黃瓜霜霉病菌對氟噻唑吡乙酮的敏感性測定及其田間防效

高葦 楊利娟 張春祥 王勇

摘要 明確天津地區(qū)黃瓜霜霉病菌對氟噻唑吡乙酮的敏感性及田間防效，為該病害的防治提供理論依據(jù)。采用離體葉片法測定黃瓜霜霉病菌對氟噻唑吡乙酮的敏感性，并進行田間防效試驗。結(jié)果表明，24株黃瓜霜霉病菌對氟噻唑吡乙酮存在敏感性差異，EC50值為0.002 6～0.071 3 μg/mL。田間試驗表明，10%氟噻唑吡乙酮可分散油懸浮劑對黃瓜霜霉病防效均在85%以上。黃瓜霜霉病菌對氟噻唑吡乙酮具有較高敏感性，田間防效高，推薦使用有效劑量19.50～30.00 g/hm2。

關(guān)鍵詞 黃瓜霜霉病;氟噻唑吡乙酮;敏感性;田間防效

中圖分類號 S482.2文獻標識碼 A文章編號 0517-6611（2020）24-0142-02

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2020.24.039

開放科學(xué)（資源服務(wù)）標識碼（OSID）：

Susceptibility and Field Efficacy of Oxathiapiprolin against the Pathogen of Cucumber Downy Mildew

GAO Wei， YANG Lijuan， ZHANG Chunxiangetal

（Institute of Plant Protection，Tianjin Academy of Agricultural Sciences，Tianjin300381）

Abstract To clarify the susceptibility and control effect of oxathiapiprolin against cucumber downy mildew in a view of the application of this fungicide in the field. The susceptibility test was assayed by vitro leaf disc method and field efficacy trials were carried out. The results showed that different susceptibility was found among 24 downy mildew pathogen， the EC50 values of oxathiapiprolin ranged from 0.002 6 to 0.071 3 μg/mL. In field trials， the control effect of oxathiapiprolin 10% OD to cucumber downy mildew was higher than 85%. Cucumber downy mildew pathogen was sensitive to oxathiapiprolin， and 19.50-30.00 g/hm2 of oxathiapiprolin 10% OD was recommended in field.

Key words Cucumber downy mildew;Oxathiapiprolin;Susceptibility;Field efficacy

黃瓜霜霉病的病原為專性寄生菌古巴假霜霉（Pseudoperonospora cubensis），主要侵染黃瓜的葉片，是黃瓜生產(chǎn)中最為嚴重的病害[1]。在溫濕度適宜的條件下，該病害極易暴發(fā)、傳播速度快、流行性強，造成黃瓜大幅減產(chǎn)甚至絕收[2]。由于抗病品種的缺乏，對于該病害的防治主要以化學(xué)防治為主。目前生產(chǎn)上常用的殺菌劑主要有酰胺類殺菌劑（如甲霜靈）、甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑（如嘧菌酯）、丙烯酰嗎啉類殺菌劑（氟嗎啉）和雙炔酰菌胺（如烯酰嗎啉和雙炔酰菌胺）等[3-4]。但黃瓜霜霉病病原是一種高度抗性風(fēng)險病原菌，極易產(chǎn)生抗藥性，許多內(nèi)吸性殺菌劑如甲霜靈等長期使用而導(dǎo)致防效顯著降低[5-7]。因此，為了有效地控制黃瓜霜霉病，新型殺菌劑的安全應(yīng)用推廣具有尤為重要的意義。

氟噻唑吡乙酮（Oxathiapiprolin）是由杜邦公司開發(fā)的新型哌啶類殺菌劑，是一種氧化固醇結(jié)合蛋白（OSBP）抑制劑，對卵菌綱病害如晚疫病、霜霉病等有特效[8-9]。2016年2月美國杜邦公司的95%氟噻唑吡乙酮原藥、10%氟噻唑吡乙酮可分散油懸浮劑（商品名增威贏綠）在中國獲得正式登記，對黃瓜霜霉病、馬鈴薯晚疫病等病害具有顯著的防效[10-12]。由于該藥劑對病原菌的作用位點單一，開展其田間抗性監(jiān)測為病害的持續(xù)有效控制及抗藥性治理策略的制訂提供重要的依據(jù)[13]。筆者于2016—2018年從天津黃瓜主產(chǎn)區(qū)采集黃瓜霜霉病病原菌，檢測其對氟噻唑吡乙酮的敏感性，并進行田間試驗，綜合評價其防病效果，以期為黃瓜生產(chǎn)中科學(xué)用藥提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

供試菌株：2016—2018年從天津市主要黃瓜種植區(qū)縣采集新鮮的黃瓜霜霉病病葉，將其編號記錄，帶回實驗室于4 ℃冰箱保存待用。使用前，將采集的黃瓜霜霉病葉片背面噴水避光于20 ℃的培養(yǎng)箱中保濕培養(yǎng)24 h。24 h后將其葉片背面的孢子囊刷下，用無菌水制成濃度為1×105個/mL的孢子囊懸浮液，以備接種待用。

供試作物：黃瓜品種津春5號。

供試藥劑：97.6%氟噻唑吡乙酮原藥和10%氟噻唑吡乙酮可分散油懸浮劑，美國杜邦公司。將原藥用二甲基亞砜（DMSO）溶解，加入無菌水稀釋成1 000 μg/mL母液，母液中DMSO的含量不超過0.1%。50%烯酰嗎啉可濕性粉劑，山東省菏澤北聯(lián)農(nóng)藥制造有限公司。

1.2 方法

1.2.1 黃瓜霜霉病菌對氟噻唑吡乙酮的敏感性測定。

采用離體葉盤法測定2016—2018年在天津區(qū)縣采集24株黃瓜霜霉病菌對氟噻唑吡乙酮的敏感性。將配制好的氟噻唑吡乙酮母液加入無菌水10倍梯度稀釋為102、10、1、0.1和0.01 μg/mL的待測藥液。在直徑9 cm的培養(yǎng)皿中倒入15 mL無菌水，上面放置20片直徑6 mm的葉盤，使其葉背朝上漂浮于無菌水上，采用噴霧塔將每個平皿定量噴施5 mL待測藥液，晾干后懸滴接種20 μL濃度為1×105個/mL的霜霉病孢子囊懸浮液，置于20 ℃培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)7～14 d，待對照充分發(fā)病后調(diào)查各處理葉盤發(fā)病情況。根據(jù)葉盤上病斑的發(fā)病面積進行病級劃分[14]。計算病情指數(shù)和防效，并通過DPS 7.05數(shù)據(jù)分析軟件進行藥劑濃度與藥劑相對防效之間的線性回歸分析，求出藥劑的毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)以及有效抑制中濃度（EC50）。

1.2.2 10%氟噻唑吡乙酮可分散油懸浮劑對黃瓜霜霉病的田間防效測定。

試驗在天津市黃花店包營村設(shè)施黃瓜棚中進行。共設(shè)5個處理：處理①～③為10%氟噻唑吡乙酮可分散油懸浮劑按藥劑推薦使用劑量19.50、24.75、30.00 g/hm2，藥劑對照為50%烯酰嗎啉可濕性粉劑300.00 g/hm2，并設(shè)清水對照。每處理重復(fù)3次，不同處理隨機排列，每小區(qū)面積20 m2。黃瓜葉片上有零星霜霉病發(fā)生時采用背負式手動噴霧器進行莖葉噴施，施藥量1 800 L/hm2，共施藥3次，每次間隔期7 d。第3次施藥后7和14 d，按各葉片上病斑面積占整個葉片面積的百分率調(diào)查各處理葉片發(fā)病病級[15]，并計算病情指數(shù)及防效。

2 結(jié)果與分析

2.1 黃瓜霜霉病菌對10%氟噻唑吡乙酮可分散油懸浮劑的敏感性

采集天津靜海、西青、寶坻和武清4個黃瓜種植區(qū)縣的24株黃瓜霜霉病病原菌，并通過離體葉盤法測定菌株對氟噻唑吡乙酮的敏感性。結(jié)果表明，不同來源的黃瓜霜霉菌株對氟噻唑吡乙酮均具有較強的敏感性，且存在一定的差異。分離到的24株菌株對10%氟噻唑吡乙酮的EC50在0.002 6～0.071 3 μg/mL，平均值為（0.018 5±0.017 5）μg/mL。其中，EC50在0.005～0.010 μg/ml菌株的分離頻率最高，達29%，EC50值低于平均值0.018 5 μg/mL的菌株達70.83%（圖1）。

2.2 10%氟噻唑吡乙酮可分散油懸浮劑對黃瓜霜霉病的田間防效

田間藥效試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，10%氟噻唑吡乙酮可分散油懸浮劑對黃瓜霜霉病具有較好的田間防效。在黃瓜霜霉病發(fā)病初期連續(xù)噴施10%氟噻唑吡乙酮可分散油懸浮劑3次（每次間隔7 d），3次藥后7 d黃瓜霜霉病的防效得到顯著

控制，清水對照的病情指數(shù)上升到31.64，而10%氟噻唑吡乙

酮可分散油懸浮劑處理小區(qū)病情指數(shù)在3.39～4.81，防效在

84.81%～89.29%，且防效高于對照藥劑50%烯酰嗎啉可濕性粉劑處理，方差分析結(jié)果表明，10%氟噻唑吡乙酮可分散油懸浮劑24.75和30.00 g/hm2處理小區(qū)的防效顯著高于50%烯酰嗎啉可濕性粉劑300.00 g/hm2處理小區(qū)，10%氟噻唑吡乙酮可分散油懸浮劑19.50 g/hm2處理小區(qū)防效與50%烯酰嗎啉可濕性粉劑300.00 g/hm2無顯著差異。10%氟噻唑吡乙酮可分散油懸浮劑3個劑量處理小區(qū)間，高劑量處理小區(qū)防效顯著高于低劑量處理小區(qū)，且均與中劑量處理小區(qū)間無顯著差異。3次藥后14 d，清水對照的病情指數(shù)上升到47.89，而10%氟噻唑吡乙酮可分散油懸浮劑處理小區(qū)病情指數(shù)在5.19～7.61，防效在85.93%～9039%，顯著高于對照藥劑50%烯酰嗎啉可濕性粉劑300.00 g/hm2處理小區(qū)的防效，且10%氟噻唑吡乙酮可分散油懸浮劑3個劑量處理小區(qū)間防效無顯著差異（表1）。

3 結(jié)論與討論

該研究采用離體葉盤法測定天津地區(qū)黃瓜霜霉病菌對氟噻唑吡乙酮的敏感性，結(jié)果表明，氟噻唑吡乙酮對該地區(qū)黃瓜霜霉菌具有較強的敏感性，通過田間藥效試驗發(fā)現(xiàn)10%氟噻唑吡乙酮可分散油懸浮劑在使用劑量19.50～30.00 g/hm2下，對黃瓜霜霉病的防效顯著，且持效期長，優(yōu)于對照藥劑50%烯酰嗎啉可濕性粉劑，可以作為黃瓜霜霉病防治的首選藥劑[12，16]。

黃瓜霜霉病一直是黃瓜生產(chǎn)中危害嚴重的葉部病害，隨著其抗病品種的不斷選育應(yīng)用，其病原不斷出現(xiàn)新的致病型與小種，導(dǎo)致該病害的侵染危害始終沒有得到有效的控制[17-18]。因此，黃瓜霜霉病的控制還需要依賴于化學(xué)藥劑防治。FRAC認為黃瓜霜霉病菌是抗藥性風(fēng)險較高的10種病原菌之一[19]，在黃瓜霜霉病防治中廣泛應(yīng)用，如苯基酸胺類（PAs）、羧酸酰胺類（CAAs）和甲氧基丙烯酸酯類（QoIs）等不斷出現(xiàn)抗性菌株，從而導(dǎo)致了田間該病害難于及時有效的控制[20]。因此，新作用位點和化學(xué)結(jié)構(gòu)的殺菌劑對黃瓜霜霉

病的田間防治具有重要意義。

氟噻唑吡乙酮是杜邦公司研發(fā)的首個哌啶基噻唑異噁唑啉類殺菌劑，其作用位點新穎，對霜霉病、晚疫病等卵菌綱病害病原多個生長發(fā)育階段均有抑制作用，在瓜類霜霉病、葡萄霜霉病、番茄晚疫病和辣椒疫病的田間防治中具有顯著的防效[8]。但由于氟噻唑吡乙酮是作用位點單一類型殺菌劑，且黃瓜霜霉病病原極易產(chǎn)生抗藥性，因此，田間應(yīng)用時應(yīng)及時掌握其對黃瓜霜霉病菌的抗性發(fā)展水平，與其他類型殺菌劑交替使用，延緩抗藥性的產(chǎn)生。

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