血液細胞培養(yǎng)及血清降鈣素原檢測對菌血癥的診斷價值

羅春偉

既往，臨床上主要是通過體溫、紅細胞沉降率、C反應蛋白以及白細胞計數(shù)等傳統(tǒng)診斷指標對菌血癥進行診斷，但上述診斷指標存在耗時較長以及敏感性、特異性較低等缺陷，不利于臨床應用［1～3］。此外，由于危重癥患者普遍存在不同程度的全身炎癥反應，加上細菌感染可能與非細菌感染的臨床表現(xiàn)相似，易相互混淆，在一定程度上增加了傳統(tǒng)診斷指標的局限性。因此，尋找一種更有診斷價值的實驗室指標對診斷菌血癥具有重要意義。近年來，越來越多的學者發(fā)現(xiàn)血清降鈣素原（PCT）可能是一具有潛在診斷價值的指標，可作為細菌性感染疾病的早期診斷和鑒別診斷指標［4］。鑒于此，本研究旨在比較血液細胞培養(yǎng)或血清PCT單獨及其聯(lián)合檢測對菌血癥的診斷價值，為臨床提供一種有效的診斷菌血癥的方法。

1 資料與方法

1.1一般資料 將2017年8月～2018年8月我院收治的80例菌血癥患者作為試驗組。納入標準［5］：①符合菌血癥相關診斷標準，年齡≥18歲；②無臨床資料缺失；③入院前已接受相關治療。排除標準：①因其他原因導致的體溫＞38℃；②伴有心、肝、腎等重要臟器功能不全；③無法正常交流或存在精神疾病；④正參與其他研究者。其中男48例，女32例，年齡21～59（38.52±7.45）歲。

另取我院同期接受體檢的80例健康者作為對照組。其中男50例，女30例，年齡22～59（38.59±7.48）歲。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。具有可比性。所有研究對象已知情同意，且經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準。

1.2研究方法 分別采集試驗組發(fā)熱24、48、72 h時，以及同時點對照組的靜脈血5 ml，采用雙抗免疫夾心化學發(fā)光法檢測PCT水平，具體操作以試劑盒說明書為準（試劑為上海酶聯(lián)生物科技有限公司產(chǎn)品）。同時，使用BacT／ALERT3D分析儀（購自法國生物梅里埃公司）進行試驗組發(fā)熱24、48、72 h時血液細胞培養(yǎng)，采用ATB Expression細菌鑒定分析儀（購自法國生物梅里埃公司）及其配套試劑進行細菌種類的鑒定；對所有實驗結果予以全面質量控制，保證實驗結果的準確、可靠。

1.3觀察指標 分析血液細胞培養(yǎng)診斷菌血癥的結果，其標準參照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》［6］第3版的要求進行，即血液細胞培養(yǎng)鑒定出菌株，且繼續(xù)培養(yǎng)5 d細胞仍未呈陰性生長。比較發(fā)熱不同時點兩組的血清 PCT陽性率，其陽性標準為 PCT＞0.5μg／L［7］。受試者工作特征（ROC）曲線分析血液細胞培養(yǎng)及血清PCT水平的曲線下面積、敏感度、特異度。

1.4統(tǒng)計學方法 采用SPSS 20.0軟件對數(shù)據(jù)進行分析；計數(shù)資料以n（%）表示，行χ2檢驗；計量資料以±s）表示，行t檢驗；檢測的能效行ROC曲線分析；P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1血液細胞培養(yǎng)診斷菌血癥的結果分析 試驗組發(fā)熱24、48、72 h時陽性率分別為 28.75%（23／80）、57.50%（46／80）、95.00%（76／80），即隨著采血時點的不斷延遲，其血培養(yǎng)陽性率隨之升高。見表1。

2.2不同時點兩組血清PCT陽性率比較 實驗組發(fā)熱24、48、72 h時的血清PCT陽性率分別與同時點的對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義（均P＜0.01）。見表2。

2.3診斷菌血癥的ROC曲線分析 試驗組血液細胞培養(yǎng)聯(lián)合血清PCT水平檢測診斷菌血癥的曲線下面積、敏感度、特異度與單獨進行血液細胞培養(yǎng)或血清PCT水平檢測比較，差異有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05）。見表3。

表1 試驗組血液細胞培養(yǎng)診斷菌血癥的結果分析

表2 兩組不同時點血清PCT陽性率比較／n（%）

表3 單獨或聯(lián)合檢測診斷菌血癥的ROC曲線分析

3 討論

血培養(yǎng)是目前國內外公認的診斷菌血癥的金標準，但該診斷方式所需的時間較長，且受外界多種因素影響，難以達到早期、快速診斷疾病的要求［8］。特別是菌血癥患者的臨床癥狀往往不明顯，且進展迅速，大部分患者在實驗室指標尚未出現(xiàn)陽性結果時，病情已經(jīng)惡化，從而失去最佳搶救時機，不利于患者預后。目前，我國大多數(shù)醫(yī)療機構開始實施全自動血培養(yǎng)儀進行血培養(yǎng)，但隨著臨床醫(yī)生對首次確診率的要求逐漸升高，單純的血培養(yǎng)已無法滿足臨床需求。因此，尋找一種更加快速、準確、有效的診斷方式顯得至關重要。PCT屬于一種糖蛋白，亦是降鈣素的前體，由116個氨基酸組成，本身無激素活性，在正常狀態(tài)下主要是由甲狀腺濾泡旁細胞內合成，其可在蛋白酶的作用下裂解成為由57個氨基酸組成的氨基PCT、32個氨基酸的降鈣素及21個氨基酸的降鈣蛋白。不少研究報道證實，PCT可作為全身細菌感染的有效標志物之一。

本研究血液細胞培養(yǎng)診斷結果顯示，發(fā)熱24 h時陽性率為28.75%，48 h時為57.50%，72 h時為95.00%，即隨著采血時間的延遲，其血培養(yǎng)陽性率隨之升高。這說明血液細胞培養(yǎng)應用于菌血癥的診斷中具有一定的價值，但首次陽性率較低，其主要原因有：①采血時間不合理（應以急性發(fā)病期或抗生素使用前作為最佳的采血時間）；②血培養(yǎng)瓶質量低下和（或）血培養(yǎng)儀的靈敏度較低；③采血量較少或（和）接種至培養(yǎng)瓶過程中菌株暴露死亡［9］。由此可知，改進上述問題可提高陽性率。本研究血清PCT檢測顯示，發(fā)熱24、48、72 h時的血清PCT陽性率分別比對照組高（均P＜0.05），這表明血清PCT水平檢測對診斷菌血癥具有較高的價值。究其原因，PCT屬于11號染色體上降鈣素1基因（CALC-1）表達產(chǎn)物之一，其在正常生理狀態(tài)下，由于甲狀腺外CALC-1的表達受到抑制，因此血清中幾乎無法檢測到PCT，一旦機體處于細菌感染狀態(tài)時，會誘導全身多種組織的多種類型細胞的CALC-1表達，促進了PCT的連續(xù)性釋放，導致PCT濃度的急劇增加。另外，在室溫條件下體內外的PCT穩(wěn)定性較好，不易被降解，且不會受機體內激素水平的影響，可于短時間內被檢測到。因此，PCT可作為一項有效評估細菌感染的敏感指標，可在細菌感染性發(fā)熱以及非細菌感染發(fā)熱中發(fā)揮顯著的作用［10］。此外，本研究還顯示，血液細胞培養(yǎng)聯(lián)合血清PCT水平檢測診斷菌血癥的ROC曲線下面積、敏感度、特異度比各自單獨檢測診斷價值更高。這說明血液細胞培養(yǎng)聯(lián)合血清PCT水平檢測可有效提高早期診斷菌血癥的敏感度、特異度。其主要原因可能與上述兩種診斷方式具有協(xié)同作用有關。

綜上所述，血液細胞培養(yǎng)與血清PCT水平檢測均可單獨作為菌血癥的診斷指標，但兩項聯(lián)合檢測對診斷菌血癥尤具價值。