超氧化物歧化酶檢測輔助診斷2型糖尿病腎病

張 帥，殷國泉，于春曉，高 羽，徐嬌陽，秦明明，路 勇，浦 春

(皖南醫(yī)學(xué)院 1.檢驗學(xué)院；2.第一附屬醫(yī)院檢驗科，安徽 蕪湖 241000)

糖尿病(diabetes mellitus，DM)是由于胰島素分泌缺陷或其生物作用受損，導(dǎo)致機體出現(xiàn)血糖升高現(xiàn)象，從而對機體器官造成慢性損害以及功能性障礙的代謝性疾病，其發(fā)病與環(huán)境、遺傳、自身免疫等因素有關(guān)[1]。隨著社會的發(fā)展，我國的糖尿病患病率逐年升高，已成為一種嚴重威脅人類生命與健康的慢性非傳染性疾病[2]。糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)，是DM慢性微血管并發(fā)癥中較為嚴重的并發(fā)癥之一，是糖尿病患者致殘及致死的主要原因。近年研究發(fā)現(xiàn)，氧化應(yīng)激可能在糖尿病腎病的發(fā)生及發(fā)展過程中發(fā)揮著重要的作用[3]。超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase，SOD)作為一種源于生命體的活性物質(zhì)，是一種非常重要的自由基清除劑，對抗氧化應(yīng)激有著十分重要作用[4]。目前SOD主要應(yīng)用于心腦等重要臟器損傷、缺血所引發(fā)的過氧化損傷和自由基清除的藥物治療效果的監(jiān)控[5]。本文主要研究SOD在糖尿病腎病中的診斷價值。

1 對象與方法

1.1 對象2016年9月至2018年10月間皖南醫(yī)學(xué)院第一附屬弋磯山醫(yī)院收治的糖尿病患者126例，健康體檢者82例，分為健康組、單純2型糖尿病組、2型糖尿病腎病組。其中，健康組82例(37例男性，45例女性)；單純2型糖尿病組70例(43例男性，27例女性)；2型糖尿病腎病組56例(36例男性，20例女性)；單純2型糖尿病組和2型糖尿病腎病組患者均符合糖尿病診斷標準，并排除嚴重心肺功能疾病患者及精神疾病患者。經(jīng)皖南醫(yī)學(xué)院第一附屬弋磯山醫(yī)院倫理委員會審核批準，患者簽署知情同意書。

1.2 試劑與儀器超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒(福建福源生物科技有限公司，比色法)參考值范圍為(129～216)U/mL；葡萄糖(GLU)檢測試劑盒(北京利德曼生化股份有限公司，葡萄糖氧化酶法)參考值范圍為(4.16～6.44)mmol/L；胱抑素C(CYS-C)(威尚生物技術(shù)(合肥)有限公司，是乳膠增強免疫比濁法)參考值范圍為(0.40～1.50)mg/L；白蛋白(ALB)(北京利德曼生化股份有限公司，溴甲酚綠法)參考值范圍為(35～53)g/L；尿素氮(BUN)(北京利德曼生化股份有限公司，尿素酶-谷氨酸脫氫酶法)參考值范圍為(1.7～8.3)mmol/L；肌酐(Cr)(北京利德曼生化股份有限公司，肌氨酸氧化酶法)參考值范圍為男：(40～106)μmol/L，女：(40～88)μmol/L。SOD、Cr、CYS-C、ALB、BUN、GLU的檢測儀器為日立7600全自動生化分析儀。

1.3 標本采集與處理所有待檢者均清晨空腹12h后，抽取前臂靜脈血3mL，凝固后以8000×g的速度離心5min以分離血清，并在2h內(nèi)進行上機檢測，剩余標本儲存于-80℃冰箱中低溫保存。

1.4 結(jié)果判斷本臨床實驗室具有完善的質(zhì)量控制措施，可保證結(jié)果的準確性和可比性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。結(jié)果以“均數(shù)±標準差”表示，兩組間比較采用t檢驗，多組間采用單因素方差分析。計數(shù)資料以百分數(shù)或百分率表示。2型糖尿病腎病的相關(guān)影響因素分析采用多因素Logistic回歸分析。通過繪制ROC曲線，得出SOD對2型糖尿病診斷的敏感度、特異度和臨床診斷效能，計算出SOD的ROC曲線下面積(AUC)。雙側(cè)P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 糖尿病組、糖尿病腎病組與健康對照組檢測結(jié)果分析分別對三組資料的GLU、BUN、Cr、CYS-C和SOD進行單因素方差分析，結(jié)果顯示DM組和DN組的GLU、BUN和CYS-C水平均高于健康對照組，DN組的GLU、CYS-C水平高于DM組；DM組的Cr水平低于健康對照組但DN組的Cr水平高于健康對照組；DM和DN組的SOD水平均低于健康對照組且DN組SOD水平較DM組更低。詳見表1。

表1 DM組、DN組與健康對照組檢測結(jié)果比較

注：與健康對照組相比，*P<0.05；與DM組相比，#P<0.05

2.2 DM的多因素回歸分析以DM組為對照組，DN組為實驗組，對表1中有統(tǒng)計學(xué)差異的指標進行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，血清SOD是預(yù)測2型糖尿病腎病的獨立危險因素(P=0.000)，詳見表2。

表2 糖尿病腎病預(yù)測指標的多因素Logistic回歸分析

2.3 SOD檢測對糖尿病腎病的臨床診斷價值以DM組為對照組，DN組為實驗組，用GLU、SOD、ALB、CYS-C、BUN和Cr等指標數(shù)值進行ROC曲線繪制，結(jié)果顯示SOD檢測對2型糖尿病腎病的敏感度和特異度為(74.3%，64.3%)，ROC曲線下面積最大，AUC=0.751。而GLU、ALB、CYS-C、BUN和Cr的曲線下面積則較小，詳見表3和圖1。

表3 不同檢測指標檢測2型糖尿病腎病的診斷效能

圖1 SOD檢測對糖尿病腎病診斷的ROC曲線

將SOD的敏感度和特異度與其他指標相比較后得出SOD的敏感性與其他檢測指標相比差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.005)；特異性與BUN相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.005)，與其他指標相比差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.005)，如表4所示。

表4 SOD敏感性和特異性與其他檢測指標的比較

2.4 SOD在糖尿病傳統(tǒng)危險因素之間的差異分析表明，SOD水平在糖尿病患者不用的性別之間、不同的年齡(≤55歲和>55歲)之間、吸煙患者與不吸煙患者之間、飲酒與不飲酒之間及是否患高血壓之間均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，詳見表5。

表5 SOD在糖尿病傳統(tǒng)危險因素之間的差異

3 討論

隨著社會的發(fā)展，物質(zhì)生活水平的不斷提高，作為中老年人常見病之一的糖尿病發(fā)病率也在逐年上升。糖尿病腎病作為糖尿病中較為常見的一種微血管并發(fā)癥是糖尿病患者死亡的主要原因之一。目前，臨床上糖尿病腎病的檢測主要依靠尿素氮、血清肌酐等生化指標，應(yīng)用方法可為聯(lián)合或單用[6]。雖然這些指標的檢測對糖尿病腎病的診斷有著一些幫助，但也容易受到性別、飲食、運動等內(nèi)源性、外源性因素的干擾而導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)偏差，影響臨床對疾病的診斷[7-8]。

有研究發(fā)現(xiàn)長時間的血糖升高會使機體內(nèi)的糖基化終末產(chǎn)物含量升高，導(dǎo)致體內(nèi)氧化酶的活性升高，進而導(dǎo)致葡萄糖自身氧化和蛋白質(zhì)糖基化增加，使機體產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)[9-10]。超氧化物歧化酶(SOD)作為一種重要的自由基清除劑，對于對抗過氧化物氧化損傷有著十分重要作用[11]。動物研究發(fā)現(xiàn)，SOD可以減輕微血管、神經(jīng)元和腎小球的損傷[12]，而糖尿病腎病正是糖尿病中的一種微血管損傷性并發(fā)癥，說明SOD水平可能與腎損傷程度存在著一些相關(guān)性，SOD活性的高低也能在一定程度上反映腎臟的功能狀況。

本研究通過對糖尿病、糖尿病腎病患者以及健康者的GLU、SOD、ALB、CYS-C、BUN、Cr水平進行單因素方差分析發(fā)現(xiàn)DM、DN組的GLU、BUN、CYS-C水平均高于健康者，DM、DN組的SOD水平低于健康者，提示GLU、BUN、CYS-C和SOD水平的異?？赡軐?型糖尿病腎病的預(yù)測具有一定的價值。為了進一步分析上述指標變化與2型糖尿病腎病的相關(guān)性，筆者對上述指標進行了多因素Logistic回歸分析，多因素Logistic回歸分析提示SOD對2型糖尿病腎病診斷可能具有一定的臨床意義。ROC曲線表明SOD對2型糖尿病腎病的診斷價值最高，AUC=0.751，而GLU、ALB、CYS-C、BUN和Cr的曲線下面積則小于SOD。由此可見，SOD對2型糖尿病腎病的診斷具有較高的診斷價值，可能是預(yù)測2型糖尿病腎病發(fā)生的獨立危險因素。

性別、年齡、吸煙、飲酒、高血壓等被認為是2型糖尿病發(fā)病的危險因素，對2型糖尿病的發(fā)生及進展起著重要的作用[13]，但國內(nèi)外對于SOD和2型糖尿病危險因素的研究相對較少。本研究發(fā)現(xiàn)血清SOD活性與患者性別、年齡、吸煙、飲酒等因素之間沒有相關(guān)性關(guān)系，而與患者是否患高血壓存在一定的相關(guān)性關(guān)系，提示血清SOD活性可能不易受患者性別、年齡、吸煙、飲酒等因素的影響，而患者是否患高血壓可能會影響到體內(nèi)血清SOD活性；但是由于本研究樣本量不大，是否存在偏差，有待于進一步擴大樣本進行研究；SOD是否真的能夠成為預(yù)測2型糖尿病腎病發(fā)病的臨床獨立危險標志物還需要進一步更加深入的研究和認證。

綜上所述，超氧化物歧化酶活性可能是預(yù)測2型糖尿病腎病發(fā)生的獨立危險標志物，并且不易受性別、年齡、飲酒、吸煙等因素的影響，血清中SOD活性的降低與2型糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，有望成為2型糖尿病腎病臨床診斷的有價值的指標。