藥物分析中應用超高效液相色譜法的研究

程士榮 王穎

連云港潤眾制藥有限公司 江蘇連云港 222000

1 超高效液相色譜技術的優(yōu)點

液相色譜是現(xiàn)代色譜技術中應用最廣泛、最活躍的分析方法之一，廣泛用于環(huán)境、生化、食品、農(nóng)業(yè)、藥物等多個領域的分析。伴隨工業(yè)進展與科技進步，各個領域?qū)σ合嗌V的要求不斷提高，大批量樣品分析要求在短時間內(nèi)完成，一些生化樣品、天然產(chǎn)物的分析對液相色譜技術的分離能力提出了更高的要求，與其他技術聯(lián)用對檢測器提出了更高的要求。在這種情況下，基于小顆粒填料的液相色譜技術——超高液相色譜應運而生。超高效液相色譜法是一種新型的高效液相色譜技術，伴隨這一技術的研發(fā)成功與廣泛應用，液相色譜技術的分離能力得到了快速提高，色譜分析技術也隨之進入了一個新領域。因超高效液相色譜法具有樣品組分易吸收、樣品處理簡便、檢測自動化、檢測靈敏度高、藥物分離效率高等優(yōu)勢，常用于藥物質(zhì)量檢驗、微量藥物檢驗、藥劑樣品檢驗、藥品成分識別等[1]。

2 超高效液相色譜法在藥物成分分析中的應用

2.1 化學藥物

在化學成分剖析中，因為含量低、分離困難，分離時刻相對較長。而超高效液相色譜法能有用地進步分離速度，縮短檢測時刻。同時，該技能靈敏度高，可為制劑成分剖析供給參閱。有學者將此技能用于氨氯地平苯那普利膠囊的成分檢測。經(jīng)過實驗發(fā)現(xiàn)，苯磺酸氨氯地平與鹽酸苯那普利的分離作用較好。在一定濃度的溶液中，二者線性關系良好，回收率大于99%。有學者選用超高效液相色譜法對水楊酸軟膏中水楊酸的含量進行了調(diào)查。并且，經(jīng)過進一步查驗，發(fā)現(xiàn)該辦法重復性和精密度高，能得到抱負的理論板號，為藥品質(zhì)量查驗供給參閱。

2.2 中藥制劑

中藥制劑成分含量較高，目標檢測物質(zhì)含量較低，同類物質(zhì)較多，難以定量剖析。超高效液相色譜法能有用打破這一問題的局限性，在中藥制劑的辨別中具有良好的使用作用。一些學者選用超高效液相色譜法對藿香正氣丸中的成分進行判定，結果表明，甘草酸、歐前胡素和丹參酮含量最高，回收率均在三以上。超高效液相色譜法在復方中藥制劑中具有良好的使用作用，可為藥物質(zhì)量操控供給有效的檢測辦法。

2.3 超高效液相色譜在藥物動力學研究中的使用

藥代動力學研究一般涉及藥物在患者體內(nèi)的吸收、分布、代謝和分泌，包含藥物及其代謝產(chǎn)物在復雜基質(zhì)中的分離，以及痕量剖析的結構判定。生物體體液系統(tǒng)結構復雜，成分復雜，難以區(qū)分相對分子質(zhì)量和保留時刻。此外，在醫(yī)治過程中，醫(yī)生給的劑量越來越少。現(xiàn)有的分離技能和微量成分檢測技能不能滿足藥物剖析的準確性要求，阻礙了藥物代謝的剖析[2]。

2.4 在藥物代謝產(chǎn)物分析中的應用

在進行藥物代謝產(chǎn)物研究時，研究人員通常會采用HPLC 或HPLC-MS 技術。近些年來SFC 技術不斷完善，其應用于代謝產(chǎn)物成分分析也逐漸被報道。在探究大鼠小腸各腸段對異甜菊醇鈉的吸收情況時引入了UPC2 方法，試驗采用ACQUITYUPC2TMBEH（100mm×3．0mm，1．7μm）色譜柱，流動相A 為二氧化碳，流動相B 為1．5%甲酸甲醇溶液進行梯度洗脫，實驗時間為7min，大大縮短了檢測周期，并且可以同時獲得較高的專屬性和靈敏度。首次建立了基于超臨界流體萃取與超臨界流體色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（SFE-SFC-QQQ/MS）的在線檢測方法，用于全血中類胡蘿卜素的檢測。利用現(xiàn)有的標準，結合離子掃描和多反應檢測進行定性，并采用改進的方法對β-隱黃質(zhì)、玉米黃素、β-胡蘿卜素和辣椒紅素進行定量分析。用UHPSFC-MS/MS 建立了血清中R/S-西酞普蘭對映體分離和定量的方法。試驗采用UPC2TrefoilCEL2 色譜柱，流動相為二氧化碳-10mM 醋酸銨的甲醇溶液（70：30），進樣量為1μl，運行時間為4min，線性范圍為5-500nM，RSD為3．4%-4．5%，回收率為81%-91%。建立一種簡單、快速、環(huán)保的超臨界流體色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法，可同時測定生物樣品中5 個AA 代 謝 物（PGD2、PGE2、PGF2α、6KetoPGF1α 和LTB4）。線 性 范 圍 為0．5-100ng/ml（R2 ≥0．995），PGD2、PGE2、PGF2α 和LTB4 的定量限均為0．5ng/ml，6KetoPGF1α的定量限為2．5ng/ml。方法的日內(nèi)和日間精密度均小于15%，準確度在83%-109%。建立一種簡單、靈敏、高效的超臨界流體色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測定比格犬血漿中尼莫地平的方法。用丙酮沉淀蛋白質(zhì)，從血漿中提取分析物，以尼群地平為內(nèi)標物。采用AcquityUPC2TMBEH2-EP 色譜柱，以1．5ml/min 的流速梯度洗脫。應用多重反應監(jiān)測尼莫地平的m/z419．3 →301．3 和尼群地平的m/z361．4 →315．2 的轉(zhuǎn)變進行定量[3-4]。

3 結語

綜上所述，高效液相色譜法是藥品生產(chǎn)企業(yè)控制藥品質(zhì)量的關鍵技術，是保證藥品質(zhì)量的關鍵一環(huán)。超高效液相色譜法是一種應用較為廣泛的藥物檢測分析方法。與傳統(tǒng)的藥物檢測分析方法相比，超高效液相色譜法在靈敏度、速度等方面具有明顯的優(yōu)勢，能夠適應更好、更復雜的環(huán)境。在高壓高速環(huán)境下，還可以進行有效的藥物檢測和分析。超高效液相色譜法能更好地滿足藥物分析的高效性要求，適合于現(xiàn)代藥物分析。