王延卓,彭江紅
(烏蘭察布職業(yè)學(xué)院,內(nèi)蒙古烏蘭察布 012000)
目前,抗生素依然被廣泛用于養(yǎng)殖業(yè),在促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育和疫病防治方面發(fā)揮著重要作用(劉磊和朱立賢,2014;蘇勇,2004)。隨著養(yǎng)殖業(yè)的不斷發(fā)展,抗生素的濫用、耐藥和殘留等問題日益嚴(yán)重,影響抗生素的應(yīng)用前景,也阻礙了養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展(王春蘭,2015)。同時(shí),隨著“減抗”“限抗”時(shí)代的到來,抗生素替代品的研究迫在眉睫。目前,益生菌制劑、抗菌肽制劑和中草藥等在抗生素替代方面的研究已成為熱點(diǎn),而益生菌制劑功能的研究受到更多青睞(王向榮,2013)。常用的益生菌種類多樣,其中,芽孢桿菌屬常被作為一種活菌制劑應(yīng)用于養(yǎng)殖業(yè),芽孢桿菌可以產(chǎn)生多種活性酶等有益物質(zhì),在促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育和能量代謝方面發(fā)揮重要作用(張雙翔等,2018;張冬梅,2016)。乳酸芽孢桿菌是一類既可以產(chǎn)生乳酸,又可以形成芽孢的桿菌。1993年,國內(nèi)首次報(bào)道了乳酸芽孢桿菌的分離鑒定研究(趙蕊蕊等,2018),隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,該菌更多的功能及特點(diǎn)被發(fā)掘。研究表明,乳酸芽孢桿菌在腸道中可以消耗氧氣,抑制病原菌的生長(zhǎng),促進(jìn)益生菌增殖,維持腸道微生態(tài)的動(dòng)態(tài)平衡(Busetto等,2014);其次,乳酸芽孢桿菌可以調(diào)節(jié)腸道pH,促進(jìn)多種消化酶活性的發(fā)揮,保證了機(jī)體對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的需求;同時(shí),乳酸芽孢桿菌對(duì)免疫器官功能的發(fā)揮具有一定促進(jìn)作用,參與調(diào)節(jié)動(dòng)物機(jī)體免疫力(Hatayama等,2006)。劉磊等(2011)研究了不同水平芽孢乳桿菌對(duì)仔雞生產(chǎn)性能、腸道發(fā)育及微生物菌群的影響發(fā)現(xiàn),不同的用量對(duì)仔雞料重比、死淘率、腸道發(fā)育、空腸大腸桿菌數(shù)量等的影響各不相同。王向榮(2013)研究了芽孢乳桿菌替代抗生素對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能和血清生化指標(biāo)的影響發(fā)現(xiàn),800mg/kg的芽孢乳桿菌替代喹乙醇、吉他霉素和硫酸粘桿菌素效果較好。本研究擬以芽孢乳桿菌為研究對(duì)象,分析其在肉兔健康養(yǎng)殖中的作用。
1.1 乳酸芽孢桿菌制劑 乳酸芽孢桿菌制劑中的活菌總數(shù)≥2×1010CFU/g。
1.2 試驗(yàn)動(dòng)物 選取體重相近的30日齡健康肉兔40只,購自某肉兔養(yǎng)殖場(chǎng)。
1.3 試驗(yàn)動(dòng)物分組及設(shè)計(jì) 將選取的肉兔隨機(jī)分為4組,每組10只,試驗(yàn)組分別為高劑量組、中劑量組、低劑量組,日糧中乳酸芽孢桿菌的添加量依次為0.08%、0.04%和0.02%,對(duì)照組不添加,正常飲水,連續(xù)飼喂30 d。
1.4 生長(zhǎng)性能測(cè)定 分別在試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)稱取各組肉兔的體重,測(cè)定各組肉兔的平均日增重,統(tǒng)計(jì)各組肉兔30 d的采食量,計(jì)算各組肉兔的平均日采食量;依據(jù)各組肉兔的日采食量和日增重,計(jì)算各組肉兔的料重比,計(jì)算公式如下:
平均日增重/(g/d)=(試驗(yàn)?zāi)w重-試驗(yàn)初體重)/試驗(yàn)天數(shù)
平均日采食量/(g/d)=總采食量/試驗(yàn)天數(shù)料重比=日采食量/日增重
1.5 血液生理生化指標(biāo)測(cè)定 各組隨機(jī)抽取5只肉兔進(jìn)行心臟采血,5 mL/只,取2 mL血液加入到抗凝管中制備抗凝血,用于測(cè)定血液生理指標(biāo);取3 mL血液,3000 r/min離心10 min,收集血清,測(cè)定血清生化指標(biāo)。
1.6 屠宰性能測(cè)定 取剩余的5只肉兔進(jìn)行屠宰性能測(cè)定,試驗(yàn)開始前,各組肉兔需禁食12 h,并于屠宰前稱重,記錄為宰前活重;利用空氣栓塞法處死,剝離皮毛,去除內(nèi)臟,并按照胴體要求,去除頭、尾和四足,測(cè)定各組的平均胴體重;依據(jù)全凈膛重和半凈膛重要求處理肉兔,測(cè)定各組肉兔的全凈膛屠宰率和半凈膛屠宰率,同時(shí)測(cè)定肝臟指數(shù)、腎臟指數(shù)和脾臟指數(shù)。
全凈膛屠宰率/%=全凈膛重/宰前活重×100
半凈膛屠宰率/%=(全凈膛+心臟重+肝臟重+腎臟重)/宰前活重×100
肝臟指數(shù)/%=肝臟重/宰前活重×100
腎臟指數(shù)/%=腎臟重/宰前活重×100
脾臟指數(shù)/%=脾臟重量/宰前活重×100
1.7 數(shù)據(jù)分析 用SPSS20.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,統(tǒng)計(jì)結(jié)果“X±SD”表示。
2.1 生長(zhǎng)性能測(cè)定結(jié)果 通過對(duì)各組肉兔的生長(zhǎng)性能測(cè)定(表1),發(fā)現(xiàn)各組的平均日增重存在差異性,而平均日采食量和平均料肉比均差異不顯著(P>0.05)。其中,高劑量組和中劑量組平均日增重較對(duì)照組顯著提高了51.06%和33.27%(P<0.01)。
表1 生長(zhǎng)性能測(cè)定結(jié)果
2.2 血液生理生化指標(biāo)測(cè)定 通過測(cè)定各組肉兔的血液生理生化指標(biāo),發(fā)現(xiàn)各組生理指標(biāo)中僅白細(xì)胞數(shù)目(WBC)存在差異性,其他指標(biāo)均差異不顯著(P>0.05),其中,高劑量組、中劑量組和低劑量組的白細(xì)胞數(shù)目均與對(duì)照組差異顯著,分別提高了70.71%、61.22%和57.14%(P<0.05),結(jié)果見表2;表3生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果表明,僅谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和葡萄糖(GLU)存在差異性,其中,高劑量組和中劑量組的谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力較對(duì)照組分別提高了35.77%和29.53%(P<0.01),高劑量組、中劑量組和低劑量組的葡萄糖濃度較對(duì)照組分別提高了122.4%、113.6%和89.6%(P<0.05),其他指標(biāo)均差異不顯著(P>0.05)。
表2 血液生理指標(biāo)測(cè)定結(jié)果
2.3 屠宰性能測(cè)定結(jié)果 由表4可知,乳酸芽孢桿菌的劑量對(duì)全凈膛率和半凈膛率的影響較大,隨著劑量的增加,試驗(yàn)組的全凈膛率和半凈膛率均先增加后降低,其中,低劑量組的全凈膛率和半凈膛率最高,且均與對(duì)照組和高劑量組差異顯著(P<0.05);各組間的肝臟指數(shù)、腎臟指數(shù)和脾臟指數(shù)差異均不顯著(P>0.05)。
表3 血清生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果
乳酸芽孢桿菌憑借其產(chǎn)乳酸、產(chǎn)芽孢的特性,已成為當(dāng)前益生菌開發(fā)領(lǐng)域的重點(diǎn)研究對(duì)象,飼料添加劑替代抗生素具有良好的研究?jī)r(jià)值(Mishra等,2013)。首先,乳酸芽孢桿菌是一種兼性厭氧菌,在增殖過程中可以產(chǎn)生乳酸、乙酸等多種有機(jī)酸,可以對(duì)腸道中的大腸桿菌和沙門氏菌等病原菌產(chǎn)生抑制作用,從而防止疫病發(fā)生。其次,乳酸芽孢桿菌可以產(chǎn)生活性較高的蛋白酶、脂肪酶等活性物質(zhì),在機(jī)體能量代謝方面起到調(diào)節(jié)作用。同時(shí),乳酸芽孢桿菌具有良好的耐受性,在工業(yè)生產(chǎn)中具有較好的應(yīng)用前景(Thamacharoensuk,等,2015)。動(dòng)物的平均日增重、平均日采食量和平均料重比是衡量其生長(zhǎng)性能的重要指標(biāo),本研究發(fā)現(xiàn),高劑量組和中劑量組的肉兔平均日增重較高,且均與對(duì)照組差異顯著(P<0.05),此外,各組間平均料重比雖然差異不顯著,但試驗(yàn)組均低于對(duì)照組,這表明,乳酸芽孢桿菌制劑在一定程度上提高了飼料利用率。白細(xì)胞主要包括淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞等,可以間接反映動(dòng)物機(jī)體的免疫力水平(Zheng等,2017),筆者發(fā)現(xiàn),食用乳酸芽孢桿菌的肉兔白細(xì)胞數(shù)目會(huì)增高,乳酸芽孢桿菌可以調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫水平。通過測(cè)定屠宰性能發(fā)現(xiàn),組間全凈膛率和半凈膛率存在差異,隨著劑量的增加,試驗(yàn)組全凈膛率和半凈膛率均先增加后降低,其中,低劑量組的全凈膛率和半凈膛率最高,且均與對(duì)照組和高劑量組差異顯著(P< 0.05)。
表4 屠宰性能測(cè)定結(jié)果??????????????????????????????%
通過分析乳酸芽孢桿菌在肉兔上的臨床應(yīng)用效果及生產(chǎn)成本發(fā)現(xiàn),選用0.04%的乳酸芽孢桿菌可以有效提高肉兔平均日增重,促進(jìn)機(jī)體能量代謝,用量為0.02%時(shí)有利于提高屠宰性能。