高絡(luò)合碘溶液口服對仔豬腸道菌群的影響

楊 清

(安徽省宿州市動物衛(wèi)生監(jiān)督所,安徽 宿州 234000)

高絡(luò)合碘溶液是通過特定工藝將碘、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)按一定比例絡(luò)合成水溶性高分子化合物,再與增強(qiáng)劑、穩(wěn)定劑等復(fù)合而成。其中有85%以上的絡(luò)合碘可解聚成游離碘而發(fā)揮殺菌效力,對多種病原微生物如病毒、細(xì)菌、芽孢、真菌、原蟲等具有很好的殺滅效果[1-4]。當(dāng)前碘制劑主要作為畜禽舍環(huán)境消毒、水體消毒或體表消毒[5-6],很少有碘制劑供動物口服后的安全性評價(jià)。高絡(luò)合碘溶液中碘與PVP 的絡(luò)合比高,毒性小,且性質(zhì)溫和,刺激性小,可廣泛應(yīng)用于獸醫(yī)臨床。然而,碘對病原微生物的殺滅作用沒有選擇性,因此,評估口服高絡(luò)合碘溶液后對仔豬腸道菌群的影響對指導(dǎo)臨床用藥有非常重要的意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)藥物 0.5%高絡(luò)合碘溶液,自制,規(guī)格為500 mL/瓶,生產(chǎn)批號為190404。

1.1.2 試驗(yàn)動物 健康杜長大三元仔豬24 頭,30日齡,公母各半。試驗(yàn)前適應(yīng)性飼養(yǎng)1 周,試驗(yàn)期間,自由采食和飲水。

1.1.3 試驗(yàn)試劑 BS 培養(yǎng)基、MRS 培養(yǎng)基、MAC培養(yǎng)基及EC 培養(yǎng)基,500 g/瓶,購自青島高科園海博生物技術(shù)有限公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)分組 30 日齡健康杜長大三元仔豬24頭,隨機(jī)分為4 組,公母各半,每組6 頭。將高絡(luò)合碘溶液用潔凈飲用水按相應(yīng)比例稀釋后按10 mL/頭灌服,每天2 次,連灌3 d?？瞻讓φ战M灌服相同體積的生理鹽水。

1.2.2 考察指標(biāo) 試驗(yàn)開始后每天觀察各組精神狀態(tài)以及排便情況。試驗(yàn)開始前(0 d)每組試驗(yàn)豬無菌采集直腸糞便做細(xì)菌分離檢查。最后1 次給藥第2 天(4 d),每組試驗(yàn)豬采集直腸糞便進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)計(jì)數(shù),統(tǒng)計(jì)糞便中大腸桿菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌和腸球菌的含菌量。結(jié)束給藥后的第7 天(11 d)同樣方法采集直腸糞便進(jìn)行細(xì)菌分離計(jì)數(shù)。

1.2.3 樣本采集及檢測 取直腸糞便后放入已滅菌干燥的10 mL 離心管中,4 ℃保存,備用。取0.5 g于10 mL 的滅菌離心管中,加入無菌生理鹽水4.5 mL,充分混勻后,吸取0.5 mL 于盛有4.5 mL 無菌生理鹽水的離心管中依次進(jìn)行10 倍稀釋。細(xì)菌數(shù)量用平板菌落計(jì)數(shù)法在37 ℃下培養(yǎng)24～48 h 后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù),以每克腸道內(nèi)容物中細(xì)菌個(gè)數(shù)的對數(shù)(lg CFU)/g 表示。大腸桿菌培養(yǎng)使用MAC 瓊脂培養(yǎng)基,腸球菌培養(yǎng)使用EC 培養(yǎng)基,乳酸桿菌培養(yǎng)使用MRS 培養(yǎng)基,雙歧桿菌培養(yǎng)使用BS 培養(yǎng)基。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS16.0 軟件統(tǒng)計(jì)處理,結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果

2.1 高絡(luò)合碘溶液對仔豬糞便形態(tài)的影響 給藥期間各組試驗(yàn)豬只精神狀態(tài)、采食及飲水等均無異常。給藥前后各組豬只的糞便均呈干燥、團(tuán)塊狀,未見有腹瀉。

2.2 高絡(luò)合碘溶液對仔豬腸道菌群的影響 從表1 可以看出,給藥前各組之間的各種菌群數(shù)量差異不顯著(P＞0.05)。給藥后第4 天和第11 天的細(xì)菌分離培養(yǎng)計(jì)數(shù)結(jié)果顯示,同一菌群的不同劑量組之間差異不顯著(P＞0.05)。

3 討論

動物腸道中的正常菌群是重要的非特異性防御屏障,對于某些入侵的病原微生物具有明顯的抵御作用。正常菌群彼此之間保持著一種動態(tài)平衡,與宿主的正常生理功能有著密切的關(guān)系。大腸桿菌和乳酸桿菌為腸道中正常菌群,其中乳酸桿菌可產(chǎn)生類抗生素物質(zhì)、乳酸,降低腸道pH 值,既可抑制病原微生物的生長繁殖,又能促進(jìn)腸道中其他厭氧菌的生長繁殖,是動物機(jī)體抵抗疾病的一道天然屏障[7-8]。

表1 給藥前后對仔豬腸道菌群的影響 (n=6)

本試驗(yàn)結(jié)果顯示,試驗(yàn)期間各組豬只均未見任何異常表現(xiàn)。不同時(shí)期點(diǎn)內(nèi)采樣的檢測結(jié)果顯示,高絡(luò)合碘溶液仔豬口服后對腸道菌群(腸桿菌、腸球菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌)變化無影響,各劑量組之間及給藥前后和停藥期相比均差異不顯著(P＞0.05)。綜合結(jié)果表明,高絡(luò)合碘溶液在125 mg/L～500 mg/L 劑量范圍內(nèi)使用,每天2 次,連灌3 d,對仔豬腸道菌群無影響,可安全使用。