血清PTEN 水平與子癇前期患者氧化應(yīng)激及妊娠結(jié)局的關(guān)系

萬(wàn)淑梅 彭 萍 高 妍

南部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東廣州 510010

子癇前期（PE）是妊娠期常見(jiàn)病，指妊娠20 周以后，出現(xiàn)血壓升高、蛋白尿，并伴有惡心、頭痛等癥狀，還可損傷心、肝腎等臟器，更為嚴(yán)重將出現(xiàn)宮內(nèi)缺氧、胎死宮內(nèi)等發(fā)生，威脅胎兒及患者健康［1］?，F(xiàn)階段，PE發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜且未明確，可能與血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷、免疫損傷等因素有關(guān)，其中血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷是PE 發(fā)病的中心環(huán)節(jié)，與機(jī)體氧化應(yīng)激聯(lián)系緊密［2］。第10 號(hào)染色體缺失性磷酸酶-張力蛋白同源物基因（PTEN）是一種抑癌基因，有研究表明［3］，其水平變化與多種惡性腫瘤均有關(guān)系，并可負(fù)調(diào)控PI3K/AKT 途徑來(lái)遷移、增殖細(xì)胞。近年來(lái)有研究發(fā)現(xiàn)，PTEN 在其外周血、胎盤(pán)組織中表達(dá)異常，并參與PE 的發(fā)生發(fā)展［4］。機(jī)體氧化應(yīng)激參與PE 發(fā)病，PTEN 緊密聯(lián)系機(jī)體氧化應(yīng)激，而目前對(duì)PTEN 在PE 中變化研究較少，因此，本研究通過(guò)探討血清PTEN 水平與PE 患者氧化應(yīng)激及妊娠結(jié)局的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017 年1 月～2019 年2 月南部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院（以下簡(jiǎn)稱(chēng)“我院）收治的PE 患者136 例，本研究已獲我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)進(jìn)行。納入標(biāo)準(zhǔn)：①診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《婦產(chǎn)科學(xué)》［5］中的有關(guān)規(guī)定；②自然受孕、單胎妊娠；③知情且簽署同意書(shū)；④所有研究對(duì)象均在我院生產(chǎn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有妊娠期其他疾病者；②伴有惡性腫瘤者；③伴有免疫系統(tǒng)系統(tǒng)障礙者；④伴有認(rèn)知功能障礙者；⑤伴有肝、腎、心等重要臟器損傷者；⑥有嗜酒、嗜煙等不良習(xí)慣者。將納入的PE 患者按照病情嚴(yán)重程度［6］的不同分為輕度組（n=67）和重度組（n=69），具體分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)為輕度PE：妊娠20 周后，24 h 尿蛋白定量＞0.3g，且舒張壓＞90 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），收縮壓＞140 mmHg；重度PE：24 h 尿蛋白定量＞5.0 g，且舒張壓＞110 mmHg，收縮壓＞160 mmHg，并伴有上腹部疼痛等癥狀；血肌酐＞106 μmol/L；血小板＜100×109/L；24 h 尿量＜400 mL。另選取來(lái)我院進(jìn)行體檢的同期健康妊娠女性60 名為對(duì)照組，各組基線(xiàn)資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05），具有可比性。見(jiàn)表1。

1.2 方法

血清各指標(biāo)檢測(cè)，所有PE 患者于住院次日抽取清晨空腹靜脈血5 mL，對(duì)照組于體檢當(dāng)日抽取，采用廈門(mén)閩測(cè)儀器設(shè)備有限公司DT5-3 離心機(jī)，3000 r/min離心10 min，離心半徑為12 cm，離心后取上清，置于-20℃冰箱中保存待用。氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測(cè)：血清超氧化物歧化酶（SOD）水平檢測(cè)采用黃嘌呤氧化酶法，丙二醛（MDA）水平檢測(cè)采用硫代巴比妥酸比色法，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)8-異前列腺素F2α（8-iso-PGF2α）水平；PTEN 指標(biāo)表達(dá)檢測(cè)：采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)PTEN 水平。所有操作嚴(yán)格遵守相關(guān)試劑盒（武漢華美生物工程有限公司提供，生產(chǎn)批號(hào)：201611 24、20161206、20170109）說(shuō)明進(jìn)行。

表1 兩組一般資料比較（）

表1 兩組一般資料比較（）

1.3 妊娠結(jié)局觀(guān)察

所有研究對(duì)象均進(jìn)行隨訪(fǎng)，記錄母親及新生兒情況，若出現(xiàn)胎兒死亡、胎兒宮內(nèi)窘迫、羊水污染≥Ⅲ度、胎盤(pán)早剝、心力衰竭及肺水腫、PE 等任意一項(xiàng)或多項(xiàng)，認(rèn)為不良妊娠結(jié)局存在，其中不良妊娠者37 例，正常妊娠者99 例。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 24.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，多組間本比較行單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t 檢驗(yàn)，兩組間比較采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；采用Pearson 相關(guān)性分析各指標(biāo)間的相關(guān)性；不良妊娠結(jié)局的影響因素采用多因素Logistic 回歸分析。以P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床各指標(biāo)比較

輕度組、重度組PTEN、SOD 水平低于對(duì)照組，而MDA、8-iso-PGF2α 均高于對(duì)照組（P ＜0.05）；隨著病情嚴(yán)重程度的增加，血清PTEN、SOD 水平呈下降趨勢(shì)，而MDA、8-iso-PGF2α 呈上升趨勢(shì)（P ＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 各組臨床各指標(biāo)比較（）

表2 各組臨床各指標(biāo)比較（）

注：與對(duì)照組比較，aP ＜0.05；與輕度組比較，bP ＜0.05。PTEN：第10號(hào)染色體缺失性磷酸酶-張力蛋白同源物基因；SOD：超氧化物歧化酶；MDA：丙二醛；8-iso-PGF2α：8-異前列腺素F2α

2.2 不同妊娠結(jié)局PE 患者臨床各指標(biāo)比較

136 例PE 患者共發(fā)現(xiàn)不良妊娠者37 例，正常妊娠者99 例。不良妊娠者PTEN、SOD 水平低于正常妊娠者（P ＜0.05）；而MDA、8-iso-PGF2α 均高于正常妊娠者（P ＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 不同妊娠結(jié)局PE 患者臨床各指標(biāo)比較（）

表3 不同妊娠結(jié)局PE 患者臨床各指標(biāo)比較（）

注：PE：子癇前期；PTEN：第10 號(hào)染色體缺失性磷酸酶-張力蛋白同源物基因；SOD：超氧化物歧化酶；MDA：丙二醛；8-iso-PGF2α：8-異前列腺素F2α

2.3 血清PTEN 水平與氧化應(yīng)激指標(biāo)之間的關(guān)系

Pearson 相關(guān)性分析顯示，PE 患者PTEN 與SOD呈正相關(guān)（r=0.596，P ＜0.05）；而與MDA、8-iso-PGF2α 均呈負(fù)相關(guān)（r=-0.468、-0.429，均P ＜0.05）。

2.4 PE 患者不良妊娠結(jié)局的多因素Logistic 回歸分析

以PE 患者是否發(fā)生不良妊娠結(jié)局為因變量，以表3 中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)的指標(biāo)為自變量，建立多因素Logistic 回歸分析模型，正常妊娠結(jié)局=0，不良妊娠結(jié)局=1；以均值為界，低表達(dá)（降低）自變量較均值低，高表達(dá)（升高）自變量高于均值，其中高表達(dá)（升高）=0，低表達(dá)（降低）=1。經(jīng)多因素Logistic 回歸分析顯示，血清PTEN 低表達(dá)、SOD 降低及MDA、8-iso-PGF2α升高是PE 患者不良妊娠結(jié)局的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P ＜0.05）。見(jiàn)表4。

3 討論

PE 是孕婦在妊娠期中的一種特發(fā)性疾病，易產(chǎn)生不良妊娠結(jié)局，最終導(dǎo)致孕婦死亡［7-9］。有學(xué)者整理了危重孕產(chǎn)婦的臨床資料總計(jì)7794 份，結(jié)果顯示，重度PE 的占比高達(dá)59.25%，是排在首位危重疾病，嚴(yán)重影響妊娠期女性身心健康［10］。目前，PE 發(fā)病機(jī)制的理論如下：①滋養(yǎng)層細(xì)胞浸潤(rùn)能力下降，子宮螺旋動(dòng)脈受細(xì)胞浸潤(rùn)過(guò)淺，繼而導(dǎo)致胎盤(pán)缺氧，大量分泌胎盤(pán)因子；②母體血循環(huán)進(jìn)入了大量的胎盤(pán)因子，使機(jī)體氧化應(yīng)激反應(yīng)被激活，從而損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞功能，引發(fā)各種病變；由此可得，PE 的一項(xiàng)重要病理改變?yōu)檠趸瘧?yīng)激被激活［11-12］。PTEN 是蛋白酪氨酸磷酸酯酶，可通過(guò)半胱氨酸催化，但是在過(guò)氧化壞境下胱氨酸極易被氧化，則氧化失活PTEN，PTEN 參與體內(nèi)氧化應(yīng)激中［13］。周喬丹等［14］研究通過(guò)建立再表達(dá)細(xì)胞，增高細(xì)胞中PTEN 蛋白表達(dá)水平，增強(qiáng)細(xì)胞抵抗外源性的能力，調(diào)控抗氧化蛋白的表達(dá)，進(jìn)一步使細(xì)胞抗氧化能力增強(qiáng)，因此，PTEN 參與機(jī)體氧化應(yīng)激反應(yīng)過(guò)程中。而PE 的疾病進(jìn)展是否與PTEN 介導(dǎo)的氧化應(yīng)激有關(guān)臨床研究較少，故本研究對(duì)血清PTEN 水平與PE 患者氧化應(yīng)激及妊娠結(jié)局的關(guān)系展開(kāi)探討，為臨床監(jiān)測(cè)PE 患者的妊娠結(jié)局提供數(shù)據(jù)支持。

表4 PE 患者不良妊娠結(jié)局的多因素Logistic 回歸分析

當(dāng)PE 患者機(jī)體出現(xiàn)氧化應(yīng)激反應(yīng)時(shí)，抗氧化酶減少，氧化產(chǎn)物增多，導(dǎo)致機(jī)體過(guò)度氧化，加重血管內(nèi)皮損傷［15］。SOD 是機(jī)體內(nèi)抗氧化酶，具有消除氧自由基作用；脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的終末產(chǎn)物為MDA；8-iso-PGF2α 是花生四烯酸受氧自由基攻擊而形成的產(chǎn)物［16-17］，而在本研究結(jié)果中，隨著病情嚴(yán)重程度的增加，血清PTEN、SOD 水平呈下降趨勢(shì)；而MDA、8-iso-PGF2α 呈上升趨勢(shì)，說(shuō)明了PTEN 參與PE 患者疾病的過(guò)程中，且PE 患者存在明顯的MDA、8-iso-PGF2α、SOD 水平異常。而本研究經(jīng)Pearson 相關(guān)性分析可得PTEN 水平與SOD 呈正相關(guān)，與MDA、8-iso-PGF2α 呈負(fù)相關(guān)，也進(jìn)一步說(shuō)明PTEN、MDA、8-iso-PGF2α、SOD 與PE患者疾病進(jìn)展有關(guān)。

現(xiàn)代藥理研究表明［18］，PTEN 通過(guò)激活STAT3 信號(hào)通路而逆轉(zhuǎn)氧化低密度脂蛋白對(duì)小鼠血管內(nèi)皮功能的損傷；也可調(diào)節(jié)機(jī)體氧化應(yīng)激反應(yīng)來(lái)減輕氧化損傷內(nèi)皮細(xì)胞。因此，PTEN 可調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮功能來(lái)影響機(jī)體疾病進(jìn)展。楊柳［19］的研究顯示，PTEN 降低活性氧水平，改善Cu/Zn-SOD 蛋白的表達(dá)；亦有研究發(fā)現(xiàn)［20］，低表達(dá)PTEN 則使機(jī)體增多氧化產(chǎn)物。故而PTEN 可通過(guò)調(diào)節(jié)機(jī)體氧化系統(tǒng)，抑制機(jī)體氧化應(yīng)激，進(jìn)一步調(diào)節(jié)MDA、8-iso-PGF2α、SOD 水平。

對(duì)于PE 患者臨床治療思路為改善胎兒生長(zhǎng)受限、胎兒死亡、胎兒宮內(nèi)窘迫、羊水污染≥Ⅲ度等不良妊娠結(jié)局，因此早發(fā)現(xiàn)、早治療尤為重要，而本研究中不良妊娠者PTEN、SOD 水平低于正常妊娠者，MDA、8-iso-PGF2α 高于正常妊娠者，提示不良妊娠者機(jī)體出現(xiàn)明顯的PTEN、SOD、MDA、8-iso-PGF2α 水平異常，且經(jīng)多因素分析顯示，血清PTEN 低表達(dá)、SOD 降低及MDA、8-iso-PGF2α 是其不良妊娠結(jié)局的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，因此臨床上可通過(guò)對(duì)上述指標(biāo)的合理監(jiān)測(cè)來(lái)控制PE 患者疾病進(jìn)展。

綜上所述，PTEN 在PE 患者體內(nèi)低表達(dá)，可通過(guò)對(duì)氧化應(yīng)激指標(biāo)的調(diào)控而參與PE 患者的疾病進(jìn)展過(guò)程中，同時(shí)PTEN 表達(dá)較低是不良妊娠結(jié)局的危險(xiǎn)因素，臨床上可通過(guò)對(duì)其合理監(jiān)測(cè)而降低不良妊娠結(jié)局的發(fā)生率。