微囊藻毒素對(duì)水稻幼苗營(yíng)養(yǎng)吸收的影響

劉洪月，申澤輝，梁嬋娟*

（1.江蘇省厭氧生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江南大學(xué)環(huán)境與土木工程學(xué)院，江蘇 無(wú)錫214122；2.江蘇省水處理技術(shù)與材料協(xié)同創(chuàng)新中心，江蘇 無(wú)錫214122）

近年來(lái)，我國(guó)許多大型淡水湖泊和水庫(kù)中藍(lán)藻水華爆發(fā)頻繁，藍(lán)藻細(xì)胞衰亡后會(huì)產(chǎn)生多種毒素[1]。其中，微囊藻毒素（Microcystins，MCs）是出現(xiàn)頻率最高、產(chǎn)量最大和危害最嚴(yán)重的一類(lèi)藻毒素[2]。MCs通過(guò)灌溉等方式進(jìn)入農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)，直接影響農(nóng)作物生長(zhǎng)和糧食生產(chǎn)。在灌溉水中，MCs濃度通常超過(guò)世界衛(wèi)生組織（WHO）允許的標(biāo)準(zhǔn)值1 μg·L-1，常見(jiàn)濃度范圍為4～50 μg·L-1，在藍(lán)藻大量死亡的極端情況下甚至高達(dá)6500 μg·L-1[3]。近年來(lái)，許多研究報(bào)道了MCs 對(duì)陸地植物的影響，包括抑制種子萌發(fā)、損害組織發(fā)育和降低作物產(chǎn)量[4-5]，涉及機(jī)理集中在抑制蛋白磷酸酶活性[6]、氧化應(yīng)激和降低光合作用等方面[7]。本項(xiàng)目組前期研究表明低濃度MCs（1 μg·L-1）促進(jìn)了水稻幼苗的生長(zhǎng)，與提高PSⅡ的光化學(xué)活性和光合電子傳遞及增加葉綠素含量有關(guān)。高濃度MCs（≥1000 μg·L-1）對(duì)水稻幼苗的生長(zhǎng)造成不可逆?zhèn)?，與膜脂過(guò)氧化和光合功能受損有關(guān)[8-10]。而植物中光合系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)氧化與營(yíng)養(yǎng)元素的吸收、分布和轉(zhuǎn)運(yùn)密切相關(guān)[11]。質(zhì)膜H+-ATP 酶是植物營(yíng)養(yǎng)吸收的主宰酶，通過(guò)水解ATP 產(chǎn)生能量將H+泵出細(xì)胞，在細(xì)胞膜兩側(cè)形成的質(zhì)子驅(qū)動(dòng)勢(shì)，為營(yíng)養(yǎng)元素跨膜運(yùn)輸提供原初動(dòng)力[12]。然而目前鮮有關(guān)于MCs 對(duì)植物營(yíng)養(yǎng)吸收的影響及其內(nèi)在機(jī)制的報(bào)道。水稻作為第一大糧食作物，其用水量大，較其他作物更易受MCs 污染的影響[13]。因此本研究以水稻為試材，以質(zhì)膜H+-ATP 酶為切入點(diǎn)，結(jié)合根系活力和ATP 含量的變化，探究MCs 對(duì)植物營(yíng)養(yǎng)吸收的影響。本文研究結(jié)果不僅為豐富MCs對(duì)植物的致毒機(jī)理提供新的佐證材料，而且為減輕MCs對(duì)植物造成的傷害提供新的思考方向。

1 材料與方法

1.1 藻毒素的制備

從無(wú)錫太湖打撈站取新鮮藍(lán)藻，將藍(lán)藻烘干、制粉保存。稱取1 g干燥的藻粉，加入40 mL 5%的冰乙酸，室溫抽提2 h，8000 r·min-1離心10 min，沉淀用40 mL 5%冰乙酸繼續(xù)抽提，重復(fù)2次，合并3次抽提的上清液，調(diào)節(jié)pH 為3.0，離心去除雜質(zhì)蛋白，調(diào)節(jié)pH 為7.0，將粗提取液過(guò)Sep-pak C18 柱固相萃?。?00 mg·6 mL-1，Waters corporation，美國(guó)）。采用高效液相色譜法（Ultimate 3000，Dionex corporation，美國(guó)）測(cè)定MCs 的組成，發(fā)現(xiàn)MC-LR、MC-RR 和MC-YR 有明顯出峰，且峰值穩(wěn)定。采用酶聯(lián)免疫法ELISA（Microcystins plate kit，Beacon Analytical Systems Inc，Saco，ME）測(cè)量粗提液中MCs的濃度[8]。

1.2 試材培養(yǎng)

水稻（Oryza sativa）試驗(yàn)材料選擇“淮稻8 號(hào)”。選擇籽粒飽滿的水稻種子用HgCl2（0.1%，W∕V）消毒10 min，洗滌3 次后在去離子水中浸泡8 h，置于恒溫培養(yǎng)箱（25 ℃）中催芽3 d。將幼芽置于蛭石中培養(yǎng)至兩葉一心時(shí)轉(zhuǎn)移至周轉(zhuǎn)箱（6.88 L）中水培。營(yíng)養(yǎng)液采用常規(guī)營(yíng)養(yǎng)液配方，其組分為150 mmol·L-1（NH4）2SO4、24 mmol·L-1KH2PO4、42 mmol·L-1K2SO4、120 mmol·L-1CaCl2·H2O、120 mmol·L-1MgSO4·7H2O、60 mmol·L-1Na2SiO3·9H2O、1.08 mmol·L-1MnCl2·4H2O、2.4 mmol·L-1H3BO3、2.40 mmol·L-1Fe（Ⅲ）-EDTA，46.82 μmol·L-1Na2MoO4·2H2O、92.39 μmol·L-1ZnSO4·7H2O、38.40 μmol·L-1CuSO4·5H2O[14]。營(yíng)養(yǎng)液每3 d更新一次。待幼苗長(zhǎng)至4葉1心（此時(shí)已結(jié)束返青，水稻生長(zhǎng)旺盛，是營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)的關(guān)鍵時(shí)期）時(shí)，進(jìn)行MCs處理[15]。

1.3 試材處理

將高濃度藻粉粗提液用營(yíng)養(yǎng)液分別稀釋成不同MCs 濃度（1、10、100、1000 μg·L-1），以不含MCs 的營(yíng)養(yǎng)液作為對(duì)照。將水稻幼苗在含有不同濃度MCs 的營(yíng)養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)7 d（脅迫期），取樣進(jìn)行各指標(biāo)的測(cè)定。將剩余水稻幼苗移至對(duì)照條件下培養(yǎng)7 d（恢復(fù)期），再取樣測(cè)定。

1.4 指標(biāo)測(cè)定

營(yíng)養(yǎng)元素含量測(cè)定：用電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀（Perkin Elmer Corp，Norwalk，CT，美國(guó)）測(cè)定鉀（K+）、鈉（Na+）、鈣（Ca2+）、鎂（Mg2+）、鐵（Fe2+）、鋅（Zn2+）、銅（Cu2+）含量[16]。PO3-4含量的測(cè)定用鉬藍(lán)比色法[17]；NH+4-N 含量的測(cè)定采用靚酚藍(lán)法[18]；NO-3-N 含量的測(cè)定采用水楊酸法[19]。根系活力采用氯化三苯基四氮唑（TTC）脫氫酶法[20]。ATP含量用高效液相色譜儀（Ultimate 3000，Dionex corporation，美國(guó)）測(cè)定[17]。質(zhì)膜H+-ATP酶活性的測(cè)定采用無(wú)機(jī)磷含量法[21]。于水稻幼苗根尖取樣，用Trizol 試劑提取RNA，以反轉(zhuǎn)錄合成的cDNA 的第一鏈為模板，進(jìn)行PCR 擴(kuò)增循環(huán)。引物序列和擴(kuò)增程序參照參考文獻(xiàn)[17]。基因相對(duì)表達(dá)量采用2-△△CT法進(jìn)行計(jì)算。每個(gè)處理重復(fù)3次，每次測(cè)定重復(fù)3次。

1.5 數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)均為3 次獨(dú)立試驗(yàn)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）。試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0和Origin 8.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和繪圖，不同字母表示差異顯著（P＜0.05）。

2 結(jié)果與討論

2.1 MCs對(duì)水稻幼苗營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量的影響

礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)元素參與細(xì)胞的組成、酶的活化和調(diào)控生理過(guò)程[22]。如表1 所示，脅迫7 d 后，1 μg·L-1MCs組水稻幼苗中礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)（K+、Na+、Ca2+、Mg2+、Fe2+、Zn2+、Cu2+、PO34-、NO-3和NH+4）含量無(wú)顯著變化。10 μg·L-1MCs 組水稻幼苗中Mg2+、Fe2+、Zn2+、NO-3和NH+4含量增加，PO3-4含量降低。推測(cè)原因如下：10 μg·L-1MCs 增強(qiáng)了礦質(zhì)元素跨膜運(yùn)輸?shù)尿?qū)動(dòng)；植物中礦質(zhì)元素的吸收與其轉(zhuǎn)運(yùn)通道及蛋白有關(guān)，因此10 μg·L-1MCs 處理還可能通過(guò)影響Mg、Fe、Zn和N轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族的表達(dá)來(lái)增強(qiáng)植物對(duì)MCs脅迫的適應(yīng)性[23-24]。Mg2+、Fe2+和Zn2+是葉綠素生物合成和光合作用的必需元素[25]，10 μg·L-1MCs 脅迫下水稻中Mg2+、Fe2+和Zn2+含量的增加利于維持地上部光合作用以適應(yīng)MCs 脅迫。同時(shí)N 元素的增加利于提高酶活性調(diào)節(jié)激素含量，如生長(zhǎng)素（IAA）和玉米素（ZT），從而有助于調(diào)節(jié)水稻的生長(zhǎng)[26]。由于植物中Fe、Zn與P存在競(jìng)爭(zhēng)作用和拮抗作用[27-28]，該處理水稻中Fe2+、Zn2+含量的增加可能造成PO3-4含量的降低。這些營(yíng)養(yǎng)元素含量的變化是水稻幼苗對(duì)10 μg·L-1MCs脅迫的適應(yīng)性機(jī)制之一。100 μg·L-1MCs 組水稻幼苗中K+、Na+、Mg2+、Zn2+、Cu2+、PO3-4和NO-3的含量降低，Ca2+、Fe2+和NH4+含量增加，造成營(yíng)養(yǎng)元素失衡。Freitas 等[29]用100 μg·L-1MC-LR 處理生菜，10 d 后發(fā)現(xiàn)葉中礦質(zhì)元素（Mg、K、P、Mn、Fe、Zn、Cu 和Mo）含量均降低。這表明MCs 處理下植物中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量的變化并不一致，可能與植物物種、發(fā)育階段、毒素性質(zhì)和暴露時(shí)間等有關(guān)。1000 μg·L-1MCs組水稻幼苗中除Ca2+含量增加外，其他元素含量均降低，且降幅大于100 μg·L-1MCs組。Ca作為植物信號(hào)傳導(dǎo)的第二信使，其含量的增加有助于與鈣結(jié)合蛋白作用，發(fā)揮Ca2+的傳感器功能，結(jié)合基因啟動(dòng)子中的順式元件來(lái)調(diào)節(jié)植物對(duì)逆境的應(yīng)激反應(yīng)[30]。結(jié)合本項(xiàng)目組前期的報(bào)道[8-9]，高濃度MCs（100 μg·L-1和1000 μg·L-1）處理下礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)元素的失衡可能與水稻幼苗體內(nèi)MCs的高積累有關(guān)，是造成水稻幼苗光合作用和生物量積累受抑的又一重要原因。

恢復(fù)7 d 后，1 μg·L-1和10 μg·L-1MCs 組水稻幼苗中各礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)元素含量均在對(duì)照水平。100 μg·L-1MCs 組水稻幼苗中礦質(zhì)元素含量較脅迫期有所恢復(fù)，利于水稻生長(zhǎng)的自我修復(fù)，這與我們前期的研究相一致[8]。1000 μg·L-1MCs 組水稻幼苗中礦質(zhì)元素含量較脅迫期恢復(fù)程度較小。由此表明，解除MCs 暴露后植物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的恢復(fù)受MCs 暴露濃度制約。

2.2 MCs對(duì)水稻幼苗根系活力的影響

根系活力反映根系吸收水分和營(yíng)養(yǎng)元素的能力[31]。如圖1 所示，脅迫7 d 后，1 μg·L-1MCs 組水稻幼苗根系活力增加，這與我們前期研究結(jié)果相一致[8]。10 μg·L-1MCs 組水稻幼苗根系活力增加，且增幅大于1 μg·L-1MCs 組，推測(cè)此處理刺激了根系中物質(zhì)的合成，增強(qiáng)根系的代謝能力，這可能是水稻幼苗對(duì)低濃度MCs 脅迫的一種適應(yīng)性機(jī)制。100 μg·L-1和1000 μg·L-1MCs 組根系活力顯著降低，且降低程度隨著MCs 濃度的增大而增強(qiáng)。此處理根系活力的降低可能與水稻根細(xì)胞功能受到破壞，以及根表形貌和生長(zhǎng)受到抑制有關(guān)[8]，進(jìn)而不利于根系吸收水分和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

表1 MCs對(duì)水稻幼苗礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)含量的影響Table 1 Effect of MCs on mineral element content of rice seedling

恢復(fù)7 d 后，1 μg·L-1和10 μg·L-1MCs 組水稻幼苗根系活力恢復(fù)至對(duì)照水平，利于水稻營(yíng)養(yǎng)吸收的正常進(jìn)行。100 μg·L-1MCs 組水稻幼苗根系活力較脅迫期增加，有利于水稻營(yíng)養(yǎng)吸收能力的自我恢復(fù)。而1000 μg·L-1MCs組根系活力低于對(duì)照且低于脅迫期，表明高濃度MCs 暴露對(duì)水稻幼苗根系功能造成了不可逆的傷害。

2.3 MCs 對(duì)水稻幼苗根系A(chǔ)TP 含量和質(zhì)膜H+-ATP 酶活性的影響

質(zhì)膜H+-ATPase 通過(guò)水解ATP產(chǎn)生能量，為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)跨膜運(yùn)輸提供電化學(xué)勢(shì)梯度[12]。前期研究表明，酸雨脅迫下植物營(yíng)養(yǎng)元素的含量與質(zhì)膜H+-ATPase的活性呈正相關(guān)關(guān)系[17]。如圖2 所示，脅迫7 d 后，1 μg·L-1MCs 組水稻根系A(chǔ)TP 含量和質(zhì)膜H+-ATPase活性無(wú)顯著變化，與該處理下?tīng)I(yíng)養(yǎng)元素?zé)o顯著變化相一致。結(jié)合根系活力的變化，表明1 μg·L-1MCs 處理下水稻中營(yíng)養(yǎng)元素含量的變化可能主要受質(zhì)膜H+-ATPase 活性的調(diào)控。10 μg·L-1MCs 處理導(dǎo)致質(zhì)膜H+-ATPase 活性顯著上升，加快了ATP 的水解，泵出更多的H+增強(qiáng)電化學(xué)勢(shì)梯度。陳穎等[32]發(fā)現(xiàn)，在鎘脅迫下龍葵通過(guò)調(diào)節(jié)質(zhì)膜H+-ATPase 活性改變體內(nèi)N、P 和K 的含量，從而起到對(duì)Cd 脅迫的解毒作用。因此，質(zhì)膜H+-ATPase 還可以通過(guò)調(diào)節(jié)營(yíng)養(yǎng)元素（Mg2+、Fe2+、Zn2+和NO-3）的吸收來(lái)增強(qiáng)水稻幼苗對(duì)MCs 脅迫的耐受性。100 μg·L-1與1000 μg·L-1MCs 處理導(dǎo)致ATP 含量和質(zhì)膜H+-ATPase 活性顯著降低，且降低程度隨著MCs 濃度的增大而增強(qiáng)。推測(cè)高濃度MCs 抑制了水稻根系中ATP的合成，使質(zhì)膜H+-ATPase 活性降低，泵運(yùn)H+的功能受損，不利于為礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)元素的跨膜運(yùn)輸提供能量[10]。

圖1 MCs對(duì)水稻幼苗根系活力的影響Figure 1 Effect of MCs on root activity of rice seedling

恢復(fù)7 d 后，10 μg·L-1MCs 組水稻根系質(zhì)膜H+-ATPase 活性和ATP 含量恢復(fù)至對(duì)照水平，是礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)元素恢復(fù)的又一重要原因。100 μg·L-1與1000 μg·L-1MCs 組H+-ATPase 活性和ATP 含量仍顯著低于對(duì)照，但較脅迫期有所增加，其中1000 μg·L-1MCs 組較脅迫期增加程度較小。解除MCs 暴露后植物營(yíng)養(yǎng)吸收的恢復(fù)程度與MCs 處理濃度、MCs 積累量、不同生育期和不同器官等因素有關(guān)[33]。通過(guò)對(duì)礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)元素含量與質(zhì)膜H+-ATPase活性進(jìn)行相關(guān)性分析（表2）發(fā)現(xiàn)，在脅迫期和恢復(fù)期質(zhì)膜H+-ATPase 活性與Ca2+含量呈顯著負(fù)相關(guān)，與其他礦質(zhì)元素均呈顯著正相關(guān)。其中K+、Na+、Mg2+、Zn2+、PO3-4、NO-3的吸收受質(zhì)膜H+-ATP 酶活性影響較大。上述結(jié)果表明，MCs 脅迫導(dǎo)致的水稻幼苗中營(yíng)養(yǎng)元素含量的變化受質(zhì)膜H+-ATPase活性的調(diào)控。

圖2 MCs對(duì)水稻幼苗根系A(chǔ)TP含量和質(zhì)膜H+-ATPase活性的影響

2.4 MCs對(duì)水稻幼苗根系質(zhì)膜H+-ATPase基因表達(dá)的影響

水稻中質(zhì)膜H+-ATPase 由多基因家族編碼，并且已鑒定出5個(gè)不同的亞家族Ⅰ（OSA1、2、3），Ⅱ（OSA5、7），Ⅲ（OSA9），Ⅳ（OSA4、6、10）和Ⅴ（OSA8）[34]。由圖3可知，脅迫7 d后，1 μg·L-1MCs組水稻根系質(zhì)膜H+-ATPase 的編碼基因OSA1、OSA3 和OSA8 的相對(duì)表達(dá)量雖顯著上調(diào)，但質(zhì)膜H+-ATPase 活性無(wú)變化。這可能由于質(zhì)膜H+-ATPase 的活性不僅與轉(zhuǎn)錄水平有關(guān)，還受翻譯和磷酸化修飾等過(guò)程的調(diào)控[35]。在正常條件下，植物中亞家族Ⅰ（OSA1、2、3）和Ⅱ（OSA5、7）通常為高表達(dá)，Ⅲ（OSA9），Ⅳ（OSA4、6、10）和Ⅴ（OSA8）通常為低表達(dá)[36]。10 μg·L-1MCs 處理OSA1、OSA2、OSA3、OSA4、OSA6、OSA8、OSA9 的相對(duì)表達(dá)顯著上調(diào)，這可能是水稻對(duì)MCs脅迫的一種適應(yīng)性機(jī)制。結(jié)合該處理質(zhì)膜H+-ATPase 活性變化可知，10 μg·L-1MCs 誘 導(dǎo) 亞 家 族Ⅰ（OSA1、2、3），Ⅲ（OSA9），Ⅳ（OSA4、6）和Ⅴ（OSA8）的表達(dá)上調(diào)可能是質(zhì)膜H+-ATPase 活 性 增 加 的 原 因。100 μg·L-1MCs 組 除OSA2、OSA3 和OSA9 外，其他基因的相對(duì)表達(dá)量均顯著下調(diào)。結(jié)合質(zhì)膜H+-ATPase 活性降低可知，亞家族Ⅰ（OSA1），Ⅱ（OSA5、7），Ⅳ（OSA4、6、10）和Ⅴ（OSA8）的表達(dá)下調(diào)可能是質(zhì)膜H+-ATPase 活性降低的原因。1000 μg·L-1MCs 組各基因的相對(duì)表達(dá)量均顯著下調(diào)，且下調(diào)幅度大于100 μg·L-1MCs 處理組，與1000μg·L-1MCs 組質(zhì)膜H+-ATPase 活性低于100 μg·L-1MCs 組的結(jié)果相一致。結(jié)合之前的報(bào)道可知[9]，MCs（100 μg·L-1和1000 μg·L-1）脅迫水稻根系質(zhì)膜H+-ATP 酶基因表達(dá)下調(diào)，不利于質(zhì)膜H+-ATP 酶活性增加，進(jìn)而阻礙植物對(duì)礦質(zhì)元素的吸收，是高濃度MCs處理下水稻生物量下降的重要原因之一。

表2 水稻幼苗中礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)元素含量與質(zhì)膜H+-ATPase活性的相關(guān)性Table 2 Correlations between mineral element content and plasma membrane H+-ATPase activity in rice seedlings

圖3 MCs對(duì)水稻幼苗根系質(zhì)膜H-ATPase基因表達(dá)的影響Figure 3 Effect of MCs on the expression levels of genes encoding plasma membrane H+-ATPase in rice seedling roots

恢復(fù)7 d 后，1 μg·L-1MCs 組水稻根系中OSA1和OSA3 相對(duì)表達(dá)量仍高于對(duì)照而低于脅迫期，OSA10 相對(duì)表達(dá)量仍低于對(duì)照組。10 μg·L-1MCs處理組OSA2、OSA3、OSA4、OSA8 和OSA9 的相對(duì)表達(dá)量顯著低于對(duì)照且低于脅迫期，其他基因表達(dá)恢復(fù)至對(duì)照水平，利于調(diào)節(jié)根系質(zhì)膜H+-ATPase 活性的 自 我 恢 復(fù)。100 μg·L-1MCs 組OSA1、OSA4、OSA5、OSA6 和OSA8 相對(duì)表達(dá)量較脅迫期增加，與質(zhì)膜H+-ATPase 活性較脅迫期增加一致。1000 μg·L-1MCs OSA1、OSA4、OSA6 相對(duì)表達(dá)量較脅迫期增加，而OSA3、OSA5、OSA7 和OSA10 相對(duì)表達(dá)量低于脅迫期。推測(cè)高濃度MCs 損傷了質(zhì)膜H+-ATPase 的構(gòu)象和功能[17]，對(duì)編碼H+-ATPase 的基因轉(zhuǎn)錄水平造成了不可逆的抑制，進(jìn)而不利于質(zhì)膜H+-ATPase活性的增加。通過(guò)對(duì)比質(zhì)膜H+-ATPase 基因表達(dá)和質(zhì)膜H+-ATPase 活性的一致性，發(fā)現(xiàn)亞家族Ⅰ（OSA1），Ⅳ（OSA4、6）和Ⅴ（OSA8）能較好地響應(yīng)MCs 脅迫，對(duì)調(diào)控質(zhì)膜H+-ATPase 活性的變化具有重要作用。

3 結(jié)論

（1）低濃度MCs（1 μg·L-1）對(duì)水稻幼苗質(zhì)膜H+-ATPase 和礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)含量無(wú)影響。10 μg·L-1MCs 處理組質(zhì)膜H+-ATPase 基因表達(dá)的上調(diào)有益于質(zhì)膜H+-ATPase 活性上升，促進(jìn)水稻對(duì)礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)的吸收，增強(qiáng)了水稻幼苗對(duì)MCs 脅迫的適應(yīng)性，經(jīng)7 d 后恢復(fù)至對(duì)照水平。

（2）高濃度MCs（100 μg·L-1和1000 μg·L-1）處理組通過(guò)下調(diào)質(zhì)膜H+-ATPase 基因表達(dá)量來(lái)降低質(zhì)膜H+-ATPase 活性，阻礙了水稻對(duì)礦質(zhì)元素的吸收?；謴?fù)7 d 后100 μg·L-1MCs 組各項(xiàng)指標(biāo)優(yōu)于脅迫期，而1000 μg·L-1MCs 對(duì)水稻根系營(yíng)養(yǎng)吸收造成不可逆?zhèn)?。表明恢?fù)效果與MCs濃度有關(guān)。

（3）MCs 脅迫下質(zhì)膜H+-ATPase 活性變化調(diào)節(jié)了根系對(duì)營(yíng)養(yǎng)元素的吸收，進(jìn)而增強(qiáng)了植物對(duì)MCs脅迫的適應(yīng)性。