采用“自上而下”方法評(píng)定11項(xiàng)生化檢測(cè)指標(biāo)的測(cè)量不確定度

黃羽萍

摘?要：采用自上而下法（Top-Down 法）對(duì)實(shí)驗(yàn)室11項(xiàng)生化檢驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行測(cè)量不確定度評(píng)定。方法：收集本室2018年3月至2018年8月之間的生化室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)，和2017年至2018年參加衛(wèi)生部臨檢中心連續(xù)6次的室間質(zhì)評(píng)回報(bào)結(jié)果，采用Top-Down 法評(píng)定葡萄糖（Glu）、尿素（Urea）、尿酸（UA）、肌酐（Cr）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、總膽固醇（TG）、甘油三酯（TC）、總膽紅素（T-Bil）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）以及天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）11項(xiàng)生化項(xiàng)目的測(cè)量不確定度。結(jié)果：由羅氏c501生化分析儀檢測(cè)Glu、Urea、UA、Cr、TP、ALB、TG、TC、T-Bil、ALT、AST11項(xiàng)生化指標(biāo)，合成相對(duì)擴(kuò)展標(biāo)準(zhǔn)不確定度U（%）分別為3.11%、6.69%、1047%、11.84%、4.43%和5.70%，7.04%、8.78%、10.36%、4.68%和7.02%均符合WS/T 403-2012 要求的目標(biāo)擴(kuò)展不確定度。結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)室11項(xiàng)生化檢測(cè)項(xiàng)目通過(guò)Top-Down法評(píng)定測(cè)量不確定度結(jié)果均為符合。

關(guān)鍵詞：測(cè)量不確定度;生化;評(píng)估

測(cè)量是通過(guò)實(shí)驗(yàn)獲得并合理賦予某物一個(gè)或多個(gè)量值的過(guò)程，臨床檢驗(yàn)中的測(cè)量就是對(duì)臨床標(biāo)本的特性進(jìn)行賦值，其賦值準(zhǔn)確與否將直接影響疾病診斷及治療。目前，賦值的準(zhǔn)確與否常用測(cè)量不確定度表示，測(cè)量不確定度是表征合理的賦予被測(cè)量值的分散性，與檢測(cè)的準(zhǔn)確度呈負(fù)相關(guān)。[1]測(cè)量不確定度的測(cè)量有兩種模型：“自下而上（bottom-up）”和“自上而下（up-bottom）”，“自下而上”是基于對(duì)測(cè)量不確定度來(lái)源進(jìn)行綜合分析，并分別評(píng)定各不確定度分量，然后進(jìn)行合成，而“自上而下”是使用統(tǒng)計(jì)原理直接估計(jì)總不確定度，本文采用“自上而下”模型，引入實(shí)驗(yàn)室日常質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)及室間質(zhì)評(píng)計(jì)算測(cè)量不確定度，并將其與目標(biāo)不確定度進(jìn)行比較，以確保本實(shí)驗(yàn)室賦值準(zhǔn)確可靠。

1 材料與方法

1.1 室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)

收集本室2018年3月至2018年8月之間的生化室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)，判斷該時(shí)間段內(nèi)各項(xiàng)質(zhì)控品批號(hào)一致，室內(nèi)質(zhì)控每日進(jìn)行 1 次，遵守westgard六個(gè)基本質(zhì)控規(guī)則。

1.2 室間質(zhì)評(píng)數(shù)據(jù)

采用實(shí)驗(yàn)室2017年至2018年參加衛(wèi)生部臨檢中心連續(xù)6次的室間質(zhì)評(píng)回報(bào)結(jié)果。

1.3 儀器與試劑

主要儀器為羅氏501全自動(dòng)生化測(cè)定儀，試劑均為羅氏配套試劑，包括：葡萄糖（Glu）方法為己糖激酶法;尿素（Urea）方法為脲酶紫外速率法;尿酸（UA）方法為尿酸酶比色法;肌酐（Cr）方法為酶法;總蛋白（TP）方法為雙縮脲終點(diǎn)法;白蛋白（ALB）方法為溴甲酚綠法;總膽固醇（TG）方法為膽固醇氧化酶法;甘油三酯（TC）方法為GPO-POD（紫外），總膽紅素（T-Bil），方法為礬酸鹽法，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）;天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）方法為速率法。

1.4 試驗(yàn)程序

（1）確保儀器處于良好的性能，儀器每年由廠家校準(zhǔn)，由實(shí)驗(yàn)員和廠家定期維護(hù)保養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)員儀器操作遵循羅氏公司的用戶手冊(cè);（2）按照實(shí)驗(yàn)室SOP進(jìn)行日常室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)操作。

1.5 測(cè)量不確定度計(jì)算

偏移（系統(tǒng)誤差）和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測(cè)量復(fù)現(xiàn)性（隨機(jī)誤差）是醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室分析（測(cè)量）過(guò)程測(cè)量不確定度的最重要的兩個(gè)分量。

（1）不精密度分量計(jì)算：由實(shí)驗(yàn)室連續(xù)6個(gè)月的室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)引入，因本實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控所使用的質(zhì)控品與常規(guī)樣本檢測(cè)流程一樣，表達(dá)類似基體，則根據(jù)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)計(jì)算出來(lái)的標(biāo)準(zhǔn)偏差就是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測(cè)量復(fù)現(xiàn)性，其計(jì)算公式為：

u（Rw）=s（Rw）=∑ni=1（xi-x-）2n-1

x-=∑ni=1xin

urel（Rw）=RSD（Rw）=s（Rw）|x-|×100%

其中：xi：?jiǎn)蝹€(gè)測(cè)量值;

x-：平均值;

n：測(cè)量次數(shù);

u（Rw）：實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測(cè)量復(fù)現(xiàn)性引入的測(cè)量不確定度;

s（Rw）：實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測(cè)量復(fù)現(xiàn)性;

RSD（Rw）：相對(duì)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測(cè)量復(fù)現(xiàn)性;

urel（Rw）：實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測(cè)量復(fù)現(xiàn)性引入的相對(duì)測(cè)量不確定度。

（2）偏倚分量計(jì)算：由實(shí)驗(yàn)室6次參與衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心 EQA 回報(bào)結(jié)果計(jì)算。其包含偏倚本身和室間質(zhì)評(píng)靶值不確定度，其計(jì)算為：

①偏倚本身不確定度計(jì)算：

b=∑bi（%）26，bi（%）=xi-xtarget（i）xtarget（i）×100%

b：6次室間質(zhì)評(píng)總相對(duì)偏移;

bi（%）：每次室間質(zhì)評(píng)的相對(duì)偏移;

xi：實(shí)驗(yàn)室每次室間質(zhì)評(píng)的值;

xtarget（i）：每次室間質(zhì)評(píng)給定靶值。

②室間質(zhì)評(píng)靶值不確定度計(jì)算：

utarget=∑utarget/6，utarget（i）=cvi/Ni

utarget：連續(xù)6次室間質(zhì)評(píng)靶值不確定度;

utarget（i）：每次室間質(zhì)評(píng)不確定度;

cvi參加室間質(zhì)評(píng)的所有實(shí)驗(yàn)室的組內(nèi)的變異系數(shù);

Ni 代表參加室間質(zhì)評(píng)實(shí)驗(yàn)室個(gè)數(shù)。

③偏倚引入測(cè)量不確定度為：

ubias，rel（%）=b2+utarget2

（3）合成相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

uc=urel（Rw）2+ubias，rel（%）2

（4）計(jì)算相對(duì)擴(kuò)展標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

U（%）=uc（%）×2，取K=2，95%可信區(qū)間。

2 結(jié)果

（1）本實(shí)驗(yàn)室12項(xiàng)生化檢測(cè)項(xiàng)目的合成相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度、相對(duì)擴(kuò)展標(biāo)準(zhǔn)不確定度及與目標(biāo)不確定度結(jié)果（目標(biāo)不確定度來(lái)源于WS-T403-2012）比較如下表：

（2）由上表可知通過(guò)選擇室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)作為不精密度來(lái)源，室間質(zhì)評(píng)數(shù)據(jù)作為偏倚來(lái)源，用Top-Down 法評(píng)定本室11項(xiàng)生化項(xiàng)目的測(cè)量不確定度均符合WS-T403-2012要求。

3 討論

測(cè)量結(jié)果準(zhǔn)確與否是醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的根本之基，臨床生化更應(yīng)該保證患者結(jié)果的可追溯性和最高可參考性，[2]測(cè)量不確定度是客觀反映測(cè)量結(jié)果是否可靠的重要數(shù)據(jù)，GUM《測(cè)量不確定度表述指南》中建議采用“模式辦法”評(píng)估不確定度，[3]但該方法需了解測(cè)量過(guò)程中每個(gè)不確定度來(lái)源，而“自上而下”法，較GUM推薦的模式方法簡(jiǎn)單易行，更易在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室使用推廣，[4]加之計(jì)算方法簡(jiǎn)單，所利用的“室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)”數(shù)據(jù)能夠真實(shí)反映實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測(cè)量不確定度，[5]因此，本實(shí)驗(yàn)室采用“自上而下”模型，引入實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)及連續(xù)6次室間質(zhì)評(píng)計(jì)算測(cè)量不確定度，并將其與目標(biāo)不確定度進(jìn)行比較，結(jié)果均滿足要求，初步評(píng)定本實(shí)驗(yàn)室賦值準(zhǔn)確可靠。

參考文獻(xiàn)：

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