培育密度和投餌量對(duì)長(zhǎng)牡蠣殼黑選育品系幼蟲(chóng)生長(zhǎng)存活及附著變態(tài)的影響*

種金豆， 李 琪,2**， 王 濤

(1. 海水養(yǎng)殖教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(中國(guó)海洋大學(xué))，山東 青島 266003；2. 青島海洋科學(xué)與技術(shù)國(guó)家實(shí)驗(yàn)室，海洋漁業(yè)科學(xué)與食物產(chǎn)出過(guò)程功能實(shí)驗(yàn)室，山東 青島 266200)

長(zhǎng)牡蠣(Crassostreagigas)也稱(chēng)太平洋牡蠣，自然分布于西北太平洋海域，具有生長(zhǎng)速度快、養(yǎng)殖成本低、抗逆性高、適應(yīng)性強(qiáng)等特點(diǎn)，是世界性海產(chǎn)貝類(lèi)養(yǎng)殖種類(lèi)之一。因其巨大的養(yǎng)殖規(guī)模和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，目前關(guān)于其抗病、產(chǎn)量等重要經(jīng)濟(jì)性狀的良種選育研究已相繼展開(kāi)[1-3]。

殼色是海產(chǎn)經(jīng)濟(jì)貝類(lèi)的一個(gè)重要經(jīng)濟(jì)性狀，受消費(fèi)者喜愛(ài)的殼色可以顯著提高其商品價(jià)值。貝類(lèi)殼色的多態(tài)性在海產(chǎn)經(jīng)濟(jì)貝類(lèi)中普遍存在[4-6]。長(zhǎng)牡蠣殼色主要受遺傳影響且遺傳力較高，經(jīng)人工選育可實(shí)現(xiàn)對(duì)殼色的純化[7-8]。采用家系選育和群體選育的混合選育技術(shù)，我們培育出左右殼均為黑色、遺傳穩(wěn)定的長(zhǎng)牡蠣殼色新品系。該新選育品系不僅具靚麗的外觀，還具有生長(zhǎng)快、抗逆性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，具有巨大的產(chǎn)業(yè)推廣價(jià)值。長(zhǎng)牡蠣殼黑選育品系的產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用對(duì)于促進(jìn)牡蠣養(yǎng)殖業(yè)的良種化具有重要的意義。

幼蟲(chóng)培育是苗種規(guī)?；庇ぷ鞯暮诵模彩浅韶惤】瞪L(zhǎng)的重要基礎(chǔ)。雙殼貝類(lèi)受精卵孵化后進(jìn)入營(yíng)浮游生活的幼蟲(chóng)期，浮游期貝類(lèi)幼蟲(chóng)的發(fā)育由早期依賴(lài)自身卵黃和外源餌料的混合型營(yíng)養(yǎng)迅速變?yōu)閱渭円蕾?lài)餌料的外源性營(yíng)養(yǎng)[9]。可見(jiàn)，投餌量是影響貝類(lèi)幼蟲(chóng)生長(zhǎng)存活及后期附著變態(tài)的重要因素[10-13]。除投餌量外，培育密度對(duì)貝類(lèi)幼蟲(chóng)生長(zhǎng)和存活也有顯著影響[14-17]。不同的貝類(lèi)幼蟲(chóng)培育密度，其投餌量也不盡相同。Liu等[18]研究表明培育密度和投餌量對(duì)幼蟲(chóng)生長(zhǎng)存活有顯著互作效應(yīng)。Marshall等[19]研究也表明培育密度和餌料量適量增加對(duì)幼蟲(chóng)生長(zhǎng)存活存在協(xié)同作用，但過(guò)高的培育密度會(huì)與投餌量產(chǎn)生拮抗作用，不利于幼蟲(chóng)生長(zhǎng)。因此，確定適宜的培育密度和投餌量是貝類(lèi)苗種規(guī)?；庇年P(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題。

本研究以長(zhǎng)牡蠣野生群體幼蟲(chóng)為對(duì)照組，研究了不同培育密度和投餌量對(duì)長(zhǎng)牡蠣殼黑選育品系幼蟲(chóng)生長(zhǎng)、存活及附著變態(tài)的影響，旨在闡明長(zhǎng)牡蠣殼黑選育品系與野生群體幼蟲(chóng)生長(zhǎng)與存活性狀的差異，確定適宜的培育密度和投餌量，為長(zhǎng)牡蠣殼黑選育品系產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 親貝采集

2017年5月從山東榮成海域養(yǎng)殖的第7代長(zhǎng)牡蠣殼黑選育群體中，挑選左右殼均為黑色個(gè)體作為親貝，并采集同海區(qū)野生長(zhǎng)牡蠣親貝作為對(duì)照組，進(jìn)行室內(nèi)人工促熟。親貝促熟期間，海水溫度為19 ～ 22 ℃，鹽度為33。每2天100%換水1次，每日投喂新月菱形藻(Nschiaclosterium) 和球等鞭金藻(Isochrysisgalbana)1∶1的混合餌料4次。

1.2 幼蟲(chóng)孵化

長(zhǎng)牡蠣殼黑品系和野生群體的親貝性腺發(fā)育成熟后，通過(guò)解剖法辨別雌雄后，分別進(jìn)行人工授精。受精卵孵化期間進(jìn)行持續(xù)微充氣，水溫22 ℃，孵化密度為20～30個(gè)/mL。受精卵經(jīng)過(guò)24h發(fā)育為D形幼蟲(chóng)。

1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

實(shí)驗(yàn)設(shè)置3個(gè)幼蟲(chóng)培育密度梯度(3、7和15個(gè)/mL)和3個(gè)初始投餌量梯度(0.4、0.8和1.6×103cells·ind-1·d-1)的交互組合共9個(gè)實(shí)驗(yàn)組，每組均設(shè)3個(gè)重復(fù)組。取長(zhǎng)牡蠣殼黑選育品系和野生群體2日齡D形幼蟲(chóng)，其殼高分別為(69.80±8.34) μm和(67.40±8.04) μm，隨機(jī)分組，按上述梯度組合分別轉(zhuǎn)移到80 L水體的聚乙烯塑料桶內(nèi)充氣培養(yǎng)，日常管理與親貝促熟期間一致。實(shí)驗(yàn)期間，投喂球等鞭金藻，每次投喂前，采用血球計(jì)數(shù)板測(cè)定餌料濃度，定量投喂。

實(shí)驗(yàn)期間，隨日齡增加幼蟲(chóng)規(guī)格逐漸增大，攝食量增加。在維持投餌量梯度比相同的基礎(chǔ)上，逐漸增加投餌量(見(jiàn)表1)。

表1 實(shí)驗(yàn)期間幼蟲(chóng)每日投餌量

實(shí)驗(yàn)第5、10、15和20天從各實(shí)驗(yàn)組隨機(jī)取50個(gè)幼蟲(chóng)，盧戈氏液固定，在顯微鏡下測(cè)定幼蟲(chóng)殼高。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，測(cè)量各實(shí)驗(yàn)組幼蟲(chóng)平均殼高并與初始?xì)じ呦啾容^，計(jì)算各實(shí)驗(yàn)組生長(zhǎng)速率；測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組幼蟲(chóng)密度，計(jì)算各實(shí)驗(yàn)組存活率。當(dāng)眼點(diǎn)幼蟲(chóng)比例>50%時(shí)，投放附著基。投放7 d后，測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組幼蟲(chóng)附著率[11]。

1.4 數(shù)據(jù)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean± SD)表示，采用SPSS19.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，以培育密度和投餌量為影響因素，進(jìn)行雙因素方差分析(two-way ANOVA)。當(dāng)培育密度和投餌量之間存在顯著交互作用時(shí)，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行一次單因素方差分析(One-way ANOVA)，并采用Tukey’s檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較分析各實(shí)驗(yàn)組間的顯著性。長(zhǎng)牡蠣殼黑選育品系與野生群體對(duì)照組之間采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，顯著性水平均設(shè)為P< 0.05。

2 結(jié)果

2.1 培育密度和投餌量對(duì)長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)生長(zhǎng)的影響

培育密度和投餌量對(duì)長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)殼高生長(zhǎng)有顯著影響(P< 0.05)(見(jiàn)表2)。實(shí)驗(yàn)第5天，在培育密度15個(gè)/mL實(shí)驗(yàn)組長(zhǎng)牡蠣殼黑品系D形幼蟲(chóng)殼高顯著高于培育密度3個(gè)/mL實(shí)驗(yàn)組(P< 0.05)，并在培育密度15個(gè)/mL、投餌量1.6×103cells·ind-1·d-1實(shí)驗(yàn)組，殼黑品系D形幼蟲(chóng)殼高達(dá)到最大值為(107.70±3.97)μm。實(shí)驗(yàn)期間，隨日齡增加幼蟲(chóng)規(guī)格逐漸增大，最適培育條件逐步發(fā)生變化。第15和20天，長(zhǎng)牡蠣殼黑品系與野生群體的殼頂幼蟲(chóng)和眼點(diǎn)幼蟲(chóng)殼高均在培育密度7個(gè)/mL，投餌量1.6×103cells·ind-1d-1實(shí)驗(yàn)組達(dá)到最大值，顯著高于其它實(shí)驗(yàn)組(P< 0.05)。此外，在培育密度15個(gè)/mL實(shí)驗(yàn)組殼黑選育品系各時(shí)期幼蟲(chóng)殼高始終高于野生群體幼蟲(chóng)。

培育密度對(duì)長(zhǎng)牡蠣野生群體幼蟲(chóng)生長(zhǎng)速率有顯著影響(P< 0.05)，對(duì)長(zhǎng)牡蠣殼黑品系幼蟲(chóng)影響不顯著(P> 0.05) ，培育密度和投餌量對(duì)長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)生長(zhǎng)速率存在顯著交互作用(P< 0.05)(見(jiàn)表3)。在培育密度3和7個(gè)/mL實(shí)驗(yàn)組，隨投餌量增加長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)生長(zhǎng)速率顯著增大(P< 0.05)，并在培育密度7個(gè)/mL、投餌量1.6×103cells·ind-1·d-1實(shí)驗(yàn)組，長(zhǎng)牡蠣殼黑品系和野生群體幼蟲(chóng)生長(zhǎng)速率均達(dá)到最大值，分別為(9.80± 0.62)μm·d-1和(9.30± 0.75)μm·d-1(見(jiàn)圖1)。而在培育密度15個(gè)/mL實(shí)驗(yàn)組，投餌量增加對(duì)幼蟲(chóng)生長(zhǎng)速率無(wú)顯著影響(P> 0.05)，且各餌料投喂組生長(zhǎng)速率均顯著低于培育密度7個(gè)/mL、投餌量1.6×103cells·ind-1·d-1實(shí)驗(yàn)組(P> 0.05)。除培育密度7個(gè)/mL、投餌量0.4×103cells·ind-1·d-1實(shí)驗(yàn)組外，殼黑品系幼蟲(chóng)生長(zhǎng)速率均高于野生群體幼蟲(chóng)。

表2 不同培育密度和投餌量對(duì)殼黑選育品系和野生群體幼蟲(chóng)殼高生長(zhǎng)的影響

注:3、7和15表示培育密度；0.4、0.8和1.6表示投餌量。同一列數(shù)據(jù)標(biāo)注不同上標(biāo)字母代表差異顯著(P<0.05)；*表示同一實(shí)驗(yàn)組兩個(gè)群體間差異顯著(P<0.05)。

Note: 3,7 and 15represented stocking density, 0.4, 0.8, and 1.6 represented algal ration.The different superscript letters of same column values are significantly (P<0.05),*means significant difference (P<0.05) between black shell color strain and wild groups at the same treatments.

①Experimental groups；②Black shell strain；③Wild population

表3 培育密度和投餌量對(duì)長(zhǎng)牡蠣殼黑品系與野生群體幼蟲(chóng)生長(zhǎng)速率、存活率及附著率影響的方差分析

注: *表示差異顯著(P<0.05)。

Note: Significant differences are denoted by asterisks (P<0.05).

(3、7和15表示培育密度為3、7和15個(gè)/mL，0.4、0.8和1.6表示初始投餌量為0.4×103、0.8×103和1.6×103cells·ind-1·d-1,*表示差異顯著(P<0.05)。下同。Stocking density of 3, 7 and 15 inds·mL-1be represented as 3, 7 and 15. Initial feed ration of 0.4×103, 0.8×103and 1.6×103cells·ind-1·d-1be represented as 0.4, 0.8 and 1.6. Significant differences are denoted by asterisks (P<0.05). The same as below.)

圖1 不同培育密度和投餌量對(duì)殼黑品系和野生群體幼蟲(chóng)生長(zhǎng)速率的影響

Fig.1 Growth rates of black shell color strain and wild population ofC.gigaslarvae at different larval stocking density and algal feed ration

2.2 培育密度和投餌量對(duì)長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)存活率的影響

培育密度和投餌量對(duì)長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)存活率存在顯著交互作用(P< 0.05)，投餌量對(duì)長(zhǎng)牡蠣殼黑品系幼蟲(chóng)存活率影響顯著(P< 0.05)，對(duì)長(zhǎng)牡蠣野生群體幼蟲(chóng)存活率無(wú)顯著影響(P> 0.05)(見(jiàn)表3)。在培育密度3和15個(gè)/mL實(shí)驗(yàn)組，隨投餌量增加殼黑品系幼蟲(chóng)存活率先升高后下降，野生群體幼蟲(chóng)各餌料投喂組間差異不顯著(P> 0.05)(見(jiàn)圖2)。在培育密度3個(gè)/mL，投餌量0.8×103cells·ind-1·d-1實(shí)驗(yàn)組，殼黑品系幼蟲(chóng)存活率為69.58%，顯著高于其它實(shí)驗(yàn)組(P< 0.05)，最終幼蟲(chóng)存活數(shù)量為2.09個(gè)/mL。在培育密度15個(gè)/mL、投餌量1.6×103cells·ind-1·d-1實(shí)驗(yàn)組，長(zhǎng)牡蠣殼黑選育品系和野生群體幼蟲(chóng)存活率最低，分別為23.01%和11.43%，最終幼蟲(chóng)存活數(shù)量分別為3.45和1.71個(gè)/mL。在培育密度7個(gè)/mL實(shí)驗(yàn)組，長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)各餌料投喂組間差異不顯著(P> 0.05)。在培育密度7個(gè)/mL、投餌量1.6×103cells·ind-1·d-1實(shí)驗(yàn)組殼黑選育品系幼蟲(chóng)存活率為45.83%，最終幼蟲(chóng)存活數(shù)量為3.21個(gè)/mL；兩群體比較中，除培育密度3個(gè)/mL、投餌量0.4×103cells·ind-1·d-1實(shí)驗(yàn)組外，殼黑選育品系幼蟲(chóng)存活率均高于野生群體幼蟲(chóng)。

2.3 培育密度和投餌量對(duì)長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)附著率的影響

培育密度和投餌量對(duì)長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)附著率有顯著交互作用(P< 0.05)(見(jiàn)表3)。在培育密度3個(gè)/mL實(shí)驗(yàn)組，隨投餌量增加長(zhǎng)牡蠣殼黑品系幼蟲(chóng)附著率先升高后下降，并在投餌量0.8×103cells·ind-1·d-1實(shí)驗(yàn)組長(zhǎng)牡蠣殼黑品系幼蟲(chóng)附著率顯著高于其它實(shí)驗(yàn)組(P< 0.05)；在培育密度7個(gè)/mL實(shí)驗(yàn)組，隨投餌量增加長(zhǎng)牡蠣殼黑品系幼蟲(chóng)附著率增大，長(zhǎng)牡蠣野生群體幼蟲(chóng)附著率各餌料實(shí)驗(yàn)組間差異不顯著(P> 0.05)。隨培育密度增加，長(zhǎng)牡蠣殼黑品系幼蟲(chóng)附著率逐步降低。在培育密度15個(gè)/mL，投餌量1.6×103cells·ind-1·d-1實(shí)驗(yàn)組，長(zhǎng)牡蠣殼黑品系幼蟲(chóng)附著率最低。且培育密度15個(gè)/mL實(shí)驗(yàn)組，隨投餌量增加長(zhǎng)牡蠣野生群體幼蟲(chóng)附著率顯著降低(P< 0.05)(見(jiàn)圖3)。除培育密度7個(gè)/mL、投餌量0.4×103cells·ind-1·d-1和培育密度15個(gè)/mL、投餌量0.4×103cells·ind-1·d-1實(shí)驗(yàn)組外，長(zhǎng)牡蠣殼黑品系幼蟲(chóng)附著率均高于野生群體。

圖2 不同培育密度和投餌量對(duì)殼黑品系和野生群體幼蟲(chóng)存活率的影響

圖3 不同培育密度和投餌量對(duì)殼黑品系和野生群體幼蟲(chóng)附著率的影響

3.討論

3.1 培育密度與投餌量對(duì)長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)生長(zhǎng)、存活和附著的影響

在適宜范圍內(nèi)，增加培育密度和投餌量會(huì)增大貝類(lèi)幼蟲(chóng)與餌料的相碰機(jī)率，提高幼蟲(chóng)的攝食效率，降低攝食行為所造成的能量消耗，對(duì)貝類(lèi)幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用[18-19]。本研究結(jié)果表明，在培育密度3和7個(gè)/mL實(shí)驗(yàn)組，隨投餌量增加長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)生長(zhǎng)速率顯著增大，并在培育密度7個(gè)/mL、投餌量1.6×103cells·ind-1·d-1實(shí)驗(yàn)組長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)生長(zhǎng)速率最高。而在培育密度15個(gè)/mL實(shí)驗(yàn)組，投餌量增加對(duì)長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)生長(zhǎng)速率沒(méi)有顯著影響。這表明高培育密度和餌料量之間存在拮抗作用，對(duì)長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)生長(zhǎng)速率產(chǎn)生影響。相似的研究結(jié)果在珠母貝(Pinctadamargaritifera)[15]、鳥(niǎo)蛤(Clinocardiumnuttallii)[18]、象拔蚌(Panopeagenerosa)[19]也有報(bào)道。這種拮抗作用可能與貝類(lèi)幼蟲(chóng)個(gè)體間競(jìng)爭(zhēng)加劇和過(guò)飽食有關(guān)。Liu等[18]研究表明在過(guò)高的培育密度條件下，貝類(lèi)幼蟲(chóng)個(gè)體間競(jìng)爭(zhēng)加劇，其生長(zhǎng)受到抑制。Ricovilla等[9]研究表明隨投餌量增大，貝類(lèi)幼蟲(chóng)攝食量逐步增加，生長(zhǎng)速率增大。但幼蟲(chóng)的攝食量存在閾值，超出閾值會(huì)使幼蟲(chóng)過(guò)飽食。過(guò)飽食狀態(tài)下幼蟲(chóng)會(huì)因消化器官負(fù)載而產(chǎn)生拒絕攝食的現(xiàn)象[13,20]，并產(chǎn)生過(guò)多假糞，增加機(jī)體能量支出使生長(zhǎng)速率降低。而在過(guò)高的培育密度條件下，增加投餌量，貝類(lèi)幼蟲(chóng)會(huì)因攝食效率的提高更容易達(dá)到過(guò)飽食狀態(tài)，不利于生長(zhǎng)發(fā)育[19]。實(shí)驗(yàn)期間，不同發(fā)育階段長(zhǎng)牡蠣殼黑選育品系幼蟲(chóng)的最適培育條件存在差異。從D形幼蟲(chóng)到殼頂幼蟲(chóng)及眼點(diǎn)幼蟲(chóng)，其最適培育密度組由15個(gè)/mL降低至7個(gè)/mL。其原因可能是在培育初期，殼黑品系幼蟲(chóng)規(guī)格較小，較高的培育密度環(huán)境下，有利于提高幼蟲(chóng)攝食效率。而隨著日齡增加，幼蟲(chóng)規(guī)格增大，個(gè)體間競(jìng)爭(zhēng)加劇，高培育密度環(huán)境不利于幼蟲(chóng)生長(zhǎng)。Doroudi 等[15]也得出相似結(jié)果，認(rèn)為在珠母貝幼蟲(chóng)在8日齡時(shí)，最適培育密度3個(gè)/mL，而在20日齡時(shí)，培育密度應(yīng)小于2個(gè)/mL。因此，本研究表明長(zhǎng)牡蠣殼黑品系幼蟲(chóng)培育期間，初期較高的培育密度和投餌量有利其快速生長(zhǎng)發(fā)育，當(dāng)殼黑品系幼蟲(chóng)殼高超過(guò)(142.00±1.00) μm時(shí)，降低培育密度有利于幼蟲(chóng)生長(zhǎng)和存活。

存活率是評(píng)價(jià)貝類(lèi)幼蟲(chóng)培育環(huán)境的指標(biāo)，是幼蟲(chóng)對(duì)不良環(huán)境耐受能力的體現(xiàn)[15]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明過(guò)高培育密度對(duì)長(zhǎng)牡蠣殼黑品系和野生群體幼蟲(chóng)存活率均產(chǎn)生負(fù)面影響，兩群體幼蟲(chóng)均在培育密度15個(gè)/mL、投餌量1.6×103cells·ind-1·d-1實(shí)驗(yàn)組存活率最低，分別為23.01%和11.43%。相似的研究結(jié)論在珠母貝[15]、象拔蚌[19]、毛蚶(Scapharcasubcrenata)[21]也有報(bào)道。培育密度過(guò)高會(huì)使水體中溶解氧含量降低，氨氮積累過(guò)多。在氨氮濃度較高的環(huán)境中，機(jī)體生理功能會(huì)受到負(fù)面影響，不利于貝類(lèi)幼蟲(chóng)生長(zhǎng)存活[22]。同時(shí)，糞便累積敗壞水質(zhì)，加速水中致病原生動(dòng)物及細(xì)菌的滋生，導(dǎo)致幼蟲(chóng)存活率下降[15]。投餌量適量增加可為貝類(lèi)幼蟲(chóng)提供充足的營(yíng)養(yǎng)提高存活率。而過(guò)高的投餌量會(huì)使養(yǎng)殖水體中硝酸鹽含量上升，導(dǎo)致幼蟲(chóng)的死亡率升高[23-24]。

附著變態(tài)是貝類(lèi)由浮游幼蟲(chóng)向稚貝轉(zhuǎn)變的重要發(fā)育階段。當(dāng)培育環(huán)境不適宜時(shí)，貝類(lèi)幼蟲(chóng)會(huì)延長(zhǎng)附著變態(tài)時(shí)間，最終導(dǎo)致大量死亡[25]。因此，附著率的高低是苗種培育工作成功的重要因素。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，投餌量適量增加有利于貝類(lèi)幼蟲(chóng)附著，但過(guò)高的投餌量會(huì)使幼蟲(chóng)附著率降低。且隨培育密度增大長(zhǎng)牡蠣殼黑品系幼蟲(chóng)附著率逐步降低。類(lèi)似的結(jié)果在其它雙殼貝類(lèi)也有報(bào)道。Robert等[26]研究發(fā)現(xiàn)食用牡蠣(Ostreaedulis)隨餌料量增加其附著率先升高后降低。Liu等[27]對(duì)文蛤(Meretrixmeretrix)研究表明培育密度增加會(huì)導(dǎo)致文蛤幼蟲(chóng)附著變態(tài)時(shí)間的延長(zhǎng)。高霄龍等[21]對(duì)毛蚶研究也表明隨培育密度增加，不僅毛蚶幼蟲(chóng)附著變態(tài)時(shí)間被延長(zhǎng)，且變態(tài)率也逐漸降低。出現(xiàn)此現(xiàn)象的原因可能是適量增加投餌量可補(bǔ)充貝類(lèi)幼蟲(chóng)附著變態(tài)所需的能量，投餌過(guò)多會(huì)增加殘餌導(dǎo)致水質(zhì)惡化，不利于幼蟲(chóng)附著。高培育密度環(huán)境下，因貝類(lèi)幼蟲(chóng)生長(zhǎng)緩慢其附著變態(tài)需要更多時(shí)間。且存活率實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在高培育密度環(huán)境下長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)的死亡率會(huì)上升，這會(huì)進(jìn)一步降低長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)附著率。

3.2 長(zhǎng)牡蠣殼黑品系與野生群體幼蟲(chóng)的比較

研究表明，不同殼色的同種貝類(lèi)在生長(zhǎng)和存活等性狀上存在差異[28-30]，本研究中也發(fā)現(xiàn)培育密度對(duì)長(zhǎng)牡蠣野生群體幼蟲(chóng)生長(zhǎng)速率影響顯著，而對(duì)長(zhǎng)牡蠣殼黑品系幼蟲(chóng)影響不顯著。且實(shí)驗(yàn)期間，在培育密度15個(gè)/mL實(shí)驗(yàn)組長(zhǎng)牡蠣殼黑品系幼蟲(chóng)殼高始終高于野生群體幼蟲(chóng)。此外，除投餌量0.4×103cells·ind-1·d-1實(shí)驗(yàn)組外，長(zhǎng)牡蠣殼黑品系幼蟲(chóng)生長(zhǎng)速率、存活率和附著率均高于野生群體幼蟲(chóng)。這些性狀優(yōu)勢(shì)可能與累代的人工定向選擇有關(guān)。人工選擇育種對(duì)雙殼貝類(lèi)生長(zhǎng)、存活和抗病等性狀的改良已有諸多報(bào)道，國(guó)內(nèi)外已成功培育出長(zhǎng)牡蠣[31]、悉尼巖牡蠣[32]、馬氏珠母貝(Pinctadafucata)[33]和蝦夷扇貝(Patinopectenyessoensis)[34]等經(jīng)濟(jì)貝類(lèi)的快速生長(zhǎng)選育品系；長(zhǎng)牡蠣抗皰疹病毒(OsHV-1)選育系[35]和悉尼巖牡蠣抗寄生蟲(chóng)病(QX)選育品系[36]等培育工作也取得了較好研究成果。

鄧傳敏等[37]研究發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)牡蠣殼金選育系的攝食率顯著高于普通群體。Bayne等[38]對(duì)悉尼巖牡蠣研究中也發(fā)現(xiàn)其快速生長(zhǎng)選育系攝食能力顯著優(yōu)于野生群體。這表明雙殼貝類(lèi)選育品系有更高攝食能力，充足的餌料攝食量是發(fā)揮其性狀優(yōu)勢(shì)的前提。本研究也發(fā)現(xiàn)投餌量對(duì)長(zhǎng)牡蠣殼黑品系幼蟲(chóng)存活率影響顯著。且在0.4×103cells·ind-1·d-1投餌量組，長(zhǎng)牡蠣殼黑選育品系幼蟲(chóng)生長(zhǎng)速率、存活率與附著率出現(xiàn)低于野生群體幼蟲(chóng)現(xiàn)象，這表明長(zhǎng)牡蠣殼黑選育品系幼蟲(chóng)對(duì)餌料量有更高的需求，而低餌料投喂量不能為其提供充足的營(yíng)養(yǎng)需求會(huì)導(dǎo)致其生長(zhǎng)速率、存活率和附著率降低。

4 結(jié)語(yǔ)

本文研究了培育密度和投餌量及其協(xié)同作用對(duì)長(zhǎng)牡蠣殼黑品系和野生群體幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)、存活及附著變態(tài)的影響。結(jié)果表明，D形幼蟲(chóng)時(shí)期長(zhǎng)牡蠣殼黑選育品系最適培育條件為培育密度15個(gè)/mL、投餌量1.6×103cells·ind-1·d-1。但隨著幼蟲(chóng)規(guī)格的增大，過(guò)高的培育密度和餌料量之間存在拮抗作用，并不利于幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育。在殼頂幼蟲(chóng)和眼點(diǎn)幼蟲(chóng)時(shí)期，其最適培育條件為培育密度7個(gè)/mL、投餌量1.6×103cells·ind-1·d-1。相對(duì)于野生群體幼蟲(chóng)，殼黑選育品系幼蟲(chóng)有著更高的餌料需求，能適應(yīng)更高的培育密度環(huán)境，其生長(zhǎng)、存活和附著性狀優(yōu)于野生群體幼蟲(chóng)。