四項(xiàng)血清腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)和ROMA指數(shù)在卵巢癌中的應(yīng)用價(jià)值

趙 冬，賈良勇，李春艷，王興寧，李 慧*

(1.延安大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西延安716000；2.云南省昭通市鎮(zhèn)雄縣中醫(yī)院檢驗(yàn)科，云南昭通657200)

卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率僅次于子宮頸癌和子宮體癌而位居第三，死亡率卻占據(jù)首位[1]。卵巢深藏于盆腔，發(fā)病隱匿，惡變?cè)缙跓o特異性癥狀，目前缺乏有效的早期篩查手段，約70%的患者確診時(shí)已為晚期，且術(shù)后復(fù)發(fā)率極高、預(yù)后極差，5年生存率僅為20%～30%[2]。而早期發(fā)現(xiàn)的卵巢癌患者經(jīng)過手術(shù)和化療后，生存率可達(dá)90%[3]。目前卵巢癌確診的“金標(biāo)準(zhǔn)”是病理學(xué)檢查，但其為有創(chuàng)檢查，多數(shù)患者難以接受，不利于早期篩查，因此，尋找能夠早期診斷卵巢癌的血清標(biāo)志物以及檢測(cè)手段具有重大意義。隨著人們對(duì)腫瘤標(biāo)志物研究的不斷深入，應(yīng)用腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測(cè)成為研究癌癥的重點(diǎn)。近幾年來，為了進(jìn)一步提升早期診斷卵巢癌的準(zhǔn)確性，有專家學(xué)者將研究結(jié)果與統(tǒng)計(jì)學(xué)相結(jié)合提出了ROMA指數(shù)，即利用CA125和HE4值建立的卵巢風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)模型，可用于鑒定女性盆腔包塊的良惡性[4,5]。在本次研究中，選擇臨床上常用的腫瘤標(biāo)志物人附睪蛋白4、癌胚抗原、糖類抗原125和糖類抗原72-4并結(jié)合ROMA指數(shù)進(jìn)行分析，旨在研究上述四項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測(cè)以及ROMA指數(shù)在卵巢癌中的應(yīng)用。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

選取延安大學(xué)附屬醫(yī)院2018年4月至2019年3月收治的因卵巢腫瘤住院的患者116例，根據(jù)術(shù)后病理確診分為惡性組和良性組。其中惡性組55例，年齡31～72歲，平均(52.13±7.73)歲；良性組61例，年齡28～69歲，平均(50.07±8.90)歲；另選同期我院體檢中心體檢合格的健康女性60例，為對(duì)照組，年齡32～70歲，平均(49.2±8.83)歲，三組年齡差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。所有入選病例均沒有心、肝、腎等重要器官上的病變，并且排除同時(shí)患有其他部位良惡性腫瘤、家族腫瘤史的患者。

1.2 標(biāo)本采集

所有研究對(duì)象(良性組、惡性組術(shù)前)均在清晨空腹?fàn)顟B(tài)下采集靜脈血3～5 mL于分離膠促凝管中，室溫下靜置30 min后，以轉(zhuǎn)速3000 r/min離心10 min，分離血清，并立即檢測(cè)。

1.3 儀器與試劑

采用德國(guó)羅氏CobasE602型全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀，所有試劑、質(zhì)控品、校準(zhǔn)品均為原廠配套提供，并嚴(yán)格按照試劑說明書和儀器操作程序進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.4 方法

用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)三組血清中的HE4、CEA、CA125、CA72-4水平。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室各標(biāo)志物的參考區(qū)間(HE4≤140 pmol/L、CEA<4.7 ng/mL、CA125<35 U/mL、CA72-4<6.9 U/mL)判斷，若檢測(cè)值高于正常參考值上限，則為陽性，反之為陰性。四項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物任何一項(xiàng)檢測(cè)為陽性則判定聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果為陽性。靈敏度=真陽性人數(shù)/(真陽性人數(shù)+假陰性人數(shù)),特異度=真陰性人數(shù)/(真陰性人數(shù)+假陽性人數(shù))。在HE4和CA125值的基礎(chǔ)上計(jì)算出絕經(jīng)前后相對(duì)應(yīng)的ROMA指數(shù)，ROMA指數(shù)計(jì)算公式：絕經(jīng)之前：PI=-12.0+2.38*LN[HE4]+0.0626*LN[CA125]；絕經(jīng)之后：PI=-8.09+1.04*LN[HE4]+0.732*LN[CA125]；ROMA(%)=[Exp(PI)*100]/[1+Exp(PI)]。以良性組為參照，繪制ROC曲線用以評(píng)價(jià)HE4、CEA、CA125、CA72-4和ROMA指數(shù)對(duì)卵巢癌的診斷價(jià)值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 三組四項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物水平及ROMA指數(shù)的比較

三組患者HE4、CEA、CA125、CA72-4水平和ROMA指數(shù)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)見表1。

2.2 三組四項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物單項(xiàng)和聯(lián)合檢測(cè)以及ROMA指數(shù)陽性率比較

三組各血清腫瘤標(biāo)志物陽性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，三組各組內(nèi)四項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的陽性率高于相應(yīng)組內(nèi)的單項(xiàng)檢測(cè)，ROMA指數(shù)的陽性率高于相應(yīng)組內(nèi)聯(lián)合檢測(cè)的陽性率。惡性組中單項(xiàng)CA125的陽性率最高，其次是HE4的陽性率，CEA的陽性率最低(見表2)。

表1 三組HE4、CEA、CA125、CA72-4水平及ROMA指數(shù)的比較

注：a、b：與惡性組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；c：與良性組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P分別為：0.520、0.756、0.984、0.940、0.896)。

表2 三組HE4、CEA、CA125、CA72-4單項(xiàng)和聯(lián)合檢測(cè)及ROMA指數(shù)陽性率比較[%(n)]

注：采用卡方分割，按α′=0.017的檢驗(yàn)水準(zhǔn)進(jìn)行比較：

d：與惡性組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.017，χ2分別為：39.370、9.367、13.694、10.948、25.715、17.093)；

e：與惡性組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.017，χ2分別為：42.304、14.616、16.402、10.672、30.482、24.890)；

f：與良性組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.017，χ2分別為：0.992、2.000、0.169、0.001、0.295、1.002)。

2.3 四項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物和ROMA指數(shù)單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)卵巢癌的診斷性(價(jià)值)評(píng)價(jià)

對(duì)單項(xiàng)而言，HE4診斷卵巢癌的特異度最高，其靈敏度亦較高；CA125的靈敏度最高，而特異度比其他三項(xiàng)的單獨(dú)檢測(cè)的特異度低；四項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度均高于其他三項(xiàng)標(biāo)志物中的任意一項(xiàng)，特異度則較低，ROMA指數(shù)的靈敏度較四項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)高，而ROMA指數(shù)與四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)，靈敏度最高，而特異度卻減低(見表3)。

表3 四項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物和ROMA指數(shù)單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)卵巢癌的診斷性(價(jià)值)評(píng)價(jià)

續(xù)表3

指 標(biāo)病理診斷陽性(n)陰性(n)合計(jì)(n)靈敏度(%)特異度(%)正確診斷指數(shù)(%)CA72-4陽性18523陰性37569332.791.724.4四項(xiàng)聯(lián)合陽性431962陰性12425478.271.149.3ROMA陽性493382陰性6283489.150.039.1ROMA+四項(xiàng)陽性514091陰性4212592.743.836.5

2.4 四項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物和ROMA指數(shù)診斷卵巢癌的ROC曲線分析

HE4、CEA、CA125、CA72-4單項(xiàng)和聯(lián)合檢測(cè)及ROMA指數(shù)診斷卵巢癌的ROC曲線下面積分別為0.820、0.706、0.774、0.736、0.839、0.880(見表4，圖1)。

表4 四項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物單項(xiàng)和聯(lián)合檢測(cè)及ROMA指數(shù)曲線下面積

圖1四項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物和ROMA指數(shù)診斷卵巢癌的ROC曲線

3 討論

HE4是一種新型的卵巢癌標(biāo)志物，本研究中，惡性組的HE4水平高于良性組和對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且陽性率也高于良性和對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.017)。有研究表明卵巢癌分泌的HE4是一種N-糖基化的分泌型蛋白，分子量很小，約為25 KDa，這可能是HE4在卵巢癌早期更易分泌入血的原因[6]。在Galgano等[7]發(fā)表的文獻(xiàn)中：就單一腫瘤標(biāo)志物來說，HE4對(duì)卵巢癌診斷的特異度很高，為95%。而在本次研究中，HE4的特異度高達(dá)99.2%，其在ROC曲線下面積為0.820，對(duì)卵巢癌的診斷價(jià)值較高，但其靈敏度為52.7%，可與其他血清腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)進(jìn)一步提高對(duì)卵巢癌診斷的靈敏度。且HE4水平可作為上皮性卵巢癌不良預(yù)后的危險(xiǎn)因素[8,9]。

CEA是一種廣譜腫瘤標(biāo)志物，對(duì)卵巢癌診斷的陽性率不高，但其有較高特異度[10]，有其特殊價(jià)值。本研究結(jié)果顯示，惡性組CEA水平高于良性組和對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，這是因?yàn)镃EA在腫瘤細(xì)胞癌變過程中，由于癌基因表達(dá)生成的抗原可在腫瘤癌變患者的血液中檢出，正常組織或良性疾病中不產(chǎn)生或產(chǎn)量極微。CEA對(duì)卵巢癌的陽性檢出率僅為21.8%，這對(duì)于卵巢癌的診斷價(jià)值不大，但其特異度相對(duì)較高為98.3%，可用作輔助判斷，或聯(lián)合其他腫瘤標(biāo)志物彌補(bǔ)其對(duì)卵巢癌診斷陽性率低的缺陷。

CA125是一種高分子糖蛋白，臨床常用的卵巢癌腫瘤標(biāo)志物，分泌于胚胎發(fā)育期的體腔上皮[11]。普遍分布于子宮內(nèi)膜、生殖道等間皮組織細(xì)胞表面，當(dāng)這些部位發(fā)生惡性病變或炎癥時(shí)，血清中CA125的含量會(huì)升高[12,13]。本研究中,惡性組CA125的水平高于良性組和對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，在惡性組內(nèi)，其陽性率為54.5%，高于HE4、CEA和CA72-4的陽性率。有研究表明，CA125是一種非特異腫瘤標(biāo)志物，在胰腺癌、乳腺癌等不同的惡性腫瘤組織中也呈高表達(dá)[14]，此次研究中，CA125的特異度較其他三項(xiàng)標(biāo)志物任意一項(xiàng)特異度低，為80.02%。

CA72-4是一種腫瘤相關(guān)糖蛋白復(fù)合物，是粘液性卵巢癌較好的血清腫瘤標(biāo)志物，正常組織一般很少表達(dá)[15]。本次研究中，惡性組CA72-4水平高于良性組和對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，對(duì)卵巢癌的陽性檢出率是32.7%，特異度相對(duì)較高為91.7%，有助于卵巢癌的診斷。

ROMA指數(shù)是一種卵巢惡性腫瘤風(fēng)險(xiǎn)判定規(guī)則。此次研究中，惡性組ROMA指數(shù)的水平及陽性率，均相應(yīng)高于良性組和對(duì)照組，且其陽性率均高于組內(nèi)其他單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)。由表3可知，ROMA指數(shù)對(duì)卵巢癌診斷的靈敏度高于四項(xiàng)標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)，由此可見，ROMA指數(shù)對(duì)盆腔腫塊良惡性的篩查具有十分重要的意義。以良性組為參照繪制ROC曲線圖，由表4、圖1可知，ROC曲線下面積最大的是ROMA指數(shù)，為0.880，對(duì)卵巢癌的診斷效率最高。所以ROMA指數(shù)可以作為一種重要的檢測(cè)手段，幫助臨床醫(yī)生對(duì)卵巢癌進(jìn)行更準(zhǔn)確的診斷。

本研究結(jié)果顯示：惡性組的HE4、CEA、CA125、CA72-4的水平和ROMA指數(shù)較良性組和對(duì)照組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且良性組和對(duì)照組組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，說明四項(xiàng)參數(shù)及ROMA指數(shù)僅在惡性病變時(shí)顯著增高。腫瘤標(biāo)志物單項(xiàng)檢測(cè)陽性率均不夠理想，聯(lián)合檢測(cè)提高了卵巢癌診斷的陽性率，而ROMA指數(shù)對(duì)卵巢癌診斷的陽性率高于四項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)，這對(duì)盆腔腫塊良惡性的區(qū)分具有重大臨床應(yīng)用價(jià)值。四項(xiàng)標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的AUC面積高于四項(xiàng)中的任意一項(xiàng)，而ROMA指數(shù)的AUC更高，提高了對(duì)卵巢癌診斷的準(zhǔn)確性。單項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)特異度較高靈敏度卻不足，將上述四項(xiàng)標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)，靈敏度從單項(xiàng)最低21.8%提高到了78.2%，將ROMA指數(shù)聯(lián)合四項(xiàng)標(biāo)志物檢測(cè)，靈敏度得到進(jìn)一步提高，為92.7%，大大降低了漏診率。

綜上所述，HE4、CEA、CA125和CA72-4四項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物對(duì)于卵巢癌的診斷各有優(yōu)勢(shì)，但也存在不足，若將上述四項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物及ROMA指數(shù)聯(lián)合檢測(cè)，則既提高了陽性率、靈敏度又保證了特異度，對(duì)卵巢癌具有較大的預(yù)測(cè)價(jià)值，利于早期診斷和早期治療，同時(shí)可使患者避免不必要的有創(chuàng)檢查。