蘇云金桿菌G033A對(duì)蘿卜黃曲條跳甲的室內(nèi)活性及田間藥效

方國(guó)斌 ，王攀 ，望勇 ，孫光忠 ，匡輝 ，司升云

（1.湖北省植物保護(hù)總站，武漢，430070；2.武漢市農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所）

黃曲條跳甲Phyllotreta striolataFabricius隸屬鞘翅目葉甲科，是一種世界性害蟲，別名菜蚤子、土跳蚤、黃跳蚤、狗虱子等[1，2]。該蟲主要為害白菜類、甘藍(lán)類、蘿卜和油菜等十字花科作物，且以苗期發(fā)生為害最為嚴(yán)重[1，2]。成蟲取食寄主植物葉片或幼苗，造成葉面坑凹或孔洞，嚴(yán)重時(shí)啃食種苗致死；幼蟲在土中為害植株根部表皮，植株受害后往往生長(zhǎng)不良，嚴(yán)重時(shí)植株萎蔫枯死[2]。黃曲條跳甲在我國(guó)分布廣泛，各地區(qū)發(fā)生代數(shù)不同，且均有世代重疊現(xiàn)象。由于該蟲繁殖能力強(qiáng)，且成、幼蟲分別為害地上植株和土中根系，防治難度大，在部分地區(qū)甚至已取代小菜蛾成為十字花科蔬菜上最主要的害蟲。

生產(chǎn)上用于防治黃曲條跳甲的方法較少，如覆蓋防蟲網(wǎng)[3]，或用黃板誘殺成蟲[3]、用線蟲防治幼蟲[4]等，但防效達(dá)不到生產(chǎn)的要求，因此，化學(xué)防治仍是防治該害蟲最主要的手段[2]。雖然市場(chǎng)上化學(xué)農(nóng)藥品類繁多，但由于生產(chǎn)上缺乏科學(xué)監(jiān)測(cè)和用藥指導(dǎo)，農(nóng)藥的亂用和濫用現(xiàn)象突出，既威脅環(huán)境安全，又使得該蟲的抗藥性逐年上升，導(dǎo)致防治效果下降[5]。

生物農(nóng)藥可明顯改善由化學(xué)農(nóng)藥帶來的環(huán)境污染及害蟲抗藥性問題。蘇云金桿菌（Bacillusthuringiensis，Bt）是一種具有殺蟲活性的微生物，其主要?dú)⑾x物質(zhì)為伴孢晶體，可在昆蟲中腸的堿性環(huán)境條件下破壞消化系統(tǒng)，是目前應(yīng)用最廣泛的微生物殺蟲劑[6]。G033A為蘇云金桿菌工程菌株，對(duì)鞘翅目害蟲有較高活性和防效，為此，進(jìn)行了32 000 IU/mg蘇云金桿菌G033A可濕性粉劑對(duì)蘿卜黃曲條跳甲的生物活性測(cè)定和田間藥效試驗(yàn)，旨在確定其防治效果，為黃曲條跳甲的防治提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

①供試蟲源 從武漢市農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所藥效園蘿卜試驗(yàn)田采集黃曲條跳甲成蟲，帶回室內(nèi)以新鮮蘿卜葉飼喂24 h后，挑選蟲體健康一致的成蟲作為室內(nèi)活性測(cè)定的蟲源。

②供試作物 用于室內(nèi)生物活性測(cè)定的蘿卜品種為韓白玉；用于田間藥效試驗(yàn)的蘿卜品種為韓白玉（湖北武漢地區(qū)）和白玉春（云南玉溪地區(qū)），分別為兩地區(qū)當(dāng)季的蘿卜主栽品種。

③供試藥劑 試驗(yàn)藥劑32 000 IU/mg蘇云金桿菌G033A可濕性粉劑（WP），由武漢科諾生物科技股份有限公司提供。對(duì)照藥劑5%啶蟲脒乳油（EC）和10%溴氰蟲酰胺可分散油懸浮劑（OD）分別由江門市大光明農(nóng)化新會(huì)有限公司和美國(guó)杜邦公司提供，2種藥劑為兩地區(qū)防治黃曲條跳甲的主要防治藥劑，且對(duì)黃曲條跳甲的防治效果較好。

室內(nèi)活性測(cè)定的藥劑劑量設(shè)置方法：稱取供試藥劑0.501 6 g，用蒸餾水定容至100 mL配制成儲(chǔ)備液，最終配制成 160.512、80.256、40.128、20.064、10.032、5.016、2.508 mg/L 共 7 個(gè)濃度，并設(shè)空白對(duì)照。

田間藥效試驗(yàn)的藥劑劑量設(shè)置方法：32 000 IU/mg蘇云金桿菌G033A WP制劑用量為1 500、2 250、3 000 g/hm2；5%啶蟲脒 EC 有效成分用量為90 g/hm2（制劑用量為120 g/667 m2，制劑用量=有效成分用量÷有效成分濃度÷15）；10%溴氰蟲酰胺OD的有效成分用量為39 g/hm2（制劑用量為26 g/667 m2）。

1.2 試驗(yàn)方法

①室內(nèi)活性測(cè)定 參照中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 1154.14-2008），于 2018年 5月進(jìn)行。將浸葉處理10 s的蘿卜葉片晾干后，在葉柄裹無菌水浸濕的脫脂棉進(jìn)行葉片保鮮，再放入燒杯（V=500 mL）內(nèi)，每杯接入黃曲條跳甲成蟲至少30頭，杯口用白紗布封口后置于人工氣候箱內(nèi)，每處理重復(fù)4次。試驗(yàn)期間設(shè)置溫度 （25±1）℃、濕度70%±10%和光照12L∶12D。于72 h后調(diào)查各處理死、活蟲數(shù)。試蟲死亡標(biāo)準(zhǔn)為：用鑷子輕觸后無明顯自主反應(yīng)。

②田間藥效試驗(yàn) 參照《農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則（一）第18部分：殺蟲劑防治十字花科蔬菜黃條跳甲》（GB/T 17980.18-2000），于 2018 年 5～8 月在湖北武漢和云南玉溪2個(gè)地區(qū)進(jìn)行供試藥劑對(duì)蘿卜黃曲條跳甲的田間藥效試驗(yàn)。

試驗(yàn)期間兩地區(qū)黃曲條跳甲成蟲均處于盛發(fā)期。試驗(yàn)在兩地區(qū)分別設(shè)置4個(gè)處理（即低、中、高3個(gè)制劑用量處理，1個(gè)藥劑對(duì)照處理），4次重復(fù)，小區(qū)面積 30 m2，各處理隨機(jī)區(qū)組排列。施藥時(shí)蘿卜處于肉質(zhì)根膨大期，采用MATABI-16型背負(fù)式手動(dòng)噴霧器莖葉噴霧法施藥，共設(shè)置低、中、高3個(gè)制劑用量（分別為 1 500、2 250、3 000 g/hm2），對(duì)水稀釋后均勻、全面噴施于蘿卜葉片的正反面及心葉部分。

采用定點(diǎn)調(diào)查法，每小區(qū)隨機(jī)標(biāo)記20株蘿卜。施藥前進(jìn)行基數(shù)調(diào)查；施藥后湖北武漢種群于施藥后第2天和第7天調(diào)查，云南玉溪種群于施藥后第2天、第5天和第10天調(diào)查。調(diào)查時(shí)于早晨露水未干前進(jìn)行，輕輕翻動(dòng)葉片，盡量避免驚動(dòng)試蟲，分別調(diào)查每株蘿卜葉片上存活的黃曲條跳甲成蟲數(shù)量。

1.3 數(shù)據(jù)處理

使用SPSS軟件對(duì)室內(nèi)生物活性測(cè)定的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析（幾率值法），計(jì)算毒力回歸曲線、LC50值及其95%置信限、相關(guān)系數(shù)、LC90值等。

2 結(jié)果與分析

2.1 供試藥劑對(duì)黃曲條跳甲的生物活性

32 000 IU/mg蘇云金桿菌G033A WP對(duì)黃曲條跳甲72 h時(shí)LC50值為26.145 1 mg/L，95%置信限為 22.360 0～30.570 9 mg/L，LC90值為 207.283 8 mg/L（表 1）。

表1 32 000 IU/mg蘇云金桿菌G033A可濕性粉劑對(duì)蘿卜黃曲條跳甲的生物活性

2.2 供試藥劑防治黃曲條跳甲的田間藥效

在試驗(yàn)劑量范圍內(nèi)，供試藥劑對(duì)兩地區(qū)的蘿卜生長(zhǎng)無不良影響，且對(duì)周圍環(huán)境和試驗(yàn)區(qū)域內(nèi)其他有益生物也未造成不利影響。由表2可知，32 000 IU/mg蘇云金桿菌G033A WP對(duì)湖北武漢地區(qū)黃曲條跳甲的防效隨處理濃度的增加而上升，第 2天 3個(gè)處理防效分別達(dá)到 70.4%、77.7%、85.6%；施藥后第7天防效均低于第2天防效。高濃度處理的防效在施藥后第2天、第7天均與對(duì)照藥劑（10%溴氰蟲酰胺OD）處理無顯著差異。

表2 32 000 IU/mg蘇云金桿菌G033A可濕性粉劑防治蘿卜黃曲條跳甲的田間藥效（湖北武漢）

表3 32 000 IU/mg蘇云金桿菌G033A可濕性粉劑防治蘿卜黃曲條跳甲的田間防效（云南玉溪）

由表3可知，該藥劑對(duì)云南玉溪地區(qū)黃曲條跳甲的防效隨處理濃度的增加而上升，各處理施藥后第5天防效分別達(dá)到最高值，3個(gè)處理防效分別達(dá)到76.2%、84.1%、89.2%。高濃度處理的防效在施藥后 2、5、10 d均與對(duì)照藥劑（5%啶蟲脒 EC）處理無顯著差異。

3 小結(jié)與討論

室內(nèi)生物活性測(cè)定結(jié)果表明，32 000 IU/mg蘇云金桿菌G033A WP對(duì)蘿卜黃曲條跳甲表現(xiàn)出較高的生物活性，LC50值為 26.145 1 mg/L，LC90值為207.283 8 mg/L。兩地田間藥效試驗(yàn)結(jié)果表明，該藥劑對(duì)蘿卜黃曲條跳甲有較好的防治效果，田間推薦制劑用量為2 250～3 000 g/hm2，同時(shí)，通過田間觀察發(fā)現(xiàn)其對(duì)蘿卜安全無藥害，對(duì)天敵昆蟲（蚜繭蜂、瓢蟲等）安全，同時(shí)，該藥劑對(duì)小菜蛾、菜青蟲等兼發(fā)害蟲也具有較好的防治效果。

根據(jù)黃曲條跳甲成蟲活動(dòng)特點(diǎn)，選擇在成蟲盛發(fā)初期防治，噴霧時(shí)應(yīng)均勻、周到，從四周向中央進(jìn)行。施藥時(shí)間一般選擇陰天或晴天傍晚，施藥間隔期為7～10 d，一般連續(xù)噴施 2～3次。