全自動血細胞分析儀與血涂片細胞形態(tài)學(xué)在血常規(guī)檢驗中的聯(lián)合應(yīng)用分析

張海燕，袁甜

泗陽縣人民醫(yī)院檢驗科，江蘇宿遷 223700

血液疾病的發(fā)生一般與血細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)、數(shù)量的異常改變有關(guān)，血常規(guī)檢查結(jié)果能夠較為準確地反映血細胞性質(zhì)，是血液科臨床檢驗中的重要項目[1-2]。全自動血細胞分析儀具有操作方便、檢驗快速等優(yōu)勢，還設(shè)置有報警系統(tǒng)，若血細胞在分類、計數(shù)上出現(xiàn)異常，則能夠及時得到反饋，但血細胞分析儀對于血細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)的檢驗存在欠缺、儀器系統(tǒng)性誤差較大等問題，因此需借助血涂片鏡檢進一步確認，以避免漏診、誤診情況[3-4]，為了探討全自動血細胞分析儀聯(lián)合血涂片細胞形態(tài)學(xué)檢驗方法在血常規(guī)檢驗中的應(yīng)用價值，該研究回顧性分析比較了2018年3—10月該院檢驗科接收的84例血液樣本采用聯(lián)合檢驗、血細胞分析儀獨立檢驗的結(jié)果，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該院檢驗科接收的血液樣本共84例，所選對象均為入院進行體檢者。血樣收集、涂片后，首先利用全自動血細胞分析儀對上述樣本進行血常規(guī)指標(biāo)檢驗，后進行細胞形態(tài)學(xué)鏡檢、細胞計數(shù)等復(fù)檢項目，納入標(biāo)準：所選患者均自愿參與該次研究，簽訂研究同意協(xié)議書，研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準。排除標(biāo)準：研究排除合并惡性腫瘤疾病、精神疾病以及急性傳染病的患者。該組受試者年齡13～84歲，平均年齡（43.9±5.27）歲，男性 50 例、女性 34 例。

1.2 方法

研究對象均保證在空腹8 h條件下于早間7：00-9：00完成血樣采集，抽血方法為肘靜脈采血法，血量為2～3 mL，將血樣分裝于無菌試管中，加入3 mg的EDTA-K2做抗凝處理，混勻后于室溫條件靜置30 min，送至檢驗科檢驗。臨床檢驗操作人員按《臨床檢驗操作規(guī)程和質(zhì)控標(biāo)準》并完成血液涂片、染色，染色方法為瑞特-姬母薩染色混合染色法。首先利用邁瑞CAL8000全自動血細胞流水線檢測系統(tǒng)及配套試劑對血樣進行檢驗，對 WBC、PLT、NE、LY、EO、MO 等血常規(guī)指標(biāo)進行計數(shù)，并對血細胞形態(tài)、體積等進行初步描述和篩查分析；后將血涂片送至50倍鏡油鏡下對有核細胞進行復(fù)檢 （包括形態(tài)學(xué)鏡檢和細胞計數(shù)、血液寄生蟲檢查等項目），為了杜絕細胞變異對結(jié)果的影響，全部樣本均應(yīng)在送檢后的3 d內(nèi)完成檢驗和復(fù)檢的全部項目，并制成檢驗報告。

1.3 血常規(guī)異常樣本的陽性篩選標(biāo)準

（1）血細胞分析儀，若符合下述結(jié)果之一檢出血常規(guī)陽性：①白細胞計數(shù)（WBC）＞28.0×109/L 或＜3.0×109/L；②血小板（PLT）＞300.0×109/L 或＜60.0×109/L；③中性粒細胞計數(shù)（NE）＞7.5×109/L 或＜2.0×109/L；④淋巴細胞計數(shù)（LY）：＞4.0×109/L 或＜0.8×109/L；⑤嗜酸性粒細胞占白細胞總數(shù)百分比（EO）：＞0.08%或＜0.004%；⑥單核細胞計數(shù)（MO）＞0.8×109/L 或＜0.3×109/L。

（2）血涂片細胞形態(tài)學(xué)，若符合下述條件之為陽性：①符合血細胞分析儀血常規(guī)異常標(biāo)準之一；②晚幼粒（晚幼紅）：胞體直徑 10～16 μm，細胞核變粗、胞質(zhì)增多呈紅色、充滿中性顆粒；③異型淋巴細胞（異淋）；④中性粒細胞中性毒變：中性粒細胞大小不均、核固縮、核左移、空泡變性、顆粒增粗；⑤紅細胞形態(tài)異常：紅細胞大小不一、呈現(xiàn)球形、橢圓形、靶形等不規(guī)則形狀，中央蒼白區(qū)擴大。

1.4 統(tǒng)計方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以[n(%)]表示，組間差異比較采用 χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

84份血樣中，血細胞分析義陽性檢出率為47.6%，血涂片、血細胞義聯(lián)合陽性檢出率為65.5%（P＜0.05）。 血細胞分析技術(shù)檢驗結(jié)果中，WBC、PLT、NE、LY、EO、MO等血常規(guī)指標(biāo)檢出陽性率分別為45.2%、28.6%、35.7%、21.4%、2.4%和4.8%；聯(lián)合檢驗結(jié)果顯示，上述指標(biāo)檢出陽性率分別為47.6%、30.9%、39.3%、22.6%、11.9%和15.5%，其中兩組檢查結(jié)果中EO、MO陽性率、總陽性檢出率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其余血常規(guī)項目差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表 1。

表1 全自動血細胞分析技術(shù)、血涂片細胞形態(tài)學(xué)分析技術(shù)對84例血液樣本的血常規(guī)項目陽性檢出率比較[n(%)]

3 討論

血液疾病的發(fā)生與血細胞結(jié)構(gòu)形態(tài)、功能和比例發(fā)生異常改變密切相關(guān)，血常規(guī)檢查主要反映血細胞的分類比例、計數(shù)情況，可為血液疾病和關(guān)聯(lián)性疾病的臨床診治提供重要參考[5]。

全自動血細胞分析儀基于電學(xué)原理，操作簡便、檢測快速、精確度高，較傳統(tǒng)人工鏡檢更具優(yōu)勢[6]，然而，臨床目前使用的血細胞分析儀一般不具備細胞形態(tài)學(xué)分析功能，而血細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)分類又較為復(fù)雜，細胞變異則能對染色和分類造成巨大影響[7]；此外，受操作人員因素、儀器系統(tǒng)性誤差的影響，不同型號的血細胞分析儀對于相同血液樣本的分析結(jié)果又具有較大的差異性，這些因素都使獨立的血細胞分析儀在血常規(guī)臨床檢驗中的應(yīng)用受到局限[8]。然而人工的血液涂片鏡檢雖然具有速度慢、工序復(fù)雜等缺點，但在高倍顯微鏡下血細胞的形態(tài)學(xué)特征都能得到立體、直觀反映，從而使血細胞的分類和計數(shù)更加精確，也是血常規(guī)檢驗的金標(biāo)準，可為血細胞分析儀檢驗結(jié)果提供補充和確證[9]。

該組84份樣本的血細胞分析結(jié)果顯示，WBC、PLT、NE、LY、EO、MO 幾項血常規(guī)指標(biāo)陽性檢出率分別為 45.2%、28.6%、35.7%、21.4%、2.4%和4.8%，總計47.6%； 聯(lián)合檢驗結(jié)果顯示，WBC、PLT、NE、LY、EO、MO幾項血常規(guī)指標(biāo)陽性檢出率則分別為47.6%、30.9%、39.3%、22.6%、11.9%和 15.5%，總計 65.5%，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析比較發(fā)現(xiàn)，血細胞分析儀和血涂片、血細胞儀聯(lián)合檢驗方法對84例血樣的血常規(guī)檢驗結(jié)果中的EO、MO陽性率、總陽性檢出率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義 （P＜0.05），其余血常規(guī)項目差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），這也與楊巍[10]關(guān)于血涂片鏡檢結(jié)果中對中性粒細胞、單核細胞、嗜酸性細胞、淋巴細胞鏡檢結(jié)果分別為56.32%、9.34%、3.12%、25.87%，與血細胞分析儀檢測結(jié)果58.15%、10.02%、2.98%、24.69%比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），血涂片鏡檢下的嗜堿性細胞鏡檢結(jié)果為0.82%與血細胞分析儀檢驗結(jié)果0.48%比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）的結(jié)果符合。

綜上所述，在血常規(guī)檢驗中聯(lián)合應(yīng)用血細胞分析技術(shù)、血涂片細胞形態(tài)學(xué)檢驗技術(shù)有助于提高血常規(guī)異常樣本的檢出率，彌補血細胞技術(shù)在細胞形態(tài)學(xué)檢驗方面的不足。