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    我院腸桿菌屬ESBLs耐藥情況及CTX-M-1、SHV型耐藥基因研究

    2019-11-12 01:58:02劉建強(qiáng)趙志國(guó)黃冬梅
    健康大視野 2019年20期
    關(guān)鍵詞:抗菌素神經(jīng)外科耐藥性

    劉建強(qiáng) 趙志國(guó) 黃冬梅

    【摘 要】目的:了解2016-2018年本院腸桿菌屬分布情況及部分耐藥基因分型。方法:利用WHONET5.6軟件分析耐藥率變化。針對(duì)產(chǎn)ESBLs酶菌株進(jìn)行CTX-M-1、SHV型耐藥基因分型。結(jié)果:2016-2018年期間共得到腸桿菌屬124株;大多數(shù)菌株來(lái)自神經(jīng)外科(19%),標(biāo)本類型主要為痰(56%);腸桿菌屬對(duì)青霉素類、頭孢菌素類、單環(huán)β-內(nèi)酰胺類抗菌素均存在較高耐藥率(>20%),對(duì)復(fù)方新諾明的耐藥率明顯呈上升趨勢(shì)。有46(37.1%)株對(duì)ESBLs耐藥菌株,主要為CTX-M-15型(21.7%)。結(jié)論:建議通過(guò)更多的研究建立一套完整的基因耐藥監(jiān)測(cè)體系。

    【關(guān)鍵詞】腸桿菌屬;ESBLs;耐藥;CTX-M-1;SHV

    Abstract:Objective To understand the distribution of Enterobacter and the types of drug resistance genes in the isolated specimens of our hospital from 2016 to 2018. Methods:The change of drug resistance rate was analyzed by WHONET5.6 software. CTX-M-1 and SHV-type genotyping were performed on strains producing ESBLs.Results: A total of 124 strains of Enterobacter were obtained during 2016-2018;Most of the strains were from neurosurgery(19%).The type of specimen was mainly sputum (56%); Enterobacteriaceae have high resistance rate to penicillins,cephalosporins and monocyclic β-lactam antibiotics, which is more than20%.The resistance rate of Nomin is rising clearly. There were 46(37.1%)strains resistant to ESBLs, mainly CTX-M-15(21.7%).Conclusions:It is suggested that a complete set of genetic drug resistance monitoring procedures should be established through more research.

    Key words: Enterobacter;ESBLs;Drug resistance;CTX-M-1;SHV

    【中圖分類號(hào)】R378.2【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1005-0019(2019)20-0-02

    腸桿菌屬隸屬于腸桿菌科,廣泛分布于自然環(huán)境中,目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的包括14種[1],是重要的在院內(nèi)感染機(jī)會(huì)性致病菌之一。而且其耐藥機(jī)制是復(fù)雜的其中對(duì)于介導(dǎo)產(chǎn)ESBLs酶分子機(jī)制一直是熱點(diǎn),且具有一定的區(qū)域特點(diǎn)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 菌株來(lái)源:2016-2018年我院門診病人與住院病人送檢至病原微生物實(shí)驗(yàn)室保存的菌株。

    1.1.2 主要試劑與設(shè)備:血·腸道菌分隔瓊脂平板、VITEK2 Compact、天根細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒、PCR試劑盒、PCR儀、高速冷凍離心機(jī)、電泳儀、全自動(dòng)凝膠成像分析系統(tǒng)。

    1.2 方法

    1.2.1 樣本信息收集:通過(guò)醫(yī)院LIS系統(tǒng)收集2016-2018年期間門診病人與住院病人送檢標(biāo)本經(jīng)分離鑒定為腸桿菌屬的菌株。

    1.2.2分析方法:利用WHONET5.6軟件對(duì)所收集菌株信息按標(biāo)本類型、科室分布進(jìn)行分析。

    1.2.3 產(chǎn)ESBLs酶的菌株收集:根據(jù)CLSI2016版指南對(duì)所收集的目次菌株以紙片擴(kuò)散法進(jìn)行初篩試驗(yàn)、確認(rèn)試驗(yàn)以篩選出產(chǎn)ESBLs的菌株,質(zhì)控菌株是大腸埃希菌ATCC 25922。

    1.2.4 基因組DNA提取與PCR:按天根基因組試劑盒操作步驟提取目的菌株基因組DNA。分別以CTX-M-1、SHV基因設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。

    1.2.5PCR產(chǎn)物電泳與測(cè)序:配制1.5%瓊脂糖凝膠,在100V電壓下電泳,對(duì)凝膠成像分析,將符合要求的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物送至上海生工測(cè)序。

    2 結(jié)果

    2.1 目的菌株構(gòu)成、類型及科室分布情況 2016-2018年期間我實(shí)驗(yàn)室共分離出腸桿菌屬124株,所有的送檢標(biāo)本類型中主要為痰、尿液、血標(biāo)本,且以神經(jīng)外科、泌尿外科、重癥醫(yī)學(xué)科1三個(gè)科室腸桿菌屬檢出率最高。

    2.2 腸桿菌屬耐藥情況 2016-2018年腸桿菌屬耐藥率變化情況(詳見(jiàn)表1),存在46株對(duì)ESBLs酶耐藥。

    2.3 PCR測(cè)序結(jié)果 有24株目的菌株測(cè)序成功,6株為CTX-M-3型ESBLs(13%)、10株為CTX-M-15型ESBLs(21.7%)、8株為SHV12型ESBLs(17.4%)。

    3 討論

    本研究中利用WHONET5.6軟件對(duì)2016-2018年期間我院病原微生物實(shí)驗(yàn)室得到的所有菌株進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn),大多數(shù)目的菌株分離自神經(jīng)外科(19%)、泌尿外科(11%)、重癥醫(yī)學(xué)科1(9%),其標(biāo)本類型主要是痰、尿液、血,與John N Kateregga等[2]研究一致。而我國(guó)學(xué)者盧兆蓮等研究[3]顯示科室分布為骨創(chuàng)傷科為主(21.2%)、老年綜合病房(12.3%)、神經(jīng)外科(11.6%),考慮與機(jī)體抵抗力比較差,或者接受過(guò)侵入性操作等因素有關(guān)。復(fù)方新諾明的耐藥率明顯呈上升趨勢(shì),而青霉素類、頭孢類菌素類、單環(huán)β-內(nèi)酰胺類抗菌素的耐藥率盡管呈下降趨勢(shì),但其耐藥率仍處于較高水平,其中頭孢曲松的耐藥率高達(dá)32.7%,這與盧兆蓮等[3]等研究相似。在郭普等[4]的研究中發(fā)現(xiàn)腸桿菌屬細(xì)菌對(duì)喹諾酮類、氨基糖苷類抗菌素有較高的耐藥率,而我院腸桿菌屬對(duì)喹諾酮類抗菌素的耐藥性呈下降趨勢(shì),之所以出現(xiàn)這種耐藥差異筆者認(rèn)為可能與不同地區(qū)臨床醫(yī)生經(jīng)驗(yàn)性用藥習(xí)慣以及地域環(huán)境等綜合因素有關(guān)。經(jīng)基因進(jìn)行分析結(jié)果表明CTX-M-15型所占比例高于SHV12型,可見(jiàn)我院CXT-M-1型ESBLs酶耐藥基因比較常見(jiàn),這與Simon G等的研究是一致的[5]。這種耐藥性可通過(guò)結(jié)合、傳導(dǎo)和轉(zhuǎn)化等方式在細(xì)菌之間傳遞[6],導(dǎo)致其產(chǎn)ESBLs酶的基因分型更為復(fù)雜,形勢(shì)更為嚴(yán)峻。

    4 結(jié)論

    我院腸桿菌屬主要存在于自身抵抗力低的病人,隨痰液、尿液、血液傳播,以CTX-M-3型、 CTX-M-15型、SHV12型ESBLs耐藥為主,亦對(duì)其他抗菌素存在耐藥現(xiàn)象,其耐藥機(jī)制是復(fù)雜的,需要進(jìn)一步探索,從基因?qū)用姹O(jiān)測(cè)其發(fā)展方向,為更合理的臨床用藥提供指導(dǎo)。

    參考文獻(xiàn)

    王輝譯.(美)James H.Jorgensen,Michael A.Pfaller著.臨床微生物學(xué)手冊(cè)[M].第1卷 第11版[M].北京:中華醫(yī)學(xué)電子音像出版社,2017.06:920-923.

    John N Kateregga, Ronah Kantume, Collins Atuhaire,Musisi Nathan Lubowa and James G Ndukui,(2015) BMC Pharmacology and Toxicology,16,14.

    盧兆蓮,公衍文,薛煉,等.陰溝腸桿菌的臨床分布及耐藥性變遷[J].中國(guó)感染與化療雜志, 2015(5):459-461.

    郭普,喬艷,李靜.2017年蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)[J].中國(guó)感染與化療雜志,2018,18(06):80-86.

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    謝朝云,熊蕓,孫靜,等.聚團(tuán)腸桿菌感染分布與耐藥性分析[J].中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志, 2015,27(9):1047-1049.

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