海南不同地區(qū)鷓鴣茶揮發(fā)性成分HS-SPME-GC/MS分析與評(píng)價(jià)

瞿兆蕙，吳淑敏，杜磊，匡婷，楊志文，胡曉蘋，云永歡，李娟玲，*，張偉敏，*

（1.海南大學(xué)食品學(xué)院，海南?？?70228；2.海南大學(xué)熱帶農(nóng)林學(xué)院海南海口570228；3.海南省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所，海南?？?70203）

鷓鴣茶（Mallotus oblongifolius（Miq.）Muell-Arg）系大戟科（Euphorbiaceae）、野桐屬（Mallotus）植物的干燥葉，又名山苦茶、禾姑茶、毛茶，自古以來是海南民間的一種具有濃郁地方特色和民族特色的代茶飲料植物和重要的藥食同源的植物。鷓鴣茶主要分布在海南山區(qū)、丘陵和沿海山丘等地，以文昌銅鼓嶺和萬寧東山嶺出產(chǎn)的最為有名。此外，零星分布在廣東、廣西和云南等地區(qū)。在東南亞中印半島和蘇門答臘島亦有分布[1-2]。2018 年 2 月頒布的 DB S46/001-2018《海南省食品安全地方標(biāo)準(zhǔn)鷓鴣茶》明確了鷓鴣茶的食品屬性并擁有了生產(chǎn)和食品安全監(jiān)管的技術(shù)依據(jù)。傳統(tǒng)鷓鴣茶屬于毛茶類，采集鷓鴣茶葉子后進(jìn)行清洗、陰干、搓揉成團(tuán)，用繩子串成珠串即可用來沖飲。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)研究表明，鷓鴣茶具有較強(qiáng)的解油膩、助消化、清熱消暑和止渴生津的功效[3]。而現(xiàn)代藥理學(xué)已證實(shí)鷓鴣茶具有抗菌、利膽、鎮(zhèn)痛、抗氧化、抗衰老、抗疲勞、增強(qiáng)免疫、抗動(dòng)脈硬化等功效[4-8]，已在海南按照綠茶加工與茶飲料制備工藝開發(fā)成為具有濃郁地方特色的暢銷旅游產(chǎn)品—鷓鴣顆粒茶并暢銷國(guó)內(nèi)外。

香氣是茶葉的重要品質(zhì)之一，茶葉中的芳香物質(zhì)亦稱“揮發(fā)性香氣組分”。在感官評(píng)審中，香氣對(duì)茶葉感官品質(zhì)的貢獻(xiàn)率達(dá)25%～35%，因此對(duì)茶葉香氣成分的研究意義重大。茶葉中常見的香氣提取方法有：減壓蒸餾萃取法（vacuum distillation extraction，VDE）[9]、頂空分析法（headspace analysis，HAS）[10]、吹掃捕集熱脫附解吸法（purge and trap thermal desorption，PTTD）[11]、超臨界流體萃取法（supercritical fluid extraction，SFE）[12]、同時(shí)蒸餾萃取法（simultaneous distillation and solvent extraction，SDE）[13]、固相微萃取法（solid-phase microextraction，SPME）[14]等。各種提取方法對(duì)茶葉香氣成分萃取各有千秋，其中VDE 法萃取水溶性香氣成分容易而萃取脂溶性香氣成分難[15]；HAS 萃取香氣成分量少且靈敏度低[10]；PTTD 法目前研究少[11，16]；SFE 法萃取效果好，但成本過高、適用性差[17]；SDE 法具有重現(xiàn)性好、效率高等優(yōu)點(diǎn)，但對(duì)于熱敏性香氣成分萃取效果不佳[18]；而SPME 法是一種靈敏、無溶劑且經(jīng)濟(jì)的樣品制備方法，該法不僅可縮短分析時(shí)間，也已經(jīng)在不同類型茶葉揮發(fā)性組分的提取中被廣泛應(yīng)用[19-21]。

鑒于沖泡后的鷓鴣茶，香味濃烈，辨認(rèn)度極高。林連波等[22]采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析（gas chromatography-mass spectrometer，GC-MS）從鷓鴣茶葉揮發(fā)油中共分離鑒定出了54 種成分，主要為十六碳酸、（z，z）-9，12-十八碳二烯酸、γ-欖香烯和葉綠醇。韓碧群等[23]采用GC-MS 從鷓鴣茶中分離鑒定出了50 種揮發(fā)性成分，含量最多的是十六碳酸（20.78%）。趙秀玲等[24]采用GC-MS 從鷓鴣茶精油中鑒定出68 種化學(xué)成分，占精油化學(xué)成分總量的85.472%。初眾等[25]利用HSSPME-GC/MS 從鷓鴣茶茶粉和速溶粉中共鑒定出72 種揮發(fā)性成分，其中茶粉含44 種，速溶粉含52 種，二者相同揮發(fā)性成分為26 種。由于受產(chǎn)地、品種、環(huán)境、生長(zhǎng)周期、生產(chǎn)工藝等因素的影響，不同品種、同一品種和不同產(chǎn)地、不同生長(zhǎng)期的茶葉香氣組成也有較大差別，對(duì)茶葉的品質(zhì)評(píng)定影響也較大。由此可以看出，國(guó)內(nèi)對(duì)鷓鴣茶揮發(fā)性成分的研究主要有單一鷓鴣茶和鷓鴣茶果皮，而對(duì)于不同地區(qū)鷓鴣茶香氣成分的對(duì)比分析甚少。而海南是我國(guó)最具熱帶海洋性氣候特色的地方，全年暖熱，雨量充沛，干濕季節(jié)明顯，常風(fēng)較大，熱帶風(fēng)暴和臺(tái)風(fēng)頻繁，氣候資源多樣。海南島大部分地區(qū)年平均氣溫在22.5 ℃～25.6 ℃之間，中部山區(qū)略低于23 ℃，南部、西部略高于25 ℃，等溫線向南彎曲呈弧線，由中部山區(qū)向沿海遞增，沿海高于內(nèi)陸，南部高于北部。海南獨(dú)特的地理位置和氣候資源多樣性是否對(duì)鷓鴣茶揮發(fā)性成分的影響不得而知。因此，本研究采用HS-SPME-GC/MS 對(duì)海南20 個(gè)地區(qū)的鷓鴣茶揮發(fā)性成分進(jìn)行測(cè)定，結(jié)合主成分分析和聚類分析探討海南各主產(chǎn)地鷓鴣茶樣品中揮發(fā)性成分的差異性，以便初步構(gòu)建海南鷓鴣茶主要揮發(fā)性成分的指紋圖譜，為鷓鴣茶產(chǎn)地追溯、品質(zhì)評(píng)價(jià)、質(zhì)量控制以及開發(fā)利用提供數(shù)據(jù)支撐和理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試材料

鷓鴣茶樣品于2016 年12 月由海南大學(xué)熱帶農(nóng)林學(xué)院李娟玲副教授采于海南省境內(nèi)，并經(jīng)其鑒定核實(shí)產(chǎn)地。分別分布在海南的?？?、萬寧、三亞、東方、臨高、樂東、保亭、儋州、定安、屯昌、文昌、昌江、澄邁、瓊中、瓊山、瓊海、白沙、通什（五指山）和陵水等20 個(gè)地方，見表1。

表1 不同地區(qū)的海南島鷓鴣茶樣品Table 1 Samples of partridge tea from 20 different geographical origins in Hainan island

1.1.2 儀器

DHG-9070A 電熱鼓風(fēng)干燥箱：上海一恒科學(xué)儀器有限公司；EL204 電子分析天平：梅特勒有限-托利多儀器（上海）有限公司；300Y 多功能粉碎機(jī)：伯歐五金廠；08-2T 恒溫磁力攪拌器：上海梅穎浦儀器儀表制造有限公司；57330-U 固相微萃取裝置、50/30 μm DVB/CAR/PDMS 固相微萃取針、手動(dòng)SPME 進(jìn)樣器：美國(guó)Supelco 公司；AUTOSYSTEM XL 型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀：美國(guó) Perkinelmer 公司；DB-WAX（0.25 mm×0.25 μm×50 m）氣相色譜柱、Agilent 7890A-5975C 相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀：美國(guó)Agilent 公司。

1.2 方法

1.2.1 樣品萃取方法

取1.00 g 樣品置于20 mL 萃取瓶中，夾子固定置于70 ℃水浴中，平衡10 min 后，插入萃取針萃取30 min。萃取針使用前，在氣質(zhì)進(jìn)樣口活化20 min（250 ℃）。

1.2.2 GC-MS 條件

GC 條件：進(jìn)樣口溫度250 ℃，氣質(zhì)接口溫度250 ℃，載氣流速1.5 mL/min。

升溫程序：初始 50 ℃，保持 1 min，以 5 ℃/min 升溫到 100 ℃保持 5 min；4 ℃/min 升溫到 140 ℃保持10 min；4 ℃/min 升溫到 180 ℃保持 10 min；4 ℃/min升溫到 240 ℃保持 10 min；5 ℃/min 升溫到 250 ℃保持10 min。

MS 條件：離子源溫度230 ℃，四級(jí)桿溫度150 ℃，電子轟擊（electron impact，EI）電離 70 eV，全掃描50 Da～550 Da。

1.3 鷓鴣茶揮發(fā)性成分的定性和定量分析

1.3.1 定性分析

揮發(fā)性成分通過GC-MS 質(zhì)譜庫NIST11 檢索結(jié)果，結(jié)合匹配度（＞40%）以及參考文獻(xiàn)對(duì)生鷓鴣茶中揮發(fā)性成分進(jìn)行定性分析。

1.3.2 定量分析

根據(jù)總離子流圖檢索NIST11 譜庫結(jié)合參考文獻(xiàn)分析鷓鴣茶揮發(fā)性特征組成，應(yīng)用峰面積歸一化法計(jì)算組分相對(duì)百分含量。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用Origin 軟件8.0 對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析及作圖處理。采用Matlab 7.0 平臺(tái)下安裝的PLS Toolbox 5.0.2 版本對(duì)鷓鴣茶揮發(fā)性成分進(jìn)行主成分分析和聚類分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶烯烴類揮發(fā)性化合物種類及含量測(cè)定

海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶烯烴類揮發(fā)性化合物種類及含量測(cè)定結(jié)果見圖1。

由圖1 可知：20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶的烯烴類揮發(fā)性化合物種類在28 種～39 種之間，含量在54.87%～79.73%之間，其中種類最少的是NPNC 產(chǎn)地，種類最多的是GPS 產(chǎn)地；含量最低的是ZJC 產(chǎn)地，為54.87%；含量最高的是BSL 產(chǎn)地，為79.73 %。在所有烯烴類化合物中，α-愈創(chuàng)木烯（0.96 %～6.97 %）、α-可巴烯（3.23%～11.34%）、β-波旁烯（1.85%～7.95%）、α-依蘭油烯（2.00%～11.2%）和乙位石竹烯（0.00%～20.25%）含量最高。

圖1 海南島20 產(chǎn)地個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶烯烴類揮發(fā)性化合物種類及含量Fig.1 Species and contents of olefin volatile components of partridge tea from 20 different geographical origins in Hainan island

2.2 海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶醇類揮發(fā)性化合物種類及含量測(cè)定

海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶醇類揮發(fā)性化合物種類及含量測(cè)定結(jié)果見圖2。

圖2 海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶醇類揮發(fā)性化合物種類及含量Fig.2 Species and contents of alcohol volatile compounds of partridge tea form 20 different geographical origins in Hainan island

由圖2 可知：20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶的醇類揮發(fā)性化合物種類在7 種～19 種之間、含量在1.30%～6.12%之間。其中種類最少的是DSL 產(chǎn)地；種類最多的是GMS 產(chǎn)地；ZJC 產(chǎn)地的含量最低，為 1.30%；BSL 產(chǎn)地的含量最高，為6.12%。其中含量較高的醇類揮發(fā)性物質(zhì)是桉油烯醇（0.50 %～2.21 %）和反-橙花叔醇（0.00%～1.53%）。韓碧群等對(duì)鷓鴣茶中揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行了鑒定，得出相對(duì)含量在5%以上的主要揮發(fā)性物質(zhì)中，葉綠醇的含量為5.66%[10]。

2.3 海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶醛類揮發(fā)性化合物種類及含量測(cè)定

海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶醛類揮發(fā)性化合物種類及含量測(cè)定結(jié)果見圖3。

圖3 海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶醛類揮發(fā)性化合物種類及含量Fig.3 Species and contents of aldehyde volatile compounds of partridge tea from 20 different geographical origins in Hainan island

由圖3 可知：20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶的醛類揮發(fā)性化合物種類在13 種～24 種之間、含量在1.61%～8.03%之間。其中NPNC 產(chǎn)地的種類最少，為13 種；ZJC 產(chǎn)地的種類最多，為24 種；GMS 產(chǎn)地的含量最低，為1.61%；TGL 產(chǎn)地的含量最高，為8.03%。其中含量較高的醛類揮發(fā)性化合物分別為2-甲基-2-丁烯醛（0.00%～0.56%）、己醛（0.12%～0.62%）和反-2-己烯醛（0.30%～1.98%），可以看出醛類揮發(fā)性化合物的含量由于地區(qū)不同差異較大。

2.4 海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶酮類揮發(fā)性化合物種類及含量測(cè)定

海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶酮類揮發(fā)性化合物種類及含量測(cè)定結(jié)果見圖4。

由圖4 可知：20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶的酮類揮發(fā)性化合物種類在3 種～9 種之間、含量在0.38%～6.32%之間。其中 XL 產(chǎn)地的種類最少，為 3 種；TGL 和 TX 產(chǎn)地的種類最多，為9 種；SSC 產(chǎn)地的含量最低，為0.38%；GX 產(chǎn)地的含量最高，為6.32%。在鷓鴣茶酮類揮發(fā)性化合物中，6-甲基-5-庚烯-2-酮（0.00%～0.89%）、香葉基丙酮（0.00%～2.07%）和β-紫羅蘭酮（0.00%～2.07%）這3 種酮類物質(zhì)含量較高，可知在20 個(gè)不同產(chǎn)地產(chǎn)出的鷓鴣茶中，酮類物質(zhì)的種類和含量差異較大，酮類揮發(fā)性化合物含量占總揮發(fā)性化合物含量比例較低。

圖4 海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶酮類揮發(fā)性化合物種類及含量Fig.4 Species and contents of ketone volatile compounds of partridge tea from 20 different geographical origins in Hainan island

2.5 海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶酯類揮發(fā)性化合物種類及含量測(cè)定

海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶酯類揮發(fā)性化合物種類及含量測(cè)定結(jié)果見圖5。

圖5 海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶酯類揮發(fā)性化合物種類及含量Fig.5 Species and contents of ester volatile compounds in partridge tea from 20 different geographical origins in Hainan island

由圖5 可知：20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶的酯類揮發(fā)性化合物種類在1 種～7 種之間、含量在0.03%～0.43%之間。其中LCNC 和GPS 產(chǎn)地的種類最少，為1 種；SSC 產(chǎn)地的種類最多，為7 種；GPS 產(chǎn)地的含量最低，為0.03%；GX 產(chǎn)地的含量最高，為0.43%。酯類揮發(fā)性化合物中，在20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶中均被發(fā)現(xiàn)含有水楊酸甲酯、葫蘆巴內(nèi)酯和鄰苯二甲酸二丁酯這3 種酯類物質(zhì)。

2.6 海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶酸類揮發(fā)性化合物種類及含量測(cè)定

海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶酸類揮發(fā)性化合物種類及含量測(cè)定結(jié)果見圖6。

圖6 海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶酸類揮發(fā)性化合物種類及含量Fig.6 Species and contents of acid volatile compounds of partridge tea from 20 different geographical origins in Hainan island

由圖6 可知：20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶的酸類揮發(fā)性化合物種類在0～4 種之間、含量在0.00%～0.70%之間。其中GMS 和GPS 產(chǎn)地鷓鴣茶不含有酸類揮發(fā)性物質(zhì)，種類為0 種、含量為0；LTCC 產(chǎn)地的種類最多，為4 種；ZJC 產(chǎn)地的含量最高，為0.70%。酸類揮發(fā)性化合物在鷓鴣茶揮發(fā)性化合物中含量非常少，其中反-2-己烯酸除了 CMS、GX、ZJC 和 GPS 這 4 個(gè)地方的鷓鴣茶揮發(fā)性化合物沒被檢測(cè)到，其他16 個(gè)地方都被檢測(cè)出來，證明反-2-己烯酸在鷓鴣茶的揮發(fā)性化合物中廣泛存在。

2.7 海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶呋喃類揮發(fā)性化合物種類及含量測(cè)定

海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶呋喃類揮發(fā)性化合物種類及含量測(cè)定結(jié)果見圖7。

圖7 海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶呋喃類揮發(fā)性化合物種類及含量Fig.7 Species and contents of furan volatile compounds of partridge tea from 20 different geographical origins in Hainan island

由圖7 可知：20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶的呋喃類揮發(fā)性化合物種類在1 種～5 種之間、含量在0.07%～1.29%之間。其中SSC、GMS 和GPS 產(chǎn)地的種類最少，為1 種；DSL 產(chǎn)地的種類最多，為 5 種；SSC 和 GMS 產(chǎn)地的含量最低，為0.07%；ZJC 產(chǎn)地的含量最高，為1.29%。在20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶的呋喃類揮發(fā)性化合物中，2-戊基呋喃全部被檢測(cè)出，2-乙基呋喃基本被檢測(cè)出，證明這兩種呋喃類物質(zhì)廣泛存在于鷓鴣茶中。

2.8 海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶酚類揮發(fā)性化合物種類及含量測(cè)定

海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶酚類揮發(fā)性化合物種類及含量測(cè)定結(jié)果見圖8。

圖8 海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶酚類揮發(fā)性化合物種類及含量Fig.8 Species and contents of phenolic volatile compounds of partridge tea from 20 different geographical origins in Hainan island

由圖8 可知：20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶的酚類揮發(fā)性化合物種類在0～2 種之間、含量在0.00%～0.29%之間。其中除了NPNC、LCNC 和GX 3 個(gè)產(chǎn)地之外，其余17 個(gè)產(chǎn)地不含有酚類揮發(fā)性物質(zhì)，種類數(shù)和含量均為0；GX 產(chǎn)地的種類最多，為2 種；LCNC 產(chǎn)地的含量最高，為0.29%。酚類揮發(fā)性化合物只在NPNC、LCNC 和GX3 個(gè)產(chǎn)地少量被檢測(cè)出，其中NPNC 中檢測(cè)出甲基麥芽酚，LCNC 檢測(cè)出4-乙基苯酚，GX 中檢測(cè)出4-乙基苯酚和苯酚這幾種物質(zhì)。

2.9 海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶其他揮發(fā)性化合物種類及含量測(cè)定

海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶其他揮發(fā)性化合物種類及含量測(cè)定結(jié)果見圖9。

由圖9 可知：20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶的其他揮發(fā)性化合物種類在0～5 種之間、含量在0.00%～9.22%之間。其中GX 產(chǎn)地不含有其他揮發(fā)性化合物。在其余19 個(gè)產(chǎn)地中，NPNC 種類最少，為 1 種；BSL、XL、JF 和ZCED 種類最多，為 5 種；BW 產(chǎn)地的含量最低，為0.12%；TGL 產(chǎn)地的含量最高，為9.22%。其中，萘基本在每個(gè)產(chǎn)地的鷓鴣茶揮發(fā)性化合物中都能被少量檢測(cè)出。

圖9 海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶其他揮發(fā)性化合物種類及含量Fig.9 Species and contents of other volatile compounds of partridge tea from 20 different geographical origins in Hainan island

2.10 主成分和聚類分析

海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶揮發(fā)性成分主成分分析和聚類分析結(jié)果見圖10。

圖10 海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶揮發(fā)性成分主成分分析和聚類分析Fig.10 Principal component analysis and cluster analysis of volatile components of partridge tea from 20 different geographical origins in Hainan island

由圖10 A 聚類分析結(jié)果可以看出，海南島20 個(gè)不同產(chǎn)地鷓鴣茶揮發(fā)性成分可將鷓鴣茶來源分為兩大支：第一支有 ZCED，TX，JF，GX 和 BW 來源鷓鴣茶樣品，其余樣品都聚在第二支。通過PCA 分析（2PC）圖10 B 可以得出，各樣本點(diǎn)的二維數(shù)據(jù)如下：ZCED（15.33，14.77），TX （14.56，13），JF（12.16，11.48），GX（13.51，8.754），BW （12.3，6.279），DPC（14.5，1.739），QXL（11.71，-1.615），TGL（14.78，-0.9725），DSL（15.4，-1.851），XP （16.59，-2.92），GPS （18.74，-2.678），SSC（17.66，-3.993），LCNC（23.68，-4.257），LTCC（20.09，-3.908），BSL（19.8，-3.834），GMS（15.73，-3.536），NPNC（16.57，1.127），XL（17.4，-2.937），PJL（20.99，-2.247），ZJC（17.05，-6.875）。通過 PCA 和 HCA 綜合分析表明，造成這20 個(gè)樣本差異性兩個(gè)最大成分分別為PC1、PC2（PC1 為第一主成分，PC2 為第二主成分），貢獻(xiàn)率分別為64.87%和9.29%；由于樣品的香氣組成越接近，樣本在PCA 中的距離越接近，由得分圖可知，ZCEDTXJFGX 及BW 也即海南島南部區(qū)域（分別是ZCEDTXJFGX 及 BW 三亞、萬寧、樂東、陵水、保亭）樣本的香氣成分較接近，聚為一類；而另外15 個(gè)樣本分別來自沿海南島的北部、東部及南部地區(qū)（?？凇⑽牟?、瓊海、萬寧、定安、屯昌、瓊中、五指山、萬寧、陵水、保亭、三亞及儋州，儋州較特殊）的樣本香氣組成接近，聚為一類。而分屬于兩類的樣本，由于它們受主成分PC1 和PC2 影響（橫、縱坐標(biāo)軸上的距離）差異較大，樣本間的差異性較大，初步可以看出呈現(xiàn)出了一定的地理分布特征。

3 結(jié)論與討論

由于鷓鴣茶的制作未經(jīng)傳統(tǒng)炒茶工藝，為野生的樹葉清蒸晾制而成，風(fēng)味清香獨(dú)特，具有濃烈的令人舒適的“零陵香氣”，沖泡后的鷓鴣茶，香味濃烈，辨認(rèn)度極高。而飲用時(shí)別具風(fēng)味、甘冽爽口，一直為海南人民長(zhǎng)期飲用的一種奇特的野生別樣茶，同時(shí)也被歷代文人墨客譽(yù)為“靈芝草”，非常受歡迎[1，26]。

本試驗(yàn)從20 個(gè)產(chǎn)地鷓鴣茶中共檢出193 個(gè)組分，超過了趙秀玲[24]等報(bào)道的鷓鴣茶精油中含有68 種揮發(fā)性成分和初眾等[25]從鷓鴣茶茶粉和鷓鴣茶速溶粉中鑒定出的72 種揮發(fā)性成分。一方面可能與試驗(yàn)所用的鷓鴣茶產(chǎn)地有關(guān)，另一方面可能與試驗(yàn)定性分析所采用匹配度（＞40%）較低有關(guān)。從鷓鴣茶烯烴類物質(zhì)組成和種類來看，本研究共從20 個(gè)產(chǎn)地鷓鴣茶中檢測(cè)出62 中烯烴類化合物，含量54.87%～79.73%，均超過鷓鴣茶精油和茶粉中烯烴類物質(zhì)含量[24-25]。另外從20種產(chǎn)地鷓鴣茶中，除烯烴類外其他成分包括酮類、酯類、酸類、呋喃類、酚類、其他類化合物分別檢出17 種、12 種、8 種、7 種、3 種、10 種，其中醇、醛類化合物各檢出37 種。

目前，揮發(fā)性成分已被廣泛用于咖啡豆、艾葉等農(nóng)產(chǎn)品地理來源鑒別、品質(zhì)好壞區(qū)分以及質(zhì)量調(diào)控等方面[27-28]。本試驗(yàn)通過GC-MS 分析結(jié)果表明，鷓鴣茶中含量較為豐富的的特征峰為反-2-己烯醛（0.12%～3.64%），6-甲基-5-庚烯-2-酮（0.00%～0.89%），蓽澄茄油烯（1.16%～6.85%），α-愈創(chuàng)木烯（0.96%～6.97%），依蘭烯（0.60%～1.53%），Α-可巴烯（3.23%～11.34%），β-波旁烯（1.85%～7.79%），（-）-Α-古蕓烯（0.22%～3.94%），檀香烯（0.00%～2.58%），乙位石竹烯（0.00%～20.25%），香葉基丙酮（0.00%～1.93%），香橙烯（0.00%～7.49 %），α-衣蘭油烯（6.47 %～13.48 %），β-紫羅蘭酮（0.00 %～3.53 %），佛術(shù)烯（0.00～6.20 %），杜松萜烯（0.32%～11.88%），律草烯（0.00%～10.72%），香樹烯（0.00%～8.72%），β-瑟林烯（0.00%～8.24%），丁位愈創(chuàng)木烯（1.27%～6.40 %），杜松-1，4-二烯（0.30 %～5.27 %），反-橙花叔醇（0.00%～1.92%）；桉油烯醇（0.37%～2.21%）和喇叭茶醇（0.00%～1.95%）。這些成分對(duì)構(gòu)成鷓鴣茶特征風(fēng)味成分具有重要作用。由此可見，鷓鴣茶中呈香物質(zhì)豐富且多樣，具有較高的研究?jī)r(jià)值。

此外，通過對(duì)20 個(gè)產(chǎn)地鷓鴣茶樣品揮發(fā)性成分進(jìn)行聚類和主成分分析發(fā)現(xiàn)，造成這20 個(gè)樣本差異性的兩個(gè)最大成分為PC1、PC2，貢獻(xiàn)率分別為64.87%和9.29%，鷓鴣茶揮發(fā)性成分之間呈現(xiàn)出了一定的地理分布特征。在李娟玲等[27]通過分子標(biāo)記（inter-simple sequence repeat，ISSR）對(duì)其中的66 份鷓鴣茶種質(zhì)資源進(jìn)行遺傳多樣性分析和聚類分析結(jié)果表明，野生鷓鴣茶居群按照地理位置可劃分為萬寧類群、三亞類群、保亭類群和文昌類群，說明了不同產(chǎn)地鷓鴣茶之間有區(qū)別。本試驗(yàn)的結(jié)果不僅了解了鷓鴣茶香氣成分的種類，也初步弄清楚了不同產(chǎn)地與鷓鴣茶揮發(fā)性成分與含量的差異和聯(lián)系，為鷓鴣茶的創(chuàng)新開發(fā)利和產(chǎn)地追溯奠定了初步基礎(chǔ)。今后可以進(jìn)一步采用代謝組學(xué)等分析方法從不同產(chǎn)地氣候環(huán)境與鷓鴣茶揮發(fā)性成分之間的相關(guān)性方面深入研究，探討鷓鴣茶產(chǎn)地對(duì)揮發(fā)性成分不同的影響機(jī)制。