標(biāo)本溶血對(duì)葡萄糖氧化酶-過(guò)氧化物酶法測(cè)定血糖的影響

陳啟華 曹冰 趙洋

作者單位：100843 北京，中國(guó)人民解放軍空軍司令部門診部檢驗(yàn)科

臨床實(shí)際工作中經(jīng)常遇到靜脈血標(biāo)本送檢時(shí)已溶血或因操作過(guò)程中標(biāo)本處置不當(dāng)導(dǎo)致溶血的現(xiàn)象，一般情況下會(huì)建議臨床重新采血，但對(duì)于不配合的兒童或某些特殊患者，重新抽血的難度較大，因此實(shí)際工作中有時(shí)也會(huì)使用不合格的溶血標(biāo)本進(jìn)行某些生化項(xiàng)目的檢測(cè)。血糖（blood glucose，Glu）測(cè)定作為血液生化檢查的常見檢測(cè)項(xiàng)目，是許多疾病臨床必查項(xiàng)目之一［1］，而標(biāo)本溶血?jiǎng)t會(huì)對(duì)Glu 檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生一定影響。本研究探討采用葡萄糖氧化酶-過(guò)氧化物酶法（glucose oxidase peroxide enzyme，GOD-POD 法）測(cè)定Glu 時(shí)標(biāo)本溶血對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響及干擾機(jī)制，更好地指導(dǎo)臨床工作，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 采集本院門診部同一天就診的30 例成年患者的空腹靜脈血，排除乳糜、黃疸等血清標(biāo)本。

1.2 儀器與試劑 Glu 測(cè)定使用北京首醫(yī)臨床醫(yī)學(xué)科技有限公司提供的Glu 檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：20190702），有效期至2021 年1 月1 日，方法采用衛(wèi)生部臨檢中心推薦的GOD-POD 法，使用東芝TBA-40FR 全自動(dòng)生化分析儀；血紅蛋白（hemoglobin，Hb）測(cè)定使用希森美康XS-800i 全血細(xì)胞分析儀，試劑均為儀器原裝配套產(chǎn)品；一次性真空分離膠采血管由湖南瀏陽(yáng)市三力醫(yī)用科技發(fā)展有限公司提供，有效期至2020 年11 月30 日。

1.3 檢測(cè)方法 于7：30—8：30 使用一次性真空分離膠采血管采集門診患者空腹靜脈血，每個(gè)患者采集2 管，每管各3 mL，分別編號(hào)A 管、B 管。使A 管血液自然凝固作為非溶血組標(biāo)本；用力震蕩B 管血液，人為造成標(biāo)本溶血，使用全血細(xì)胞分析儀檢測(cè)Hb，確定其血清中Hb 測(cè)定濃度為1～4 g/L作為溶血組標(biāo)本。將全部樣本分離血清，采用GOD-POD 法檢測(cè)60 份標(biāo)本的Glu 值，每份樣本重復(fù)檢測(cè)5 次，取平均值進(jìn)行對(duì)比。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

溶血組Glu 測(cè)定值明顯低于非溶血組（P＜0.05），說(shuō)明標(biāo)本溶血后血清Glu 測(cè)定值明顯降低。見表1。

表1 兩組血液標(biāo)本的Glu 測(cè)定值比較（）

表1 兩組血液標(biāo)本的Glu 測(cè)定值比較（）

3 討論

GOD-POD 法作為衛(wèi)生部臨檢中心Glu 測(cè)定的推薦方法［2］，其可靠性已得到臨床廣泛認(rèn)可，準(zhǔn)確度和精密度也能滿足臨床要求，但由于該方法POD 的特異性不夠高，干擾過(guò)氧化反應(yīng)的物質(zhì)可使Glu 測(cè)定值出現(xiàn)較大偏差。

本研究顯示，溶血標(biāo)本Glu 測(cè)定值較非溶血標(biāo)本明顯降低，與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致［3-5］，說(shuō)明標(biāo)本溶血后紅細(xì)胞釋放的物質(zhì)可干擾Glu 測(cè)定，使Glu 測(cè)定值的準(zhǔn)確性和可靠性出現(xiàn)較大偏差，不利于臨床醫(yī)師對(duì)疾病的診斷和治療。

有研究表明，標(biāo)本溶血致Glu 測(cè)定值偏低有許多方面原因，包括：①紅細(xì)胞內(nèi)外葡萄糖濃度差異引起。由于紅細(xì)胞的自由水含量少于血液中自由水含量，故紅細(xì)胞中所溶解的葡萄糖少于血清，紅細(xì)胞內(nèi)的葡萄糖濃度低于血清葡萄糖濃度，紅細(xì)胞破壞時(shí)血清葡萄糖濃度被稀釋，使得Glu 測(cè)定值偏低。② 紅細(xì)胞破裂后釋放的Hb 可抑制呈色反應(yīng)（通過(guò)與H2O2競(jìng)爭(zhēng)色素原受體），干擾正常Glu 測(cè)定，產(chǎn)生較大誤差，尤其是終點(diǎn)法影響更大［6-7］。楊建平等［8］認(rèn)為，正常紅細(xì)胞的葡萄糖代謝路徑中含有還原型輔酶Ⅰ（NADH）和還原型輔酶Ⅱ（NADPH），紅細(xì)胞破裂后上述兩種還原性物質(zhì)釋放入血清，干擾Glu 測(cè)定，使得Glu 測(cè)定值偏低。根據(jù)GODPOD 法Glu 測(cè)定原理，我們認(rèn)為標(biāo)本溶血后血清被稀釋以及紅細(xì)胞破裂后釋放的還原性輔酶中和了反應(yīng)過(guò)程中部分中間產(chǎn)物H2O2，使得反應(yīng)的最終產(chǎn)物醌式染料的濃度降低，兩方面影響因素綜合導(dǎo)致Glu 測(cè)定值偏低。

綜上所述，采用GOD-POD 法進(jìn)行Glu 測(cè)定時(shí)，標(biāo)本溶血會(huì)使檢測(cè)結(jié)果明顯偏低。臨床工作者在日常工作中應(yīng)規(guī)范管理標(biāo)本的采集、運(yùn)送、分離和檢測(cè)過(guò)程，發(fā)現(xiàn)標(biāo)本溶血后應(yīng)主動(dòng)聯(lián)系臨床重新采血，若條件不允許，應(yīng)在報(bào)告上注明標(biāo)本存在的瑕疵，以便臨床醫(yī)師恰當(dāng)評(píng)估報(bào)告價(jià)值。