全自動毛細管電泳系統(tǒng)在地中海貧血篩查中的應(yīng)用

鄧 利 勝

(廣東省龍川縣婦幼保健院 河源 517300)

地中海貧血是臨床上較為常見的貧血類型，主要是因為珠蛋白鏈減少或消失導(dǎo)致的血紅蛋白異常性疾病，主要表現(xiàn)為溶血性貧血，影響患者的身體健康。在地中海貧血的診斷上，主要采用PCR(聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)與其他分子生物學(xué)方法相結(jié)合的方式，但是在篩查診斷過程中操作較為繁瑣，且費用高，故難以大面積推廣[1～2]。全自動毛細管電泳儀是目前最先進的且自動化程度最高的儀器，能夠提供原試管連續(xù)進樣到最后電泳結(jié)果剖析的全過程。本次研究旨在探究地中海貧血篩查中全自動毛細管電泳系統(tǒng)的應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2016年8月～2018年6月經(jīng)我院診斷證實為地中海貧血篩查的190患者作為此次研究對象，分別給予瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)與全自動毛細血管電泳技術(shù)進行診斷，年齡22～32歲，平均年齡(27.15±2.23)歲。所有研究對象均采用PCR基因診斷技術(shù)進行確診。

1.2 研究方法

采集研究對象6ml空腹靜脈血，平均放置在3個試管中，每個試管中2ml。1號試管注入已加EDTA-K2血常規(guī)管中，用血細胞分析儀進行血常規(guī)檢測，其余兩個試管分別采用全自動毛細管電泳系統(tǒng)、瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)進行血紅蛋白電泳檢測，具體的檢測方法如下。

瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)：使用法國進口的電泳系統(tǒng)和配套掃描系統(tǒng)，配套血紅蛋白電泳試劑盒。根據(jù)儀器說明書上的內(nèi)容，逐步進行洗滌、溶血制作溶血液。點樣：在電泳單元中放入點樣梳，使用相應(yīng)程序進行電泳。半小時后，儀器自動完成電泳和烘干等步驟。完成電泳后，要將膠片及時取出，放入到儀器染色單元。選擇相應(yīng)的程序，對儀器進行自動沖洗、染色、脫色、烘干。染色結(jié)束后，將膠片取出，并使用配套系統(tǒng)掃描結(jié)果。

全自動毛細管電泳系統(tǒng)：使用法國進口的全自動毛細血管電泳儀和配套血紅蛋白電泳試劑盒，將標本直接放試管架，儀器自動吸樣，溶血，稀釋，電泳，出結(jié)果。

1.3 判定標準[3]

當血常規(guī)結(jié)果出現(xiàn)異常且MCV<82fl、MCH<27pg，HbA2<3.2%，但是血清鐵結(jié)果正常，為α-地中海貧血；HbA2<3.5%、HbF正?；蛴兴黾?，為β-地中海貧血。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 兩種檢查技術(shù)檢查結(jié)果的比較

全自動毛細血管電泳技術(shù)檢出α-地中海貧血與β-地中海貧血率均高于瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)，兩種檢查技術(shù)在HbH檢出率中比較并無差異(P>0.05)，見表1。

表1 兩種檢查技術(shù)檢查結(jié)果的比較[n(%)]

疾病類型例數(shù)瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)全自動毛細血管電泳技術(shù)χ2Pα-地中海貧血2214(63.64)20(90.91)4.658<0.05β-地中海貧血2617(65.38)25(96.15)7.923<0.05HbH65(83.33)6(100.00)1.090>0.05

2.2 各種類型地中海貧血的紅細胞、血紅蛋白、平均紅細胞體積、平均紅細胞血紅蛋白含量指標對比分析

通過對各種地中海貧血患者的紅細胞、血紅蛋白、平均紅細胞體積、平均紅細胞血紅蛋白含量等指標進行比較，發(fā)現(xiàn)地中海貧血患者的平均紅細胞體積、平均紅細胞血紅蛋白含量與異常血紅蛋白病、HbCS而言相對較低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

類型紅細胞(×1012/L)血紅蛋白(g/L)平均紅細胞體積(fl)平均紅細胞血紅蛋白(pg)α-地中海貧血4.52±1.21120.25±12.5582.23±0.1526.21±0.07β-地中海貧血4.68±1.22117.84±12.2276.54±0.1226.56±0.08HbCS4.33±1.18118.49±12.4883.39±0.19a27.48±0.09aHbH病4.47±1.20117.87±12.2582.45±0.17a26.89±0.10a

注：aHbCS及HbH病比較，P<0.05。

3 討論

地中海貧血是臨床上較為常見的貧血類型，可發(fā)生于各個年齡段，其中，α型和β型地中海貧血是最為常見的[4]。現(xiàn)階段主要采用PCR基因診斷技術(shù)對地中海貧血患者進行確診，但此種技術(shù)對操作的要求高，操作較為復(fù)雜，加上診斷費用較高，故很難在我國人群篩查中大面積的推廣和普及[5]。

本次研究比較了全自動毛細管電泳系統(tǒng)和瓊脂糖凝膠電泳兩種技術(shù)的篩查準確率，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，無論是在α型還是β型地中海貧血的篩查中，全自動毛細管電泳系統(tǒng)均有較高的檢出率，說明此種技術(shù)優(yōu)勢更為顯著。全自動毛細血管電泳技術(shù)在充滿電泳液的石英毛細血管中進行電泳，也就使紅細胞樣品在溶血實際中被稀釋之后再注射進毛細管的負極端，然后實施電泳分離，經(jīng)靠近正極端的415nm光波檢測裝置進行相對定量。而瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)在對樣品進行處理時其過程較為復(fù)雜，主要以人工操作為主，極易受到外界因素的影響，而全自動毛細血管電泳技術(shù)在處理樣品的過程中將復(fù)雜的過程簡單化，自動化的處理方法可以有效避免人工干擾對結(jié)果造成的負面影響，且精確度相對較高，持續(xù)時間更短，經(jīng)濟性較強[6]。此外通過研究發(fā)現(xiàn)地中海貧血患者的平均紅細胞體積與平均血紅蛋白濃度比HbCS及HbH病要低，也就是說地中海貧血患者紅細胞體積減少、脆性降低可作為篩查的標準之一。

綜上所述，在地中海貧血的篩查中，全自動毛細管電泳系統(tǒng)的檢出率高，可為地中海貧血的診斷和治療提供科學(xué)依據(jù)，值得推廣和應(yīng)用。