• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    給水管網(wǎng)多相界面中微生物表面疏水性研究

    2019-11-28 10:50:46張明露徐紹峰徐夢瑤柴杉杉
    中國環(huán)境科學(xué) 2019年11期
    關(guān)鍵詞:掛片菌門致病菌

    張明露,徐紹峰,徐夢瑤,王 禮,柴杉杉,白 淼,張 燦*

    給水管網(wǎng)多相界面中微生物表面疏水性研究

    張明露1,徐紹峰1,徐夢瑤1,王 禮1,柴杉杉1,白 淼2,張 燦2*

    (1.北京工商大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程系,北京 100048;2.中國人民解放軍疾病預(yù)防控制中心,北京 100071)

    采用疾病控制中心(CDC)生物膜反應(yīng)器模擬給水管網(wǎng)系統(tǒng),選取聚氯乙烯(PVC)和聚碳酸酯(PC)2種材質(zhì)的掛片,通過微生物粘附碳?xì)浠衔?MATH)實(shí)驗(yàn)和Illumina高通量測序相結(jié)合的方法,對反應(yīng)器水相、生物膜相和顆粒物相中微生物的疏水性進(jìn)行了研究.結(jié)果顯示,PVC材質(zhì)掛片反應(yīng)器中優(yōu)勢菌為厚壁菌門,相對豐度為68.31%~81.00%,PC材質(zhì)掛片反應(yīng)器中優(yōu)勢菌為變形菌門,相對豐度為24.39%~64.40%.PVC材質(zhì)掛片反應(yīng)器中優(yōu)勢菌包含3類致病菌,PC材質(zhì)掛片反應(yīng)器中包含8類致病菌.PC材質(zhì)掛片生物膜相較于PVC材質(zhì)疏水性更高,利于微生物吸附形成生物膜,而PVC材質(zhì)不易形成生物膜,對控制輸送過程中的二次污染具有積極作用,但在管網(wǎng)實(shí)際應(yīng)用中還應(yīng)考慮其他工程因素的影響.

    給水管網(wǎng);生物膜;細(xì)胞疏水性;微生物碳?xì)湮?;高通量測序

    飲用水微生物尤其致病菌是介水感染的主要風(fēng)險(xiǎn)來源.原水經(jīng)過水廠處理后微生物含量大幅降低.但是隨著輸配水管道長度的增加,細(xì)菌會(huì)大幅增多,導(dǎo)致管網(wǎng)水的二次污染[1].管網(wǎng)中細(xì)菌附著于管壁形成生物膜,使其避免被流體沖刷,因此管網(wǎng)輸送的水體和管網(wǎng)本身是一個(gè)龐雜的“反應(yīng)器”[2].生物膜中的細(xì)菌具有很高的生物活性與密度,又有生物膜的保護(hù)作用,較之水中懸浮細(xì)菌更難以被滅活,這導(dǎo)致大量的細(xì)菌在管壁生物膜中生存與增長,對人類健康具有極大威脅[3-4].管壁生物膜的形成和管材性質(zhì)[5]、滯留時(shí)間[6]、發(fā)生粘附的微生物等密切相關(guān)[7],其中微生物表面疏水性是其中一個(gè)重要指標(biāo).較弱的表面疏水性利于提高細(xì)胞的懸浮穩(wěn)定性,而較強(qiáng)的表面疏水性則表征細(xì)胞對水環(huán)境的親和力較低,利于吸附過程的發(fā)生.微生物表面疏水性對細(xì)菌在管道中的吸附和分布特征都有重要影響,在生物絮凝、生物掛膜、降解菌對污染物的吸附等過程中也有重要作用[8].前期研究表明,具有較強(qiáng)的表面疏水性和較低(更中性)電泳遷移率的微生物(如霍亂弧菌)在水處理過程中雖然可以通過靜電和疏水相互作用被有效去除,但是在輸配水管網(wǎng)中更易附著在管壁[9].表面疏水性對生物膜中細(xì)胞生長也具有一定影響[10],因此從細(xì)菌表面疏水性方面開展給水管網(wǎng)生物膜研究,對保障管網(wǎng)水的水質(zhì)安全具有重要意義.環(huán)境領(lǐng)域微生物表面疏水性的檢測通常采用微生物碳?xì)湮侥芰Ψ?MATH)[11],用于驗(yàn)證細(xì)菌與碳?xì)浠衔锏恼掣叫约捌渑c表面附著之間的相關(guān)性.該方法在生物工程、石油開采、醫(yī)學(xué)、食品工程等領(lǐng)域的研究中也有廣泛應(yīng)用.

    目前關(guān)于管網(wǎng)生物膜的研究主要集中在細(xì)菌群落和腐蝕性質(zhì)等方面,對管網(wǎng)多相界面疏水性與細(xì)菌群落的關(guān)系研究較少.本研究采用MATH實(shí)驗(yàn)和Illumina高通量測序相結(jié)合的方法,解析不同材質(zhì)的模擬給水管網(wǎng)系統(tǒng)中多相界面的細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)及其疏水性,探究不同管材生物膜形成機(jī)制,為尋求控制管網(wǎng)中生物膜形成的技術(shù)方法提供理論基礎(chǔ).

    1 材料與方法

    1.1 模擬給水管網(wǎng)

    選取美國疾病預(yù)防與控制中心(CDC)研制的生物膜反應(yīng)器來模擬給水管網(wǎng)系統(tǒng)[12].反應(yīng)器由體積為1L的玻璃容器組成,出水量達(dá)350mL,停留時(shí)間約為6h;8個(gè)獨(dú)立的、可拆卸的聚丙烯桿支撐著聚氯乙烯材料的頂蓋,頂蓋上有一個(gè)進(jìn)水口、一個(gè)取樣口和一個(gè)氣體交換口;每個(gè)桿上可以固定3個(gè)可拆卸的掛片(直徑約1.27cm,厚度約0.3cm),細(xì)菌在掛片表面附著生長形成生物膜;容器底部固定一個(gè)帶轉(zhuǎn)子的隔板,反應(yīng)器運(yùn)行過程中與磁力攪拌器相連,轉(zhuǎn)速控制在200~300r/min,給掛片表面提供均勻的剪切力,模擬實(shí)際管網(wǎng)中的水力條件.本實(shí)驗(yàn)選擇的掛片材質(zhì)分別為聚氯乙烯(PVC)和聚碳酸酯(PC),進(jìn)水經(jīng)蠕動(dòng)泵輸送到CDC反應(yīng)器中,對反應(yīng)器出水進(jìn)行收集.反應(yīng)器穩(wěn)定運(yùn)行60d后,對樣品進(jìn)行收集,對各指標(biāo)進(jìn)行檢測.

    1.2 管網(wǎng)多相界面樣品的收集

    分別收集10L進(jìn)水和出水進(jìn)行過濾,采用孔徑0.22μm聚醚砜材質(zhì)的濾膜 (GPWP04700),將過濾后的濾膜放入50mL離心管中,加入25mL磷酸鹽 MgSO4緩沖液(PUM),震蕩5min后置于超聲儀內(nèi),40kHz下超聲20min,即得到水相菌懸液;取3片掛片放入50mL離心管內(nèi),加入25mL PUM溶液,震蕩1min后置于超聲儀內(nèi),40kHz下超聲5min,重復(fù)2次,即得到生物膜相菌懸液;收集50L反應(yīng)器出水進(jìn)行過濾,采用Swinnex過濾器 (Millipore SX0004700),直徑47mm,孔徑1.2μm的玻璃纖維素濾膜(Millipore APFC04700).將過濾完畢的濾膜放入50mL離心管內(nèi),加入25mL PUM溶液,震蕩5min后,40k Hz下超聲20min,得到顆粒物相菌懸液.

    1.3 MATH測定

    1.4 DNA提取與高通量測序

    分別采集3mL烴系和10mL水系細(xì)菌細(xì)胞,使用Soil DNA提取試劑盒(MO-Bio,美國) 提取DNA,操作按照試劑盒的說明進(jìn)行.DNA濃度采用Nanodrop 2000在260nm下測定(Nano-drop Technologies, Wilmington, DE).采用上游引物(5’- CAACGCGAAGAACCTTAC-3’)和下游引物(5’- CGACAGCCATGCANCACCT-3’)擴(kuò)增16S rRNA基因的高變V6區(qū)[13].PCR反應(yīng)采用Hot Start and Hot Star high fidelity Taq polymerases混合酶進(jìn)行擴(kuò)增.反應(yīng)體系為50μL,反應(yīng)條件為95℃預(yù)變性2min,95℃ 30s,55℃ 30s,72℃ 30s,循環(huán)30次;72℃延伸5min,PCR產(chǎn)物回收定量后應(yīng)用Illumina測序平臺(tái)測序.

    1.5 表面疏水性評價(jià)指標(biāo)

    前期文獻(xiàn)[14]中采用相對疏水性(RH)評估微生物總體疏水性,見式1.

    除了RH,也可用烴-水分配系數(shù)(0hw)值的大小來表征總菌群的微生物疏水性高低,且0hw與RH成正比關(guān)系.其中TB代表總生物量,OD表示600nm光密度下的細(xì)胞濃度.見式2.

    對于不同分類水平(從門到屬)的細(xì)菌疏水性,應(yīng)用特定的烴-水分配系數(shù)('hw),表征該分類水平的微生物疏水性高低,見式3.

    在式3中,RN表示在正十六烷烴系和水系中不同分類水平的特定細(xì)菌群的讀數(shù).

    通過比較0hw和'hw可以得到不同分類水平細(xì)菌的疏水性.如果'hw顯著大于0hw,則該細(xì)菌是疏水性的.反之,該細(xì)菌被認(rèn)為是親水性的.此外,如果細(xì)菌的'hw與0hw值差異較小,則該細(xì)菌呈中等疏水性.

    2 結(jié)果與討論

    2.1 CDC反應(yīng)器多相界面的整體疏水性

    如圖1所示,CDC反應(yīng)器多相界面的RH與0hw成正比,即RH越大0hw越大.PVC和PC兩種材質(zhì)掛片生物膜相的疏水性均高于水相和顆粒物相,說明生物膜相對疏水性更強(qiáng).PC材質(zhì)掛片生物膜相的0hw(1.76)遠(yuǎn)高于PVC材質(zhì)(0.46),表明PC材質(zhì)掛片生物膜疏水性更強(qiáng).PC材質(zhì)掛片水相的RH和0hw明顯低于生物膜相,表明水相是相對親水性.對于PVC材質(zhì)掛片顆粒物相的RH和0hw則明顯低于水相,表明顆粒物相是相對親水性.

    圖1 PVC和PC材質(zhì)掛片反應(yīng)器多相界面的相對疏水性和烴-水分配系數(shù)

    2.2 細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)分析

    如圖2(a)所示,圖中匯總了8個(gè)樣品中排名前10(總相對豐度>99.7%)的菌門,分別為厚壁菌門(Firmicutes)、變形菌門(Proteobacteria)、放線菌門(Actinobacteria)、藍(lán)藻門(Cyanobacteria)和酸桿菌門(Acidobacteria)等.除了生物膜相-烴系,其他7個(gè)樣品中第一優(yōu)勢菌門均為厚壁菌門,其相對豐度為68.31%~81.00%,該菌在生物膜相-水系中相對豐度最高.生物膜相-烴系中第一優(yōu)勢菌門為變形菌門,相對豐度為55.01%,其次是厚壁菌門,相對豐度為37.09%.如圖2(b)所示,8個(gè)樣品中排名前10(總相對豐度>97.0%)的菌門分別為變形菌門(Proteobacteria)、厚壁菌門(Firmicutes)、放線菌門(Actinobacteria)、擬桿菌門(Bacteroidetes)和綠彎菌門(Chloroflexi)等.厚壁菌門和放線菌門分別在進(jìn)水相-烴系和生物膜相-烴系中的相對豐度最高,分別為60.84%和13.4%.

    式中,Is為飽和電流,q為單位電荷,V為外加電壓,n為理想因子,kB為玻爾茲曼常數(shù),T為開爾文溫度.圖5(b)插圖為加正向電壓時(shí),實(shí)驗(yàn)所得I-V特性曲線的擬合,其很好地?cái)M合于

    如圖3(a)所示,圖中匯總了8個(gè)樣品中排名前20的菌屬(平均相對豐度>0.5%),分別為乳球菌屬()、、普羅威登斯菌屬()、分支桿菌屬()和不動(dòng)桿菌屬()等.除進(jìn)水相-水系和生物膜相-烴系外,其他6個(gè)樣品中第一優(yōu)勢菌屬均為乳球菌屬,其相對豐度為17.31%~20.72%,該菌屬在顆粒物相-烴系中相對豐度最高.進(jìn)水相-水系第一優(yōu)勢菌屬為土壤桿菌屬(),相對豐度為4.07%,生物膜相-烴系中第一優(yōu)勢菌屬為變形菌門的普羅威登斯菌屬,相對豐度為30.22%,其次為乳球菌屬,相對豐度為8.05%.如圖3(b)所示,8個(gè)樣品中排名前20的菌屬(平均相對豐度>1%)分別為斯科曼氏球菌屬(),枝動(dòng)桿菌屬(),土壤桿菌屬(),紫色桿菌屬()和不動(dòng)桿菌屬()等.除進(jìn)水相-烴系和生物膜相-烴系之外,其他6個(gè)樣品中第一優(yōu)勢菌屬均為枝動(dòng)桿菌屬,其相對豐度為5.64%~8.30%,該菌屬在顆粒物相-烴系中含量最高.進(jìn)水相-烴系中第一優(yōu)勢菌屬為乳球菌屬,相對豐度為15.08%,生物膜相-烴系中第一優(yōu)勢菌屬為斯科曼氏球菌屬,相對豐度為43.55%.

    圖3 2種材質(zhì)掛片反應(yīng)器多相界面的細(xì)菌屬水平相對豐度

    Fig 3 Relative abundance of bacteria level at the multiphase interface in PVC (a) and PC (b) reactors

    2.3 細(xì)菌門水平疏水性分析

    如圖4(a)~(c),在PVC材質(zhì)掛片反應(yīng)器中,比較各相門分類水平'hw與總菌群0hw的大小,可知出水相中10個(gè)菌門的'hw均顯著大于0hw(< 0.01),表明出水相細(xì)菌整體疏水性較高,其中排名第10的異常球菌-棲熱菌門('hw-0hw=+6.21)疏水性最強(qiáng);生物膜相中,僅排名第2的變形菌門和第10的浮霉菌門的'hw高于0hw,其他菌門如厚壁菌門、放線菌門、藍(lán)菌門等的'hw則明顯低于0hw(<0.01),表明在生物膜相中大多數(shù)菌門呈親水性.顆粒物相中,除了第10位的異常球菌-棲熱菌門('hw-0hw=-0.01)偏適中疏水性外,其他9個(gè)菌門均表現(xiàn)出高疏水性.

    如圖4(d)~(f),在PC材質(zhì)掛片反應(yīng)器中,出水相僅酸桿菌和藍(lán)藻門'hw略低于0hw,而相對豐度排名前2位的變形菌門和厚壁菌門'hw略高于0hw(<0.05),這些菌門均表現(xiàn)中等的疏水性,其他菌門如放線菌門、綠彎菌門、疣微菌門等的'hw顯著高于0hw(<0.01),疏水性較高;生物膜相中,排名第1的變形菌門呈適中疏水性,放線菌門和酸桿菌門呈較高疏水性,其他菌門則表現(xiàn)出較高親水性;顆粒物相中包括變形菌門、厚壁菌門、放線菌門等在內(nèi)的10個(gè)菌門的'hw均顯著高于0hw(<0.01),說明生物膜相的細(xì)菌在門水平上的整體疏水性較高.

    圖4 2種材質(zhì)掛片反應(yīng)器多相界面排名前10的細(xì)菌門水平疏水性

    .2.4 細(xì)菌屬水平疏水性分析

    如圖5(a)~(c),在PVC材質(zhì)掛片反應(yīng)器中,出水相僅類芽孢桿菌屬的'hw低于0hw,表現(xiàn)出親水性,其他9個(gè)菌屬均呈較高疏水性,說明出水的細(xì)菌在屬水平上整體偏疏水性,其中普羅威登斯菌屬('hw-0hw=+8.65)'hw最大,疏水性最強(qiáng);生物膜相中,僅普羅威登斯菌屬('hw-0hw=+13.42)和不動(dòng)桿菌屬('hw-0hw=+0.19)的'hw高于0hw,呈疏水性,其他8個(gè)菌屬均偏親水性;顆粒物相中細(xì)菌疏水性與出水相類似,僅類芽孢桿菌屬呈親水性,其他9個(gè)菌屬均表現(xiàn)出較強(qiáng)疏水性,說明顆粒物相細(xì)菌在屬水平上的整體疏水性較高.

    圖5 2種材質(zhì)掛片反應(yīng)器多相界面排名前10的細(xì)菌屬水平疏水性

    .如圖5(d)~(f),在PC材質(zhì)掛片反應(yīng)器中,出水相僅棒狀桿菌屬的'hw略低于0hw,其他包括枝動(dòng)桿菌屬和土壤桿菌屬等在內(nèi)的6個(gè)菌屬'hw略高于0hw,這些菌屬均呈中等疏水性,說明出水細(xì)菌在屬水平上整體疏水性適中;生物膜相中僅排名第1位的斯科曼氏球菌屬('hw-0hw=+101.33)和第6位的貧養(yǎng)桿菌屬('hw-0hw=+104.06)表現(xiàn)出極高疏水性,其他菌屬則偏親水性;顆粒物相中僅羅氏菌屬表現(xiàn)出親水性,其他9個(gè)菌屬均呈較高疏水性,說明顆粒物相細(xì)菌在屬水平上的整體疏水性較高.

    3 討論

    3.1 pH值對MATH測定的干擾和排除

    本研究采用MATH測定與Illumina高通量測序相結(jié)合的方法,評估多相界面中不同細(xì)菌群體的細(xì)胞疏水性.以前的研究表明,除了表面疏水性之外,微生物對烴類液滴的粘附還依賴于pH值[15].這說明除了疏水性相互作用外,靜電力也參與了粘附過程.本研究在MATH測定的實(shí)驗(yàn)中使用了PUM緩沖液,該緩沖液由于其高離子強(qiáng)度(大于150mM)而使靜電效應(yīng)降到最低,從而使疏水性相互作用更加明顯[16].

    3.2 PVC材質(zhì)和PC材質(zhì)對群落結(jié)構(gòu)的影響

    通過比較不同材質(zhì)掛片反應(yīng)器多相界面的細(xì)菌種群發(fā)現(xiàn),PVC材質(zhì)和PC材質(zhì)掛片反應(yīng)器中的微生物群落結(jié)構(gòu)差異明顯,存在部分共同的優(yōu)勢菌群,但相對豐度不同.門水平上,PC材質(zhì)掛片反應(yīng)器的水相中變形菌門是主要優(yōu)勢菌門,PVC材質(zhì)掛片反應(yīng)器中的主要優(yōu)勢菌門則為厚壁菌門,這2類菌門均為給水管網(wǎng)中的常見菌門[17-19].PVC材質(zhì)掛片反應(yīng)器的生物膜相-烴系中變形菌門相對豐度最高,說明變形菌門類細(xì)菌在PVC管壁更易形成生物膜.

    PVC和PC 2種材質(zhì)掛片反應(yīng)器中的微生物在屬水平上的差異較大,但都發(fā)現(xiàn)多種致病菌或條件致病菌,這些致病菌在其他飲用水的研究中也均有發(fā)現(xiàn),如分枝桿菌[20-21]、不動(dòng)桿菌[22-23]、代爾夫特菌[24-25]、銅綠假單胞菌[16,26]等.PVC材質(zhì)掛片反應(yīng)器中的優(yōu)勢菌屬共包含3類致病菌,總相對豐度為4.22%~4.82%,其中分枝桿菌比例最高(1.09%~ 2.92%).PC材質(zhì)掛片反應(yīng)器中的優(yōu)勢菌屬共包含8類致病菌,總相對豐度為24.07%~29.62%,土壤桿菌比例最高(1.46%~6.46%).2種材質(zhì)掛片的反應(yīng)器中均發(fā)現(xiàn)了不動(dòng)桿菌和鏈球菌,不動(dòng)桿菌可引起泌尿道感染、肺炎、繼發(fā)性腦膜炎以及傷口感染,多發(fā)于免疫力低下人群,如新生兒和老年人[27];鏈球菌則可引起各種化膿性炎癥、猩紅、新生兒敗血癥等,在兒童中發(fā)病率較高[28],這些致病菌的檢出表明飲用水微生物的安全性應(yīng)引起足夠重視.通過對比2種材質(zhì)掛片反應(yīng)器中致病菌種類和相對豐度可知,與PVC材質(zhì)相比,PC材質(zhì)中的致病菌的種類更多、相對豐度更高.2種材質(zhì)的生物膜相-烴系的致病菌比例均較低,PVC材質(zhì)中疏水性最強(qiáng)的致病菌為普羅威登斯屬,PC材質(zhì)中疏水性最強(qiáng)的致病菌為斯科曼氏球菌屬,說明這2種細(xì)菌易附著于管壁上形成生物膜從而影響飲水健康,因此在處理給水管網(wǎng)二次污染問題時(shí),應(yīng)著重對這類細(xì)菌進(jìn)行去除.

    3.3 PVC和PC材質(zhì)對表面疏水性的影響

    通過比較水相、生物膜相和顆粒物相中細(xì)菌的表面疏水性發(fā)現(xiàn),在門分類水平上,PVC和PC2種材質(zhì)掛片反應(yīng)器的出水相和顆粒物相微生物的整體疏水性均較高,其中PC材質(zhì)掛片反應(yīng)器的出水相細(xì)菌的疏水性稍弱于PVC材質(zhì).PVC材質(zhì)掛片反應(yīng)器的生物膜相相對豐度最高的厚壁菌門呈親水性,其他菌門相對豐度較低,故PVC生物膜相整體偏親水性.PC材質(zhì)掛片反應(yīng)器的生物膜相比例較高的2個(gè)菌門均表現(xiàn)出中等疏水性,因此PC材質(zhì)掛片反應(yīng)器生物膜相整體疏水性適中.在屬分類水平上,PVC材質(zhì)掛片反應(yīng)器出水相和顆粒物相疏水性均較強(qiáng),生物膜相中除了普羅威登斯菌屬呈較高疏水性,其他菌屬多表現(xiàn)為親水性,故生物膜相整體呈親水性.PC材質(zhì)掛片反應(yīng)器的出水相整體疏水性適中,生物膜相中由于占絕對優(yōu)勢的斯科曼氏球菌屬疏水性較強(qiáng),故生物膜相整體呈疏水性,顆粒物相則整體疏水性較高.其中,PVC材質(zhì)反應(yīng)器出水相的3種致病菌和PC材質(zhì)反應(yīng)器出水相的8種致病菌在生物膜相中均呈親水性,而在出水相和顆粒物相中則表現(xiàn)出較強(qiáng)或中等疏水性,說明致病菌在生物膜相-烴系中數(shù)量較少,出現(xiàn)這一現(xiàn)象的原因可能與管壁生物膜的脫落有關(guān).由于生物膜脫落導(dǎo)致微生物一部分進(jìn)入水體中,一部分附著在顆粒物上,進(jìn)而使出水相-烴系和顆粒物-烴系中致病菌數(shù)量增多,疏水性增強(qiáng).此外,與PC材質(zhì)掛片反應(yīng)器生物膜相的疏水性相比,PVC材質(zhì)掛片生物膜相相對親水,這在一定程度上也說明PVC材質(zhì)對微生物的吸附作用稍弱于PC材質(zhì).

    4 結(jié)論

    4.1 通過對實(shí)驗(yàn)室模擬管網(wǎng)條件下PVC材質(zhì)和PC材質(zhì)掛片反應(yīng)器的進(jìn)出水水相、生物膜相和顆粒物相分析發(fā)現(xiàn),2種材質(zhì)掛片的反應(yīng)器各相樣品中細(xì)菌群落均具有較高多樣性,但群落結(jié)構(gòu)明顯不同,PVC材質(zhì)掛片的反應(yīng)器中優(yōu)勢菌為厚壁菌門, PC材質(zhì)掛片的反應(yīng)器中優(yōu)勢菌則為變形菌門;兩種材質(zhì)掛片上的微生物在屬水平上的差異較大, PVC材質(zhì)的優(yōu)勢菌是乳球菌屬,PC材質(zhì)的優(yōu)勢菌是斯科曼氏球菌屬.

    4.2 PVC材質(zhì)和PC材質(zhì)掛片反應(yīng)器3相樣品中的優(yōu)勢菌均存在部分致病菌或條件致病菌,其中PVC材質(zhì)掛片反應(yīng)器中優(yōu)勢菌包含3類致病菌,PC材質(zhì)掛片反應(yīng)器包含8類致病菌;PVC和PC2種材質(zhì)掛片反應(yīng)器中含量最高的致病菌分別是分枝桿菌和土壤桿菌,增加了飲用水的健康風(fēng)險(xiǎn),應(yīng)引起關(guān)注.

    4.3 PC材質(zhì)掛片生物膜相較于PVC材質(zhì)疏水性更高,對微生物的吸附作用更強(qiáng),易積累生物膜,但PC材質(zhì)抗沖擊性能好、安裝方便、價(jià)格低廉.而PVC材質(zhì)不易形成生物膜,對控制管網(wǎng)水質(zhì)的二次污染具有積極意義.

    [1] Power K N, Nagy L A. Relationship between bacterial regrowth and some physical and chemical parameters within Sydney's drinking water distribution system [J]. Water Research, 1999,33(3):741-750.

    [2] 林文芳,余志晟,陳 曦,等.給水管網(wǎng)生物膜反應(yīng)器及分子生物學(xué)研究方法進(jìn)展 [J]. 環(huán)境科學(xué)與技術(shù), 2012,35(6):71-78. Lin W F, Yu Z C, Chen X, et al. Advances in research methods of biofilm reactors and molecular biology in water supply networks [J] Environmental Science & Technology, 2012,35(6):71-78.

    [3] 周玲玲,劉文君,張永吉.給水管壁生物膜附著異養(yǎng)菌與水中懸浮菌活性比較 [J]. 中國給水排水, 2007,23(21):37-40. Zhou L L, Liu W J, Zhang Y J. Comparison of activity of heterotrophic bacteria attached to biofilm of water supply wall and suspended bacteria in water [J]. China Water & Wastewater, 2007,23(21):37-40.

    [4] 陳雨喬,段曉笛,陸品品,等.給水管網(wǎng)中耐氯性細(xì)菌的滅活特性研究 [J]. 環(huán)境科學(xué), 2012,33(1):104-109. Chen Y Q, Duan X D, Lu P P, et al. Study on inactivation characteristics of chlorine-tolerant bacteria in water supply network [J]. Environmental Science, 2012,33(1):104-109.

    [5] 張向誼,劉文君,高圣華,等.模擬配水管網(wǎng)中管材和余氯對生物膜形成的影響 [J]. 中國環(huán)境科學(xué), 2006,(3):303-306. Zhang X Y, Liu W J, Gao S H, et al. The influence of pipe materials and residual chlorine in the stimulant water distribution pipe net on the biofilm formation. [J]. China Environmental Science, 2006,(3):303- 306.

    [6] 葉 萍,申屠華斌,陳環(huán)宇,等.滯流工況下管網(wǎng)水中微生物群落對鐵釋放的影響 [J]. 中國環(huán)境科學(xué), 2017,37(12):4578-4584. Ye P, Shen T H B, Chen H Y, et al. Influence of microbial community on iron release under stagnation condition in drinking water systems [J]. China Environmental Science, 2017,37(12):4578-4584.

    [7] 孫慧芳,石寶友,王東升.供水管網(wǎng)內(nèi)壁生物膜的特征及其對水質(zhì)的影響 [J]. 中國給水排水, 2011,27(21):40-45. Sun H F, Shi B Y, Wuang D S. Characteristics of biofilm on the inner wall of water supply network and its influence on water quality [J]. China Water & Wastewater, 2011,27(21):40-45.

    [8] 黃翔峰.MATH法表征環(huán)境微生物細(xì)胞表面疏水性的研究進(jìn)展 [J]. 微生物學(xué)通報(bào), 2015,42(1):200-206. Huang X F. Advances in MATH Method for characterizing the surface hydrophobicity of environmental microorganisms [J]. Microbiology China, 2015,42(1):200-206.

    [9] Popovici J, White C P, Hoelle J, et al. Characterization of the cell surface properties of drinking water pathogens by microbial adhesion to hydrocarbon and electrophoretic mobility measurements [J]. Colloids & Surfaces B: Biointerfaces, 2014,118:126-132.

    [10] Noriyuki I, Michio S, Hirosi Anzai, et al. Relationships among colony morphotypes, cell-surface properties and bacterial adhesion to substrata in[J]. Colloids & Surfaces B Biointerfaces, 2003,30(1):51-60.

    [11] Djeridi I, Cécile Militon, Grossi V, et al. Evidence for surfactant production by the, sp. MSNC14 in hydrocarbon-containing media [J]. Extremophiles, 2013,17(4):669- 675.

    [12] Zhang M L, Wang L, Xu M Y, et al.Selective antibiotic resistance genes in multiphase samples during biofilm growth in a simulated drinking water distribution system: Occurrence, correlation and low- pressure ultraviolet removal [J].Science of The Total Environment, 2019,649:146-155.

    [13] Caporaso J G, Lauber C L, Walters W A, et al. Global patterns of 16S rRNA diversity at a depth of millions of sequences per sample [J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2011,108Suppl 1(Supplement_1):4516-4522.

    [14] Yuan Q C, Feng G, Herbert H P, et al. Hydrophobicity of diverse bacterial populations in activated sludge and biofilm revealed by microbial adhesion to hydrocarbons assay and high-throughput sequencing [J]. Colloids & Surfaces B: Biointerfaces, 2014,(114): 379-385.

    [15] Busscher H J, Mei H C V D. Implications of microbial adhesion to hydrocarbons for evaluating [J]. Colloids & Surfaces B Biointerfaces, 1995,5(3/4):111-116.

    [16] Rosenberg M. Microbial adhesion to hydrocarbons: Twenty-five years of doing MATH [J]. FEMS Microbiology Letters, 2006,262(2):129- 134.

    [17] Vaz-Moreira I, Nunes O C, Manaia, et al. Ubiquitous and persistent, Proteobacteria, and other Gram-negative bacteria in drinking water [J]. Science of the Total Environment, 2017,586:1141-1149.

    [18] Wu H, Zhang J, Mi Z, et al. Biofilm bacterial communities in urban drinking water distribution systems transporting waters with different purification strategies [J]. Applied Microbiology & Biotechnology, 2015,99(4):1947-1955.

    [19] Sun H, Shi B, Bai Y, et al. Bacterial community of biofilms developed under different water supply conditions in a distribution system [J]. Science of The Total Environment, 2014,472:99-107.

    [20] Marciano-Cabral F, Jamerson M, Kaneshiro E S. Free-living amoebae,andin tap water supplied by a municipal drinking water utility in the USA [J]. Journal of Water & Health, 2010,8(1):71-82.

    [21] Gomez-Smith C K, Lapara T M, Hozalski R M. Sulfate reducing bacteria and Mycobacteria dominate the biofilm communities in a chloraminated drinking water distribution system [J]. Environmental Science & Technology, 2015,49(14):8432-8440.

    [22] Narciso-Da-Rocha C, Vaz-Moreira I, Svensson-Stadler L, et al. Diversity and antibiotic resistance ofspp. in water from the source to the tap [J]. Applied Microbiology & Biotechnology, 2013, 97(1):329-340.

    [23] Kelly J J, Minalt N, Culotti A, et al. Temporal variations in the abundance and composition of biofilm communities colonizing drinking water distribution pipes [J]. PLoS One, 2014,9(5):1-11.

    [24] 張明露,劉文君,李翠萍,等.水源切換對水廠出水細(xì)菌群落的影響 [J]. 中國環(huán)境科學(xué), 2015,35(8):2517-2522. Zhang M L, Liu W J, Li C P, et al. Effect of water source switching on bacterial community in effluent of waterworks [J]. China Environmental Science, 2015,35(8):2517-2522.

    [25] Liao X, Chen C, Wang Z, et al. Bacterial community change through drinking water treatment processes [J]. International Journal of Environmental Science & Technology, 2015,12(6):1867-1874.

    [26] Flores Ribeiro A, Bodilis J, Alonso L, et al. Occurrence of multi- antibiotic resistantspp. in drinking water produced from karstic hydrosystems [J]. Science of The Total Environment, 2014, 490:370-378.

    [27] 胡子鑒.不動(dòng)桿菌屬感染的研究進(jìn)展 [J]. 醫(yī)學(xué)綜述, 1999,(1):5-7. Hu Z J. Advances in research on Acinetobacter infection [J]. Medical Recapitulate, 1999,(1):5-7.

    [28] O'Brien K L, Wolfson L J, Watt J P, et al. Burden of disease caused byin children younger than 5 years: Global estimates [J]. The Lancet, 2009,374(9693):893-902.

    Study on microbial surface hydrophobicity under multiphase interface of water distribution network.

    ZHANG Ming-lu1, XU Shao-feng1, XU Meng-yao1, WANG Li1, CHAI Shan-shan1, BAI Miao2, ZHANG Can2*

    (1.Department of Environmental Science and Engineering, Beijing Technology and Business University, Beijing 100048, China;2.Center for Disease Control and Prevention of Chinese PLA, Beijing 100071, China)., 2019,39(11):4823~4830

    The CDC (Centers for Disease Control) biofilm reactor was used to simulate the water distribution system, and two kinds of hanging materials of polyvinyl chloride (PVC) and polycarbonate (PC) were selected. The cell hydrophobicity of different bacterial populations in the water phase, biofilm phase and particulate phase of the two hanging materials was studied by a combination of microbial adhesion hydrocarbon (MATH) experiment and Illumina high-throughput sequencing. The results showed that the dominant bacteria in the reactor of PVC hanging coupon was Firmicutes and the relative abundance was 68.31% ~ 81.00%. While the dominant bacteria in the reactor of PC hanging coupon was Proteobacteria and the relative abundance was 24.39% ~ 64.40%. The predominantbacteria in the reactor of PVC hanging coupon contained three types of pathogenic bacteria, and the PC hanging coupon contained eight pathogens. The hydrophobicity of biofilm phase on the PC hanging coupon was higher than that on PVC, which facilitated the attachment of bacteria and biofilm formation. The ability of PVC material to form biofilm was lower. Hence,it had positive impact on the secondary pollution control during the water transportation. However, other engineering factors should also be considered in the practical applications.

    water distribution system;biofilm;cell hydrophobicity;microbial adhesion hydrocarbon (MATH);high-throughput sequencing

    X172

    A

    1000-6923(2019)11-4823-08

    張明露(1982-),女,黑龍江哈爾濱人,副教授,博士,主要從事環(huán)境微生物研究.發(fā)表論文30余篇.

    2019-04-29

    國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃(2016YFD0401202);國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(51408010,51578008);北京自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(8192053)

    * 責(zé)任作者, 副研究員,zhangcancqu@163.com

    猜你喜歡
    掛片菌門致病菌
    用檸檬酸銨代替硝酸處理不銹鋼掛片
    海上油氣田油氣管道腐蝕掛片監(jiān)測技術(shù)
    野生樹鼩與人工飼養(yǎng)樹鼩消化道不同部位微生物組成的比較研究
    饑餓與重?cái)z食對河蟹腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響
    昆蟲體內(nèi)微生物多樣性的影響因素研究進(jìn)展
    妊娠期糖尿病腸道菌群變化及臨床價(jià)值分析
    大型水泥企業(yè)5級內(nèi)筒耐熱鋼掛片與全陶瓷掛片使用性能研究
    中國水泥(2017年9期)2017-05-08 03:36:27
    SSEL結(jié)合多重PCR同時(shí)快速檢測生菜中4種食源性致病菌
    食品中致病菌快速檢測方法的探討
    獼猴桃采后致病菌的分離及中草藥提取物對其抑菌效果初探
    国产精品不卡视频一区二区| 精品欧美国产一区二区三| 日本黄色片子视频| 成人永久免费在线观看视频| 此物有八面人人有两片| 丰满乱子伦码专区| 国产成人aa在线观看| 成年av动漫网址| 色5月婷婷丁香| 精品人妻偷拍中文字幕| 97超视频在线观看视频| 亚洲四区av| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲av成人av| 久久久久国内视频| 天堂影院成人在线观看| 欧美三级亚洲精品| 五月玫瑰六月丁香| 国产人妻一区二区三区在| 99热这里只有是精品50| 亚洲一区二区三区色噜噜| 国产成人91sexporn| 99国产精品一区二区蜜桃av| 夜夜夜夜夜久久久久| 99热精品在线国产| 悠悠久久av| 波多野结衣高清作品| 插阴视频在线观看视频| 国产精品永久免费网站| 女同久久另类99精品国产91| 国产高清激情床上av| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 日本三级黄在线观看| 大香蕉久久网| 91av网一区二区| 欧美一区二区亚洲| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 啦啦啦韩国在线观看视频| av.在线天堂| 免费av毛片视频| 免费搜索国产男女视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 色综合色国产| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 波多野结衣高清无吗| 亚洲内射少妇av| 日韩亚洲欧美综合| 国产av麻豆久久久久久久| 亚洲成人久久性| 十八禁网站免费在线| 国产成人影院久久av| 亚洲人成网站在线播| 看免费成人av毛片| 日本 av在线| 卡戴珊不雅视频在线播放| 国产精品一二三区在线看| 国产欧美日韩精品一区二区| 免费看a级黄色片| 中国国产av一级| 国产中年淑女户外野战色| 日韩大尺度精品在线看网址| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 91在线精品国自产拍蜜月| 极品教师在线视频| 国产视频一区二区在线看| 久久99热这里只有精品18| 男女视频在线观看网站免费| 午夜福利成人在线免费观看| 小说图片视频综合网站| 十八禁网站免费在线| 久久久国产成人免费| 久久久久久久亚洲中文字幕| 日韩一本色道免费dvd| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 国产成人aa在线观看| 少妇的逼水好多| 久久久久久九九精品二区国产| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 精品欧美国产一区二区三| 国产探花在线观看一区二区| 人人妻人人澡欧美一区二区| 日韩成人av中文字幕在线观看 | 国产精品免费一区二区三区在线| 国产精华一区二区三区| 中文字幕av在线有码专区| 又粗又爽又猛毛片免费看| 色综合站精品国产| 中出人妻视频一区二区| www.色视频.com| 欧美成人a在线观看| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 成人亚洲欧美一区二区av| 99热只有精品国产| 99热6这里只有精品| 国产伦精品一区二区三区四那| 中文字幕av成人在线电影| 欧美一区二区国产精品久久精品| 国产v大片淫在线免费观看| 欧美激情久久久久久爽电影| 久久亚洲精品不卡| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产激情偷乱视频一区二区| 亚洲国产精品sss在线观看| av视频在线观看入口| 欧美高清性xxxxhd video| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 韩国av在线不卡| 伦精品一区二区三区| 亚洲精品成人久久久久久| 色播亚洲综合网| 一本精品99久久精品77| 欧美又色又爽又黄视频| 精品久久久久久久末码| 级片在线观看| 91久久精品电影网| 亚洲精品国产成人久久av| 久久久久性生活片| 欧美日韩综合久久久久久| 黑人高潮一二区| 1024手机看黄色片| 在线播放无遮挡| 美女免费视频网站| 美女cb高潮喷水在线观看| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 亚洲国产欧美人成| 欧美极品一区二区三区四区| 永久网站在线| 日韩强制内射视频| 亚洲国产精品国产精品| 亚洲成人久久性| 中国国产av一级| 午夜福利成人在线免费观看| 国产精品综合久久久久久久免费| 免费观看人在逋| 成人亚洲精品av一区二区| 波野结衣二区三区在线| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 国产免费男女视频| 国产精品人妻久久久影院| 最近2019中文字幕mv第一页| 三级经典国产精品| 欧美一区二区国产精品久久精品| 全区人妻精品视频| 国产精品人妻久久久影院| 在线免费观看不下载黄p国产| 91在线观看av| 男人舔女人下体高潮全视频| 亚洲国产色片| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 日韩三级伦理在线观看| 干丝袜人妻中文字幕| 国产黄片美女视频| 欧美精品国产亚洲| 欧美成人精品欧美一级黄| 小说图片视频综合网站| 18禁在线播放成人免费| 观看免费一级毛片| 亚洲成人精品中文字幕电影| 久久国内精品自在自线图片| 国产伦在线观看视频一区| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 国产亚洲av嫩草精品影院| 男女那种视频在线观看| 亚洲自拍偷在线| 在线观看午夜福利视频| 欧美激情国产日韩精品一区| 久久人人爽人人爽人人片va| 少妇熟女欧美另类| 精品不卡国产一区二区三区| 99九九线精品视频在线观看视频| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 免费在线观看影片大全网站| 免费搜索国产男女视频| 97超碰精品成人国产| 国内揄拍国产精品人妻在线| 免费在线观看成人毛片| 日本成人三级电影网站| 亚洲性夜色夜夜综合| 亚洲久久久久久中文字幕| 悠悠久久av| 嫩草影院新地址| 观看免费一级毛片| www日本黄色视频网| 国产亚洲av嫩草精品影院| 久久亚洲国产成人精品v| 99久久精品热视频| 99久国产av精品国产电影| 欧美高清成人免费视频www| 国内揄拍国产精品人妻在线| 99热这里只有是精品在线观看| 亚洲经典国产精华液单| 国产一区二区激情短视频| 极品教师在线视频| 亚洲精品亚洲一区二区| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国产欧美日韩精品一区二区| 久久久久久伊人网av| 国产成人aa在线观看| 黄色一级大片看看| 成年女人永久免费观看视频| 午夜久久久久精精品| 亚洲精品日韩在线中文字幕 | 欧美高清性xxxxhd video| 一区二区三区高清视频在线| 99国产精品一区二区蜜桃av| 免费av观看视频| 亚洲美女视频黄频| 性欧美人与动物交配| 国产熟女欧美一区二区| 免费观看人在逋| 精品一区二区三区av网在线观看| eeuss影院久久| 最近在线观看免费完整版| 91狼人影院| 精品国产三级普通话版| 久久久国产成人精品二区| 亚洲电影在线观看av| 九九热线精品视视频播放| 欧美高清性xxxxhd video| 日韩一本色道免费dvd| 国产成人a∨麻豆精品| 成人欧美大片| 丰满的人妻完整版| 男人狂女人下面高潮的视频| 日韩欧美 国产精品| 免费观看人在逋| 淫妇啪啪啪对白视频| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 国产亚洲av嫩草精品影院| 搞女人的毛片| 有码 亚洲区| 中文字幕免费在线视频6| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 精品久久久久久久末码| 日本熟妇午夜| 精品久久国产蜜桃| 亚洲av成人精品一区久久| 国产一区二区三区av在线 | 老女人水多毛片| 国产av在哪里看| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲最大成人中文| 综合色av麻豆| 国产在线精品亚洲第一网站| 99久久精品热视频| 亚洲av电影不卡..在线观看| 男人舔奶头视频| 性色avwww在线观看| 99久久精品一区二区三区| 草草在线视频免费看| 欧美色欧美亚洲另类二区| 全区人妻精品视频| 亚洲高清免费不卡视频| 久久久久国产网址| 俄罗斯特黄特色一大片| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产伦精品一区二区三区视频9| 在线观看午夜福利视频| 久久久精品大字幕| 日韩制服骚丝袜av| av女优亚洲男人天堂| 看片在线看免费视频| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲欧美精品自产自拍| 午夜福利在线观看吧| 欧美+日韩+精品| 国产黄a三级三级三级人| 高清毛片免费看| 国产精品福利在线免费观看| 三级毛片av免费| 国产精品久久久久久久电影| 性插视频无遮挡在线免费观看| 人人妻人人看人人澡| 高清日韩中文字幕在线| 久久久久久久久久久丰满| 亚洲自拍偷在线| 久99久视频精品免费| 欧美日韩综合久久久久久| 日本a在线网址| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 干丝袜人妻中文字幕| 国产乱人视频| 久久九九热精品免费| 三级经典国产精品| 日韩av在线大香蕉| 黄色配什么色好看| 免费观看人在逋| 真人做人爱边吃奶动态| 色哟哟·www| 久久精品国产亚洲av天美| 国产一区二区三区av在线 | 免费一级毛片在线播放高清视频| 久久久久久伊人网av| 午夜福利成人在线免费观看| 亚洲精品成人久久久久久| 韩国av在线不卡| 国产高潮美女av| 亚洲精品国产av成人精品 | 久久久国产成人免费| 日本成人三级电影网站| 一区二区三区免费毛片| 又黄又爽又免费观看的视频| 日本a在线网址| 欧美日本视频| 有码 亚洲区| 亚洲在线自拍视频| 国产成年人精品一区二区| 欧美国产日韩亚洲一区| 热99在线观看视频| 人妻久久中文字幕网| 午夜福利在线在线| 久久精品国产亚洲网站| 日韩欧美 国产精品| 男人的好看免费观看在线视频| 亚洲经典国产精华液单| 性插视频无遮挡在线免费观看| 国产精品乱码一区二三区的特点| 男女之事视频高清在线观看| 不卡视频在线观看欧美| 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 五月玫瑰六月丁香| 中文字幕久久专区| 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲在线观看片| 国产精品久久久久久精品电影| 99热这里只有精品一区| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 熟女人妻精品中文字幕| 老熟妇仑乱视频hdxx| 男插女下体视频免费在线播放| 黄色日韩在线| 免费搜索国产男女视频| 国产黄片美女视频| 美女内射精品一级片tv| 女同久久另类99精品国产91| 一本久久中文字幕| 在线a可以看的网站| 国产精品久久久久久av不卡| 又黄又爽又免费观看的视频| 男女视频在线观看网站免费| 大香蕉久久网| 男女视频在线观看网站免费| av天堂中文字幕网| 最后的刺客免费高清国语| 婷婷亚洲欧美| 天天躁日日操中文字幕| 免费无遮挡裸体视频| 日日摸夜夜添夜夜爱| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 俄罗斯特黄特色一大片| 内射极品少妇av片p| 欧美性感艳星| 国产伦在线观看视频一区| 成人漫画全彩无遮挡| 看黄色毛片网站| 成人特级av手机在线观看| 国产精品电影一区二区三区| 国产黄a三级三级三级人| 免费人成在线观看视频色| 国产一区亚洲一区在线观看| 国产色爽女视频免费观看| 色吧在线观看| 国产成人a区在线观看| 亚洲精品色激情综合| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 日韩制服骚丝袜av| 久久人妻av系列| 日日撸夜夜添| 亚洲在线自拍视频| 国产一区二区在线av高清观看| 久久久精品大字幕| 亚洲国产欧美人成| 久久亚洲国产成人精品v| 黄色视频,在线免费观看| 中文资源天堂在线| 狠狠狠狠99中文字幕| 国内精品一区二区在线观看| 免费人成视频x8x8入口观看| h日本视频在线播放| 男女视频在线观看网站免费| 欧美区成人在线视频| 插阴视频在线观看视频| 人妻夜夜爽99麻豆av| 国产淫片久久久久久久久| 一区二区三区高清视频在线| 精品无人区乱码1区二区| 日本五十路高清| 免费在线观看成人毛片| 91av网一区二区| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 亚洲人成网站在线播| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 亚洲成人精品中文字幕电影| 成人亚洲精品av一区二区| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 亚洲精品日韩av片在线观看| 欧美高清性xxxxhd video| 久久99热这里只有精品18| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| av在线老鸭窝| 国国产精品蜜臀av免费| 搡老熟女国产l中国老女人| 免费观看人在逋| 看免费成人av毛片| 亚洲精品久久国产高清桃花| 欧美日韩综合久久久久久| 春色校园在线视频观看| 老熟妇仑乱视频hdxx| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 国产男靠女视频免费网站| 欧美3d第一页| 最新中文字幕久久久久| 日韩强制内射视频| 内射极品少妇av片p| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 国产亚洲精品久久久com| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 少妇人妻精品综合一区二区 | 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 一本精品99久久精品77| АⅤ资源中文在线天堂| 日韩成人伦理影院| 91久久精品国产一区二区成人| 色综合色国产| 国产亚洲av嫩草精品影院| 成人av一区二区三区在线看| 99热这里只有是精品在线观看| 一级a爱片免费观看的视频| 亚洲美女搞黄在线观看 | 99久久精品一区二区三区| 嫩草影院精品99| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 亚洲无线在线观看| 国产成人freesex在线 | 久久热精品热| 久久99热6这里只有精品| 欧美日韩精品成人综合77777| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 深夜精品福利| 久久久欧美国产精品| 天美传媒精品一区二区| 国产高清不卡午夜福利| 成人av在线播放网站| 午夜福利在线在线| 精品久久久久久成人av| 国产高清视频在线观看网站| 国产亚洲精品av在线| 狠狠狠狠99中文字幕| 精品不卡国产一区二区三区| 国产人妻一区二区三区在| 一级毛片我不卡| 欧美三级亚洲精品| 一级黄片播放器| 午夜福利18| 国产久久久一区二区三区| 精品乱码久久久久久99久播| a级一级毛片免费在线观看| 日韩欧美免费精品| 一级黄色大片毛片| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 国产三级在线视频| 亚洲第一电影网av| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 久久久久久久久久成人| 亚洲精品久久国产高清桃花| 大型黄色视频在线免费观看| 老司机福利观看| 美女黄网站色视频| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 一级av片app| 久久亚洲精品不卡| 99精品在免费线老司机午夜| 天美传媒精品一区二区| 国产熟女欧美一区二区| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 婷婷色综合大香蕉| 成人美女网站在线观看视频| 免费看美女性在线毛片视频| 亚洲成人av在线免费| 国产亚洲av嫩草精品影院| 久久欧美精品欧美久久欧美| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | av在线亚洲专区| 六月丁香七月| 成人毛片a级毛片在线播放| 少妇熟女欧美另类| 99久久精品热视频| 午夜视频国产福利| av视频在线观看入口| 成年女人看的毛片在线观看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 日韩精品有码人妻一区| 联通29元200g的流量卡| 国产黄色小视频在线观看| 国产熟女欧美一区二区| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 国产精品电影一区二区三区| 国产高清有码在线观看视频| 亚洲电影在线观看av| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 日韩精品有码人妻一区| 日韩一区二区视频免费看| 一区二区三区四区激情视频 | www.色视频.com| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 亚洲av熟女| 国产精品一区二区性色av| 99热这里只有是精品在线观看| 久久99热这里只有精品18| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 日日摸夜夜添夜夜爱| 免费在线观看影片大全网站| 晚上一个人看的免费电影| 国产高清视频在线观看网站| 一个人看视频在线观看www免费| 国产精华一区二区三区| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 亚洲无线观看免费| 亚洲高清免费不卡视频| 此物有八面人人有两片| 亚洲国产精品国产精品| 国产精品爽爽va在线观看网站| 少妇高潮的动态图| 熟女人妻精品中文字幕| 日本 av在线| 国产精品野战在线观看| 91久久精品国产一区二区成人| 日韩欧美 国产精品| 午夜福利成人在线免费观看| 有码 亚洲区| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 国产人妻一区二区三区在| 欧美日韩精品成人综合77777| 中文字幕久久专区| 99国产精品一区二区蜜桃av| 两个人的视频大全免费| 欧美丝袜亚洲另类| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 一个人免费在线观看电影| 成年女人看的毛片在线观看| 老司机午夜福利在线观看视频| 国产亚洲91精品色在线| 国产成人freesex在线 | 日本色播在线视频| 久久久久久久亚洲中文字幕| 日本a在线网址| 亚洲成人久久性| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 精品久久国产蜜桃| 婷婷精品国产亚洲av| 午夜激情福利司机影院| 亚洲av.av天堂| 国产伦在线观看视频一区| 久久九九热精品免费| 美女免费视频网站| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 六月丁香七月| av中文乱码字幕在线| 中文在线观看免费www的网站| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| av.在线天堂| 极品教师在线视频| 成年女人永久免费观看视频| .国产精品久久| 韩国av在线不卡| 97超视频在线观看视频| 少妇熟女aⅴ在线视频| 欧美色视频一区免费| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 观看免费一级毛片| 日本a在线网址| 精品人妻偷拍中文字幕| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 日日摸夜夜添夜夜添小说| 精品久久久久久久末码| 中文字幕av成人在线电影| 欧美中文日本在线观看视频| 国产成人91sexporn| 亚洲丝袜综合中文字幕| 九九热线精品视视频播放| 久久午夜亚洲精品久久| 一区二区三区高清视频在线| 国产成人aa在线观看| 2021天堂中文幕一二区在线观| 欧美成人免费av一区二区三区| 国内揄拍国产精品人妻在线| 亚洲av成人精品一区久久| 听说在线观看完整版免费高清| av福利片在线观看| 国产美女午夜福利| 成人国产麻豆网| 久久精品国产亚洲av天美| 国产成人福利小说| 不卡视频在线观看欧美| 国产精华一区二区三区| 亚洲精品在线观看二区| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 色综合亚洲欧美另类图片| 欧美潮喷喷水| 一区二区三区四区激情视频 | 91狼人影院| 亚洲五月天丁香|