膀胱癌患者血清血小板因子4的表達及臨床意義

（寧波市醫(yī)療中心李惠利醫(yī)院東部院區(qū) 泌尿外科，浙江 寧波 315040）

膀胱癌發(fā)病機制復雜，膀胱癌生長依賴新生血管，膀胱癌細胞需要的大部分營養(yǎng)由血管供應，血管新生為膀胱癌細胞分裂、增殖和侵襲轉移提供了條件[1]。血管生成受血管生成調節(jié)因子調節(jié)。血小板因子4（platelet factor 4, PF4）具有抑制惡性腫瘤血管生成的作用，在肝癌等惡性腫瘤中發(fā)揮重要作用[2]。血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）為血管生成重要的調控因子，缺氧誘導因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α）在血管生成中也發(fā)揮重要作用[3-4]。本文對血清PF4水平與膀胱癌、VEGF、HIF-1α的相關性進行研究，探討血清PF4在膀胱癌中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年1月—2015年12月寧波市醫(yī)療中心李惠利醫(yī)院泌尿外科收治的膀胱癌患者130例作為膀胱癌組，選取本院健康體檢者130例作為對照組。膀胱癌組中男性77例，女性53例；平均年齡（63.42±9.53）歲；腫瘤平均直徑（3.32±1.18）cm，腫瘤分期：Ta期19例、T1期31例、T2期30例、T3期43例及T4期7例；腫瘤分級：低級別65例、高級別65例；有淋巴結轉移59例、無淋巴結轉移71例。對照組男性72例，女性58例；平均年齡（63.64±9.73）歲。納入標準：對照組身體健康；膀胱癌組患者經術后病理確診為膀胱癌，首次診斷患者，術前未進行放化療及生物靶向治療等其他治療，術后隨訪3年，病歷資料及隨訪資料完整。排除標準：嚴重肝、腎等臟器功能異常者，其他惡性腫瘤者，血液系統(tǒng)疾病者，自身免疫性疾病者，近1個月內免疫制劑及激素治療者。兩組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）?；颊呔炇鹬橥鈺１狙芯拷涐t(yī)院倫理委員會審批。

1.2 方法

收集膀胱癌組患者術前靜脈血和對照組體檢當天靜脈血，采用ELX800全自動酶免分析儀（美國寶特）測定血清PF4、HIF-1α及VEGF水平。

1.3 統(tǒng)計學方法

數(shù)據分析采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件。計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，比較用t檢驗；膀胱癌預后影響因素采用Cox比例風險回歸模型；相關分析用Pearson法，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清PF4、HIF-1α及VEGF水平比較

兩組血清PF4、HIF-1α及VEGF水平比較，經t檢驗，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），膀胱癌組均高于對照組。見表1。

表1 兩組血清PF4、HIF-1α及VEGF水平比較（n =130，±s）

表1 兩組血清PF4、HIF-1α及VEGF水平比較（n =130，±s）

組別 PF4/（ng/ml） HIF-1α/（μg/L）VEGF/（pg/ml）對照組 0.17±0.10 4.63±0.84 7.13±1.24膀胱癌組 0.42±0.14 24.16±1.01 18.76±1.37 t值 16.568 169.508 70.982 P值 0.000 0.000 0.000

2.2 不同因素膀胱癌患者血清PF4水平比較

不同腫瘤分期患者血清PF4水平比較，經t檢驗，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），T2～T4患者高于Ta、T1患者；不同性別、年齡、腫瘤大小、腫瘤分級、淋巴結轉移患者血清PF4水平比較，經t檢驗，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表2。

2.3 膀胱癌預后的Cox分析

單因素Cox分析結果顯示，腫瘤大小、腫瘤分期、淋巴結轉移、血清PF4、HIF-1α及VEGF水平與膀胱癌的預后有關（P＜0.05）。見表3、4。

將膀胱癌預后作為因變量，將單因素分析中差異有統(tǒng)計學意義的因素作為自變量納入Cox回歸模型。引入水準為0.05，剔除水準為0.10。多因素分析結果顯示，腫瘤分期、淋巴結轉移、PF4、HIF-1α及VEGF水平為膀胱癌預后的獨立危險因素（P＜0.05）。見表5。

2.4 膀胱癌患者血清PF4與血清HIF-1α、VEGF水平的相關性

膀胱癌患者血清PF4與血清HIF-1α、VEGF水平呈正相關（r=0.591和0.624，均P=0.000）。

表2 不同因素膀胱癌患者血清PF4水平比較（ng/ml，±s）

表2 不同因素膀胱癌患者血清PF4水平比較（ng/ml，±s）

因素 n PF4 t值 P值性別男77 0.43±0.05 1.789 0.077女53 0.41±0.07年齡≥65歲 71 0.44±0.09 1.710 0.090＜65歲 59 0.41±0.11腫瘤大小≥3 cm 67 0.43±0.10 1.894 0.061＜3 cm 63 0.40±0.08腫瘤分期Ta、T1 50 0.34±0.07 16.464 0.000 T2～ T4 80 0.53±0.06腫瘤分級低65 0.44±0.12 1.900 0.060高65 0.40±0.12淋巴結轉移有59 0.43±0.11 1.871 0.064無71 0.39±0.13

表3 膀胱癌預后影響因素的賦值參數(shù)

續(xù)表3

表4 膀胱癌預后的單因素Cox分析參數(shù)

表5 膀胱癌預后的多因素Cox分析參數(shù)

3 討論

膀胱癌是常見的惡性腫瘤之一，其生長具有血管依賴性，血管新生是膀胱癌發(fā)生、發(fā)展的關鍵，是局部浸潤和遠處轉移的主要因素[5]。新生血管的發(fā)生受血管生成調節(jié)因子調節(jié)，正常情況下，促血管生成因子和抑制血管生成因子處于平衡狀態(tài)，在多種內外因素的作用下，上述平衡被打破，當促血管生成因子占優(yōu)勢時，血管內皮細胞受到刺激產生金屬蛋白酶等溶解細胞外基質，使血管內皮細胞以出芽的方式形成新生血管，從而促進惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及侵襲、轉移；當抑制血管生成因子占優(yōu)勢時則抑制新生血管生成[6]。

PF4基因位于4號染色體上，主要由巨核細胞合成，少數(shù)由成熟血小板合成。PF4蛋白儲存在血小板a顆粒中，當血小板活化時PF4蛋白以PF4-蛋白多糖復合物形式從血小板α顆粒釋放到血液中[7-8]。近年來研究發(fā)現(xiàn)PF4在惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用，如PF4可促進肺癌生長，可誘導乳腺癌細胞生長和凋亡，并抑制腫瘤轉移[9-12]。檢測惡性腫瘤血清PF4水平也具有重要意義，如肝細胞癌患者血清PF4水平升高，血清PF4水平隨肝細胞癌分期的升高而升高，可作為肝細胞癌診斷、鑒別診斷和分期的依據[13]。膀胱癌患者血清PF4水平尚不清楚，本文對膀胱癌患者血清PF4水平進行研究，發(fā)現(xiàn)膀胱癌患者血清PF4水平升高，血清PF4水平與膀胱癌患者的分期關系密切，膀胱癌分期越高血清PF4水平越高，血清PF4為膀胱癌預后的獨立影響因素。本研究結果表明檢測膀胱癌患者血清PF4水平也具有重要意義，血清PF4水平在膀胱癌的診斷、分期及預后評估中具有一定價值。

VEGF為研究比較多的促血管生成因子，VEGF可通過和受體結合促進血管生成；VEGF在惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及侵襲、轉移中也具有重要作用：VEGF通過與受體結合作用于血管內皮細胞，促進血管內皮細胞增殖和生長[14]；誘導惡性腫瘤血管和淋巴管生成，促進惡性腫瘤生長和轉移[15]。PF4為與VEGF相關聯(lián)的一種血管生成調節(jié)因子，具有抑制血管生成的作用，PF4可通過抑制VEGF受體激活抑制血管生成，也可通過抑制VEGF誘導的內皮細胞再生抑制血管生成。PF4和VEGF在肝癌中呈顯著相關性，共同參與肝癌的發(fā)生、發(fā)展[16]。HIF-1α作為一種轉錄因子，在細胞應對缺氧環(huán)境時發(fā)揮關鍵作用，在多種缺氧反應中發(fā)揮調控作用[17]；HIF-1α在多種惡性腫瘤中也表達異常，和惡性腫瘤的血管生成關系較密切[18]。HIF-1α在參與血管生成中和PF4具有一定關系，如PF4和HIF-1α聯(lián)合可通過協(xié)同作用抑制肝細胞癌裸鼠皮下移植瘤的血管生成[19]。本文發(fā)現(xiàn)血清PF4與血清HIF-1α、VEGF呈正相關，分析PF4和VEGF作為血管生成相關因子，在體內通過反饋機制維持人體內環(huán)境穩(wěn)定，當腫瘤組織中VEGF生成增加時，VEGF進入血液循環(huán)，導致血清中VEGF水平升高，血清VEGF誘導巨核細胞合成和釋放PF4，反饋性抑制VEGF，以維持體內血管生成，PF4和HIF-1α在血管抑制作用中具有協(xié)同作用，共同反饋性抑制VEGF對血管生成的促進作用。

綜上所述，膀胱癌患者血清PF4水平升高，血清PF4水平在膀胱癌的診斷、分期和預后評價中具有一定參考價值，PF4可能通過抑制血管生成機制參與膀胱癌的發(fā)生、發(fā)展。