北京地區(qū)三個(gè)日本晚櫻品種花芽形態(tài)分化的比較

劉志雄　李鳳蘭

摘要：對(duì)3個(gè)日本晚櫻（Prunus 1annesiana）品種在北京地區(qū)花芽形態(tài)分化過程連續(xù)3年的觀察發(fā)現(xiàn)，日本晚櫻單瓣品種大島櫻花芽從7月開始分化，翌年3月底和4月初開花，花芽分化可依次分為花原基分化期、萼片分化期、花瓣分化期、雄蕊分化期和雌蕊分化期共5個(gè)時(shí)期。相對(duì)于單瓣大島櫻而言，重瓣品種普賢像和一葉呈現(xiàn)花原基分化晚、花瓣分化期持續(xù)時(shí)間長、雄蕊分化期持續(xù)時(shí)間短、雌蕊葉化等特點(diǎn)。2個(gè)重瓣品種花芽形態(tài)分化相比，一葉花原基分化晚于普賢像，但其花芽分化進(jìn)程較快，雄雌蕊原基發(fā)生均早于普賢像。

關(guān)鍵詞：日本晚櫻（Prunus 1annesiana）；花發(fā)育；花芽分化

中圖分類號(hào)：S685.99 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2014）06-1338-04

Flower Bud Development of Three Cultivar of Prunus lannesiana in Beijing Region

LIU Zhi-xiong1，2，LI Feng-lan2

（1. College of Horticulture and Gardening，Yangtze University，Jingzhou 434025，Hubei，China；

2. College of Biological Sciences and Biotechnology，Beijing Forestry University，Beijing 100083，China）

Abstract： Flower bud development of three cultivars of Prunus lannesiana in Beijing was observed for three years. The results showed that floral bud of ‘Makino started developing in July and flowering at the end of March and in the beginning of April the next year. There were 5 phases of flower bud development including floral primodium differentiation phase， sepal differentiation phase， petal differentiation phase， stamen differentiation phase and carpel differentiation phase. Comparing with single flower cultivar ‘Makino，double flower cultivars，‘Albo-rosea and ‘Hisakura had late development of floral primodium， longer lasting time of petals development， shorter time of stamens development， leaf-like development of carpels， etc. The differences between two double flower cultivars， floral primodium developed in‘‘Hisakura was later than that of ‘Albo-rosea， with faster developing process in which stamens and carpels primodium were earlier than that of ‘Albo-rosea.

Key words： Prunus 1annesiana； flower development； floral bud differentiation

日本晚櫻（Prunus lannesiana）是薔薇科（Rosaceae）櫻屬著名的觀賞花木。因其花色嬌艷、樹形優(yōu)美、品種繁多、適應(yīng)性廣且觀賞價(jià)值高，園林應(yīng)用十分廣泛[1，2]。隨著近年國內(nèi)櫻花熱的不斷升溫，不少珍稀櫻花品種不斷從國外引入。系統(tǒng)研究這些引進(jìn)品種花芽形態(tài)分化的規(guī)律是進(jìn)行適應(yīng)性和觀賞性評(píng)價(jià)的基礎(chǔ)，同時(shí)也是調(diào)控、養(yǎng)護(hù)櫻花開花質(zhì)量與數(shù)量的關(guān)鍵。在引進(jìn)品種馴化和適應(yīng)性評(píng)價(jià)方面，目前國內(nèi)主要關(guān)注櫻花品種的抗逆（抗寒和抗病）性[3，4]，而從花芽形態(tài)分化角度來評(píng)價(jià)櫻花品種的適應(yīng)性和觀賞性尚未見報(bào)道。因此，對(duì)日本晚櫻里櫻系遺傳背景相近的3個(gè)品種在北京地區(qū)的花芽形態(tài)分化的規(guī)律進(jìn)行了系統(tǒng)研究，以明確日本晚櫻花芽分化的關(guān)鍵時(shí)期，為日本晚櫻在我國北方地區(qū)栽培、養(yǎng)護(hù)管理與花期預(yù)報(bào)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試的3個(gè)日本晚櫻（Prunus lannesiana）品種分別為大島櫻（P. lannesiana ‘Makino）、普賢像（P. lannesiana‘Albo-rosea）和一葉（P. lannesiana ‘Hisakura）（圖1）。3個(gè)日本晚櫻品種均在北京地區(qū)自然建植，常規(guī)水肥管理，其中大島櫻為里櫻系單瓣白花品種，普賢像和一葉為里櫻系重瓣白花品種。

1.2 方法

連續(xù)3年（2007年10月至2010年10月）分別取3個(gè)日本晚櫻品種不同發(fā)育時(shí)期的新鮮花芽，用游標(biāo)卡尺測量其大小。按花大小歸類分裝（長度分別為1.0～1.5、2.0～2.9、3.0～3.9、4.0～5.9、6.0～7.9、8.0～9.9、10.0～14.9、15.0～20.0 mm），用FAA固定液固定，按常規(guī)石蠟切片技術(shù)包埋，用Leica RM 2015石蠟切片機(jī)連續(xù)切片，切片厚度8 μm，用番紅-固綠染色法顯示其細(xì)胞結(jié)構(gòu)，在Olympus BH-2型顯微鏡下觀察拍照。切片和照相參考文獻(xiàn)[5]進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 單瓣大島櫻花芽的分化過程及主要特征

大島櫻為傘房花序，腋生，多由3～5朵小花組成，完全花。其花芽內(nèi)小花形態(tài)分化時(shí)間相對(duì)集中，可將其形態(tài)分化過程分化為5個(gè)時(shí)期：花原基分化期、萼片分化期、花瓣分化期、雄蕊分化期和雌蕊分化期（圖2）。

花原基分化期：7月下旬，花芽長約為4.16 mm時(shí)，花芽內(nèi)突起的生長錐開始快速膨大呈半球狀，隨后不斷加寬生長，形成小花原基，并在突起的生長錐邊緣開始分化苞片原基（圖2a）。萼片分化期：8月中旬開始，花芽長約為5.06 mm時(shí)，生長錐頂部變寬，漸趨平坦，并在周圍產(chǎn)生5個(gè)小突起，即為萼片原基，并逐漸伸長最終發(fā)育為花萼（圖2b）?；ò攴只冢?月中旬開始，花芽長約為5.50 mm時(shí)，隨著萼片原基的伸長變寬并向內(nèi)彎曲，在其內(nèi)側(cè)又產(chǎn)生5個(gè)突起，為花瓣原基，將來發(fā)育成5枚單輪花瓣（圖2c）。雄蕊分化期：9月下旬開始，隨著萼片和花瓣原基不斷地伸展，在花瓣原基的內(nèi)側(cè)首先形成外輪的雄蕊原基，然后生長錐近中央的周圍部分不斷下陷，花托在外輪雄蕊原基的下方繼續(xù)分化為雄蕊原基，以后逐漸發(fā)育為雄蕊群（圖2d）。雌蕊分化期：10月中旬開始，花芽長約為6.48 mm時(shí)，隨著雄蕊的進(jìn)一步發(fā)育，生長錐的中央逐漸向上突起，形成雌蕊原基，以后逐漸發(fā)育形成子房、花柱（圖2e、2f）。從11月下旬開始，花芽長約為7.00 mm、小花長為1.0～1.5 mm時(shí)，雌蕊基本形成，接著花芽進(jìn)入休眠期。翌年2月底在子房內(nèi)壁上才會(huì)出現(xiàn)胚珠原基，直至3月底和4月初胚珠發(fā)育成熟后開花。

2.2 重瓣品種與單瓣大島櫻花芽形態(tài)分化的比較

普賢像和一葉為傘房花序，腋生，多由3～4朵小花組成，重瓣。在8月上旬，花芽長約為6.03 mm時(shí)普賢像形成小花原基和苞片原基，至9月上旬，花芽長約為6.32 mm時(shí)形成萼片原基，其小花原基和萼片原基在外形上與單瓣大島櫻并無明顯區(qū)別（圖3a、3b）。至9月下旬10月初，花芽長約為6.68 mm時(shí)，隨著萼片原基的伸長和向內(nèi)彎曲，在萼片原基的內(nèi)方開始形成花瓣原基，隨著萼片原基和外輪的花瓣原基不斷地伸展，在外輪的花瓣原基內(nèi)側(cè)不斷出現(xiàn)新的花瓣原基（圖3c）。至10月下旬，在最內(nèi)輪的花瓣原基內(nèi)出現(xiàn)雄蕊原基，并在外輪雄蕊原基內(nèi)側(cè)下方繼續(xù)分化出新的雄蕊原基，形成雄蕊群（圖3d）；隨著雄蕊原基的發(fā)育，當(dāng)花芽長約為8.54 mm，在生長錐的中央形成雌蕊原基，以后發(fā)育為葉化雌蕊（圖3d、3e）。從11月下旬開始，小花長約為1.42 mm時(shí)，花芽進(jìn)入休眠期，翌年2月下旬休眠結(jié)束后繼續(xù)發(fā)育，直到開花。普賢像的少數(shù)花萼筒內(nèi)壁上著生異位子房，子房通常不愈合，內(nèi)著生敗育胚珠（圖3f）。

一葉在8月中旬花芽長約為4.35 mm時(shí)形成小花原基和苞片原基，至9月上旬，花芽長約為5.34 mm時(shí)形成萼片原基，其小花原基和萼片原基從外形上與單瓣大島櫻也無明顯區(qū)別（圖3g、3h）。至9月下旬10月初，花芽長約為5.50 mm時(shí)，隨著萼片原基的伸長和向內(nèi)彎曲，在萼片原基的內(nèi)方開始形成花瓣原基，并隨著花芽的發(fā)育，在新形成的花瓣原基內(nèi)方不斷地出現(xiàn)新的花瓣原基（圖3i）。至10月中旬，在最內(nèi)輪的花瓣原基內(nèi)出現(xiàn)雄蕊原基（圖3j），并在其內(nèi)側(cè)下方繼續(xù)分化出新的雄蕊原基，形成雄蕊群，并在生長錐的中央形成雌蕊原基，以后發(fā)育為葉化雌蕊（圖3k、3l）。從11月下旬開始，小花長約為1.66 mm時(shí)，花芽進(jìn)入休眠期，翌年2月下旬休眠結(jié)束后繼續(xù)發(fā)育，直到開花。

與單瓣大島櫻相比，普賢像花芽分化時(shí)間較晚，從最外輪花瓣原基出現(xiàn)到最外輪雄蕊原基發(fā)生所用時(shí)間較長；而從最外輪雄蕊原基出現(xiàn)到雌蕊原基發(fā)生所用時(shí)間較短；一葉花原基發(fā)生的時(shí)間較大島櫻和普賢像晚，但其花芽分化的進(jìn)程較快，其雄雌蕊原基發(fā)生均早于普賢像。普賢像和一葉雌蕊葉化，而且通常2個(gè)原基發(fā)生后各自發(fā)育形成葉化雌蕊。普賢像的少數(shù)花萼筒上會(huì)長出異位心皮，心皮子房中有1～2個(gè)胚珠，但未發(fā)育成成熟胚囊；而且有部分子房未完全愈合的心皮內(nèi)壁會(huì)長出1～2個(gè)裸露的敗育胚珠。一葉的少數(shù)花中雌蕊未完全葉化的子房內(nèi)壁上也會(huì)長出敗育胚珠。

3 討論

比較3個(gè)遺傳背景相近的里櫻系日本晚櫻品種在北京地區(qū)花芽的分化情況可知，單瓣大島櫻花原基分化時(shí)間早，重瓣普賢像和一葉花原基分化時(shí)間晚，這可能與單重瓣品種中參與調(diào)控花分生組織分化相關(guān)基因的差異表達(dá)和功能分化相關(guān)。Liu等[6]通過對(duì)單瓣大島櫻和重瓣普賢像品種中1個(gè)參與控制花芽分化和雌雄蕊發(fā)育的PrseAG基因的功能研究發(fā)現(xiàn)，該基因在普賢像中因一段外顯子遺漏導(dǎo)致其C末端功能區(qū)缺失，進(jìn)而造成了重瓣花和晚花表型，其分子發(fā)育遺傳學(xué)研究結(jié)果與形態(tài)觀察的結(jié)果完全吻合。而近年來前人在對(duì)薔薇科植物重瓣花的發(fā)育研究中也進(jìn)一步地支持了這個(gè)結(jié)果[7]。從花瓣分化期持續(xù)的時(shí)間來看，重瓣品種花瓣分化期持續(xù)的時(shí)間長，雄蕊分化期持續(xù)的時(shí)間短，主要原因可能是因?yàn)橹匕耆毡就頇哑贩N花瓣數(shù)量較多，輪數(shù)相對(duì)也多，因此，完成分化所需的時(shí)間相對(duì)較長；另一方面，其由于大量的雄蕊瓣化，使得重瓣品種的雄蕊數(shù)量較單瓣品種少，因此雄蕊分化持續(xù)的時(shí)間相對(duì)較短。比較2個(gè)重瓣品種花芽的分化情況可知，相對(duì)一葉而言，普賢像的花瓣數(shù)量多，其花瓣分化期持續(xù)的時(shí)間較長，從而出現(xiàn)一葉品種花原基分化晚，雄雌蕊的分化均比普賢像早的特點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)：

[1] 劉志雄，于先泥.日本晚櫻同源異型基因PrseAP3的克隆及其在單瓣與重瓣花中的表達(dá)分析[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，31（5）：578-583.

[2] 宋煥芝，王歷慧，于曉南.櫻花文化的中日差異及其在園林中的應(yīng)用[J].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2010，36（2）：98-100.

[3] 馬 玉.北京地區(qū)櫻花抗寒情況的初探[J].中國園林，2001（2）：74-76.

[4] 劉玉英，王占深.櫻花病蟲害及其防治[J].北京園林，2009， 25（4）：54-56.

[5] 劉志雄，馬小婷，程朋軍，等.單瓣與重瓣櫻花雌雄蕊發(fā)育的比較研究[J].北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，32（4）：86-91.

[6] LIU Z，ZHANG D，LIU D，et al.Exon skipping of AGAMOUS homolog PrseAG in developing double flowers of Prunus lannesiana（Rosaceae）[J]. Plant Cell Reports，2013，32（2）：227–237.

[7] BENDAHMANE M，DUBOIS A，RAYMOND O，et al.Genetics and genomics of flower initiation and development in roses [J]. J Exp Bot，2013，64（4）：847-857.

2 結(jié)果與分析

2.1 單瓣大島櫻花芽的分化過程及主要特征

大島櫻為傘房花序，腋生，多由3～5朵小花組成，完全花。其花芽內(nèi)小花形態(tài)分化時(shí)間相對(duì)集中，可將其形態(tài)分化過程分化為5個(gè)時(shí)期：花原基分化期、萼片分化期、花瓣分化期、雄蕊分化期和雌蕊分化期（圖2）。

花原基分化期：7月下旬，花芽長約為4.16 mm時(shí)，花芽內(nèi)突起的生長錐開始快速膨大呈半球狀，隨后不斷加寬生長，形成小花原基，并在突起的生長錐邊緣開始分化苞片原基（圖2a）。萼片分化期：8月中旬開始，花芽長約為5.06 mm時(shí)，生長錐頂部變寬，漸趨平坦，并在周圍產(chǎn)生5個(gè)小突起，即為萼片原基，并逐漸伸長最終發(fā)育為花萼（圖2b）?；ò攴只冢?月中旬開始，花芽長約為5.50 mm時(shí)，隨著萼片原基的伸長變寬并向內(nèi)彎曲，在其內(nèi)側(cè)又產(chǎn)生5個(gè)突起，為花瓣原基，將來發(fā)育成5枚單輪花瓣（圖2c）。雄蕊分化期：9月下旬開始，隨著萼片和花瓣原基不斷地伸展，在花瓣原基的內(nèi)側(cè)首先形成外輪的雄蕊原基，然后生長錐近中央的周圍部分不斷下陷，花托在外輪雄蕊原基的下方繼續(xù)分化為雄蕊原基，以后逐漸發(fā)育為雄蕊群（圖2d）。雌蕊分化期：10月中旬開始，花芽長約為6.48 mm時(shí)，隨著雄蕊的進(jìn)一步發(fā)育，生長錐的中央逐漸向上突起，形成雌蕊原基，以后逐漸發(fā)育形成子房、花柱（圖2e、2f）。從11月下旬開始，花芽長約為7.00 mm、小花長為1.0～1.5 mm時(shí)，雌蕊基本形成，接著花芽進(jìn)入休眠期。翌年2月底在子房內(nèi)壁上才會(huì)出現(xiàn)胚珠原基，直至3月底和4月初胚珠發(fā)育成熟后開花。

2.2 重瓣品種與單瓣大島櫻花芽形態(tài)分化的比較

普賢像和一葉為傘房花序，腋生，多由3～4朵小花組成，重瓣。在8月上旬，花芽長約為6.03 mm時(shí)普賢像形成小花原基和苞片原基，至9月上旬，花芽長約為6.32 mm時(shí)形成萼片原基，其小花原基和萼片原基在外形上與單瓣大島櫻并無明顯區(qū)別（圖3a、3b）。至9月下旬10月初，花芽長約為6.68 mm時(shí)，隨著萼片原基的伸長和向內(nèi)彎曲，在萼片原基的內(nèi)方開始形成花瓣原基，隨著萼片原基和外輪的花瓣原基不斷地伸展，在外輪的花瓣原基內(nèi)側(cè)不斷出現(xiàn)新的花瓣原基（圖3c）。至10月下旬，在最內(nèi)輪的花瓣原基內(nèi)出現(xiàn)雄蕊原基，并在外輪雄蕊原基內(nèi)側(cè)下方繼續(xù)分化出新的雄蕊原基，形成雄蕊群（圖3d）；隨著雄蕊原基的發(fā)育，當(dāng)花芽長約為8.54 mm，在生長錐的中央形成雌蕊原基，以后發(fā)育為葉化雌蕊（圖3d、3e）。從11月下旬開始，小花長約為1.42 mm時(shí)，花芽進(jìn)入休眠期，翌年2月下旬休眠結(jié)束后繼續(xù)發(fā)育，直到開花。普賢像的少數(shù)花萼筒內(nèi)壁上著生異位子房，子房通常不愈合，內(nèi)著生敗育胚珠（圖3f）。

一葉在8月中旬花芽長約為4.35 mm時(shí)形成小花原基和苞片原基，至9月上旬，花芽長約為5.34 mm時(shí)形成萼片原基，其小花原基和萼片原基從外形上與單瓣大島櫻也無明顯區(qū)別（圖3g、3h）。至9月下旬10月初，花芽長約為5.50 mm時(shí)，隨著萼片原基的伸長和向內(nèi)彎曲，在萼片原基的內(nèi)方開始形成花瓣原基，并隨著花芽的發(fā)育，在新形成的花瓣原基內(nèi)方不斷地出現(xiàn)新的花瓣原基（圖3i）。至10月中旬，在最內(nèi)輪的花瓣原基內(nèi)出現(xiàn)雄蕊原基（圖3j），并在其內(nèi)側(cè)下方繼續(xù)分化出新的雄蕊原基，形成雄蕊群，并在生長錐的中央形成雌蕊原基，以后發(fā)育為葉化雌蕊（圖3k、3l）。從11月下旬開始，小花長約為1.66 mm時(shí)，花芽進(jìn)入休眠期，翌年2月下旬休眠結(jié)束后繼續(xù)發(fā)育，直到開花。

與單瓣大島櫻相比，普賢像花芽分化時(shí)間較晚，從最外輪花瓣原基出現(xiàn)到最外輪雄蕊原基發(fā)生所用時(shí)間較長；而從最外輪雄蕊原基出現(xiàn)到雌蕊原基發(fā)生所用時(shí)間較短；一葉花原基發(fā)生的時(shí)間較大島櫻和普賢像晚，但其花芽分化的進(jìn)程較快，其雄雌蕊原基發(fā)生均早于普賢像。普賢像和一葉雌蕊葉化，而且通常2個(gè)原基發(fā)生后各自發(fā)育形成葉化雌蕊。普賢像的少數(shù)花萼筒上會(huì)長出異位心皮，心皮子房中有1～2個(gè)胚珠，但未發(fā)育成成熟胚囊；而且有部分子房未完全愈合的心皮內(nèi)壁會(huì)長出1～2個(gè)裸露的敗育胚珠。一葉的少數(shù)花中雌蕊未完全葉化的子房內(nèi)壁上也會(huì)長出敗育胚珠。

3 討論

比較3個(gè)遺傳背景相近的里櫻系日本晚櫻品種在北京地區(qū)花芽的分化情況可知，單瓣大島櫻花原基分化時(shí)間早，重瓣普賢像和一葉花原基分化時(shí)間晚，這可能與單重瓣品種中參與調(diào)控花分生組織分化相關(guān)基因的差異表達(dá)和功能分化相關(guān)。Liu等[6]通過對(duì)單瓣大島櫻和重瓣普賢像品種中1個(gè)參與控制花芽分化和雌雄蕊發(fā)育的PrseAG基因的功能研究發(fā)現(xiàn)，該基因在普賢像中因一段外顯子遺漏導(dǎo)致其C末端功能區(qū)缺失，進(jìn)而造成了重瓣花和晚花表型，其分子發(fā)育遺傳學(xué)研究結(jié)果與形態(tài)觀察的結(jié)果完全吻合。而近年來前人在對(duì)薔薇科植物重瓣花的發(fā)育研究中也進(jìn)一步地支持了這個(gè)結(jié)果[7]。從花瓣分化期持續(xù)的時(shí)間來看，重瓣品種花瓣分化期持續(xù)的時(shí)間長，雄蕊分化期持續(xù)的時(shí)間短，主要原因可能是因?yàn)橹匕耆毡就頇哑贩N花瓣數(shù)量較多，輪數(shù)相對(duì)也多，因此，完成分化所需的時(shí)間相對(duì)較長；另一方面，其由于大量的雄蕊瓣化，使得重瓣品種的雄蕊數(shù)量較單瓣品種少，因此雄蕊分化持續(xù)的時(shí)間相對(duì)較短。比較2個(gè)重瓣品種花芽的分化情況可知，相對(duì)一葉而言，普賢像的花瓣數(shù)量多，其花瓣分化期持續(xù)的時(shí)間較長，從而出現(xiàn)一葉品種花原基分化晚，雄雌蕊的分化均比普賢像早的特點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)：

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[2] 宋煥芝，王歷慧，于曉南.櫻花文化的中日差異及其在園林中的應(yīng)用[J].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2010，36（2）：98-100.

[3] 馬 玉.北京地區(qū)櫻花抗寒情況的初探[J].中國園林，2001（2）：74-76.

[4] 劉玉英，王占深.櫻花病蟲害及其防治[J].北京園林，2009， 25（4）：54-56.

[5] 劉志雄，馬小婷，程朋軍，等.單瓣與重瓣櫻花雌雄蕊發(fā)育的比較研究[J].北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，32（4）：86-91.

[6] LIU Z，ZHANG D，LIU D，et al.Exon skipping of AGAMOUS homolog PrseAG in developing double flowers of Prunus lannesiana（Rosaceae）[J]. Plant Cell Reports，2013，32（2）：227–237.

[7] BENDAHMANE M，DUBOIS A，RAYMOND O，et al.Genetics and genomics of flower initiation and development in roses [J]. J Exp Bot，2013，64（4）：847-857.

2 結(jié)果與分析

2.1 單瓣大島櫻花芽的分化過程及主要特征

大島櫻為傘房花序，腋生，多由3～5朵小花組成，完全花。其花芽內(nèi)小花形態(tài)分化時(shí)間相對(duì)集中，可將其形態(tài)分化過程分化為5個(gè)時(shí)期：花原基分化期、萼片分化期、花瓣分化期、雄蕊分化期和雌蕊分化期（圖2）。

花原基分化期：7月下旬，花芽長約為4.16 mm時(shí)，花芽內(nèi)突起的生長錐開始快速膨大呈半球狀，隨后不斷加寬生長，形成小花原基，并在突起的生長錐邊緣開始分化苞片原基（圖2a）。萼片分化期：8月中旬開始，花芽長約為5.06 mm時(shí)，生長錐頂部變寬，漸趨平坦，并在周圍產(chǎn)生5個(gè)小突起，即為萼片原基，并逐漸伸長最終發(fā)育為花萼（圖2b）?；ò攴只冢?月中旬開始，花芽長約為5.50 mm時(shí)，隨著萼片原基的伸長變寬并向內(nèi)彎曲，在其內(nèi)側(cè)又產(chǎn)生5個(gè)突起，為花瓣原基，將來發(fā)育成5枚單輪花瓣（圖2c）。雄蕊分化期：9月下旬開始，隨著萼片和花瓣原基不斷地伸展，在花瓣原基的內(nèi)側(cè)首先形成外輪的雄蕊原基，然后生長錐近中央的周圍部分不斷下陷，花托在外輪雄蕊原基的下方繼續(xù)分化為雄蕊原基，以后逐漸發(fā)育為雄蕊群（圖2d）。雌蕊分化期：10月中旬開始，花芽長約為6.48 mm時(shí)，隨著雄蕊的進(jìn)一步發(fā)育，生長錐的中央逐漸向上突起，形成雌蕊原基，以后逐漸發(fā)育形成子房、花柱（圖2e、2f）。從11月下旬開始，花芽長約為7.00 mm、小花長為1.0～1.5 mm時(shí)，雌蕊基本形成，接著花芽進(jìn)入休眠期。翌年2月底在子房內(nèi)壁上才會(huì)出現(xiàn)胚珠原基，直至3月底和4月初胚珠發(fā)育成熟后開花。

2.2 重瓣品種與單瓣大島櫻花芽形態(tài)分化的比較

普賢像和一葉為傘房花序，腋生，多由3～4朵小花組成，重瓣。在8月上旬，花芽長約為6.03 mm時(shí)普賢像形成小花原基和苞片原基，至9月上旬，花芽長約為6.32 mm時(shí)形成萼片原基，其小花原基和萼片原基在外形上與單瓣大島櫻并無明顯區(qū)別（圖3a、3b）。至9月下旬10月初，花芽長約為6.68 mm時(shí)，隨著萼片原基的伸長和向內(nèi)彎曲，在萼片原基的內(nèi)方開始形成花瓣原基，隨著萼片原基和外輪的花瓣原基不斷地伸展，在外輪的花瓣原基內(nèi)側(cè)不斷出現(xiàn)新的花瓣原基（圖3c）。至10月下旬，在最內(nèi)輪的花瓣原基內(nèi)出現(xiàn)雄蕊原基，并在外輪雄蕊原基內(nèi)側(cè)下方繼續(xù)分化出新的雄蕊原基，形成雄蕊群（圖3d）；隨著雄蕊原基的發(fā)育，當(dāng)花芽長約為8.54 mm，在生長錐的中央形成雌蕊原基，以后發(fā)育為葉化雌蕊（圖3d、3e）。從11月下旬開始，小花長約為1.42 mm時(shí)，花芽進(jìn)入休眠期，翌年2月下旬休眠結(jié)束后繼續(xù)發(fā)育，直到開花。普賢像的少數(shù)花萼筒內(nèi)壁上著生異位子房，子房通常不愈合，內(nèi)著生敗育胚珠（圖3f）。

一葉在8月中旬花芽長約為4.35 mm時(shí)形成小花原基和苞片原基，至9月上旬，花芽長約為5.34 mm時(shí)形成萼片原基，其小花原基和萼片原基從外形上與單瓣大島櫻也無明顯區(qū)別（圖3g、3h）。至9月下旬10月初，花芽長約為5.50 mm時(shí)，隨著萼片原基的伸長和向內(nèi)彎曲，在萼片原基的內(nèi)方開始形成花瓣原基，并隨著花芽的發(fā)育，在新形成的花瓣原基內(nèi)方不斷地出現(xiàn)新的花瓣原基（圖3i）。至10月中旬，在最內(nèi)輪的花瓣原基內(nèi)出現(xiàn)雄蕊原基（圖3j），并在其內(nèi)側(cè)下方繼續(xù)分化出新的雄蕊原基，形成雄蕊群，并在生長錐的中央形成雌蕊原基，以后發(fā)育為葉化雌蕊（圖3k、3l）。從11月下旬開始，小花長約為1.66 mm時(shí)，花芽進(jìn)入休眠期，翌年2月下旬休眠結(jié)束后繼續(xù)發(fā)育，直到開花。

與單瓣大島櫻相比，普賢像花芽分化時(shí)間較晚，從最外輪花瓣原基出現(xiàn)到最外輪雄蕊原基發(fā)生所用時(shí)間較長；而從最外輪雄蕊原基出現(xiàn)到雌蕊原基發(fā)生所用時(shí)間較短；一葉花原基發(fā)生的時(shí)間較大島櫻和普賢像晚，但其花芽分化的進(jìn)程較快，其雄雌蕊原基發(fā)生均早于普賢像。普賢像和一葉雌蕊葉化，而且通常2個(gè)原基發(fā)生后各自發(fā)育形成葉化雌蕊。普賢像的少數(shù)花萼筒上會(huì)長出異位心皮，心皮子房中有1～2個(gè)胚珠，但未發(fā)育成成熟胚囊；而且有部分子房未完全愈合的心皮內(nèi)壁會(huì)長出1～2個(gè)裸露的敗育胚珠。一葉的少數(shù)花中雌蕊未完全葉化的子房內(nèi)壁上也會(huì)長出敗育胚珠。

3 討論

比較3個(gè)遺傳背景相近的里櫻系日本晚櫻品種在北京地區(qū)花芽的分化情況可知，單瓣大島櫻花原基分化時(shí)間早，重瓣普賢像和一葉花原基分化時(shí)間晚，這可能與單重瓣品種中參與調(diào)控花分生組織分化相關(guān)基因的差異表達(dá)和功能分化相關(guān)。Liu等[6]通過對(duì)單瓣大島櫻和重瓣普賢像品種中1個(gè)參與控制花芽分化和雌雄蕊發(fā)育的PrseAG基因的功能研究發(fā)現(xiàn)，該基因在普賢像中因一段外顯子遺漏導(dǎo)致其C末端功能區(qū)缺失，進(jìn)而造成了重瓣花和晚花表型，其分子發(fā)育遺傳學(xué)研究結(jié)果與形態(tài)觀察的結(jié)果完全吻合。而近年來前人在對(duì)薔薇科植物重瓣花的發(fā)育研究中也進(jìn)一步地支持了這個(gè)結(jié)果[7]。從花瓣分化期持續(xù)的時(shí)間來看，重瓣品種花瓣分化期持續(xù)的時(shí)間長，雄蕊分化期持續(xù)的時(shí)間短，主要原因可能是因?yàn)橹匕耆毡就頇哑贩N花瓣數(shù)量較多，輪數(shù)相對(duì)也多，因此，完成分化所需的時(shí)間相對(duì)較長；另一方面，其由于大量的雄蕊瓣化，使得重瓣品種的雄蕊數(shù)量較單瓣品種少，因此雄蕊分化持續(xù)的時(shí)間相對(duì)較短。比較2個(gè)重瓣品種花芽的分化情況可知，相對(duì)一葉而言，普賢像的花瓣數(shù)量多，其花瓣分化期持續(xù)的時(shí)間較長，從而出現(xiàn)一葉品種花原基分化晚，雄雌蕊的分化均比普賢像早的特點(diǎn)。

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