套袋對(duì)大櫻桃果實(shí)發(fā)育期花色苷形成的影響試驗(yàn)

劉 瑾 曹金石 呼麗萍

果實(shí)的外觀色澤可以反映出果實(shí)的成熟度和風(fēng)味，從而直接決定其商業(yè)價(jià)值。櫻桃果實(shí)著色是花色苷積累的結(jié)果。花色苷屬于類黃酮物質(zhì)，是植物體內(nèi)一類重要的次級(jí)代謝產(chǎn)物，廣泛存在于高等植物的所有組織和器官中，是使植物呈現(xiàn)藍(lán)色、紫色和紅色的一種水溶性色素。除了決定色澤外，花色苷還具有多種生物學(xué)功能及保健功能。

本試驗(yàn)在果實(shí)硬核期前至果實(shí)成熟這段發(fā)育期，分階段采集套袋和不套袋的的果實(shí)，通過(guò)測(cè)定不同時(shí)期的花色苷含量，分析套袋和不套袋櫻桃果實(shí)不同發(fā)育階段花色苷含量的差異，探明花色苷大量形成的關(guān)鍵時(shí)期，以明確套袋處理對(duì)果實(shí)著色的影響。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn) 位于天水市果樹(shù)研究所中日友好櫻桃園，面積6.5畝，海拔1 318 m，年平均氣溫10.8℃，平均年日照時(shí)數(shù)2 013.2小時(shí)，平均年降水量500～600 mm，無(wú)霜期185天左右，土壤為河床淤積沙質(zhì)壤土，2012年定植，砧木為ZY-1，苗木定植東西行向，栽植株行距3.5m×4 m，采用紡錘形整形修剪，豐產(chǎn)溝栽植，2016年開(kāi)始結(jié)果，管理水平較好。

1.2 供試品種 選擇常見(jiàn)品種“美早”作試驗(yàn)。

1.3 試驗(yàn)方法

1）樣品采集。美早套袋及不套袋處理的果實(shí)分別于落花（4月10日）后第26天、30天、34天、41天、47天、53天、60天分7個(gè)時(shí)期取樣。供試品種在生理落果后轉(zhuǎn)色期前 （5月10日）用小白袋（臺(tái)果）進(jìn)行果實(shí)套袋，在相應(yīng)套袋果附近留不套袋果實(shí)為對(duì)照，采集的樣品果實(shí)去核后液氮速凍，-80℃低溫冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

2）供試試劑。無(wú)水甲醇、濃鹽酸、冰乙酸、氯化鉀、乙酸鈉均為分析純?cè)噭?。試劑用水均為去離子水。

3）儀器與設(shè)備。SP-1920比例雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，上海光譜儀器有限公司生產(chǎn)。H1850R臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)，湘儀離心機(jī)儀器有限公司生產(chǎn)。

PHS-3E pH計(jì)，上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司生產(chǎn)。KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)。

4）花色苷檢測(cè)方法。大櫻桃果實(shí)中花色苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定采用pH值示差法。取2g果肉，用研缽加入無(wú)水甲醇研成果漿，倒入燒杯中，在數(shù)控超聲波清洗器上振蕩10分鐘，裝入50 mL離心管中，在臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)15℃條件下5 000 rpm離心5分鐘，取上清液，如上清液還有顏色可加入無(wú)水甲醇繼續(xù)離心，直至上清液無(wú)色透明。取5mL花青素樣品液，用0.025 mol/L的氯化鉀緩沖溶液 （pH=1）和0.4mol/L的乙酸鈉緩沖溶液 （pH=4.5）稀釋到50 mL，在暗處反應(yīng)20分鐘后，用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)分別在510 nm及700 nm下檢測(cè)其吸光度值，根據(jù)如下公式計(jì)算出樣品中花色苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

花色苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)（mg/100g）=C·1000·V/M式中：A為吸光度值；C為花色苷質(zhì)量濃度，單位g/L；MW為矢車(chē)菊素-3-O-葡萄糖苷分子量，449.2 g/mol；DF為稀釋因子，此處為10；ε為矢車(chē)菊素-3-O-葡萄糖苷摩爾消光系數(shù)，26 900 L/(mol·cm)； l為光程， 1 cm； V 為花色苷樣品液總體積，單位L；M為樣品初始質(zhì)量，單位g。

1.5 數(shù)據(jù)處理 試驗(yàn)結(jié)果用Excel軟件統(tǒng)計(jì)，并用SPSS 18.0分析數(shù)據(jù)。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

表1 套袋和不套袋美早果實(shí)不同發(fā)育期間花色苷的含量mg/100 g

由表1可知，套袋和不套袋果花色苷在花后第41天開(kāi)始積累，套袋果比不套袋果花色苷積累速度慢，但在花后第47天后，套袋果花色苷迅速合成，隨著果實(shí)的發(fā)育成熟，套袋果和不套袋果花色苷含量一直呈線性上升，在花后第60天套袋處理的果實(shí)花色苷含量最高，達(dá)到了29.641 mg/100 g。在花后第53天，不套袋果達(dá)到九成熟，花色苷含量比不套袋果高8.19%，花后第60天套袋果充分成熟，且最終含量比不套袋果高18.52%。

3 小結(jié)

果實(shí)色澤是果實(shí)品質(zhì)和商品性的重要指標(biāo)，甜櫻桃果實(shí)著色正是花色苷積累的結(jié)果。隨著果實(shí)成熟度越來(lái)越高，花色苷的含量逐漸升高。果實(shí)套袋后，袋內(nèi)光照大大減弱，而光照一般通過(guò)兩個(gè)方面來(lái)影響花色苷的合成。首先，套袋影響了果實(shí)的光合作用，進(jìn)而影響了花色苷的底物來(lái)源；其次套袋影響了光強(qiáng)和光質(zhì)，進(jìn)而影響了花色苷合成途徑中光調(diào)節(jié)酶的活性，從而影響了花色苷的合成。本試驗(yàn)結(jié)果表明，套袋果比不套袋果花色苷積累速度慢，在果實(shí)發(fā)育后期套袋果花色苷含量達(dá)到了最高，這與果實(shí)成熟度有關(guān)，套袋果比不套袋果延遲采摘，果實(shí)發(fā)育更加充分。