魚粉替代品對鰻鱺生長性能、胴體成分及免疫的影響

李 泳，李同新

（南陽農(nóng)業(yè)職業(yè)學院，河南南陽 473000）

日本鰻鱺是東南亞最具傳統(tǒng)價值和養(yǎng)殖價值的淡水魚類之一，具有很高的市場價值，我國鰻鱺資源豐富，長江、錢塘江、閩江等河口地段尤多，江浙兩省的幼苗資源占到近50%。魚粉是水產(chǎn)養(yǎng)殖飼料中優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)來源，粗蛋白質(zhì)高達66%，同時富含多種必需氨基酸。但由于魚粉資源有限且價格昂貴，開發(fā)魚粉蛋白源替代品可以使水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)對魚粉的依賴程度降到最低。但對于大多數(shù)魚類來說，價格和魚粉數(shù)量有限，希望用其他蛋白質(zhì)來源替代而不對魚生長性能產(chǎn)生負面影響（Tacon等，2011）。豆粕是最常用的植物蛋白來源，其價格相對動物源蛋白低廉、氨基酸平衡、蛋白質(zhì)含量高，但由于豆粕中存在抗營養(yǎng)因子，如蛋白酶抑制劑、凝集素、植酸鹽、葡萄糖苷酸鹽、皂苷和單寧，限制了其在魚類日糧中的添加量。

豆粕、家禽副產(chǎn)品、血粉、皮革粉、羽毛粉等動植物蛋白源的濃縮混合物已被廣泛應用于多種淡水魚飼料中（Kirimi等，2016）。Khan等（2003）發(fā)現(xiàn)，使用豆粕、家禽副產(chǎn)品、皮革粉、血粉和羽毛粉作為魚粉替代品對魚健康和生長沒有負面影響。本研究使用的魚粉替代品是以家禽副產(chǎn)品、皮革粉、血粉、羽毛粉、魚油和豆粕為基礎，添加賴氨酸和蛋氨酸后制成的混合物，試驗目的是探討日糧添加魚粉替代物對鰻鱺生長性能的影響，以及魚粉替代品適宜添加水平。

1 材料與方法

1.1 試驗設計 試驗分為5組，每組3個重復，每個重復5條魚[平均初始體重（119.60±0.97）g]，試驗日糧中分別以0、10、20、30和40%的魚粉替代品代替魚粉，試驗共進行10周，試驗日糧組成及營養(yǎng)成分分析見表1。所有的日糧都補充了維生素和礦物質(zhì)預混料，以玉米淀粉為粘合劑，以魚油和大豆油為油脂來源。日糧和鰻鱺機體氨基酸組分分別見表2、表5。

將干料在電動攪拌機中攪拌5～10 min，通過1 mm螺桿式制粒機成型。然后將顆粒風干約72 h，這個過程重復一次，以創(chuàng)建第二批飼料。

1.2 飼養(yǎng)管理 試驗前兩周每天喂魚兩次（早上9點和下午6點），前兩周飼喂量為濕體重的0.50%，第三周和第四周飼喂量為0.70%，試驗結(jié)束前6周飼喂量為濕體重的1.50%。在整個試驗期間，通過水箱加熱器將水溫維持在（25±1）℃。此外，在每個魚缸中放置供氧器，以維持氧飽和度。

表1 試驗日糧原料組成及成分分析???%

表2 試驗日糧氨基酸含量??????g/kg

1.3 指標分析 試驗結(jié)束后分析魚的生長性能。整個機體用于分析水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量。采用肝素化注射器從尾靜脈采血，3800×g離心5 min，分離血清。血清樣品-70℃保存，用于分析血液生化參數(shù)，谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和超氧化物歧化酶（SOD）活性、葡萄糖、總蛋白、甘油三酯、膽固醇采用商品試劑盒分析。參考Ellis（1999）的方法評估非特異性免疫反應。

1.4 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)使用SAS軟件單因素方差分析，檢驗日糧魚粉替代品添加水平對鰻魚生長性能的效果。采用Tukey法進行多重比較，以P＜0.05為差異顯著性水平。同時采用折線回歸分析魚粉替代品的適宜添加水平。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長性能 由表3可知，在飼養(yǎng)試驗10周后，對照組、10%和20%魚粉替代品組較30%和40%魚粉替代品組顯著提高了鰻鱺增速（P＜0.05）。鰻鱺末重和采食量變化趨勢與增速一致。處理組魚的特定生長率與增速呈相似趨勢，平均生長率為0.30%～0.42%/d，40%魚粉替代品組較對照組和10%魚粉替代品組顯著降低了飼料效率（P＜0.05）。各處理間的蛋白質(zhì)效率比、肝臟指數(shù)和內(nèi)臟指數(shù)無顯著差異（P＞0.05）。40%魚粉替代品組外形指數(shù)顯著低于30%組（P＜0.05）。試驗結(jié)束后，鰻鱺存活率在90%～100%，各組無顯著差異（P＞0.05）。

2.2 體成分 由表4可知，各處理組鰻鱺機體的水分含量為59.40%～63.50%，其中40%魚粉替代品組水分較對照組顯著降低（P＜0.05）。機體粗蛋白質(zhì)含量為16.27%～16.53%，各組粗蛋白質(zhì)含量無顯著差異（P＞0.05），而機體粗脂含量為14.23%～14.83%，組間也無顯著差異（P＞0.05）。

試驗日糧的氨基酸組成（表2）與機體氨基酸含量（表5）在氨基酸組成上沒有顯著變化（P＞0.05）。鰻鱺機體組織中天冬氨酸是氨基酸中主要的非必需氨基酸，而亮氨酸和賴氨酸是主要的必需氨基酸。

表3 試驗日糧對鰻鱺生長性能的影響

表4 試驗日糧對鰻鱺體成分的影響????????????????????????????%

表5 試驗日糧對鰻鱺機體氨基酸組成的影響????????????????????g/kg

表6 試驗日糧對鰻鱺血清生化指標的影響

表7 試驗日糧對鰻鱺非特異性免疫反應的影響

2.3 血清生化指標 由表6可知，30%和40%魚粉替代品組較其他組顯著提高了血清AST和ALT水平（P＜0.05）。同樣，與對照組相比，30%和40%魚粉替代品組鰻鱺血清葡萄糖含量顯著提高（P＜0.05）。10%魚粉替代品組較20%組顯著提高了血清總蛋白含量（P＜0.05）。對照組與各處理組間對血清膽固醇含量無顯著影響（P＞0.05）。對照組血清甘油三酯含量最低（P＜0.05），而40%魚粉替代品組較對照組、10和20%組顯著提高了血清甘油三酯含量（P＜ 0.05）。

2.4 非特異性免疫反應 由表7可知，40%魚粉替代品組SOD水平最高，10%魚粉替代品組最低，但各組無顯著差異（P＞0.05）。同樣，溶菌酶活性也表現(xiàn)出與SOD相似的趨勢。

3 討論

本研究結(jié)果表明，日糧添加10%、20%魚粉替代品、對照組對鰻鱺生長性能無顯著影響，但添加水平超過20%時對生長性能有負面影響，這說明較高水平不同蛋白質(zhì)來源的魚粉替代品的局限性，以及由于日糧中某些氨基酸、維生素和礦物質(zhì)的缺乏會對魚生長性能產(chǎn)生不利影響。因此，大多數(shù)魚飼料中添加包括蛋氨酸、賴氨酸、植酸酶、?；撬帷⒁T劑等可以促進魚生長、飼料利用、身體組成和生理健康的氨基酸和添加劑（Jo等，2016）。本研究中添加魚粉替代品后對魚機體成分的影響有一定差異，其中40%魚粉替代品組與對照組相比機體水平含量顯著降低。

血液生化指標是評價魚類健康和應激水平的重要指標。本研究結(jié)果顯示，日糧添加0～20%魚粉替代品對AST和ALT水平無顯著影響，但30%～40%魚粉替代品顯著提高這兩種酶的水平。同樣，與對照組相比，日糧添加魚粉替代品有提高血清葡萄糖和甘油三酯含量的趨勢，這可能是由于魚粉替代品中含有豆粕，而豆粕的胰蛋白酶抑制劑、植酸酶、皂苷、鞣質(zhì)等抗營養(yǎng)因子水平升高的影響，最終可能導致腸道組織受損（Moniruzzaman等，2018）。相反，盡管血清膽固醇含量很高，但其不受試驗日糧影響，而且膽固醇值在許多淡水鰻魚種常見的范圍內(nèi)（Nates，2016）。

非特異性防御機制是微生物入侵過程中需要的一種高效的清除系統(tǒng)和降解系統(tǒng)，否則會導致嚴重的炎癥，最終導致動物死亡，它包括中性粒細胞活化、過氧化物酶、氧化自由基、蛋白酶、賴氨酸、凝集素的產(chǎn)生，以及其他炎癥因子的啟動，如黏膜分泌作為魚的第一道防線，這些機制通過控制免疫細胞釋放和清除活性氧在感染的所有階段發(fā)揮重要作用（Park等，2016）。隨著日糧魚粉替代品添加水平的升高，SOD活性并未顯著升高，這與Jo等（2016）的研究結(jié)果一致。與SOD一樣，溶菌酶也是一種重要的防御機制酶，它為細菌裂解提供動力，激活補體系統(tǒng)的吞噬細胞的作用（Jo等，2016）。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果通過回歸分析表明，鰻鱺日糧中魚粉替代品的適宜添加水平為15.4%～20%。魚粉替代品可以作為淡水魚（鰻鱺）潛在的飼料蛋白原料。