獻(xiàn)血者ABO 血型正反鑒定不一致的原因分析及處理

龔宏偉

江陰市紅十字血站質(zhì)管科，江蘇江陰 214431

人類血型系統(tǒng)中重要的血型系統(tǒng)之一為ABO 血型系統(tǒng)，其在臨床輸血工作中占有舉足輕重的位置，對(duì)臨床患者的生命安全有直接影響[1]。 ABO 血型正反定型血型一致是鑒定ABO 血型的重要因素，ABO 血型正反定型不一致的影響因素較多，包括不規(guī)則抗體、血型抗原、年齡以及疾病等，對(duì)血型鑒定有重要影響[2-3]。所以，在面對(duì)ABO 血型正反定型不一致的過程中，需開展其他有關(guān)血型血清學(xué)試驗(yàn)，與病史、妊娠史以及輸血史等有效結(jié)合進(jìn)行合理的ABO 血型鑒定，只有這樣，才可以確保臨床輸血的安全與有效[4]。為了探究獻(xiàn)血者ABO 血型正反鑒定不一致原因分析與處理措施，該研究選取2017 年2 月—2018 年12 月該站送檢的無償獻(xiàn)血者標(biāo)本21 例，并選取同一時(shí)期29例臨床患者標(biāo)本，所有標(biāo)本都進(jìn)行血型血清學(xué)檢驗(yàn)，并對(duì)正反定型不一致的原因與處理措施予以分析，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該站送檢的無償獻(xiàn)血者標(biāo)本21 例，所有獻(xiàn)血者都滿足《獻(xiàn)血者健康檢查要求》，其中有男性標(biāo)本9例，所占比例42.86%，女性標(biāo)本12 例，所占比例57.14%；最小年齡19 歲，最大年齡56 歲，平均年齡（38.46±20.23）歲。同時(shí)，選取同一時(shí)期29 例臨床患者標(biāo)本，男性標(biāo)本13 例，所占比例44.83%，女性標(biāo)本16例，所占比例55.17%； 最小年齡1 歲，最大年齡85歲，平均年齡（43.45±42.63）歲。 由血站采供科對(duì)獻(xiàn)血前予以血型初篩，檢驗(yàn)科進(jìn)行復(fù)檢，把ABO 血型正反定型不一致標(biāo)本送到血型參比室鑒定血型。

1.2 試劑與儀器

1.2.1 試劑 選擇上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)的抗A、A1、B、H 以及抗球蛋白試劑等； 選擇上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供的抗體篩選細(xì)胞、譜細(xì)胞、以及ABO 試劑紅細(xì)胞。上述實(shí)際都為檢驗(yàn)合格試劑，都在有效期之內(nèi)。

1.2.2 儀器 選擇日本久保田KA-2200 型離心機(jī)。

1.3 血型血清學(xué)檢測(cè)方法

①重新采集臨床送檢的29 例患者血液標(biāo)本。 核對(duì)申請(qǐng)單詳細(xì)與準(zhǔn)確的填寫，并將患者的性別、藥物史、疾病史以及輸血史等資料充分注明。并對(duì)21 例獻(xiàn)血者的藥物史、 年齡以及病史等資料進(jìn)行電話咨詢。標(biāo)本通過EDTA-Na2 抗凝后處理，對(duì)所用試劑準(zhǔn)確核對(duì)，根據(jù)操作規(guī)程對(duì)ABO 正反定型進(jìn)行檢測(cè)，將認(rèn)為因素或者操作失誤因素充分排除；②對(duì)患者血液標(biāo)本與獻(xiàn)血者標(biāo)本予以相關(guān)試驗(yàn)操作，如ABO 正反定型試驗(yàn)、 直接抗球蛋白試驗(yàn)以及不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)、抗體鑒定等，按照試驗(yàn)結(jié)果、電話咨詢臨床資料情況，對(duì)可能引發(fā)正反定型不一致的原因進(jìn)行全面分析。 ABO 血型鑒定、抗體鑒定、ABH 血型物質(zhì)檢測(cè)等根據(jù)臨床標(biāo)準(zhǔn)操作。

2 結(jié)果

經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)影響ABO 正反定型結(jié)果不一致原因包括年齡、淋巴瘤、自身免疫性溶血貧血、白血病、冷抗體、亞型、ABO 以外抗體；其中患者在淋巴瘤、自身免疫性溶血貧血、白血病、冷抗體、亞型、ABO 以外抗體上分別有3 例、7 例、2 例、8 例、0 例、9 例，所占比例分別為10.34%、24.14%、6.90%、27.59%、0.00%、31.03%；獻(xiàn)血者在淋巴瘤、自身免疫性溶血貧血、白血病、冷抗體、亞型、ABO 以外抗體上分別有0 例、0 例、0 例、11 例、2 例、8 例，所 占 比 例 分 別 為0.00%、0.00%、0.00%、52.38%、9.52%、38.10%。主要原因分析與處理措施見表1。

表1 ABO 正反定型結(jié)果不一致原因分析與處理措施

3 討論

引發(fā)ABO 血型正反定型不一致的原因較多，包括自身免疫性溶血性貧血、 抗體減弱以及ABO 血型亞型等，另外，也會(huì)受到人為因素與技術(shù)因素的影響。針對(duì)ABO 血型正反定型不一致標(biāo)本，需根據(jù)操作標(biāo)準(zhǔn)規(guī)程再次試驗(yàn)，按照實(shí)際問題對(duì)可能引發(fā)正反不一致的原因有效分析，并予以針對(duì)性的處理措施[5-6]。

該研究選擇的無償獻(xiàn)血者標(biāo)本21 例與29 例臨床患者標(biāo)本都為本地人，都滿足《獻(xiàn)血者健康檢查要求》，經(jīng)過電話詢問將有關(guān)疾病可能導(dǎo)致血型抗原表達(dá)異常的因素充分排除，如腫瘤以及血液系統(tǒng)等疾病[7]。通過統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)獻(xiàn)血者出現(xiàn)ABO 血型正反定型不一致的原因包括冷抗體、 亞型、ABO 以外抗體等，該結(jié)果與國內(nèi)其他文獻(xiàn)報(bào)道一致。 因?yàn)槟挲g因素、遺傳因素以及自身免疫因素等導(dǎo)致ABO 血型正反定型不一致的主要原因有年齡、淋巴瘤、自身免疫性溶血貧血、白血病、冷抗體、亞型、ABO 以外抗體等[8]。

抗體減弱或者缺失在新生兒與老年患者中比較常見。 伴隨年齡的不斷增大，機(jī)體抗原抗體水平日益減弱或者缺失[9]。針對(duì)此種情況，可選擇增強(qiáng)抗原抗體反應(yīng)技術(shù)，如增大血清量，在4℃內(nèi)放置增強(qiáng)反應(yīng)等，并且通常以O(shè) 型紅細(xì)胞或自身細(xì)胞進(jìn)行陰性對(duì)比。針對(duì)抗體集減弱或者消失的患者與獻(xiàn)血者而言，需與臨床資料有效結(jié)合對(duì)結(jié)果進(jìn)行全面判斷[10]。

疾病會(huì)對(duì)血型的鑒別造成影響。多發(fā)性骨髓瘤或淋巴瘤患者血漿蛋白紊亂會(huì)產(chǎn)生緡錢狀凝集表現(xiàn)，選擇生理鹽水適當(dāng)稀釋血清后予以試驗(yàn)，于顯微鏡下發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞緡錢狀凝集時(shí)，添加一滴生理鹽水能夠有效消除。 試管試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)存在緡錢狀凝集表現(xiàn)，使試管離心，把上清液傾去并瀝干，再添加兩滴生理鹽水，重懸，會(huì)使假凝聚有效消失，而真凝聚不會(huì)消失，嚴(yán)重情況可再次試驗(yàn)一次[11]。 自身免疫性溶血貧血患者直抗陽性影響正定型，溫抗體型自身免疫性溶血貧血紅細(xì)胞通過生理鹽水洗滌與氯喹放散后予以正定型，選擇自身紅細(xì)胞吸收60 min 后的血清予以反定型，若出現(xiàn)冷抗體型，可選擇45℃熱生理鹽水對(duì)紅細(xì)胞多次洗滌后對(duì)血型科學(xué)判定。

研究中抗原減弱在亞型與白血病中十分常見。亞型在獻(xiàn)血者中十分常見，亞型與白血病在患者中較為常見。 亞型屬于基因突變導(dǎo)致，與疾病的出現(xiàn)沒有聯(lián)系；白血病是一種血液系統(tǒng)惡性腫瘤，會(huì)引發(fā)ABO 血型抗原顯著減弱，通常為暫時(shí)性的，會(huì)伴隨疾病的改善而恢復(fù)。

吸收放散試驗(yàn)與唾液血型物質(zhì)檢測(cè)能夠?qū)θ魽與弱B 抗原進(jìn)行檢測(cè)，確定有無若抗原出現(xiàn)，對(duì)ABO血型有效鑒定。 并根據(jù)受檢者的病史、輸血史等情況對(duì)ABO 血型進(jìn)行確定。 血液病導(dǎo)致的血型變異會(huì)伴隨病情的改善而恢復(fù)期原本血型，需對(duì)其充分關(guān)注。隨后檢測(cè)ABO 血型基因，使結(jié)果更加明確[12]。

于獻(xiàn)血者與患者中冷抗體與ABO 意外抗體都存在。 高效價(jià)冷抗體在冬季十分常見，會(huì)引發(fā)反定型產(chǎn)生凝聚表現(xiàn)，在37℃水浴箱內(nèi)放置2 min 對(duì)結(jié)果認(rèn)真觀察，凝聚消失，或者選擇溫生理鹽水對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌，將冷抗體的影響充分去除，正反定型一致。導(dǎo)致ABO 血型正反定型不一致的同種抗體主要為血型系統(tǒng)抗體。 研究中ABO 意外抗體主要以抗-M 抗體為主，反定型O 細(xì)胞凝聚而自身對(duì)比陰性時(shí)，需對(duì)同種抗體的可能性充分考慮。借助譜細(xì)胞對(duì)其抗體特異性有效鑒定，按照反應(yīng)格局確定抗-M 抗體，選擇M 抗原陰性的紅細(xì)胞作為試劑紅細(xì)胞予以反定型鑒別，使同種抗體的影響充分消除。 該研究結(jié)果顯示：經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)影響ABO 正反定型結(jié)果不一致原因包括年齡、淋巴瘤、自身免疫性溶血貧血、白血病、冷抗體、亞型、ABO 以外抗體；其中患者在淋巴瘤、自身免疫性溶血貧血、白血病、冷抗體、亞型、ABO 以外抗體上分別有3 例、7 例、2 例、8 例、0 例、9 例； 獻(xiàn)血者在淋巴瘤、自身免疫性溶血貧血、白血病、冷抗體、亞型、ABO 以外抗體上分別有0 例、0 例、0 例、11 例、2 例、8 例。 張趁利等[5]學(xué)者探究了無償獻(xiàn)血者ABO 血型正反鑒定不一致的原因與處理策略，研究選取血站2011 年1月—2012 年12 月期間28 例無償獻(xiàn)血者正反不符標(biāo)本，并對(duì)所有標(biāo)本予以檢測(cè)，結(jié)果顯示：全部血型鑒定不一致者通過檢測(cè)后，發(fā)現(xiàn)正反一致與正反不一致者分別有5 例、23 例，正反不一致者主要表現(xiàn)為抗體減弱、冷凝集、ABO 以外抗體、亞型，分別有5 例、8 例、6例、4 例，說明分析血型鑒定不一致原因，并借助相應(yīng)試驗(yàn)對(duì)獻(xiàn)血者血型進(jìn)行鑒定，合理鑒定血型，可確保臨床患者安全與有效的輸血，此研究結(jié)果與該研究結(jié)果相近。

綜上所述，合理鑒定獻(xiàn)血者ABO 血型，避免不合格血液在臨床上運(yùn)用，保證臨床用血的安全與有效。