肺腺癌患者EGFR基因突變與血清VEGF和腫瘤標(biāo)志物的關(guān)系研究

胡雨薇

肺癌的死亡率居眾多腫瘤死亡率之首，而肺癌患者中有近80%的患者所患肺癌種類為非小細(xì)胞肺癌，而作為非小細(xì)胞肺癌重要類型之一的肺腺癌的發(fā)病率逐年上升，成為非小細(xì)胞肺癌中的主要類型[1，2]。近年由于診斷技術(shù)以及治療方式逐漸改進(jìn)，肺腺癌患者的預(yù)后有一定改善，但尚未達(dá)到預(yù)期效果，探究新型有效的治療方式是腫瘤研究者們一直努力的方向[3]。靶向治療可以特異性作用于腫瘤病灶，改善治療效果，靶向治療中使用酪氨酸激酶抑制劑可以對表皮生長因子受體（EGFR）基因突變癌細(xì)胞予以特異性抑制，改善患者預(yù)后[4]。肺腺癌患者血清中癌胚抗原（CEA）、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）、細(xì)胞角蛋白19（CYFRA21-1）等的表達(dá)水平可用于評價(jià)肺腺癌的療效[5]，但研究者們對這些血清腫瘤指標(biāo)與EGFR 基因突變的關(guān)系意見不一。本研究深入探究肺腺癌患者血清CEA、VEGF、CYFRA21-1 的表達(dá)水平及與EGFR 基因突變之間的關(guān)系，為后期此類患者靶向治療方案的制訂提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2017年9月～2018年9月在我院接受治療的132 例肺腺癌患者的相關(guān)資料。其中男71 例，女61 例，年齡30～86 歲，平均（60.26±5.16）歲；腫瘤分期：Ⅰa～Ⅲa 和Ⅲb～Ⅳ分別為53 例和79 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①病理檢測證實(shí)為肺腺癌患者；②首次治療前均接受血清標(biāo)志物檢查，且接受EGFR 基因突變檢查；③患者資料均無遺失。排除標(biāo)準(zhǔn)：①鱗癌患者；②未被確診者；③僅接受血清腫瘤標(biāo)志物與EGFR 基因突變中一項(xiàng)檢查者。

1.2 方法

1.2.1 血清腫瘤標(biāo)志物測定 治療前抽取靜脈血后離心得到血清，使用酶聯(lián)免疫吸附法測定CEA、VEGF、CYFRA21-1 水平，其指標(biāo)處于下列范圍顯示為陰性，CEA：0～5.0μg/L，VEGF：0～50μg/L，CYFRA21-1：0～3.3ng/ml，超出上述范圍顯示為陽性。

1.2.2 EGFR 基因突變測定 使用ARMS 法對EGFR基因突變類型中各個(gè)外顯子突變進(jìn)行檢測，所有檢測均使用試劑盒進(jìn)行，測試過程依據(jù)試劑盒說明書操作，質(zhì)量控制采用陰性、陽性以及空白對照，其中Ct＜26 為 陽 性，而Ct≥29 與26≤Ct＜29 分 別 為EGFR 突變陰性以及可疑陽性。

1.3 觀察指標(biāo) 分析患者EGFR 基因突變情況、EGFR 基因突變與患者一般資料與血清腫瘤標(biāo)志物之間的關(guān)系，EGFR 基因突變幾率與患者血清CEA、VEGF、CYFRA21-1 水平的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析與處理，各組計(jì)數(shù)資料均使用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料如血清腫瘤標(biāo)志物水平均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，使用t檢驗(yàn)進(jìn)行差異比較，相關(guān)性分析使用Pearson 相關(guān)性分析法，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 EGFR 基因突變情況 所有患者進(jìn)行基因突變測定發(fā)現(xiàn)，EGFR 基因突變陰性與陽性分別81 例（61.36%）和51 例（38.64%），EGFR 基因突變陽性中21 號外顯子錯(cuò)義突變以及19 號外顯子缺失突變分別30 例（22.73%）和17 例（12.88%），并含兩種突變4 例（3.03%）。

2.2 EGFR 基因突變與一般資料之間的關(guān)系 EGFR基因突變陽性中男性顯著多于女性（P＜0.05），EGFR基因突變較常發(fā)生于無吸煙史患者中，而患者年齡與腫瘤分期與EGFR 基因突變之間關(guān)系不大（P＞0.05），見表1。

表1 EGFR 基因突變與患者一般資料之間的關(guān)系[n（%）]

2.3 EGFR 基因突變與血清腫瘤標(biāo)志物之間的關(guān)系EGFR 基因突變陽性患者血清CEA、VEGF 水平顯著高于EGFR 基因突變陰性患者（P＜0.05），而血清CYFRA21-1 在EGFR 基因突變陰性與陽性患者中差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表2。

表2 EGFR 基因突變與患者血清腫瘤標(biāo)志物的關(guān)系（±s）

表2 EGFR 基因突變與患者血清腫瘤標(biāo)志物的關(guān)系（±s）

類型 例數(shù) CEA（μg/L） VEGF（μg/L） CYFRA21-1（ng/ml）陰性 81 35.52±10.18 89.35±10.76 6.81±1.09陽性 51 168.33±32.67 117.33±25.34 7.13±1.35 t 34.12 8.77 1.50 P＜0.05 ＜0.05 ＞0.05

2.4 EGFR 基因突變幾率與血清CEA、VEGF、CYF RA21-1 水平的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析顯示患者血清CEA、VEGF 水平與EGFR 基因突變幾率呈正相關(guān)（P＜0.05），而CYFRA21-1 水平與患者EGFR 基因突變幾率無相關(guān)性（P＞0.05），見表3。

表3 EGFR 基因突變幾率與患者血清CEA、VEGF、CYFRA21-1 水平的相關(guān)性分析

3 討論

多項(xiàng)腫瘤治療指南中提出非小細(xì)胞肺癌患者在進(jìn)行EGFR 受體酪氨酸酶抑制劑靶向治療前需要接受EGFR 基因突變測試以篩選出陽性患者，確保靶向治療效果[6，7]。研究顯示EGFR 基因突變情況與豐度是進(jìn)行EGFR 受體酪氨酸酶抑制劑靶向治療預(yù)測有價(jià)值的指標(biāo)[8]。臨床常通過患者一般資料來篩選EGFR 基因突變陽性的患者，蒲桂梅等[9]研究顯示非吸煙肺腺癌患者出現(xiàn)EGFR 基因突變概率較大，與本研究中相關(guān)結(jié)果一致，但是其研究認(rèn)為女性肺腺癌患者可能是EGFR 基因突變高發(fā)人群，這點(diǎn)與本研究結(jié)果不一致，兩項(xiàng)研究差異可能是由于蒲桂梅研究中納入研究對象中男性比例偏高，這在一定程度上會影響其研究結(jié)果。本研究中EGFR 基因突變陽性患者51 例，陽性率為38.64%，與另一項(xiàng)類似研究中結(jié)果一致[10]。EGFR基因突變多為21 號與19 號外顯子發(fā)生基因突變，20 號與18 號發(fā)生突變情況較為少見，所以本研究中只測定了21 號與19 號基因突變，其中21 號外顯子錯(cuò)義突變以及19 號外顯子缺失突變發(fā)生率分別為22.73%和12.88%，并含兩種突變的發(fā)生率為3.03%。

血清腫瘤標(biāo)志物由腫瘤細(xì)胞釋放，CEA 與CYFRA21-1 均為重要的腫瘤標(biāo)志物，可由此判斷患者的預(yù)后。已有研究證實(shí)CEA 濃度與肺癌患者EGFR 基因突變存在一定的關(guān)系[11]。李磊等[12]認(rèn)為EGFR 基因突變導(dǎo)致患者下游信號通路被激活，從而誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化加快，致使CEA 蛋白合成增多。本研究中EGFR 基因突變陽性患者血清CEA 水平顯著高于EGFR 基因突變陰性患者，而患者CEA 水平越高EGFR 基因突變概率越大。本研究中血清CYFRA21-1 在EGFR 基因突變陰性與陽性患者中差異不顯著，這可能是由于CYFRA21-1多見于肺鱗癌，是診斷肺鱗癌特異性指標(biāo)，而EGFR基因突變常見于肺腺癌[13，14]。由于VEGF 不是腫瘤標(biāo)志物，其在腫瘤發(fā)生中的作用常被人們忽略，但是腫瘤整個(gè)發(fā)展階段均需要血液提供氧氣與營養(yǎng)物質(zhì)，而VEGF 在整個(gè)血管發(fā)生過程中作用重大。有研究顯示VEGF 可將EGFR 所致刺激送入細(xì)胞中，致使細(xì)胞大量增殖，從而發(fā)生腫瘤。韓影等[15]研究顯示VEGF 與EGFR 在低分化非小細(xì)胞肺癌患者體內(nèi)高表達(dá)，而在中高分化患者體內(nèi)表達(dá)則較少，提示兩者在肺癌患者體內(nèi)呈正相關(guān)，兩者共同作用誘導(dǎo)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。本研究中EGFR基因突變陽性患者血清VEGF 水平顯著高于EGFR基因突變陰性患者，且VEGF 水平越高患者EGFR基因突變概率越大，同樣提示VEGF 水平與患者EGFR 基因變化關(guān)系密切。這可能因EGFR 在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)期間介導(dǎo)腫瘤血管生成，其突變可以使患者體內(nèi)VEGF 水平上調(diào)，致使細(xì)胞凋亡，EGFR 激活致使癌癥細(xì)胞過增殖，細(xì)胞大量增殖對血氧大量需求導(dǎo)致血管增生[16]。

綜上所述，肺腺癌患者血清CEA 與VEGF 水平與患者EGFR 基因突變關(guān)系密切，其可以結(jié)合患者臨床資料篩選出EGFR 受體酪氨酸酶抑制劑靶向治療優(yōu)勢人群，臨床應(yīng)用價(jià)值較高。