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    ERK1/2在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)與預(yù)后判斷

    2019-11-12 09:09:31徐廣有劉婷于秀文
    健康大視野 2019年20期
    關(guān)鍵詞:生存期免疫組化生存率

    徐廣有 劉婷 于秀文

    【摘 要】目的:絲裂原活化蛋白激酶(MAPKs)介導(dǎo)的的信號(hào)傳導(dǎo)通路在結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展中扮演著重要的角色,但其是否能夠作為結(jié)直腸癌的預(yù)后判斷指標(biāo)還有待證實(shí)。方法:收集齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院臨床病理檢驗(yàn)中心原發(fā)結(jié)直腸癌根治性切除術(shù)新鮮標(biāo)本184例作為觀察組,對(duì)應(yīng)遠(yuǎn)切端正常組織為對(duì)照組。采用免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry,IHC)法檢測(cè)ERK1/2表達(dá)水平,分析其表達(dá)與CRC患者臨床病理參數(shù)、患者生存期間的關(guān)系。結(jié)果:ERK1/2結(jié)直腸癌對(duì)照組和觀察組陽(yáng)性率分別為25%(46/184)、82.1%(151/184),兩者比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。ERK1/2的表達(dá)與患者年齡、性別和腫瘤的部位、腫瘤的分化程度無(wú)相關(guān)性,與浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期有關(guān)(P<0.05)。ERK1/2對(duì)照組和觀察組5年生存率分別為57.6%(19/33)和21.9%(33/151),log-rank顯著性檢驗(yàn)P<0.05,ERK1/2與結(jié)直腸癌患者5年生存期密切相關(guān),是影響結(jié)直腸癌預(yù)后的因素。結(jié)論:結(jié)直腸癌中ERK1/2是影響結(jié)直腸癌預(yù)后的因素,本研究為研究ERK1/2在結(jié)直腸癌患者預(yù)后判斷中的價(jià)值提供了第一手?jǐn)?shù)據(jù)。

    【關(guān)鍵詞】結(jié)直腸癌;ERK1/2;預(yù)后

    【中圖分類號(hào)】R735.3【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1005-0019(2019)20--02

    結(jié)直腸癌(Colorectal Cancer,CRC)是人類常見(jiàn)惡性腫瘤之一,由于人口增長(zhǎng)和人口結(jié)構(gòu)的變化,預(yù)計(jì)未來(lái)幾十年大多數(shù)地區(qū)的CRC發(fā)病率將繼續(xù)上升[1]。細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2(extracellular signal regulated protein kinase1/2,ERK1/2) 信 號(hào) 通 路 是MAPK 家族中的一條重要信號(hào)通路[2]。ERK1/2是否能夠作為結(jié)直腸癌的預(yù)后判斷指標(biāo)還有待證實(shí)。

    1 資料與方法

    1.1 標(biāo)本來(lái)源 隨機(jī)選取2012年1月~2017年12月期間在齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院臨床病理檢驗(yàn)中心根治性切除術(shù)的結(jié)直腸癌原發(fā)病例184例作為觀察組。對(duì)照組為大腸癌遠(yuǎn)切端正常組織184例。184例中<60歲87例,≥60歲97例;男性95例,女性89例;發(fā)生部位結(jié)腸90例,直腸94例;高中分化119例,低分化65例;浸潤(rùn)未達(dá)肌層90例,浸及或超過(guò)肌層94例;無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者81例,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者103例;TNM分期中Ⅰ期-Ⅱ期85例,Ⅲ-Ⅳ期99例。5年以上隨訪資料,生存期≥60個(gè)月52例, 生存期<60個(gè)月 132例,復(fù)檢符合結(jié)直腸癌病理診斷。

    1.2 主要試劑 鼠抗人ERK1/2多克隆抗體購(gòu)自北京博奧森生物技術(shù)有限公司,工作液濃度為1∶200, 即用型免疫組化EliVisionTM super 檢測(cè)試劑盒及DAB顯色液為福州邁新生物技術(shù)公司產(chǎn)品。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方法 本研究采用免疫組化二步法,切片常規(guī)脫蠟,水化后,3%H2O2-甲醇封閉內(nèi)源性過(guò)氧化物酶20min,枸櫞酸高壓修復(fù)10min,PBS洗3×3分鐘,一抗4℃冰箱過(guò)夜,第二天切片恢復(fù)室溫后,依次滴加試劑A:反應(yīng)增強(qiáng)液,試劑B:酶標(biāo)抗小鼠/兔IgG聚合物,室溫各孵育15min,,中間PBS洗3×3分鐘,DAB顯色,蘇木精復(fù)染。以PBS代替一抗作陰性對(duì)照。采用半定量積分法判定結(jié)果,顯色度按細(xì)胞著色深淺計(jì)分。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用 IBM SPSS Statistics 25.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)據(jù)以表示,組間均數(shù)比較使用t 檢驗(yàn),P < 0.05為差異有顯著性意義;生存時(shí)間的關(guān)系采用Kaplan-Meier生存率曲線及l(fā)og-rank檢驗(yàn),顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)α值等于0.05。

    2 結(jié)果

    2.1ERK1/2在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)

    ERK1/2免疫組化陽(yáng)性產(chǎn)物呈棕褐色顆粒狀位于細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)。ERK1/2結(jié)直腸癌對(duì)照組和觀察組陽(yáng)性率分別為25%(46/184)、82.1%(151/184), ?=120.438,P=0.000兩者比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

    2.2ERK1/2表達(dá)與結(jié)直腸癌的臨床病理因素的關(guān)系

    ERK1/2的表達(dá)與患者年齡、性別和腫瘤的部位無(wú)關(guān),與腫瘤的分化程度、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、及TNM分期有關(guān)(P<0.05),見(jiàn)表1。

    2.3ERK1/2表達(dá)與患者生存期的關(guān)系

    184例結(jié)直腸癌患者根據(jù)對(duì)照組和觀察組ERK1/2陽(yáng)性表達(dá)的情況進(jìn)行Kaplan-Meier生存分析。ERK1/2對(duì)照組和觀察組5年生存率分別為57.6%(19/33)和21.9%(33/151),生存分析函數(shù)曲線和風(fēng)險(xiǎn)函數(shù)曲線,見(jiàn)圖1-2.log-rank顯著性檢驗(yàn)(=14.074,P=0.000)P<0.05可知, ERK1/2與結(jié)直腸癌患者5年生存期密切相關(guān),是影響結(jié)直腸癌預(yù)后的因素。

    3 討論

    細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2(extracellular signal regulated protein kinase1/2,ERK1/2)包括ERK1和ERK2,RAS-RAF-MEK-MAPK信號(hào)傳導(dǎo)通路參與細(xì)胞增殖、分化、凋亡、運(yùn)動(dòng)與分泌等多種生命活動(dòng)的調(diào)節(jié),MAPK是這一傳導(dǎo)通路中的重要一環(huán)。ERK是MAPK家族的一員,主要被各種生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子、腫瘤啟動(dòng)子等激活而磷酸化,促進(jìn)某些基因的轉(zhuǎn)錄與表達(dá),與細(xì)胞的增殖密切相關(guān)。文獻(xiàn)報(bào)道,多種惡性腫瘤中可檢測(cè)到 ERK活化,已成為相關(guān)腫瘤疾病變化發(fā)展的標(biāo)志物[3]。通過(guò)免疫組化積分法判斷正常的組織與腫瘤組織ERK1/2 磷酸化水平[4]。本研究結(jié)果表明,ERK1/2磷酸化水平在結(jié)直腸癌顯著升高(P<0.05),且與腫瘤的分化程度、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、及TNM分期有關(guān)(P<0.05)。5年生存率分別為57.6%(19/33)和21.9%(33/151),生存分析函數(shù)曲線和風(fēng)險(xiǎn)函數(shù)曲線及l(fā)og-rank顯著性檢驗(yàn)(=14.074,P=0.000)可知, ERK1/2與結(jié)直腸癌患者5年生存期密切相關(guān),是影響結(jié)直腸癌預(yù)后的因素,本研究為研究ERK1/2在結(jié)直腸癌患者預(yù)后判斷中的價(jià)值提供了第一手?jǐn)?shù)據(jù)。

    參考文獻(xiàn)

    Cursons J,Gao J,Hurley DG,et al.Regulation of erk-mapk signaling in human epidermid[J].BMC Syst Biol,2015;9(1):41.

    王利偉,初桂偉,杜靈霞,等. MMP-9、ERK 與 PTEN 在舌癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J].解放軍醫(yī)藥雜志,2019,31(2).

    馬利峰,胡春榮,李鳳君. ERK 磷酸化在預(yù)測(cè)結(jié)直腸癌患者預(yù)后的價(jià)值[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué),2017,40(4).

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