圍產(chǎn)期婦女感染GBS 體液免疫功能變化的研究

楊麗瑋 郭淑麗 賈海英 馬晶 王婧

無(wú)乳鏈球菌，又稱B群鏈球菌（B group streptococcus，GBS），曾被認(rèn)為是美國(guó)新生兒細(xì)菌感染的首位致病菌，常定殖在腸道和生殖道，是引起孕婦胎膜早破、產(chǎn)后感染的主要病原菌[1-3]。正常情況下, 各種淋巴細(xì)胞亞群、免疫球蛋白含量等保持一定的數(shù)量和比例，維持著機(jī)體正常的免疫功能。一旦外源病原微生物侵入，機(jī)體會(huì)出現(xiàn)各樣變化淋巴細(xì)胞或免疫球蛋白的消長(zhǎng), 以抵御病原微生物的感染。GBS可通過(guò)垂直傳播或上行感染，引起新生兒敗血癥和腦膜炎[4-5]。本文旨在了解本地區(qū)GBS感染的圍產(chǎn)期婦女機(jī)體體液免疫功能狀態(tài)，為孕婦GBS感染的臨床診治工作奠定基礎(chǔ)，具體如下。

1 資料與方法

1.1 病例資料

收集2017年1月—2018年9月新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院門診及住院的35～37周常規(guī)產(chǎn)檢者，進(jìn)行GBS帶菌狀況篩查，收集病例組GBS陽(yáng)性者孕婦135例，年齡25～46周歲，漢族51例，維吾爾族79例，回族3例，哈薩克族2例，平均年齡（33.2±4.5）周歲，對(duì)照為同孕期35～37周的健康體檢者為對(duì)照組，GBS陰性者100例，年齡20～43周歲，平均年齡（31.89±3.3）周歲，漢族41例，維吾爾族55例，回族2例，哈薩克族2例，且年齡（t=0.259，P=0.796）、民族（χ2=0.617，P=0.685）無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。所有受試者均經(jīng)B超證實(shí)為單胎宮內(nèi)妊娠，胎兒存活，自愿加入本研究且簽署知情同意書(shū)，排除標(biāo)準(zhǔn)：多胎妊娠者；免疫缺陷者；精神病患者；不愿意合作者，本研究項(xiàng)目已通過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2 細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定方法

將分泌物標(biāo)本接種于珠海迪爾生物工程有限公司的B群鏈球菌選擇性顯色培養(yǎng)基，并采用B群鏈球菌培養(yǎng)分析系統(tǒng)進(jìn)行自動(dòng)判別。陽(yáng)性者取肉湯轉(zhuǎn)種，挑取可疑菌落涂片行革蘭染色陽(yáng)性鏈球菌，觸酶試驗(yàn)陰性、最終通過(guò)梅里埃MS確認(rèn)GBS。試劑由法國(guó)梅里埃生物有限公司提供。所有標(biāo)本檢測(cè)均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)及相應(yīng)儀器標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行，并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制。

表1 GBS 陽(yáng)性孕婦組與健康對(duì)照組免疫球蛋白含量（）

表1 GBS 陽(yáng)性孕婦組與健康對(duì)照組免疫球蛋白含量（）

組別 IgG（g/L）IgA（g/L） IgM（g/L）C3（g/L）C4（g/L）CRP（mg/L）KAP（g/L）LAM（g/L） β2-MG（mg/L） KAP/LAM病例 6.62±4.87 3.46 ±0.58 3.06±0.43 1.22 ±0.65 0.3±0.07 12.35±4.43 6.85±1.43 3.65±1.08 2.51±0.78 1.92±0.55對(duì)照 13.52 ±5.73 3.38±0.72 0.95±0.35 1.15±0.52 0.38 ±0.06 3.81±0.74 6.79±1.85 3.76 ±1.12 0.98±0.33 1.89 ±0.57 t 值 9.99 0.12 11.5 0.76 0.95 15.4 0.49 0.74 13.2 1.50 P 值 0.00 0.91 0.00 0.45 0.34 0.00 0.62 0.46 0.00 0.14

1.3 免疫球蛋白和補(bǔ)體檢測(cè)方法

采用速率散色比濁法，利用BN proSpec特種蛋白分析儀進(jìn)行測(cè)定受試者血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）和補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、CRP、KAP、LAM、 β2-MG，試劑由Marburg GmbH公司提供，室內(nèi)質(zhì)控均在控。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件采集和處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料呈正態(tài)分布，以表示。病例組與對(duì)照組民族比較采用χ2檢驗(yàn)，病例組與對(duì)照組年齡比較及免疫球蛋白含量組間比較采用t 檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

135例GBS陽(yáng)性孕婦血清IgG（6.62±4.87）g/L明顯低于健康對(duì)照組（13.52±5.73）g/L，t=9.99，P=0.00，而IgM、 CRP、β2-MG分別為（3.06±0.43）g/ L、（12.35±4.43）mg/L、（2.51±0.78）g/L高于健康對(duì)照組（0.95±0.35）g/L、（3.81±0.74）mg/L、（0.98±0.33）g/L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=11.5，10.4，13.2，P=0.00，0.00，0.00）；而兩組間IgA、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、KAP、LAM、KAP/LAM無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），具體詳見(jiàn)表1。

3 討論

由于孕期機(jī)體免疫功能減低，孕婦中的GBS攜菌率較高。美國(guó)和北歐等國(guó)家孕婦攜菌率相似約5%～35%；而國(guó)內(nèi)孕婦GBS攜菌率約2.4%～10.1%。各年齡攜菌率無(wú)明顯差異，但種族和地區(qū)的差異比較大，GBS的檢出率受較多因素的影響，例如采集的樣本質(zhì)量、檢測(cè)時(shí)間、檢測(cè)方法等。妊娠婦女感染GBS的高危因素包括肥胖、多次妊娠、多個(gè)性伴侶等。

正常妊娠時(shí)，母體會(huì)產(chǎn)生維持妊娠的一種獨(dú)特型封閉抗體，利于胚胎著床、生長(zhǎng)、發(fā)育和成熟，免受致敏淋巴細(xì)胞的攻擊[6]。本研究發(fā)現(xiàn)妊娠合并GBS感染時(shí)母體IgG水平明顯降低，提示IgG類封閉抗體減少，母胎間的免疫耐受破壞，從而引起異常免疫反應(yīng)，出現(xiàn)胎膜早破、早產(chǎn)、流產(chǎn)等現(xiàn)象。GBS的主要致病因子包括莢膜多糖、溶血素等，可對(duì)孕產(chǎn)婦和新生兒造成嚴(yán)重后果[7]，但目前，關(guān)于妊娠合并GBS感染者血清免疫球蛋白變化的研究不多，有報(bào)道孕婦IgM水平低于非孕期婦女[8]，本研究發(fā)現(xiàn)妊娠合并GBS感染者IgG降低而IgM顯著性增高，可能與IgG減少導(dǎo)致IgM反應(yīng)性增多有關(guān)，或是由GBS通過(guò)其致病因子引發(fā)免疫反應(yīng)所致，另外，大分子IgM不能經(jīng)尿液排出也會(huì)致其增高。

補(bǔ)體是存在于人體和動(dòng)物血清、組織液，經(jīng)活化具有酶活性的蛋白質(zhì)，在細(xì)胞免疫和體液免疫介導(dǎo)的胎兒損傷中發(fā)揮重要作用[9]。CRP是一種急性時(shí)相蛋白，是獨(dú)立于年齡、體重指數(shù)、CD4淋巴細(xì)胞之外的預(yù)測(cè)因子，彭鳳梅[10]，張艷[11]通過(guò)多元回歸分析證實(shí)CRP水平與孕婦宮內(nèi)感染相關(guān)，CRP升高可預(yù)測(cè)如GBS等的宮內(nèi)感染，與本研究結(jié)論一致，孕婦出現(xiàn)GBS感染時(shí)，炎癥指標(biāo)CRP會(huì)升高。β2-MG是一種低分子量蛋白質(zhì)，正常人血中含量甚微，但若受病毒感染或腎臟早期損傷，血中β2-MG含量可升高[12]。唐永霞[13]報(bào)道β2-MG隨著孕周的增加而增高，但在32 周之后升高的比例不大。本研究顯示GBS感染的孕婦β2-MG水平會(huì)較正常孕婦升高，提示GBS感染后機(jī)體可能出現(xiàn)腎臟的早期損傷，由于GBS致病力較強(qiáng)，且孕婦GBS感染時(shí)機(jī)體出現(xiàn)體液免疫功能失衡。GBS的主要黏附作用是通過(guò)與宿主細(xì)胞的外基質(zhì)蛋白結(jié)合，從而啟動(dòng)細(xì)菌與宿主細(xì)胞表面整聯(lián)蛋白的相互作用，通過(guò)該途徑入侵細(xì)胞[14]。研究這些細(xì)胞間的相互作用及其相關(guān)蛋白，可為開(kāi)發(fā)新的治療藥物提供科學(xué)依據(jù)。

綜上所述，我們有必要關(guān)注GBS陽(yáng)性孕婦腎臟的情況，同時(shí)需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，并進(jìn)行分子生物學(xué)、毒力學(xué)等方面的深入研究。