EGLN3尚不能作為一種絕對(duì)的抑癌基因，在某些腫瘤類型中EGLN3 也存在促癌效應(yīng)。目前研究者們分析了EGLN3 在不同癌種中的調(diào)控機(jī)制，以期尋找新型治療方法改善患者預(yù)后。

3.1 肺癌 轉(zhuǎn)移與耐藥是肺癌亟待攻克的兩大難題。Dopeso 等[16]對(duì)EGLN3 在肺癌轉(zhuǎn)移中的作用進(jìn)行了分析討論，揭示了EGLN3 與EMT 之間存在復(fù)雜的聯(lián)系。EMT 是癌癥轉(zhuǎn)移的重要環(huán)節(jié)，可通過(guò)TGFβ/SMAD 信號(hào)和EGFR 信號(hào)通路誘導(dǎo)激活[16]。EGLN3 在TGFβ/SMAD 信號(hào)激活后表達(dá)沉默，使HIFs 蛋白表達(dá)水平增高，HIFs 刺激下游靶基因TGFα 的轉(zhuǎn)錄和分泌，增強(qiáng)SMAD 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，而TGFα作為EGFR 的配體，可通過(guò)激活EGFR 通路進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)對(duì)EMT 的正反饋調(diào)控，促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移；相反，EGLN3 重新表達(dá)則抑制了EMT 和肺腫瘤轉(zhuǎn)移[16]。此外，EGLN3 可能通過(guò)抑制HIF 依賴的PKM2 途徑調(diào)控肺癌轉(zhuǎn)移。Chu 等[17]發(fā)現(xiàn)EGLN3 過(guò)表達(dá)可顯著下調(diào)HIF-1α 和PKM2，肺癌細(xì)胞的活性、遷移和侵襲能力隨著EGLN3 過(guò)表達(dá)而顯著降低（P＜0.05）。PKM2 是HIF1 的直接靶基因，在多項(xiàng)研究中被證實(shí)對(duì)腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移具有促進(jìn)作用。由此可見(jiàn)，EGLN3在肺癌中對(duì)PKM2 的負(fù)向調(diào)控可能是抑制肺癌轉(zhuǎn)移的重要機(jī)制。針對(duì)肺癌治療耐藥性的研究中，EGLN3 表現(xiàn)出對(duì)肺癌靶向藥物厄洛替尼（EGFR 抑制劑）耐藥性的負(fù)向調(diào)控。EGLN3 表達(dá)沉默引起HIF介導(dǎo)的TGFα 的轉(zhuǎn)錄，TGFα 是維持EGFR 過(guò)度激活的關(guān)鍵因子，在應(yīng)用EGFR 抑制劑進(jìn)行治療的情況下仍能維持EGFR 活性，產(chǎn)生藥物抗性。在EGLN3重新表達(dá)后，TGFα 轉(zhuǎn)錄受限，肺癌細(xì)胞對(duì)厄洛替尼的敏感性得以恢復(fù)[16]。目前認(rèn)為EGLN3 對(duì)控制肺癌轉(zhuǎn)移和耐藥性具有積極作用，但這種影響是否還涉及其他通路的調(diào)節(jié)仍需要進(jìn)一步研究。

3.2 胃癌 多項(xiàng)臨床研究結(jié)果表明，與癌旁組織相比，EGLN3 在胃癌組織中呈低表達(dá)，其表達(dá)水平與腫瘤分化程度、腫瘤大小和臨床分期顯著相關(guān)，提示EGLN3 具有抑癌效應(yīng)，可作為判斷胃癌預(yù)后的指標(biāo)[18-20]。EGLN3 的抑癌機(jī)制可能涉及對(duì)某些致癌途徑的負(fù)向調(diào)控。目前發(fā)現(xiàn)在胃癌中起致癌作用的分子通路主要包括Wnt/β-連環(huán)蛋白（β-catenin）、NF-κB、刺猬蛋白（Hedgehog，Hh）和表皮生長(zhǎng)因子受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。在Wnt/β-catenin 通路中，βcatenin 在Wnt 信號(hào)激活時(shí)可免受泛素化蛋白酶體水解作用，獲得穩(wěn)定性，不斷積累進(jìn)入胞核，與T 細(xì)胞因子（TCF）等轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，刺激致癌基因（如c-myc、cyclinD1）的轉(zhuǎn)錄，從而誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生并獲得惡性表型[21]。值得注意的是，這種β-catenin/TCF 信號(hào)活性受EGLN3 的表達(dá)水平影響，EGLN3 能夠促進(jìn)β-catenin 的泛素化降解來(lái)抑制β-catenin/TCF信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，使該通路誘導(dǎo)的致癌性得以控制[19]。但EGLN3 影響β-catenin 泛素化修飾的具體過(guò)程未系統(tǒng)闡釋。此外，EGLN3 也被證實(shí)能夠在胃癌中通過(guò)經(jīng)典的HIF 羥化途徑負(fù)向調(diào)節(jié)HIF-1α 及下游促癌基因的轉(zhuǎn)錄活性，降低胃癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力，抑制腫瘤脈管系統(tǒng)的形成[20]。EGLN3 在胃癌中表現(xiàn)出較明顯的抑癌效應(yīng)，具有作為胃癌新型治療靶點(diǎn)的潛力。

3.3 結(jié)直腸癌 在原發(fā)性結(jié)直腸癌患者腫瘤組織中，EGLN3 表達(dá)降低，它可能是一種抑癌因子，在結(jié)直腸腫瘤細(xì)胞與組織學(xué)中均表現(xiàn)出抑癌特征。2010年，Xue 等[12]報(bào)道了EGLN3 能夠抑制IKKβ 磷酸化與NF-κB 的激活。NF-κB 在結(jié)直腸癌中被廣泛激活，是推動(dòng)腫瘤發(fā)展的重要轉(zhuǎn)錄因子。正常情況下它與NF-κB 抑制劑——IκB 蛋白結(jié)合，以無(wú)活性狀態(tài)局限于細(xì)胞質(zhì)中，但在IκB 激酶α/β 受磷酸化激活時(shí)，IκB 蛋白被誘導(dǎo)降解，NF-κB 暴露核定位序列獲得入核能力，刺激核內(nèi)靶基因（促炎因子、HIF 等）轉(zhuǎn)錄翻譯，導(dǎo)致腫瘤惡性進(jìn)展。活化NF-κB 的關(guān)鍵酶——IKKβ 的磷酸化激活需要伴侶蛋白Hsp90 的協(xié)同作用，而EGLN3 與IKKβ 的結(jié)合能夠競(jìng)爭(zhēng)性抑制Hsp90 與IKKβ 結(jié)合產(chǎn)生的磷酸化效應(yīng)（EGLN3與IKKβ 共定位，結(jié)合位點(diǎn)與Hsp90 相同），從而抑制IKKβ/NF-κB 誘導(dǎo)的腫瘤生長(zhǎng)[12]。Radhakrishnan等[22]提出，EGLN3 也具有抑制結(jié)直腸癌的轉(zhuǎn)移擴(kuò)散的作用，這一效應(yīng)與新發(fā)現(xiàn)的EGLN3 下游分子MCL-1 有關(guān)。MCL-1 屬于BCL-2 抗凋亡家族，定位于線粒體，能夠維持并增強(qiáng)線粒體功能，增加ATP 的產(chǎn)生，這種能量代謝的活躍促進(jìn)了癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。EGLN3 使MCL-1 表達(dá)降低，從而抑制了MCL-1 介導(dǎo)的能量產(chǎn)生和癌細(xì)胞遷移。但EGLN3 通過(guò)何種方式抑制MCL-1 還需進(jìn)一步探討。最近Xu 等[23]將EGLN3 與結(jié)腸癌干細(xì)胞活性聯(lián)系起來(lái)，發(fā)現(xiàn)EGLN3能夠與原癌基因MDM2 結(jié)合，抑制MDM2 介導(dǎo)的p53降解，影響腫瘤干細(xì)胞活性。MDM2 是一種E3 泛素連接酶，包含N 端p53 結(jié)合域、中間酸性域和C 端鋅指結(jié)構(gòu)。中間酸性域是控制p53 泛素化降解的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)之一，EGLN3 通過(guò)與該結(jié)構(gòu)域結(jié)合抑制p53的降解，使p53 穩(wěn)定性增強(qiáng)并負(fù)向調(diào)控干細(xì)胞相關(guān)基因的表達(dá)，從而減弱結(jié)腸癌干細(xì)胞活性。

3.4 胰腺癌 胰腺癌絕大部分起源于外分泌部的導(dǎo)管上皮細(xì)胞，主要為導(dǎo)管腺癌，因其侵襲性強(qiáng)，臨床預(yù)后不良。持續(xù)性缺氧是胰腺腫瘤微環(huán)境的典型特征，根據(jù)先前報(bào)道的EGLN3 在低氧反應(yīng)中表現(xiàn)出強(qiáng)敏感性，研究者們分析了EGLN3 在胰腺癌發(fā)生、發(fā)展中的作用機(jī)制。首先，Su 等[24]報(bào)道了EGLN3 的表達(dá)水平與胰腺癌的分化程度相關(guān)，EGLN3 低表達(dá)的癌組織和細(xì)胞表現(xiàn)出更高的惡性特征（腫瘤生長(zhǎng)、侵襲遷移、血管生成和抗凋亡）。Tanaka 等[25]提出EGLN3 是抑制胰腺腫瘤血管生成的重要調(diào)節(jié)蛋白。促進(jìn)腫瘤血管生成的關(guān)鍵因子VEGF 是HIF-1 的靶基因之一，在缺氧環(huán)境下分泌增高。胰腺癌中HIF-1α和VEGF 的轉(zhuǎn)錄分泌受EGLN3 的反向調(diào)控，表明EGLN3 可能通過(guò)抑制HIF-1/VEGF 途徑阻礙胰腺癌組織血管生成[24-25]。EGLN3 的羥化活性可能還應(yīng)用于除HIF 外的其他通路。Su 等[24]發(fā)現(xiàn)EGLN3在不依賴HIF 途徑的情況下引起了胰腺腫瘤細(xì)胞形態(tài)變化，它可能通過(guò)羥化作用使黏著斑激酶（FAK）磷酸化增加，誘導(dǎo)增強(qiáng)細(xì)胞收縮性的應(yīng)力纖維的形成。應(yīng)力纖維與FAK 的活化是細(xì)胞遷移侵襲的基礎(chǔ)條件，與EGLN3 本身所表現(xiàn)出的抑制侵襲遷移特點(diǎn)并不相符。對(duì)此研究者進(jìn)一步分析認(rèn)為促凋亡機(jī)制可能是胰腺腫瘤生長(zhǎng)、侵襲遷移能力受限的原因之一[24]。EGLN3 通過(guò)激活半胱氨酸蛋白酶（caspase）-3 以神經(jīng)生長(zhǎng)因子NGF 依賴性的方式誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞凋亡。Caspase-3 是參與凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的重要蛋白，可以切割某些特定的底物，催化裂解。近年來(lái)，Tang 等[26]觀察到EGLN3 過(guò)表達(dá)聯(lián)合放射治療能夠?qū)⒁认侔┘?xì)胞阻滯在對(duì)輻射敏感性較強(qiáng)的細(xì)胞周期G2/M 期，加劇細(xì)胞凋亡。這一效應(yīng)的機(jī)制可能是EGLN3 能夠抑制HIF-1 通路的活化，而HIF-1 則抑制胰腺癌細(xì)胞進(jìn)入G2 期，影響放療療效[26]。由此可見(jiàn)，EGLN3 參與胰腺腫瘤多種惡性表型的調(diào)控，有望成為一種新型生物標(biāo)志物，改善胰腺癌的治療效果。

3.5 腎細(xì)胞癌（RCC） RCC 往往存在VHL 等腫瘤抑制基因的突變，這與啟動(dòng)子CpG 島甲基化或特定microRNA 失調(diào)有關(guān)。VHL 的表達(dá)失調(diào)能夠使HIFs免受泛素化降解，引起HIFs 通路中致癌基因表達(dá)增強(qiáng)，EGLN3 作為HIFs 通路的重要參與者，在腎細(xì)胞癌中可能具有獨(dú)特的意義。2011年Tanaka 等[27]檢測(cè)到RCC 患者血清中的抗EGLN3 抗體滴度明顯高于健康者，提出抗EGLN3 抗體可作為腎細(xì)胞癌血清學(xué)標(biāo)志物。RCC 中EGLN3 高表達(dá)有兩種激活模式，在VHL 突變型RCC 細(xì)胞（SMKT-R2 和SMKTR3）中，EGLN3 可能由于HIFs 的異常積累負(fù)反饋激活，而在VHL 野生型細(xì)胞（Caki-1 和ACHN）中則通過(guò)PI3K/蛋白激酶B/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白途徑誘導(dǎo)[28]。與其他惡性腫瘤不同的是，EGLN3高表達(dá)狀態(tài)可能維持腎癌細(xì)胞活性。一方面，EGLN3 通過(guò)調(diào)控細(xì)胞周期進(jìn)程維持癌細(xì)胞生長(zhǎng)，它使p27（一種周期蛋白抑制劑，誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯于G1/S 期）絲氨酸S10 磷酸化受阻，降低p27 的穩(wěn)定性以及周期阻滯作用，促使腫瘤細(xì)胞進(jìn)入G1/S期恢復(fù)增殖狀態(tài)[29]；另一方面，EGLN3 似乎對(duì)HIF-2α 存在除羥化作用以外的影響，在腎透明細(xì)胞癌中，它與HIF-2α 的表達(dá)呈正相關(guān)[30]。盡管目前針對(duì)EGLN3 在腎癌發(fā)展中的作用機(jī)制研究較少，但這種反差結(jié)果的出現(xiàn)需要重新思考先前對(duì)EGLN3作為抑癌基因的認(rèn)識(shí)。EGLN3 還具有多少未知的效應(yīng)需要我們進(jìn)一步觀察研究。

4 結(jié)語(yǔ)

EGLN3 是惡性腫瘤發(fā)展過(guò)程中許多重要信號(hào)通路的中間環(huán)節(jié)，對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲、遷移、凋亡、血管形成以及干細(xì)胞活性均有著不同程度的影響。目前發(fā)現(xiàn)，EGLN3 在多種腫瘤類型（如肺癌、胃癌和結(jié)直腸癌）中表現(xiàn)出強(qiáng)烈的抑癌效應(yīng)，它是一種新型生物標(biāo)志物，有助于腫瘤患者的預(yù)后評(píng)估。根據(jù)現(xiàn)有研究，EGLN3 的靶向調(diào)控有望開(kāi)辟腫瘤的新型治療方法，改善患者的治療效果，未來(lái)對(duì)EGLN3 作用機(jī)制還需更深入的挖掘。