呂輝,范明琴
(福建省立金山醫(yī)院檢驗(yàn)科,福建 福州 350028)
B群鏈球菌(GBS),又稱無乳鏈球菌,已被證實(shí)為圍產(chǎn)期母嬰感染的主要致病菌之一[1],在圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)中占有不可忽視的地位,也是嬰幼兒腦膜炎和敗血癥最常見的原因。孕婦感染GBS可能會(huì)導(dǎo)致早產(chǎn)、早期破水、產(chǎn)后子宮發(fā)炎、甚至流產(chǎn)、死產(chǎn)的發(fā)生。感染GBS的孕婦可能會(huì)在生產(chǎn)過程中導(dǎo)致胎兒帶菌,使新生兒出現(xiàn)侵入性感染,引起新生兒肺炎、腦膜炎、敗血癥等[2-3]。一般而言,如果母體產(chǎn)道存在GBS,新生兒將會(huì)有50.0%的概率攜帶GBS,其中有2%會(huì)出現(xiàn)新生兒感染[4]。因此,對(duì)圍產(chǎn)期孕婦進(jìn)行GBS篩查,實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)孕產(chǎn)婦GBS的感染和耐藥狀況,并在分娩前給予有效的抗生素干預(yù),是預(yù)防侵入性新生兒GBS感染的關(guān)鍵所在,對(duì)保證母嬰健康具有重要的臨床意義。本文就本院2017年3月至2018年12月圍產(chǎn)期孕婦送檢的陰道分泌物標(biāo)本及新生兒(母親感染GBS)送檢的痰液標(biāo)本進(jìn)行GBS鑒定及藥敏試驗(yàn),從而了解圍產(chǎn)期孕婦及新生兒 (母親感染GBS)GBS感染的帶菌情況及藥敏情況,為臨床開展GBS感染的防治工作提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。
1.1 標(biāo)本來源 收集本院2017年3月至2018年12月圍產(chǎn)期孕婦送檢的陰道分泌物標(biāo)本及新生兒(母親感染GBS)送檢的痰液標(biāo)本(臨床采用吸痰器獲取新生兒痰液標(biāo)本)進(jìn)行GBS細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn),同一患者相同標(biāo)本多次分離出同一菌種以1株計(jì)算,圍產(chǎn)期孕婦共分離培養(yǎng)出B群鏈球菌414株,新生兒6株。
1.2 儀器和試劑 意大利COPAN的運(yùn)送培養(yǎng)基及采樣拭子、貝瑞特公司的哥倫比亞血平板、鄭州安圖公司的GBS顯色平板,法國梅里埃公司的GP鑒定卡、A67藥敏卡、VITEK2-微生物鑒定儀,ATCC25923金黃色葡萄球菌,觸酶試劑、OXOID藥敏紙片。
1.3 方法
1.3.1 標(biāo)本采集 使用運(yùn)送培養(yǎng)基及采樣拭子采集圍產(chǎn)期孕婦的陰道下1/3處的黏膜分泌物,取材后立即送檢;母親感染GBS的新生兒使用吸痰器獲取痰液標(biāo)本。
1.3.2 GBS培養(yǎng) 將陰道分泌物接種到血平板、GBS顯色平板;新生兒(母親感染GBS)送檢的痰液標(biāo)本接種到血平板、巧克力平板,在CO2培養(yǎng)箱中孵育24h。GBS菌落在血平板上呈現(xiàn)β溶血,在GBS顯色平板呈現(xiàn)紅色到紫紅色,革蘭染色陽性球菌。
1.3.3 GBS鑒定及藥敏 挑取可疑菌落進(jìn)行CAMP試驗(yàn)及觸酶試驗(yàn)確認(rèn) (B群鏈球菌CAMP試驗(yàn)陽性,觸酶試驗(yàn)陰性),若無法明確的菌株通過法國梅里埃公司提供的GP鑒定卡進(jìn)行鑒定。對(duì)于GBS菌株使用A67藥敏卡或藥敏紙片進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。1.4結(jié)果分析 世界衛(wèi)生組織提供的WHONET 5.6軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
2.1 圍產(chǎn)期孕婦GBS篩查標(biāo)本送檢量及陽性率2017年3月至2018年12月共送檢6958例陰道分泌物標(biāo)本,共檢出B群鏈球菌414株,陽性率5.95%,見表 1。
表1 各月陰道分泌物標(biāo)本的送檢量及GBS的檢出情況
2.2.1 圍產(chǎn)期孕婦GBS的藥敏結(jié)果 未檢出對(duì)青霉素G、氨芐西林、利奈唑胺、替加環(huán)素及萬古霉素耐藥的菌株,見表2。
2.2.2 新生兒GBS藥敏結(jié)果 2017年3月至2018年12月新生兒(母親感染GBS)送檢的痰液標(biāo)本共檢出6株GBS,這6株菌株對(duì)青霉素G、氨芐西林、替加環(huán)素、利奈唑胺、萬古霉素均敏感。
B群鏈球菌(GBS)又稱無乳鏈球菌,已被證實(shí)為圍產(chǎn)期母嬰感染的主要致病菌之一。GBS的感染率因種族、區(qū)域和年齡等因素的影響,在不同國家的報(bào)道差異很大[5]。國外研究顯示健康人群GBS帶菌率可15%~35%,圍產(chǎn)期孕婦的帶菌率為10%~30%[6]。國內(nèi)報(bào)道的妊娠婦女GBS帶菌率為3.5%~32.4%[7,8]。在本組數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)中圍產(chǎn)期孕婦GBS篩查檢出率為5.95%,遠(yuǎn)低于國外文獻(xiàn)報(bào)道的檢出率。分析其原因可能有:1.取材部位的原因:本組數(shù)據(jù)只采集陰道分泌物單種標(biāo)本,可能造成GBS的漏檢,因此建議臨床需同時(shí)采集陰道分泌物和直腸拭子雙標(biāo)本送檢,可以提高GBS的檢出率。2.檢測(cè)方法的區(qū)別:國內(nèi)GBS篩查目前最常用的檢測(cè)方法為培養(yǎng)法,其費(fèi)用便宜但方法學(xué)的敏感性及特異性與國外采用的分子生物學(xué)檢測(cè)有較大差異,檢測(cè)方法滯后可能是造成GBS感染漏診的原因[9,10]。3.其他既往病史的影響:孕婦可能有流產(chǎn)史或婦科炎癥史等[11,12]。
表2 2017年3月至2018年12月圍產(chǎn)期孕婦檢出的GBS藥敏情況
本組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)中GBS對(duì)青霉素、氨芐西林、利奈唑胺、替加環(huán)素、萬古霉素的敏感率為100%,而對(duì)環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、紅霉素、克林霉素的敏感率分別為68.0%、69.4%、33.3%、60.7%,與國內(nèi)其他相關(guān)文獻(xiàn)研究結(jié)果相似[13,14]。據(jù)國內(nèi)外多數(shù)研究報(bào)道青霉素和氨芐西林為治療GBS感染的首選用藥,但隨著抗生素的廣泛使用,也有對(duì)青霉素和氨芐西林耐藥的菌株出現(xiàn)。本組實(shí)驗(yàn)中暫未出現(xiàn)對(duì)青霉素和氨芐西林耐藥的菌株;紅霉素和克林霉素的耐藥率高于國外文獻(xiàn)報(bào)道的16.7%和11%的耐藥率[15],因此在治療GBS感染時(shí)應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果有針對(duì)性的選擇抗菌藥物,減少耐藥株的產(chǎn)生。
GBS感染于孕婦的生殖道時(shí)可通過上行擴(kuò)散感染至胎膜,進(jìn)而由炎性細(xì)胞產(chǎn)生吞噬作用,也可因膠質(zhì)酶、蛋白酶以及彈性蛋白酶發(fā)生侵襲作用,對(duì)胎膜的膠質(zhì)以及基質(zhì)產(chǎn)生一定的降解作用,導(dǎo)致胎膜早破[16]。胎膜早破對(duì)產(chǎn)婦的生命威脅極大,可能出現(xiàn)早產(chǎn)、難產(chǎn)、羊水栓塞、產(chǎn)后大出血等。胎兒可能在分娩過程中感染GBS,感染GBS的胎兒可能有新生兒肺炎、腦膜炎、敗血癥等病癥的出現(xiàn),因此對(duì)圍產(chǎn)期GBS篩查陽性的孕婦要及時(shí)治療。
綜上所述,要加強(qiáng)對(duì)圍產(chǎn)期孕婦GBS的篩查,同時(shí)采集陰道分泌物和直腸拭子雙標(biāo)本送檢,提高檢出率。對(duì)篩查陽性的孕婦要及早干預(yù)和及時(shí)治療,從而降低GBS感染對(duì)孕婦和新生兒的影響。