淺析高效液相色譜技術(shù)在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用

秦建蘭 孫玲

連云港潤(rùn)眾制藥有限公司 江蘇連云港 222000

1 高效液相色譜法的技術(shù)原理和特點(diǎn)

通過檢驗(yàn)這一技術(shù)的使用過程可以發(fā)現(xiàn)，該項(xiàng)技術(shù)的使用主要借助了高壓輸液系統(tǒng)，并且將高壓輸液系統(tǒng)之中的液體當(dāng)成主要的流動(dòng)相，是色譜法中的重要技術(shù)之一，能夠借助高壓輸液泵將不同型號(hào)的單一溶劑以及不同比例的成分混合溶劑等具有流動(dòng)性的液體裝入到固定的實(shí)驗(yàn)色譜柱之中，對(duì)柱中的所有成分進(jìn)行分析以及分離之后，然后再將其送入到相應(yīng)的檢測(cè)儀器中進(jìn)行檢測(cè)，從而對(duì)化學(xué)試樣進(jìn)行分析。從技術(shù)的角度來說，該方法和經(jīng)典的液相色譜法相比較而言并沒有什么實(shí)質(zhì)上的區(qū)別，主要是由于高效液相色譜法借助了高靈敏的檢測(cè)器材、新型的高壓輸液泵以及高效的微粒固定相，因此活力特點(diǎn)更加明顯。

2 高效液相色譜技術(shù)在藥品檢驗(yàn)領(lǐng)域中的應(yīng)用

2.1 檢測(cè)藥物中的有效成分

新藥品上市銷售前都必須通過嚴(yán)格的監(jiān)測(cè)，了解其中有效成分的具體含量。只有當(dāng)這些有效成分含量符合國(guó)家規(guī)定后方可允許上市銷售。高效液相色譜法具有高準(zhǔn)確性與高靈敏度，能夠有效檢測(cè)藥品中的相關(guān)成分，同時(shí)，還不會(huì)受到藥物中附加劑的干擾，從而確保檢測(cè)準(zhǔn)確性較高。比如，黃酮屬于鳳尾茶中的主要藥效成分，在檢測(cè)黃酮含量時(shí)可采用高效液相色譜技術(shù)，不僅操作簡(jiǎn)便而且檢測(cè)結(jié)果的穩(wěn)定性良好，結(jié)果準(zhǔn)確。因此，我國(guó)在鳳尾茶出口過程中就將該技術(shù)作為檢測(cè)手段，從而有效保證了我國(guó)藥物出口質(zhì)量。據(jù)相關(guān)調(diào)查顯示，運(yùn)用該技術(shù)檢測(cè)不同產(chǎn)地的白芍藥材中有效成分芍藥苷的含量，以確定哪個(gè)產(chǎn)地的白芍中芍藥苷含量最多。其中，色譜柱選擇HypersilC18柱，流動(dòng)相設(shè)為乙腈-0.05%磷酸水，將檢測(cè)波長(zhǎng)定為230nm，流速設(shè)為1.0mL/min，柱溫為25℃，結(jié)果顯示亳州產(chǎn)的兩年生十月份采摘的白芍所含的芍藥苷含量最多。此法可對(duì)不同產(chǎn)地的白芍藥材中的有效成分進(jìn)行檢測(cè)，具有簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、可重復(fù)行等優(yōu)點(diǎn)[1]。

2.2 生物藥成分的檢測(cè)

隨著近幾十年生物技術(shù)的發(fā)展，市場(chǎng)上生物藥種類越來越多，生物藥日益受到患者和醫(yī)生的追捧，究其原因是：生物藥其靶向性強(qiáng)，效果好，尤其是近幾年上市的抗體類藥物。但是生物藥與傳統(tǒng)的化藥相比，其分子量大，高級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜，易變性失活等特點(diǎn)，這對(duì)生物藥的質(zhì)量要求尤為重要。高效液相色譜不僅在傳統(tǒng)的化藥純度檢測(cè)中發(fā)揮著重要作用，在生物藥新領(lǐng)域中仍發(fā)揮著不可替代的作用，目前生物藥被放行前，均要經(jīng)過高效液相色譜的檢測(cè)，通過查詢相關(guān)藥典，該技術(shù)有在純度方面的檢測(cè)要求，也有在相關(guān)雜質(zhì)方面的檢測(cè)要求。

2.3 中藥成分檢驗(yàn)

由于中藥的組成成分復(fù)雜，并且對(duì)于中藥成分的檢測(cè)也比較困難，因此，使用高效液相色譜法能夠很好的實(shí)現(xiàn)對(duì)中藥成分以及含量的測(cè)定，在中藥領(lǐng)域中，高效液相色譜法的使用非常廣泛，并且具有同時(shí)定性以及定量準(zhǔn)確的優(yōu)勢(shì)[2]。

2.4 藥物中雜質(zhì)含量的檢測(cè)

國(guó)家對(duì)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)均設(shè)立了非常嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，這些標(biāo)準(zhǔn)與規(guī)定均由國(guó)家藥品質(zhì)監(jiān)部門制定。除了對(duì)藥物有效成分含量有嚴(yán)格規(guī)定，對(duì)藥物中的雜質(zhì)含量規(guī)定就更為嚴(yán)格。因此，需對(duì)藥物中雜質(zhì)含量進(jìn)行監(jiān)測(cè)，確定是否含有有害物質(zhì)或違禁物質(zhì)。在制藥過程中藥材經(jīng)過溫濕度以及狀態(tài)的變化，可能使得部分藥材原料產(chǎn)生出沒有作用的附加成分，一旦這些物質(zhì)超標(biāo)可使藥物中有效成分減少，甚至造成藥物不達(dá)標(biāo)。因此，必須嚴(yán)格控制藥物中附加成分的生成量。運(yùn)用高效液相色譜法可有效檢測(cè)出藥物中附加物的含量，而常規(guī)液相色譜法是難以檢測(cè)出來的。近年來部分不法商家為了賺錢私自在藥物中添加一些違禁成分來取代價(jià)格較高的正規(guī)成分，以節(jié)約生產(chǎn)成本，但極大損害了公眾的健康。相關(guān)職能部門在打擊藥品制假售假過程中也積極運(yùn)用高效液相色譜技術(shù)，可以高效、準(zhǔn)確確定藥物中違禁成分的含量，對(duì)這些違法行為起到了很好的打擊效果[3]。

3 高效液相色譜技術(shù)的發(fā)展

如今，高效液相色譜法獲得了較為廣泛的使用空間，和該項(xiàng)技術(shù)配套使用的先進(jìn)的設(shè)備技術(shù)主要有質(zhì)譜儀的聯(lián)合、梯度洗脫以及柱切換技術(shù)等，同時(shí)，還引進(jìn)了現(xiàn)代分子藥理學(xué)以及分子生物學(xué)，從而使得藥品的檢測(cè)工作更加精準(zhǔn)。高效液相色譜法抵抗干擾的能力越來越強(qiáng)，并且該項(xiàng)技術(shù)在和質(zhì)譜法聯(lián)用之后，已經(jīng)成為了國(guó)內(nèi)外測(cè)定藥品有效成分以及低濃度藥品的主要方法。對(duì)于清開靈等一些中藥復(fù)方注射液，在對(duì)其有效成分--比如膽酸類藥物進(jìn)行測(cè)定時(shí)，使用的也是高效液相色譜與質(zhì)譜法聯(lián)合檢測(cè)的方式，這種方法的測(cè)定結(jié)果比較準(zhǔn)確。核磁共振與高效液相色譜法聯(lián)合使用具有很好的發(fā)展空間，與此同時(shí)，在該項(xiàng)技術(shù)中不斷融入新技術(shù)，使得高效液相色譜法逐漸朝著自動(dòng)化、信息化以及智能化的方向發(fā)展。

4 結(jié)語

目前高效液相色譜技術(shù)已被廣泛應(yīng)用到藥品檢驗(yàn)工作中，該技術(shù)不僅給醫(yī)藥研發(fā)人員提供了有效的檢測(cè)手段，同時(shí)在藥品質(zhì)量放行方面也發(fā)揮著重要作用。作為一名藥品檢測(cè)人員，我們應(yīng)該充分利用好高效液相色譜技術(shù)，發(fā)揮它在藥品檢測(cè)中的優(yōu)勢(shì)，同時(shí)我們要及時(shí)學(xué)習(xí)新的技術(shù)，為藥品的研發(fā)和生產(chǎn)提供保證，為我國(guó)的醫(yī)藥事業(yè)發(fā)展做出我們的貢獻(xiàn)。