野生樺剝管菌馴化栽培初探

杜忠偉 胡志強(qiáng) 亢學(xué)平 李 建 王 旭 王 鑫

（延邊朝鮮族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院，吉林 延邊 133000）

樺剝管菌[Piptoporus betulinus(Bull.ex Fr.)Karst.]又名樺孔菌、樺滴孔菌、樺多孔菌，市場(chǎng)流通名為“白靈芝”。隸屬于真菌界（Fungi）、擔(dān)子菌亞門（Basidiomycota）、層菌綱（Hymenomycetes）、非褶菌目（Polyporales）、多孔菌科（Polyporaceae）、剝管菌屬（Piptoporus）。該菌生于樺樹的樹干或倒木上，主要分布在我國(guó)黑龍江、吉林、遼寧、內(nèi)蒙古、甘肅、四川、云南、貴州、新疆、西藏、河南、陜西、福建、安徽、湖南等地[1,2]。

子實(shí)體中等至較大，無(wú)柄或幾乎無(wú)柄。菌蓋扁平，扁半球形，近肉質(zhì)至革質(zhì)，靠基部著生部分常凸起，大小 4～24×5～35（cm），厚 1.5～9.0 cm，表面光滑，初期乳白色，后呈褐色，有一層薄表皮，可剝離露出白色菌肉，邊緣內(nèi)卷[3]。樺剝管菌是一種木材褐腐真菌，可分泌纖維素和半纖維素酶，能高效分解纖維素。嫩時(shí)可食用，子實(shí)體可分離多孔菌酸、蹄菌酸等多種藥用物質(zhì)，有抑制分枝桿菌、抵抗化膿小球菌生長(zhǎng)、抑制小白鼠肉瘤、抵抗小白鼠及猴子的脊髓灰質(zhì)炎等作用[4,5]。

目前我國(guó)未見有人工栽培的報(bào)道，而野生的樺剝管菌在民間已有很長(zhǎng)的食用和藥用歷史，作為一種藥用大型真菌應(yīng)該得到重視與開發(fā)。因此，我們對(duì)采集的野生樺剝管菌進(jìn)行人工馴化栽培試驗(yàn)，以期為開發(fā)應(yīng)用研究提供基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 菌株來(lái)源

采集自長(zhǎng)白山地區(qū)樺樹林中的野生大型真菌，經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定，確定為樺剝管菌（P.betulinus）。對(duì)子實(shí)體進(jìn)行組織分離獲得菌種，編號(hào)為YBHB-1，保存于延邊農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所。

1.2 母種培養(yǎng)基制作

PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g/L，葡萄糖20 g/L，瓊脂粉20 g/L，蒸餾水定容至1 L，pH自然。采用20×200（mm）的玻璃試管，接種后放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，觀察記錄菌絲的定植時(shí)間、長(zhǎng)勢(shì)、顏色、滿管時(shí)間。

1.3 原種培養(yǎng)基制作

按照玉米粒80%、木屑10%、麩皮8%、石膏1%、白灰1%的培養(yǎng)基混合配制，含水量60%。選用750 mL專用菌種瓶裝料，接種后放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，觀察記錄菌絲的定植時(shí)間、長(zhǎng)勢(shì)、顏色及滿瓶時(shí)間。

1.4 出菇試驗(yàn)

培養(yǎng)料配方：樺樹木屑76%，麥麩20%，黃豆粉2%，白灰1%，石膏1%，含水量60%～65%。采用15×30×0.06（cm）規(guī)格的聚丙烯塑料袋裝料，每袋裝濕料重1.25 kg。裝好后放入高壓滅菌鍋，121℃滅菌2 h，冷卻至30℃以下，轉(zhuǎn)移至接種室接種。接種后置于25℃培養(yǎng)室，前期避光培養(yǎng)，后期給予適當(dāng)?shù)纳⑸涔獯龠M(jìn)原基形成，觀察記錄菌絲長(zhǎng)滿袋時(shí)間和原基形成時(shí)間。

形成原基后轉(zhuǎn)移至出菇實(shí)驗(yàn)室，根據(jù)其原始生長(zhǎng)環(huán)境特點(diǎn)，保持生長(zhǎng)溫度不高于25℃，相對(duì)空氣濕度為80%～85%，保持散射光照，通風(fēng)良好，促進(jìn)子實(shí)體生長(zhǎng)。觀察記錄子實(shí)體的形態(tài)特征。

2 結(jié)果與分析

2.1 馴化條件下的樺剝管菌菌絲生長(zhǎng)

通過對(duì)樺剝管菌母種、原種及栽培種的培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，其菌絲在PDA培養(yǎng)基中生長(zhǎng)速度快，且菌絲潔白、粗壯，少有氣生菌絲產(chǎn)生。原種接種后第2天開始萌發(fā)吃料，經(jīng)過15天左右菌絲基本長(zhǎng)滿原種瓶，18天完全長(zhǎng)滿瓶。栽培種接種后3天菌絲萌發(fā)，35～40天菌絲長(zhǎng)滿袋，此時(shí)菌袋表面菌絲不濃密但粗壯，部分菌包會(huì)吐水，有異味，菌包不緊實(shí)，隨著光照的刺激會(huì)在菌包表面長(zhǎng)出圓球狀的原基（表1）。

2.2 出菇試驗(yàn)結(jié)果

出菇情況詳見圖1。原基形成后進(jìn)行開口出菇，選擇在長(zhǎng)出原基的部位劃口，不要?jiǎng)潅＝?jīng)過15天左右培養(yǎng)，原基分化形成半圓形子實(shí)體。通過比較形態(tài)特征，發(fā)現(xiàn)其與野生的相似，子實(shí)體半圓形，初期顏色潔白，后期在菌蓋表面產(chǎn)生深棕色色素，使菌蓋表面形成深棕色菌皮。菌柄短小，待菌蓋完全形成后測(cè)量子實(shí)體大小為8～10×5～8（cm），厚度1～3 cm。采收成熟子實(shí)體，經(jīng)烘干后菌蓋表面出現(xiàn)裂紋，稱重為9～20 g/個(gè)。

圖1 樺剝管菌子實(shí)體形態(tài)特征

3 結(jié)論與討論

對(duì)采自長(zhǎng)白山地區(qū)的野生樺剝管菌菌株YBHB-1進(jìn)行馴化栽培試驗(yàn)，根據(jù)原生環(huán)境，選用樺木屑作為主要栽培原料，成功獲得栽培子實(shí)體。研究發(fā)現(xiàn)，其菌絲在PDA母種培養(yǎng)基和玉米粒為主的原種培養(yǎng)基中生長(zhǎng)快速，在以樺木屑為主的栽培種培養(yǎng)料中生長(zhǎng)正常。菌絲長(zhǎng)滿菌袋后，表現(xiàn)菌絲不濃密，菌袋不緊實(shí)，易產(chǎn)生黃水，能使木屑培養(yǎng)基腐爛，產(chǎn)生異味。后期在菌袋表面形成圓球狀原基。出菇培養(yǎng)期間發(fā)現(xiàn)，該菌子實(shí)體生長(zhǎng)階段需要充足的氧氣，在18～25℃下均能形成子實(shí)體。

劉欣等的研究表明，樺剝管菌對(duì)白樺木材具有較強(qiáng)的降解能力，且其腐朽后的木材呈紅褐色，易粉碎[6]。李翠珍等研究表明，樺剝管菌是一種典型的褐腐菌，可分泌纖維素和半纖維素酶，分解木材中的纖維素和半纖維素[7]。根據(jù)本研究結(jié)果，它是一種分解能力較強(qiáng)的木腐菌。

2016 年，Ma?gorzata Pleszczyńska等報(bào)道，樺剝管菌人工栽培獲得成功，并證實(shí)人工栽培的子實(shí)體與野生的具有相當(dāng)?shù)目拱┨匦訹8]。樺剝管菌作為一種藥用真菌，國(guó)內(nèi)研究主要集中在木材的降解機(jī)理、藥用價(jià)值及有機(jī)污染物降解作用等方面[9,10]，未見對(duì)其栽培特性的研究報(bào)道。我們利用菌株YBHB-1進(jìn)行栽培試驗(yàn)，成功獲得子實(shí)體，為進(jìn)一步開發(fā)利用樺剝管菌提供了基礎(chǔ)資料。未來(lái)將探索研究其最佳生長(zhǎng)條件和規(guī)?；a(chǎn)，使之成為一種能廣泛開發(fā)應(yīng)用的藥用真菌。