動(dòng)物庫(kù)布病毒研究進(jìn)展

周秀蓉，肖霜艷，2，康樺華，陳小文，呂殿紅，溫肖會(huì)，翟頎，賈春玲，翟少倫*，魏文康*

（1.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物衛(wèi)生研究所/廣東省畜禽疫病防治研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部獸用藥物與診斷技術(shù)廣東科學(xué)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站 廣州 510640；2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 武漢 430000；3.四會(huì)市畜牧獸醫(yī)局 廣東肇慶 526200）

目前，研究庫(kù)布病毒大部分是基于病原特征以及基因組特征來(lái)進(jìn)行分子生物學(xué)技術(shù)以及血清學(xué)等方面的研究。本文旨在通過(guò)對(duì)庫(kù)布病毒的研究進(jìn)展進(jìn)行闡述，希望對(duì)廣大研究者有所幫助。

1 病毒的發(fā)現(xiàn)

庫(kù)布病毒的首次發(fā)現(xiàn)可追溯到1989年，日本科研人員在日本愛(ài)知縣的急性胃腸炎病人糞便樣本中發(fā)現(xiàn)庫(kù)布病毒，因在愛(ài)知縣被發(fā)現(xiàn)，又名愛(ài)知病毒（Aichivirus）[1]。2003 年，Yamashita 等[2]在實(shí)驗(yàn)室體外培養(yǎng)HeLa 細(xì)胞的過(guò)程中，庫(kù)布病毒被當(dāng)成一種細(xì)胞因子被發(fā)現(xiàn)，通過(guò)檢測(cè)和分析發(fā)現(xiàn)，庫(kù)布病毒粒子來(lái)源于培養(yǎng)細(xì)胞用的胎牛血清，因此被命名為牛庫(kù)布病毒。2007 年，在匈牙利和中國(guó)的腹瀉仔豬糞便中檢測(cè)到了豬庫(kù)布病毒[3]。2010 年，在匈牙利家養(yǎng)綿羊糞便中，檢測(cè)到了羊庫(kù)布病毒陽(yáng)性[4]。自從2007 年首次在中國(guó)腹瀉仔豬糞便中分離出庫(kù)布病毒，國(guó)內(nèi)對(duì)該病毒的研究越來(lái)越多，逐漸發(fā)現(xiàn)庫(kù)布病毒在我國(guó)廣泛流行分布。

庫(kù)布病毒被認(rèn)為是國(guó)內(nèi)的新發(fā)病原，初期研究發(fā)現(xiàn)其在腹瀉動(dòng)物糞便樣本中可以被檢測(cè)出來(lái)，因此推測(cè)其與動(dòng)物的腹瀉關(guān)系密切；隨著對(duì)庫(kù)布病毒的研究，對(duì)其的認(rèn)識(shí)愈加全面。Reuter 等[5]發(fā)現(xiàn)，庫(kù)布病毒可在野豬糞便樣本中檢測(cè)到。Jin 等[6]在健康動(dòng)物糞便及血清中也檢測(cè)到了庫(kù)布病毒。綜上，從多個(gè)研究結(jié)果中可推測(cè)庫(kù)布病毒不僅作用于腸道細(xì)胞，可能還能穿過(guò)血管壁到達(dá)血液中，由此可見，庫(kù)布病毒的致病機(jī)制較為復(fù)雜。此外，通過(guò)國(guó)內(nèi)外的研究表明，庫(kù)布病毒不僅感染動(dòng)物，還感染人。通過(guò)對(duì)庫(kù)布病毒的基因組序列的研究與分析可知，不同地區(qū)、不同物種、不同個(gè)體的庫(kù)布病毒毒株的基因組序列存在著很大的差異。綜合國(guó)內(nèi)外所面對(duì)的動(dòng)物衛(wèi)生安全環(huán)境，基于庫(kù)布病毒的變異性較大，因此在疫苗研制方面沒(méi)有較大的實(shí)際意義。

2 病毒的分類

自1989 年發(fā)現(xiàn)庫(kù)布病毒以來(lái)，科研人員逐步在豬牛羊等動(dòng)物中檢測(cè)到庫(kù)布病毒。隨著對(duì)庫(kù)布病毒研究的增多，發(fā)現(xiàn)庫(kù)布病毒除了人、牛、豬三種宿主以外，還感染犬、貓、鼠、綿羊等動(dòng)物[4,7,8]。因此，在國(guó)際病毒分類委員會(huì)公布的第十次病毒分類報(bào)告中將庫(kù)布病毒進(jìn)行了分類，根據(jù)病毒所感染的宿主不同，以及基因同源性，分為Achivirus A、B、C、D、E、F 六類[9,10]。

牛、羊庫(kù)布病毒（Bovine/Ovine kobuvirus BKoV/OKoV）根據(jù)對(duì)其基因組序列和遺傳進(jìn)化分析，將二者歸納于B 型愛(ài)知病毒。2003 年，在日本一實(shí)驗(yàn)室中發(fā)現(xiàn)了第一株牛的庫(kù)布病毒，其被命名為U-1 毒株（GenBank 登錄號(hào)，AB084788.1）[2]。U-1 毒株全長(zhǎng)基因組為8374nt。U-1 毒株是在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中被當(dāng)作一種細(xì)胞誘變劑而發(fā)現(xiàn)的。通過(guò)對(duì)其基因組和病毒粒子特性分析，將其歸納于B 型愛(ài)知病毒，這種“細(xì)胞誘變劑”來(lái)源于用于培養(yǎng)細(xì)胞的胎牛血清。另有研究發(fā)現(xiàn)從黑牛體內(nèi)分離得到一株庫(kù)布病毒不屬于B 型愛(ài)知病毒，而被歸類于D型愛(ài)知病毒。由此可見相同物種中感染的庫(kù)布病毒可能不屬于同一種病毒類型[11]。2018 年，F(xiàn)akry F 等[12]首次報(bào)告了埃及牛群中的BKoV 感染情況，其中埃及BKoV 毒株（GenBank 登錄號(hào)，KY407744.1）基因組長(zhǎng)度為8319nt，與U-1 毒株在核酸和氨基酸水平上同源性分別為89.5%和96.3%；與綿羊庫(kù)布病毒[A]（Gen-Bank 登錄號(hào)，GU245693.2）在核酸和氨基酸水平上同源性分別為81.5%和86.2%。2011 年，從韓國(guó)黑山羊的糞便中，檢測(cè)到了庫(kù)布病毒（GenBank 登錄號(hào)，JF714211.1）[13]。將該病毒進(jìn)行全基因組測(cè)序以及進(jìn)行基因序列的同源性比對(duì)和遺傳進(jìn)化分析，發(fā)現(xiàn)羊庫(kù)布病毒與牛庫(kù)布病毒具有較高的同源性，因此將羊庫(kù)布病毒也歸類于B 型愛(ài)知病毒。

豬庫(kù)布病毒（Porcine kobuvirous，PKoV）是C 型愛(ài)知病毒的唯一成員，該病毒與牛羊源庫(kù)布病毒基因序列及結(jié)構(gòu)有較大的差異。2008 年，在匈牙利的豬群糞便樣品中檢測(cè)到庫(kù)布病毒，通過(guò)對(duì)該毒株（Kobuvirus/swine/S-1-HUN/2007/Hungary）（GenBank登錄號(hào)，EU787450.2）基因組進(jìn)行分析，將該病毒暫時(shí)歸類于C 型愛(ài)知病毒[3]。該毒株基因組大小約為8.2kb。Zhai 等[14]研究發(fā)現(xiàn)一株新型的PKoV，與S-1-HUN 株對(duì)比，其在2B 區(qū)域缺失了30 個(gè)氨基酸。

在近期的研究中發(fā)現(xiàn)，從同一宿主中可以分離出多株不同庫(kù)布病毒毒株。此外，從帶毒豬/牛中可能分離得到基因組與BKoV/PKoV 基因組相似度更高的毒株。

3 病毒基因組特征

庫(kù)布病毒（Kobuvirus，KBV）是微小RNA 病毒科庫(kù)布病毒屬成員，無(wú)囊膜的單股正鏈RNA 病毒，直徑約為30nm，病毒粒子為球形的二十面體對(duì)稱結(jié)構(gòu)，表面有很多凸起[15]。基因組大小為8.2～8.3kb。庫(kù)布病毒基因組中GC 的含量高達(dá)59%。其3'UTR 端非常長(zhǎng)，最長(zhǎng)可達(dá)240bp，5'端復(fù)雜的二級(jí)結(jié)構(gòu)涉及RNA 復(fù)制和衣殼化[16]。

庫(kù)布病毒全基因組具有小RNA 基因組特征，全基因組被分為兩部分，包括非編碼區(qū)和編碼區(qū)。非編碼區(qū)包括5'端的UTR 區(qū)和3'端的UTR 區(qū)；5'端有一個(gè)編碼VPg 小分子蛋白的區(qū)域，該蛋白主要充當(dāng)引物參與RNA 的復(fù)制；3' 端有一個(gè)較長(zhǎng)的富含A 的ployA 尾[15]。編碼區(qū)有一個(gè)較大的開放閱讀框ORF，近5'端有一個(gè)前導(dǎo)蛋白L 的編碼區(qū)，以及編碼一個(gè)多聚蛋白；多聚蛋白可以裂解為三個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白和七個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白。將該區(qū)域分為P1、P2、P3 三個(gè)區(qū)域，P1 編碼結(jié)構(gòu)蛋白包括VP0、VP3、VP1，參與病毒衣殼蛋白的合成；P2、P3 編碼2A、2B、2C、3A、3B、3C、3D 七種非結(jié)構(gòu)蛋白[16,17,18]。其VP1 蛋白具有良好的免疫源性，VP1 基因突變率較高，常發(fā)生同源重組[19]。3D 序列為庫(kù)布病毒的保守序列，因此常針對(duì)3D序列設(shè)計(jì)引物，檢測(cè)庫(kù)布病毒。

4 流行病學(xué)

牛庫(kù)布病毒（Bovine Kobuvirus，BKoV）最早被發(fā)現(xiàn)于胎牛血清中，通過(guò)血清學(xué)方法在72 份牛血清中檢測(cè)出42 份為庫(kù)布病毒陽(yáng)性（59.2%）[2]。后來(lái)，在國(guó)內(nèi)外相繼有在牛糞便中檢測(cè)到庫(kù)布病毒的報(bào)道。在對(duì)泰國(guó)、韓國(guó)、比利時(shí)、匈牙利、荷蘭、意大利和巴西等多個(gè)國(guó)家的流行情況研究發(fā)現(xiàn)，BKoV 的總流行率在1%～40%之間。2008—2010 年，韓國(guó)患腹瀉牛群中的BKoV 檢測(cè)率為34.6%～36.1%（37/107～13/36），而犢牛（66.7%）中的BKoV 檢出率明顯高于青年牛（25.0%）和奶牛（18.4%）[20,21]。意大利腹瀉牛糞便樣品中BKoV 的檢出率為4.9%（7/142）[22]。巴西BKoV 檢出率14.4%（31/216），并發(fā)現(xiàn)幼仔感染率最高，隨年齡增長(zhǎng)呈下降趨勢(shì)；1 個(gè)月的犢牛為82.6%（19/23），年齡較大的犢牛為38.5%（5/13）[23]。埃及BKoV 檢出率為66.7%（24/36）[24]。中國(guó)檢出率為1%～34.9%，其中，Chang 等[25]收集了來(lái)自中國(guó)四個(gè)主要奶牛產(chǎn)區(qū)中腹瀉牛的166 個(gè)糞便標(biāo)本，通過(guò)RT-PCR 檢測(cè)BKoV，BKoV 陽(yáng)性率為34.9%（58/166）。師志海等[26]在建立牛嵴病毒與牛諾如病毒雙重PCR 檢測(cè)方法中，檢測(cè)了127 份腹瀉牛糞便樣品，BKoV 檢出率為4.72%（6/127）。此外，最近在匈牙利的家養(yǎng)綿羊和韓國(guó)的黑山羊中也發(fā)現(xiàn)了類似BKoV[4,27]，這表明B 型愛(ài)知病毒在反芻動(dòng)物包括牛、羊群體中具有世界性的分布。

豬庫(kù)布病毒最早在匈牙利被發(fā)現(xiàn)，在隨后的報(bào)道中表明，在美國(guó)、匈牙利、意大利、捷克、荷蘭、巴西、中國(guó)、韓國(guó)、日本和泰國(guó)等國(guó)的豬群中廣泛分布著PKoV。PKoV 在腹瀉和健康豬中均能被檢測(cè)出，該病毒的陽(yáng)性率從3.9%～100%不等。據(jù)報(bào)道，在匈牙利野豬中發(fā)現(xiàn)了高流行的PKoV（100%），這一發(fā)現(xiàn)表明，野豬也可能是PKoV 的重要宿主[5]。Chu 等[28]通過(guò)RT-PCR 方法檢測(cè)了在2009—2013 年期間在泰國(guó)北部仔豬群收集的636 個(gè)糞便樣品，腹瀉仔豬中和無(wú)癥狀仔豬中檢測(cè)出庫(kù)布病毒陽(yáng)性率分別為95.6%（505/528）和96.3%（104/108），由此可知，泰國(guó)北部仔豬普遍感染PKoV。2010 年，Wang 等[29]對(duì)上海三個(gè)豬場(chǎng)收集的116 例糞便樣本進(jìn)行了篩查，發(fā)現(xiàn)PKoV 感染率為38.8%（45/116）。Chen 和Wang 等[19,30]對(duì)中國(guó)四川省、甘肅省PKoV 的流行現(xiàn)狀進(jìn)行調(diào)查發(fā)現(xiàn)，PKoV 的檢出率分別為53%（87/163）和62.1%（126/203），其中腹瀉樣品中豬庫(kù)布病毒總檢出率為64.3%，無(wú)癥狀豬的PKoV的感染率為29.4%（15/51）。張沙等[31]利用RT-PCR 方法對(duì)2011、2012 年期間來(lái)自中國(guó)27 個(gè)省市126 個(gè)豬場(chǎng)的病料共計(jì)448 份進(jìn)行了3D 基因的檢測(cè)，PKoV 陽(yáng)性率為25.0%，豬場(chǎng)陽(yáng)性率為40.48%（51/126）。Mai 等[32]在對(duì)豬博卡病毒進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查過(guò)程中發(fā)現(xiàn)PKoV 的感染率高達(dá)68.7%。2017 年，Zhai 等[14]調(diào)查國(guó)內(nèi)某豬場(chǎng)對(duì)庫(kù)布病毒的感染率，發(fā)現(xiàn)竟高達(dá)90%，且伴隨著中度博卡病毒1 型感染。王瑋等[33]對(duì)山東省2014—2016 年冬采集的350份病料樣品進(jìn)行RT-PCR 檢測(cè)，結(jié)果顯示，在350 份病料樣品中，PKoV 陽(yáng)性率為56%（196/350），陽(yáng)性豬場(chǎng)占80%（24/30）；非腹瀉豬個(gè)體陽(yáng)性率（65.38%，153/234）明顯高于腹瀉豬個(gè)體陽(yáng)性率（37.07%，43/116）；育肥豬的PKoV 陽(yáng)性率（97.50%）遠(yuǎn)高于哺乳期仔豬（45.40%）、斷奶期仔豬（52.75%）以及成年豬（66.67%）；夏秋季節(jié)采集的樣品PKoV 檢出率（71.94%）明顯高于冬春季節(jié)（45.50%）。統(tǒng)計(jì)PKoV 與PEDV、TGEV 混合感染結(jié)果顯示，雖然PKoV 在非腹瀉豬群中單獨(dú)感染率（61.11%，143/234）遠(yuǎn)高于腹瀉豬群(18.97%，22/116)，但非腹瀉豬群PKV 與PEDV 和TGEV 的混合感染率卻明顯低于腹瀉豬群。劉占旭等[34]在建立RAP 快速診斷PKoV 方法的過(guò)程中，對(duì)2016—2017 年采自河南、新疆、黑龍江等地的276 份臨床豬腹瀉樣品進(jìn)行檢測(cè)，PKoV 的檢出率為58.7%。楊振等[35]對(duì)江蘇省七個(gè)縣域豬嵴病毒感染的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果表明所有樣品豬嵴病毒感染陽(yáng)性率達(dá)52.73%（116/220），陽(yáng)性豬場(chǎng)占79.41%（27/34）。由以上研究表明，PKoV 在國(guó)內(nèi)的流行范圍較為廣泛，且感染率較高，不僅感染家豬還感染野豬，且不同年齡階段豬群的感染率不一致。同時(shí)PKoV 的感染呈現(xiàn)出典型的季節(jié)特性，但無(wú)區(qū)域特性。無(wú)癥狀豬與腹瀉豬均可檢測(cè)到PKoV，且常伴隨著多種病毒混合感染。

5 病毒與疾病的相關(guān)性

Yang 等[36]通過(guò)建立健康仔豬模型，然后對(duì)該模型仔豬進(jìn)行單一變量的攻毒試驗(yàn)；作用一段時(shí)間后，將不同的組織器官進(jìn)行病理學(xué)研究，結(jié)果表明庫(kù)布病毒可引起肺、胃、小腸等器官不同程度的細(xì)胞脫落、淋巴細(xì)胞聚集等炎癥反應(yīng)。由此可見，庫(kù)布病毒在機(jī)體的定植范圍較為廣泛。此外，大多數(shù)攜帶有豬庫(kù)布病毒、牛庫(kù)布病毒與羊庫(kù)布病毒的動(dòng)物可能表現(xiàn)為腹瀉、消瘦、惡心等臨床癥狀；有部分?jǐn)y帶者并不表現(xiàn)出任何的臨床癥狀。因此KBV 是否致病目前尚沒(méi)有直接的證據(jù)證明，但是PKoV 在豬群中感染率很高，不僅感染患病豬群，健康豬糞便中也可以檢測(cè)到豬庫(kù)布病毒，由此可以推測(cè)庫(kù)布病毒在動(dòng)物體內(nèi)的長(zhǎng)期存在能致使宿主患病。另有研究表明，動(dòng)物感染庫(kù)布病毒的同時(shí)，亦會(huì)感染其他病毒，例如豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒、豬星形病毒、豬輪狀病毒和豬博卡病毒等[37,38,39]，可推測(cè)庫(kù)布病毒可能與其他病毒共同作用于動(dòng)物機(jī)體，從而對(duì)動(dòng)物機(jī)體造成不同程度的損傷。

6 病毒的培養(yǎng)與檢測(cè)

6.1 病毒的培養(yǎng)

在2003 年的一項(xiàng)研究中表明，牛庫(kù)布病毒可以使HeLa 細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞病變（CPE），但是無(wú)法從該細(xì)胞中分離得到病毒[2]。目前對(duì)PKV 易感細(xì)胞系的研究表明，PKV 無(wú)法導(dǎo)致HeLa 細(xì)胞、Vero細(xì)胞、PK-15 細(xì)胞、MDBK 細(xì)胞、Mac-145 細(xì)胞、ST 細(xì)胞、RD 細(xì)胞等細(xì)胞系產(chǎn)生CPE。但是PKV 在Vero 細(xì)胞系盲傳6 代或者11代后，無(wú)法檢測(cè)到豬庫(kù)布病毒[40]，由此推測(cè)可能檢測(cè)到的是接種的病毒核酸，而PKV 可能不在Vero 細(xì)胞中復(fù)制。在目前對(duì)豬庫(kù)布病毒的研究中還未找到PKV 的易感細(xì)胞系。

6.2 病毒的檢測(cè)

6.2.1 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase Chain Reaction，PCR）聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)方法常用于病原的遺傳進(jìn)化分析以及各種動(dòng)物疫病的檢測(cè)，該檢測(cè)是以分子生物學(xué)為基礎(chǔ)，建立起來(lái)的一種簡(jiǎn)便、快速的方法。該方法敏感性、特異性和重復(fù)性較好。庫(kù)布病毒屬于RNA 病毒，因此檢測(cè)該病毒需要使用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Revers Transpersiton PCR，RT-PCR）。2007 年匈牙利科學(xué)家就是通過(guò)RT-PCR 方法檢測(cè)豬庫(kù)布病毒。隨著庫(kù)布病毒全基因組序列被公開，大多數(shù)研究者基于庫(kù)布病毒的3D 序列設(shè)計(jì)三種病毒的通用檢測(cè)引物，可以用于檢測(cè)不同動(dòng)物源庫(kù)布病毒。孟麗等[41]根據(jù)多種腹瀉病毒基因組建立了多重PCR 法，該研究中PKV 陽(yáng)性率最高，為26.98%（2015 年）和45.79%（2016 年）。胡軍勇等[42]建立了多重RT-PCR 法檢測(cè)多種腹瀉病毒，其敏感度為180fg/mL、特異性良好，不會(huì)和其他病毒模板發(fā)生非特異擴(kuò)增。

6.2.2 實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Real-time Polymerase Chain Reaction）隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步與發(fā)展，實(shí)時(shí)熒光定量PCR 逐漸被應(yīng)用于臨床檢測(cè)。Real-time PCR 的敏感性、特異性以及重復(fù)性都要優(yōu)于普通PCR，且其檢測(cè)限較低，這樣可以更加準(zhǔn)確地檢測(cè)和判斷動(dòng)物機(jī)體是否感染庫(kù)布病毒。同時(shí)，Real-time PCR操作簡(jiǎn)單方便，可以實(shí)時(shí)監(jiān)控?cái)U(kuò)增過(guò)程中基因拷貝數(shù)的變化，與普通PCR 比較，省略了凝膠電泳的步驟，可以減少大量時(shí)間。Real-time PCR 檢測(cè)方法不僅能夠進(jìn)行定性檢測(cè)還能進(jìn)行定量檢測(cè)，其產(chǎn)物同樣也可以進(jìn)行膠回收等試驗(yàn)。劉孟良等[43]建立了SYBR GreenⅠ實(shí)時(shí)熒光定量PCR 法，其擴(kuò)增效率可達(dá)到91.8%，檢測(cè)出的最低拷貝數(shù)為100 拷貝。謝榮輝等[44]建立的豬庫(kù)布病毒Taq Man 熒光定量RT-PCR 檢測(cè)方法能特異性檢測(cè)豬庫(kù)布病毒，與其他引起豬腹瀉的病毒無(wú)交叉反應(yīng)，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒檢測(cè)靈敏度達(dá)10 copies/μL；模板終濃度在107～10copies/μL 范圍內(nèi)時(shí)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線Ct 值有良好的線性關(guān)系；Real-time RT-PCR 陽(yáng)性檢出率（30.94%）高于普通RT-PCR（29.50%）。

6.2.3 重組酶聚合酶擴(kuò)增（RPA）快速診斷方法 劉占旭等[34]建立了RPA 快速診斷方法，結(jié)果表明該方法對(duì)KBoV 最低檢測(cè)限度為3.36×102copies/μL 的質(zhì)粒DNA，該方法具有良好的敏感性。對(duì)208 份臨床豬糞便樣品進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果顯示，豬庫(kù)布病毒陽(yáng)性率為73.1%，明顯高于常規(guī)RT-PCR 的46.6%，兩種方法的符合率為90.2%。

6.2.4 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）朱慶賀等[45]基于豬庫(kù)布病毒重組VP3 蛋白建立了間接ELISA 檢測(cè)方法，檢測(cè)55 份臨床血清樣品，其中28 份樣品為PKV 抗體陽(yáng)性，而RT-PCR 檢測(cè)結(jié)果顯示有32 份樣品呈陽(yáng)性，這兩種方法的符合率為90.3%。VP1 蛋白具有良好的免疫原性，田野[46]基于VP1 蛋白建立了間接ELISA 檢測(cè)方法，結(jié)果顯示我國(guó)華北地區(qū)PKV 感染率高達(dá)81.25%。

7 展望

自2008 年在我國(guó)豬糞便中檢測(cè)到庫(kù)布病毒以來(lái)，對(duì)庫(kù)布病毒的研究逐漸增多。在 2010—2018 年期間，研究熱度較高。但由于庫(kù)布病毒基因組在物種之間的差異性較大，且易發(fā)生變異，對(duì)該病毒的研究難度變大。由于還未找到豬庫(kù)布病毒的易感細(xì)胞系，導(dǎo)致在對(duì)病毒的分離上遇到了較大的阻礙。目前對(duì)庫(kù)布病毒的研究仍集中在對(duì)該病毒基因組的遺傳進(jìn)化分析、檢測(cè)方法以及流行病學(xué)上的研究。雖然對(duì)該病毒的致病機(jī)制、感染性克隆、穩(wěn)定的體外培養(yǎng)系統(tǒng)等方面的研究不少，但突破性進(jìn)展仍然很少。相信通過(guò)科研人員今后更加深入的研究，將逐步揭開庫(kù)布病毒的神秘面紗，從而獲得更多庫(kù)布病毒的科學(xué)知識(shí)。