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    胃癌組織中microRNA-144-3p水平及與臨床病理特點(diǎn)和預(yù)后的關(guān)系

    2019-11-22 01:49:54
    關(guān)鍵詞:胃癌水平

    (義烏市中心醫(yī)院 病理科,浙江 義烏322000)

    胃癌是胃黏膜上皮發(fā)生的惡性腫瘤,預(yù)后較差,對(duì)患者的生命健康造成嚴(yán)重威脅。近年來(lái),隨著胃癌診療技術(shù)的不斷提高,胃癌的預(yù)后改善明顯,但胃癌早期診斷率比較低,使部分胃癌患者未能得到及時(shí)診治,導(dǎo)致胃癌的生存率不容樂(lè)觀[1]。探索影響胃癌發(fā)生、發(fā)展的標(biāo)志物,并對(duì)其進(jìn)行調(diào)控和干預(yù),對(duì)早期防治胃癌和改善患者預(yù)后具有重要意義。MicroRNA(miRNA)在動(dòng)植物中廣泛存在,可與mRNA特異性結(jié)合發(fā)揮轉(zhuǎn)錄后調(diào)控作用;miRNA在惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用[2-3]。miR-144-3p為miRNA的一種,在多種惡性腫瘤中呈低表達(dá),其與惡性腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡、遷移及侵襲等關(guān)系密切[4-5]。本文對(duì)胃癌組織中miR-144-3p水平進(jìn)行研究,探討其與臨床病理特點(diǎn)和預(yù)后的關(guān)系。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    選取2011年1月—2013年12月在義烏市中心醫(yī)院進(jìn)行手術(shù)切除的100例胃癌患者的胃癌組織及其癌旁組織標(biāo)本。其中,男性59例,女性41例;年齡(63.24±5.26)歲;臨床分期:Ⅰ期32例,Ⅱ期24例,Ⅲ其33例,Ⅳ期11例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移49例,無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移51例;低分化28例,中分化38例,高分化34例。納入標(biāo)準(zhǔn):①經(jīng)病理證實(shí)為胃癌;②手術(shù)前未進(jìn)行放化療及其他治療;③患者簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn):①合并其他惡性腫瘤;②重要臟器功能不全;③圍手術(shù)期死亡;④術(shù)后無(wú)法接受隨訪及中途退出;⑤臨床資料及隨訪資料不全。本研究通過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

    1.2 方法

    胃癌組織和癌旁組織中miR-144-3p水平測(cè)定:取患者胃癌組織及癌旁組織標(biāo)本(距離腫瘤組織邊緣≥5 cm),置于冰上用生理鹽水沖洗干凈,取部分組織標(biāo)本在冰上研磨提取總RNA,測(cè)定總RNA的完整性和濃度。取總RNA 1μg逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)測(cè)定組織中miR-144-3p水平。以U6為內(nèi)參照,qTR-PCR反應(yīng)條件:56℃預(yù)變性2 min,95℃變性 10 min,95℃退火 15 s,60℃延伸 60 s,共42個(gè)循環(huán),用2-ΔΔCT法計(jì)算miR-144-3p相對(duì)表達(dá)量。Hsa-miR-144-3p正向引物:5'-ACACTCCAGCTG GGTACAGTATAGATGATGTA-3',長(zhǎng)度32 bp;反向引物 :5'-CTCAACTGGTGTCGTGGA-3',長(zhǎng)度 18 bp。U6反向引物:5'-CTGCTTCGGCAGCACA-3',長(zhǎng)度16 bp;反向引物:5'-TGGTGTCGTGGAGTCG-3',長(zhǎng)度16 bp。miR-144-3p引物及PCR試劑盒購(gòu)自美國(guó)ABI公司。

    1.3 隨訪

    胃癌患者術(shù)后通過(guò)電話或門(mén)診隨訪,隨訪時(shí)間從手術(shù)時(shí)間開(kāi)始至術(shù)后死亡時(shí)間或截止時(shí)間,截至?xí)r間為2018年12月31日。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    數(shù)據(jù)分析采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,比較用t檢驗(yàn);Kaplan-Meier法繪制生存曲線,比較用Log-rank χ2檢驗(yàn);影響因素的分析采用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 胃癌組織和癌旁組織中miR-144-3p水平比較

    胃癌組織與癌旁組織中miR-144-3p分別為(0.53±0.12)和(1.00±0.11),經(jīng)t檢驗(yàn),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=28.872,P=0.000);胃癌組織中miR-144-3p水平低于癌旁組織。見(jiàn)圖1。

    2.2 胃癌組織中miR-144-3p水平與胃癌臨床病理特點(diǎn)的關(guān)系

    不同臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分化程度胃癌組織中miR-144-3p水平比較,經(jīng)t檢驗(yàn),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);Ⅲ和Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、中和低分化胃癌組織中miR-144-3p水平低于Ⅰ和Ⅱ期、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及高分化胃癌組織(P<0.05)。不同年齡和性別胃癌患者miR-144-3p水平比較,經(jīng)t檢驗(yàn),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

    2.3 胃癌組織中miR-144-3p水平與胃癌預(yù)后的關(guān)系

    100例患者術(shù)后隨訪5年,以miR-144-3p在胃癌組織中水平的中位數(shù)為界,分為低表達(dá)46例和高表達(dá)54例。miR-144-3p高表達(dá)者5年總生存率和無(wú)病生存率分別高于低表達(dá)者(77.8% VS 52.2%)(68.5%VS 45.7%)。miR-144-3p高表達(dá)者與低表達(dá)者5年總生存率和無(wú)病生存率比較,經(jīng)χ2檢驗(yàn),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=7.257和5.332,P=0.007和0.021)。見(jiàn)圖2、3。

    2.4 影響胃癌預(yù)后因素的Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型分析

    以胃癌組織miR-144-3p表達(dá)、年齡、性別、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分化程度為自變量進(jìn)行胃癌預(yù)后的Cox多因素分析,結(jié)果顯示:miR-144-3p低表達(dá)、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分化程度為影響胃癌預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見(jiàn)表2。

    圖2 胃癌組織中miR-144-3p高低表達(dá)患者生存曲線

    圖3 胃癌組織中miR-144-3p高低表達(dá)患者5年無(wú)病生存率

    表2 影響胃癌預(yù)后因素的多因素Cox風(fēng)險(xiǎn)模型參數(shù)

    3 討論

    胃癌作為消化系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性腫瘤,早期癥狀缺乏特異性,致使大多數(shù)患者確診時(shí)已為中晚期,嚴(yán)重影響患者的預(yù)后。隨著外科手術(shù)水平和放化療技術(shù)的不斷提高,胃癌的預(yù)后得到一定改善,但仍具有易轉(zhuǎn)移、高復(fù)發(fā)及預(yù)后差等惡性生物學(xué)特點(diǎn)[6-7]。因此,探索胃癌的早期診斷和預(yù)后標(biāo)志物具有重要意義。

    miRNA是在真核生物體內(nèi)廣泛存在的一種微小RNA,與細(xì)胞增殖、分化、生長(zhǎng)、凋亡及應(yīng)激等多種生命活動(dòng)關(guān)系密切,在維持機(jī)體生理平衡中具有重要作用[8]。miRNA雖然只占人類(lèi)基因庫(kù)的2%,但可調(diào)控體內(nèi)約30%基因表達(dá),在不同組織和器官中的表達(dá)存在大量差異[9]。miRNA在惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中也具有重要作用,miRNA表達(dá)異常可引起靶基因表達(dá)異常,從而導(dǎo)致惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展[10]。多種miRNA在胃癌的發(fā)生、發(fā)展及診治和預(yù)后中具有重要價(jià)值。如SHI等[11]研究發(fā)現(xiàn),miR-373通過(guò)下調(diào)波形蛋白抑制胃癌轉(zhuǎn)移。WANG等[12]研究發(fā)現(xiàn),miR-21抑制劑通過(guò)PTEN/PI3K/mTOR途徑調(diào)節(jié)胃癌細(xì)胞的生物學(xué)功能。ZHAO等[13]研究發(fā)現(xiàn),miR-194和miR-29在胃癌診斷和預(yù)后中具有重要價(jià)值。DONG等[14]發(fā)現(xiàn),miR-133a可直接靶向USP39抑制細(xì)胞增殖,并可預(yù)測(cè)胃癌的預(yù)后。

    miR-144-3p具有多種生理和病理功能,在脂代謝尤其膽固醇逆行轉(zhuǎn)運(yùn)中具有重要作用[15]。miR-144-3p在多種惡性腫瘤中表達(dá)異常,在多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及診斷和預(yù)后預(yù)測(cè)中具有重要價(jià)值[16]。如miR-144-3p可通過(guò)下調(diào)ARID1A促進(jìn)腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移及舒尼替尼耐藥[17];上調(diào)人肺癌細(xì)胞系H292中miR-144-3p引起細(xì)胞凋亡[18];miR-144-3p通過(guò)絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)通路靶向富含脯氨酸蛋白11的表達(dá),誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞的細(xì)胞周期阻滯和凋亡[19];miR-144-3p在上皮性卵巢癌組織中低表達(dá),與上皮性卵巢癌的直徑、病理分期、分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。miR-144-3p可能參與上皮性卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程,有望成為上皮性卵巢癌治療和預(yù)后的新靶點(diǎn)[20]。miR-144-3p在宮頸癌組織中低表達(dá),與宮頸癌的臨床分期、分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切,miR-144-3p低表達(dá)可促進(jìn)宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展[21]。

    miR-144-3p與胃癌的關(guān)系也受到大家關(guān)注,如LI等[22]研究發(fā)現(xiàn),miR-144-3p通過(guò)靶向前白血病轉(zhuǎn)錄因子3,抑制上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化來(lái)抑制胃癌細(xì)胞的增殖、遷移及侵襲。呂弢等[23]研究發(fā)現(xiàn),miR-144-3p靶向調(diào)控ABCG2信號(hào)通路影響胃癌細(xì)胞侵襲和遷移。但目前關(guān)于miR-144-3p和胃癌的研究主要集中在細(xì)胞水平。本文對(duì)胃癌組織中miR-144-3p水平研究發(fā)現(xiàn),胃癌組織中miR-144-3p水平降低,miR-144-3p水平與胃癌的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分化程度關(guān)系密切。miR-144-3p低表達(dá)者的5年累積生存率和無(wú)病生存率較低,miR-144-3p低表達(dá)是影響胃癌預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,表明miR-144-3p可能在胃癌的發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用,與胃癌患者的臨床病理特點(diǎn)和預(yù)后關(guān)系密切。

    綜上所述,胃癌組織中miR-144-3p水平降低,miR-144-3p在胃癌的診斷和預(yù)后評(píng)價(jià)中具有一定的價(jià)值。

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