HPLC法測(cè)定安康顆粒中阿魏酸的含量

袁文洪 高宇明 謝艷 何琴 吳秀清

【摘?要】目的：采用HPLC法測(cè)定安康顆粒中阿魏酸的含量。方法：色譜柱Waters XSelect HSS T3（4.6×250 mm，5 μm）;流動(dòng)相：甲醇-0.085%磷酸溶液（25∶75）為流動(dòng)相，等度洗脫;流速：1.0 mL/min;檢測(cè)波長：316 nm;柱溫：30 ℃。 結(jié)果：阿魏酸對(duì)照品在0.224-2.247 μg/mL濃度范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好，r=0.9994;平均回收率為100.31%（RSD=1.58%）。 結(jié)論：所采用的方法準(zhǔn)確、可靠，可行性及重復(fù)性良好，能有效控制安康顆粒的質(zhì)量。

【關(guān)鍵詞】安康顆粒;阿魏酸;高效液相色譜法

【中圖分類號(hào)】R284.1?【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A?【文章編號(hào)】1007-8517（2019）19-0042-02

Abstract：Objictive To establish a HPLC method for the simultaneous content determination of ferulic acid in Ankang Granules.Methods The analysis of methanol-0.085% phosphoric acid（25∶75） extract of Ankang Granules was performed on a 30℃ thermostatic InertsiL?Waters XSelect HSS T3（4.6×250 mm，5 μm），with the mobile phase comprising of methanol-water flowing at 1.0 mL/min. Results Ankang Granules showed good linear relationships within their own ranges（ r=0.9994），whose average recoveries were 100.31%，with the RSDs of 1.58%.?Conclusion This sensitive，teliable and accurate mehtod can be used for the quality control of Ankang Granules.

Key?words：Ankang Granules;Ferulic Acid;HPLC

安康顆粒是由紅參、銀耳、當(dāng)歸、山藥、豬脊髓、鹿茸、山楂等七位藥材煎煮制成的顆粒劑，具有安和五臟、健腦安神的功效，主要用于治療頭目眩暈、耳鳴、四腳乏力疲軟、食欲不振、睡眠不深、多夢(mèng)等癥?，F(xiàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)為《國家食品藥品監(jiān)督管理局國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS3-B-2888-98-1》[1]，檢驗(yàn)項(xiàng)目僅有性別和理化鑒別兩項(xiàng)，均較簡單，不能有效控制該樣品質(zhì)量。在安康顆粒處方組成中，當(dāng)歸用量較大，為主要組成部分，當(dāng)歸的主要有效成分為阿魏酸。本實(shí)驗(yàn)建立HPLC法測(cè)定安康顆粒中阿魏酸的含量，為該制劑質(zhì)量控制提供參考。

1?儀器與材料

1.1?儀器?LC-20AT液相色譜儀（含SPD-20A檢測(cè)器，島津）;MS205DU電子天平（梅特勒托利多），水浴鍋 。

1.2?材料?阿魏酸對(duì)照品（批號(hào)110773-201614，中國食品藥品檢定研究院）。理氣舒心片（批號(hào)：20180803、20190309、）。甲醇（色譜純，F(xiàn)isher公司），磷酸，水為注射用水;

2?方法與結(jié)果

2.1?溶液的制備

2.1.1?對(duì)照品溶液的制備?取對(duì)照品阿魏酸適量，精密稱定，加甲醇制成濃度為11.236 μg/mL的對(duì)照品溶液。

2.1.2?供試品溶液制的制備?取研細(xì)安康顆粒約10 g，精密稱定，精密加甲醇10mL，稱定重量，加熱回流30min，冷卻后用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用0.45 μm濾膜過濾，即得供試品溶液。

2.2?色譜條件?色譜柱在：Waters XSelect HSS T3（4.6×250 mm，5 μm）;流動(dòng)相：甲醇-0.085%磷酸溶液（25∶75）;流速：1.0 mL/min;檢測(cè)波長：316 nm;柱溫：30 ℃。色譜圖見圖1、圖2。

2.3?線性關(guān)系考察?精密吸取“2.1.1”項(xiàng)下對(duì)照品溶液適量，加甲醇溶液稀釋制備成濃度分別為0.224、0.449、0.899、1.124、2.247 μg/mL系列混合對(duì)照品溶液，按照“2.2”項(xiàng)下的條件進(jìn)行測(cè)定。以對(duì)照品的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（X）、峰面積為縱坐標(biāo)（Y）進(jìn)行線性回歸，Y=83328X-1355.2，r=0.9994，表明阿魏酸在該0.224～2.247濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.4?精密度試驗(yàn)?精密吸取“2.1.1”項(xiàng)下對(duì)照品溶液，在“2.2”項(xiàng)色譜條件下，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)得其RSD分別為0.13%，表明儀器精密度良好。

2.5?穩(wěn)定性試驗(yàn)?精密稱取研細(xì)的安康顆粒粉末，按“2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液。于制備后0、2、4、8、16在“2.2”項(xiàng)色譜條件下進(jìn)樣，測(cè)得其RSD為1.08%，表明供試品溶液在16 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.6?重復(fù)性試驗(yàn)?精密稱取研細(xì)的安康顆粒粉末，按“2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液6份，在“2.2”項(xiàng)色譜條件下進(jìn)樣，測(cè)得其RSD為2.85%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.7?加樣回收率試驗(yàn)?取6份已知含量的研細(xì)的安康顆粒粉末約10 g，精密稱定，精密加入“2.1.1”項(xiàng)下對(duì)照品適量后，按按“2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，在“2.2”項(xiàng)色譜條件下進(jìn)樣，以外標(biāo)法計(jì)算各阿魏酸的量，計(jì)算其加樣回收率，結(jié)果見表1。

2.8?樣品含量測(cè)定?取安康顆粒供試品，按“2.1.2”項(xiàng)下方法平行制備供試品溶液各2份，在“2.2”項(xiàng)下色譜條件下進(jìn)樣，以外標(biāo)法計(jì)算阿魏酸的含量，結(jié)果見表2。

3?分析與討論

3.1?指標(biāo)成分選擇?在該藥品處方組成中，僅有紅參、當(dāng)歸在《中國藥典》2015年版[2]中收載有含量測(cè)定項(xiàng)。經(jīng)過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，紅參因處方量較小，且經(jīng)過煎煮后，轉(zhuǎn)移到制劑中的人參皂苷量較低，導(dǎo)致無法檢出。故本實(shí)驗(yàn)選擇當(dāng)歸中的阿魏酸進(jìn)行含量測(cè)定，以評(píng)估安康顆粒的質(zhì)量。

3.2?測(cè)定方法選擇?樣品前處理方面，本實(shí)驗(yàn)考察了甲醇提取、70%甲醇提取、乙醇提取、70%乙醇提取，發(fā)現(xiàn)甲醇提取出的阿魏酸量最高，故最終選取了甲醇作為提取溶劑。

綜上所述，本實(shí)驗(yàn)所建立的高效液相色譜方法操作簡單，重復(fù)性好，可在較短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)安康顆粒中阿魏酸的含量測(cè)定。因此，該方法可用于安康顆粒的質(zhì)量控制與評(píng)價(jià)。

參考文獻(xiàn)

[1]國藥典委員會(huì).衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn).中藥成方制劑（第八冊(cè)）[S].1993：87.

[2]國藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（一部）[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

（收稿日期：2019-07-23?編輯：劉斌）