禽腦脊髓炎的診斷

邢德芳

禽腦脊髓炎的診斷

邢德芳

（山東省萊陽(yáng)市團(tuán)旺畜牧獸醫(yī)工作站 265217）

通過(guò)對(duì)發(fā)病雞進(jìn)行臨床剖檢、病理組織觀察及病毒分離鑒定，結(jié)果雛雞患禽腦脊髓炎，同時(shí)制定了的防控措施，豐富了禽腦脊髓炎的臨床研究數(shù)據(jù)。

2018年10月，山東某地區(qū)某肉種雞場(chǎng)孵化3批肉雛雞，連續(xù)發(fā)生疫病，以共濟(jì)失調(diào)和頭頸震顫為主要臨床特征，發(fā)病率為50%左右。有的病例癱瘓、不能正常站立，隨之頭頸出現(xiàn)輕度的顫動(dòng)；有的不愿走動(dòng)，蹲坐在跗關(guān)節(jié)上，一側(cè)腿麻痹、半斜倒地；有的站立不穩(wěn)，手握時(shí)會(huì)出現(xiàn)間歇性的震顫。對(duì)15只患病雛雞進(jìn)行剖檢，初步診斷該雞群所患疾病為禽腦脊髓炎，通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)進(jìn)行確診，并制定了相應(yīng)的防控措施。

1 材料與方法

1.1 臨床檢查與樣品處理 對(duì)送檢的患病雞進(jìn)行解剖，觀察其病理變化，同時(shí)采集眼、腦、心、胰腺、腸道、脾臟等組織，置于10%福爾馬林溶液中固定24～48h，按照常規(guī)方法制作石蠟切片，HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察組織病理學(xué)變化。另外將一份腦組織置于-80℃保存，進(jìn)行病原分離鑒定。

1.2 病毒分離鑒定 將采集的腦組織反復(fù)凍融、研磨，5000r/min離心10min，取上清，提取組織中的總RNA，進(jìn)行RT-PCR。上游引物P1 5’-CTTGTGGGGACATAAATTCAC-3’；下游引物P2 5’-CGCTCTGGGAACAGAAAACTG -3’。

表1 PCR體系

表2 反應(yīng)條件為

PCR擴(kuò)增結(jié)束后，產(chǎn)物進(jìn)行1.0 %的瓊脂糖凝膠電泳。

2 結(jié)果與分析

2.1 剖檢變化 有的雛雞兩腳拆開(kāi)翅膀著地(圖1A)；部分雞只出現(xiàn)一側(cè)眼球晶體混濁云霧狀，內(nèi)有絮狀物，瞳孔反射減弱，眼球增大；腦膜充血、水腫、出血，有時(shí)可見(jiàn)液化現(xiàn)象；心臟、胰腺、脾臟可見(jiàn)壞死點(diǎn)；其他器官未見(jiàn)明顯病理變化。

2.2 病理組織學(xué)觀察 腦組織發(fā)生非化膿性腦炎，顯微鏡下可見(jiàn)神經(jīng)元中心性染色質(zhì)溶解，細(xì)胞變圓、染色變淡、核破碎消失，有的神經(jīng)元皺縮、胞漿凝固。腦膜血管充血、出血，有淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)增生，內(nèi)皮細(xì)胞腫脹變性，血管周?chē)仔约?xì)胞浸潤(rùn)，形成“袖套”現(xiàn)象。膠質(zhì)細(xì)胞呈彌漫性或是局灶性增生，形成膠質(zhì)結(jié)節(jié)。心肌間質(zhì)淋巴細(xì)胞增生，而心肌細(xì)胞輕微顆粒變性。胰腺灶性壞死，淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。腸道肌層之間有大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，破壞了組織結(jié)構(gòu)。脾臟白髓區(qū)淋巴細(xì)胞壞死嚴(yán)重，核崩解破碎、消失。

2.3 RT-PCR結(jié)果 將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行1.0%瓊脂糖凝膠電泳，結(jié)果顯示其中處理的6份病料其加樣孔中490 bp處均出現(xiàn)一條亮帶。

3 討論

（1）通過(guò)臨床剖檢、組織病理學(xué)及病毒分離鑒定最終確定，該雛雞感染了禽腦脊髓炎。通過(guò)對(duì)種雞場(chǎng)的流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在此之前其產(chǎn)蛋率嚴(yán)重下降，能達(dá)70%，后期一直沒(méi)有提高。禽腦脊髓炎并可以進(jìn)行垂直傳播，雛雞患禽腦脊髓炎跟種雞場(chǎng)關(guān)系密切。假如種雞未免疫過(guò)禽腦脊髓炎疫苗，則雞群對(duì)禽腦脊髓炎病毒沒(méi)有特異性抵抗力。同時(shí)，冬季是該病高發(fā)季節(jié)，發(fā)病早期養(yǎng)殖戶(hù)未采取有效的治療、隔離和消毒措施，致使疫病在該養(yǎng)殖場(chǎng)大面積暴發(fā)，造成嚴(yán)重?fù)p失。（2）該病表現(xiàn)非化膿性腦炎，腦組織血管周?chē)霈F(xiàn)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)、神經(jīng)元變性、膠質(zhì)細(xì)胞的增生以及某些臟器組織淋巴細(xì)胞的增生等，可作為禽腦脊髓炎的診斷依據(jù)，必要時(shí)還需進(jìn)行病毒分離或是血清學(xué)的檢測(cè)。（3）目前，該病沒(méi)有特效的治療藥物，為減少經(jīng)濟(jì)損失，盡量將病雞隔離飼養(yǎng)，給予安靜舒適的環(huán)境，飼料中添加維生素尤其是B1和E。成年的蛋雞發(fā)病之后減蛋現(xiàn)象 嚴(yán)重，經(jīng)過(guò)2周左右即可自行恢復(fù)，但恢復(fù)期的蛋不可做種蛋使用。本病發(fā)生以后，一定注意清掃清糞便和日常消毒。（4）平時(shí)一定注意種雞的免疫：采用弱毒苗在8～10周齡、產(chǎn)前4周分別進(jìn)行點(diǎn)眼或是滴鼻，如若飲水應(yīng)注意添加疫苗保護(hù)劑。若使用滅活苗，應(yīng)在開(kāi)產(chǎn)之前30d左右，采用肌注接種疫苗。商品蛋雞則在90日齡左右進(jìn)行弱毒疫苗的免疫，可有效減少本病的發(fā)生。

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（2019-09-25）