葉洲辰 吳友根 于靖 張軍鋒 楊東梅 胡新文
(海南大學(xué)熱帶農(nóng)林學(xué)院,海口 570100)
油茶(Camellia oleiferaAbel.)隸屬山茶科(Theaceae),是富含油脂且具有栽培價(jià)值的一類(lèi)山茶屬植物[1],為我國(guó)食用四大木本油料作物之首,與油橄欖、油棕、椰子齊名,具有較高的經(jīng)濟(jì)生態(tài)效益[2],素有“綠色金庫(kù)”和“鐵桿莊稼”之稱(chēng)[3]。中國(guó)是油茶的原產(chǎn)地也是主產(chǎn)地,栽培歷史悠久,主要種植于南方地區(qū),尤以江西、湖南和廣西等省居多,面積約400萬(wàn)hm2,僅少量分布在日本、越南和馬來(lái)西亞等國(guó)家[4]。油茶藥用歷史可追溯到公元前三世紀(jì),民間常采摘其果實(shí)榨油以供食用滋補(bǔ),油茶籽油(茶油)營(yíng)養(yǎng)豐富,其不飽和脂肪酸含量高達(dá)90%,且含有角鯊烯、植物甾醇、維生素、類(lèi)黃酮及茶多酚等多種次生代謝活性產(chǎn)物,易被人體消化和吸收,醫(yī)食兼?zhèn)洹,F(xiàn)代科學(xué)研究表明,長(zhǎng)期食用茶油可以預(yù)防心腦血管疾病、延緩動(dòng)脈粥樣硬化、促進(jìn)腸胃吸收、提高免疫力以及調(diào)理人體內(nèi)分泌系統(tǒng),同時(shí)對(duì)高血壓、肥胖癥等有明顯療效,被譽(yù)為“東方橄欖油”和“油中軟黃金”,現(xiàn)收載于《中國(guó)醫(yī)藥寶典》[5]。
迄今為止,油茶的主要研究多集中于花粉萌發(fā)、良種選育、苗木嫁接、組織培養(yǎng)和遺傳多樣性等方面,而其藥理成分和生物活性等相關(guān)研究還比較薄弱,尤其是海南油茶,目前關(guān)于該栽培種的研究報(bào)道較少,致使其產(chǎn)業(yè)發(fā)展一直處于相對(duì)落后的階段。經(jīng)調(diào)查統(tǒng)計(jì),海南島油茶種植面積約6萬(wàn)畝,該省為油茶資源分布的最南端,地處亞熱帶區(qū)域,瓊州海峽使之與大陸隔離,氣候條件較為特殊,在環(huán)境因素和遺傳特性的雙重控制下,海南油茶表型變異豐富[6],故而其茶油品質(zhì)可能也會(huì)不同于其他地區(qū)。因此,本研究以海南油茶與大陸優(yōu)良品系油茶為樣本,經(jīng)壓榨工藝得到茶油,采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)、高效液相色譜(HPLC)技術(shù)對(duì)其脂肪酸和活性成分的組成及相對(duì)含量進(jìn)行檢測(cè)分析,然后通過(guò)DPPH自由基(DPPH·)清除法、ABTS自由基(ABTS·)清除法、羥基自由基(OH·)清除法和FRAP還原法研究茶油提取物的抗氧化能力,并比較不同種油茶間品質(zhì)差異性,旨在對(duì)日后油茶種質(zhì)資源收集保存、優(yōu)良品系篩選以及生產(chǎn)工藝優(yōu)化等奠定基礎(chǔ),并為茶油藥用價(jià)值評(píng)價(jià)提供科學(xué)理論參考依據(jù),同時(shí)深入了解海南油茶的品質(zhì)特征、穩(wěn)定性及可控性,可為促進(jìn)海南油茶產(chǎn)業(yè)的發(fā)展作出貢獻(xiàn)[7]。
1.1.1 植物樣品 供試油茶待蒴果微裂時(shí)分別采摘自海南、江西和湖南3省,參照當(dāng)?shù)卣ビ头绞浇y(tǒng)一進(jìn)行處理。同時(shí)采用熱蒸-壓榨工藝(大陸地區(qū))和炒制-壓榨工藝(海南地區(qū))進(jìn)行處理得到不同的茶油用于比較分析,樣品來(lái)源及加工工藝見(jiàn)表1。
表1 油茶樣品來(lái)源及加工工藝
1.1.2 試劑 1,1-二苯基-2-2苦基肼(DPPH,美國(guó) Sigma公司);2,2-聯(lián)氮 -二(3-乙基 -苯并噻唑-1-6-磺酸)二銨鹽(ABTS,日本東京化成工業(yè)株式會(huì)社);多酚類(lèi)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品(純度>99%)均購(gòu)自成都瑞芬思生物科技有限公司;2,4,6-三吡啶基三嗪購(gòu)自上海麥克林試劑有限公司;甲醇、乙睛均為色譜純,購(gòu)自廣州化學(xué)試劑廠;其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。
1.1.3 儀器 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(Agilent 7890B-7000B,美國(guó)Agilent公司);高效液相色譜儀(Waters e2695,美國(guó)Waters公司);電子分析天平(AS.R,波蘭Radwag公司);數(shù)顯恒溫水浴鍋(HH-4A,常州金壇精達(dá)儀器制造有限公司);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(Precision MLG6,德國(guó)Heidolph公司);紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(UV-2100,上海尤尼柯儀器有限公司);超聲波清洗器(KQ5200E,昆山超聲儀器有限公司);渦旋振蕩器(SI-T25,美國(guó)Scientific Industries公司);烘箱(DHG-9123A,上海一恒儀器有限公司);高速冷凍離心機(jī)(TGL.16S,四川蜀科儀器有限公司)等。
1.2.1 茶油脂肪酸及其他化學(xué)成分GC-MS檢測(cè) (1)茶油樣品的制備:樣品脂肪酸甲酯化處理參考GB/T 17376-2008。樣品其他化學(xué)成分檢測(cè)預(yù)處理:精確稱(chēng)取不同種油樣各10 mg,加入適量的無(wú)水Na2SO4進(jìn)行干燥,12 000 r/min室溫離心5 min,吸取上清液至10 mL容量瓶中,并用正己烷溶液定容至刻度,搖勻。取1 mL樣品制備液于進(jìn)樣瓶中,經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾,待GC-MS檢測(cè)。(2)氣相色譜條件:Agilent 7890B-7000B氣相色譜質(zhì)譜儀,配備HP-5MS彈性石英毛細(xì)管柱(0.25 mm×30 mm,0.25 μm),檢測(cè)室溫度保持250℃,柱溫以6℃/min從60℃升至270℃,載氣為高純氦氣(99.995%),柱前壓7.62 psi,流量 1.00 mL/min,進(jìn)樣量 1.00 μL,不分流。(3)質(zhì)譜條件:離子源(EI)溫度230℃,四極桿溫度150℃,發(fā)射電流34.60 μA,電離電壓70 eV,倍增器電壓 2000 V,質(zhì)量范圍 50-450 amu[8]。(4)化合物鑒定及數(shù)據(jù)處理:在HPMSD化學(xué)工作站,通過(guò)NIST2005標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫(kù)和WILEY275質(zhì)譜圖庫(kù)對(duì)化合物進(jìn)行鑒定,并采用色譜峰面積歸一化法計(jì)算其相對(duì)含量[9]。
1.2.2 茶油提取物中酚類(lèi)化合物的HPLC檢測(cè) (1)茶油樣品預(yù)處理:準(zhǔn)確稱(chēng)取茶油3.00 g,并加入9.00mL 50%甲醇溶液,超聲震蕩30 min,然后在4000 r/min條件下離心15 min,吸取上清液,此步驟重復(fù)3次,合并上清液,45℃減壓濃縮;再用等體積正己烷萃取3次,合并下層提取液,45℃減壓濃縮;最后用50%甲醇提取液溶解殘液,室溫保存?zhèn)溆谩#?)標(biāo)準(zhǔn)溶液制備:精密稱(chēng)取多酚標(biāo)準(zhǔn)品(沒(méi)食子酸、兒茶素、表兒茶素、3,4-二羥基苯乙酸、槲皮素及山茶甙),以甲醇為溶劑配制標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,封口,冷藏避光保存,檢測(cè)前用流動(dòng)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行稀釋?zhuān)^(guò)濾待上機(jī)[10]。(3)色譜條件:Waters e2695高效液相色譜儀,配備Thermo C18分析型色譜柱(250 mm×4.60 mm,5.00 μm);柱溫 30℃,流速 1.00 mL/min,進(jìn)樣量10 μL,檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm。流動(dòng)相A為甲醇,流動(dòng)相B為0.5%乙酸溶液,線性梯度洗脫程序?yàn)椋?-10 min,90% A;10-18 min,80%A;18-28 min,70% A;28-36 min,65% A;36-42 min,35% A;42-49 min,0% A 和 49-56 min,90% A。
1.2.3 茶油提取物對(duì)DPPH·清除能力的測(cè)定 參照Z(yǔ)antar等[11]所描述的方法,取不同質(zhì)量濃度的待測(cè)樣品液1.00 mL于7支盛有3.00 mL DPPH溶液的離心管中,使總體積為4.00 mL,渦旋振蕩充分混勻后,室溫下避光反應(yīng)30 min,通過(guò)紫外分光光度計(jì)用1.00 cm石英比色皿檢測(cè)吸光值(517 nm),以提取劑代替樣品作為空白對(duì)照,每個(gè)濃度樣品重復(fù)測(cè)定3次,取平均值,清除率計(jì)算公式如下:
式中,A0表示空白對(duì)照的吸光值,A表示樣品液的吸光值。
1.2.4 茶油提取物對(duì)ABTS·清除能力的測(cè)定 略微改進(jìn)Cai等[12]的實(shí)驗(yàn)方法,將2.45 mmol/L過(guò)硫酸鉀溶液與7.00 mmol/L ABTS儲(chǔ)備液等量混勻,在室溫避光條件下靜置12-16 h,即ABTS工作液。使用時(shí)稀釋該混合溶液,使之OD734達(dá)到0.70 ± 0.02,為ABTS測(cè)定液。將其與樣品待測(cè)液按3∶1的比例充分混勻,室溫下避光放置30 min后,在734 nm波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè),以提取劑代替樣品作為空白對(duì)照,平行測(cè)定3次,按清除率公式進(jìn)行計(jì)算。
1.2.5 茶油提取物對(duì)OH·清除能力的測(cè)定 采用水楊酸法[13]來(lái)測(cè)定茶油提取物的OH·清除率,取不同體積待測(cè)樣品液于離心管中,用去離子水補(bǔ)足至5.00 mL,再依次加入0.05 mL 0.02 mol/L FeSO4溶液、0.10 mL 0.01 mol/L水楊酸溶液和0.05 mL 0.02 mol/L雙氧水溶液,將混合溶液放置在37℃水浴鍋保溫30min后,立即在510 nm波長(zhǎng)處測(cè)得吸光值。空白對(duì)照為去離子水,每組樣品測(cè)定3次,按清除率公式進(jìn)行計(jì)算。
1.2.6 茶油提取物FRAP還原能力的測(cè)定 參考Moghaddam等[14]的研究方法,用去離子水將不同體積的待測(cè)樣品液補(bǔ)足至2.00 mL,再與3.00 mL FRAP工作液混合均勻,于37℃恒溫保持30 min,立即檢測(cè)吸光值(593 nm)。重復(fù)測(cè)定3次,結(jié)果取平均值,根據(jù)FRAP還原能力標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品FRAP值。
1.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 每組樣品平行測(cè)定3次,通過(guò)SPSS軟件進(jìn)行單因素方差分析和LSD顯著性檢驗(yàn),P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,數(shù)據(jù)以“平均值 ± 標(biāo)準(zhǔn)差”表示。
2.1.1 茶油脂肪酸含量 4種茶油脂肪酸成分及相對(duì)含量見(jiàn)表2,各茶油樣品間脂肪酸比例有所不同,但主要組成成分基本無(wú)差異,油酸均為含量最高的不飽和脂肪酸,其次為亞油酸,含量范圍分別在70.849%-81.353%和0%-8.080%,其中,海南(炒)茶油中油酸含量顯著高于江西(蒸)茶油;亞油酸在海南(蒸)茶油中含量最高,而該成分在海南(炒)茶油中卻未檢測(cè)出。棕櫚酸和硬脂酸在飽和脂肪酸中占主要地位,含量范圍分別為4.934%-12.683%和1.380%-4.307%,海南(蒸)茶油和海南(炒)茶油中棕櫚酸和硬脂酸含量均顯著高于江西(蒸)茶油。本實(shí)驗(yàn)所有供試材料中芥酸含量都較低,且海南(蒸)茶油中尚未檢測(cè)到該成分。
2.1.2 茶油其他化學(xué)成分含量 4種茶油化學(xué)成分組成及相對(duì)含量見(jiàn)表3,結(jié)果表明,角鯊烯(2.300%-15.237%),維生素 E(0.400%-2.900%),豆甾醇(0%-2.507%)和β-香樹(shù)脂醇(1.300%-5.432%)為茶油的主要活性成分,其中,海南(炒)茶油和海南(蒸)茶油中角鯊烯和β-香樹(shù)脂醇的含量顯著高于江西(蒸)茶油;維生素E在湖南(蒸)茶油中含量最高,約為江西(蒸)茶油的7倍;豆甾醇僅在海南(蒸)茶油和海南(炒)茶油中檢測(cè)出,可推測(cè)海南的氣候條件有利于這4種重要活性成分的生物合成。湖南(蒸)茶油中巖芹酸的含量較高,可達(dá)63.000%,而江西(蒸)茶油中卻未檢測(cè)出,且海南(蒸)茶油和海南(炒)茶油中該成分含量差異較為顯著。
表2 茶油中脂肪酸含量的GC-MS分析
酚類(lèi)物質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)品HPLC色譜圖見(jiàn)圖1,6種酚類(lèi)化合物線性方程及其相對(duì)含量見(jiàn)表4和5。結(jié)果可知,4種茶油提取物中沒(méi)食子酸含量均較少,且在海南(蒸)茶油中未檢測(cè)出該成分;海南(炒)茶油提取物中3,4-二羥基苯乙酸和兒茶素含量分別高達(dá)6.065 μg/g和7.352 μg/g,而這兩種成分含量在海南(蒸)茶油中卻相對(duì)較低;海南(炒)茶油提取物中的表兒茶素(8.661 μg/g)含量顯著高于海南(蒸)茶油和湖南(蒸)茶油;此外,海南(炒)茶油提取物中的山茶甙(5.987 μg/g)含量也是供試茶油中最高的;海南(炒)茶油提取物中槲皮素含量(59.025 μg/g)約為海南(蒸)茶油和江西(蒸)茶油的20倍,差異顯著。
表3 茶油中化學(xué)成分含量的GC-MS分析
圖1 (A)沒(méi)食子酸、(B)3,4-二羥基苯乙酸、(C)兒茶素、(D)表兒茶素、(E)山茶甙和(F)槲皮素標(biāo)準(zhǔn)品的HPLC色譜圖
2.3.1 茶油提取物對(duì)DPPH·的清除能力 由圖2可知,隨著樣品提取液濃度的減少,DPPH·清除能力也在逐步減弱,說(shuō)明二者存在劑量依賴(lài)關(guān)系。其中當(dāng)提取液體積為2.50 mL時(shí),海南(炒)茶油提取物的自由基清除率高達(dá)98.223%,其次是湖南(蒸)茶油,同體積條件下其清除率為71.170%。當(dāng)樣品溶液稀釋至30 mL時(shí),海南(蒸)茶油、江西(蒸)茶油和湖南(蒸)茶油提取物對(duì)DPPH·的清除率已經(jīng)分別降至23.793%、17.193%和22.281%,但是海南(炒)茶油仍為58.517%,由此說(shuō)明,相比其他3種茶油,海南(炒)茶油具有更強(qiáng)的DPPH·清除能力。
表4 酚類(lèi)化合物的標(biāo)準(zhǔn)曲線、相關(guān)系數(shù)及線性范圍
表5 茶油中酚類(lèi)化合物的HPLC分析
圖2 茶油提取物對(duì)DPPH·的清除能力
2.3.2 茶油提取物對(duì)ABTS·的清除能力 4種茶油提取物均具有一定程度的ABTS·清除活性,且其能力隨濃度改變而發(fā)生變化(圖3)。其中海南(炒)茶油、江西(蒸)茶油和湖南(蒸)茶油提取物的自由基清除活性均較強(qiáng),當(dāng)提取液體積為20mL時(shí),湖南(蒸)茶油提取物對(duì)ABTS·清除率為55.472%,約是同等稀釋倍數(shù)條件下海南(蒸)茶油的12倍。當(dāng)樣品溶液稀釋至25 mL時(shí),海南(蒸)茶油提取物不具備ABTS·清除能力,而其他3種茶油提取物的ABTS·清除率仍可達(dá)20%左右。
2.3.3 茶油提取物對(duì)OH·的清除能力 由圖4可以看出,在反應(yīng)體系中,當(dāng)茶油提取液體積在0-0.10mL范圍內(nèi)時(shí),其OH·清除能力的量效關(guān)系增加明顯,而在0.10-0.70 mL內(nèi)趨于飽和。4種茶油提取物的自由基清除能力存在較大差異(P>0.05),其中最強(qiáng)的是海南(炒)茶油,然后依次是江西(蒸)茶油、海南(蒸)茶油及湖南(蒸)茶油。當(dāng)加入的樣品溶液體積為0.10 mL時(shí),海南(炒)茶油提取物OH·清除率為37.152%,顯著高于湖南(蒸)茶油(8.333%)。
圖3 茶油提取物對(duì)ABTS·的清除能力
2.3.4 茶油提取物的FRAP還原能力 如圖5所示,樣品溶液體積在0-0.25 mL范圍內(nèi),茶油提取物的還原能力增加較為迅速,而在大于0.25 mL時(shí)有所緩慢。其中海南(炒)茶油提取物的還原能力在測(cè)試范圍內(nèi)顯著強(qiáng)于其他3種茶油,當(dāng)反應(yīng)體系中提取液為0.25 mL時(shí),其FeSO4濃度可達(dá)31.181 μm/L,而湖南(蒸)茶油、江西(蒸)茶油、海南(蒸)茶油分別僅為9.476 μm/L、5.463 μm/L和2.980 μm/L。當(dāng)加入的樣品溶液為1.00 mL時(shí),海南(炒)茶油提取物的還原能力(47.175 μm/L)是海南(蒸)茶油的近6倍,差異顯著。
圖4 茶油對(duì)OH·的清除能力
圖5 茶油提取物的總還原能力
茶油被譽(yù)為“油中之王”,深度探究其功能品質(zhì)和藥理價(jià)值,已成為當(dāng)今研究的一個(gè)熱點(diǎn)[15]。茶油脂肪酸組成較為豐富,且易于吸收,其中,油酸是人體必需的單不飽和脂肪酸,其含量是評(píng)價(jià)食用油質(zhì)量的重要標(biāo)準(zhǔn);亞油酸等多不飽和脂肪酸有助于調(diào)節(jié)人體中樞神經(jīng)系統(tǒng),同時(shí)還具有消炎、抗癌等功效[16-17];棕櫚酸和硬脂酸等重要飽和脂肪酸可有效減弱粥狀動(dòng)脈硬化的發(fā)病率[5]。本實(shí)驗(yàn)供試樣品中,海南(炒)茶油油酸含量(81.353%)顯著高于海南(蒸)茶油,而亞油酸在海南(蒸)茶油中含量最高(8.080%),該成分在海南(炒)茶油中卻未檢測(cè)到,可推測(cè)二者含量與茶油加工工藝存在一定相關(guān)性。Wei等[18]研究表明茶油提取工藝是影響其不飽和脂肪酸含量的重要因素,與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相一致。此外,海南(蒸)茶油的棕櫚酸和硬脂酸含量均顯著高于江西(蒸)茶油,但卻與海南(炒)茶油差異較小,推測(cè)該脂肪酸含量可能會(huì)隨著地域氣候條件的不同而產(chǎn)生差異,由此可將飽和脂肪酸含量作為鑒別油茶籽產(chǎn)地的參考指標(biāo)[19]。鄭小非等[20]通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),采用不同方法所制備的茶油之間硬脂酸含量差異并不顯著,本試驗(yàn)結(jié)論得到進(jìn)一步驗(yàn)證。4種茶油樣品的飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸及多不飽和脂肪酸組成比例均與橄欖油(15∶75∶1)相接近[21],因而被國(guó)際糧農(nóng)組織推薦為綠色食用油。
科學(xué)研究表明,維生素E和角鯊烯有助于調(diào)節(jié)人體新陳代謝[22-23];谷甾醇對(duì)于前列腺肥大等疾病具有一定療效[24];茶多酚則是一種天然抗氧化劑[25],因此,這些活性物質(zhì)也可作為評(píng)價(jià)植物油品質(zhì)的重要特征指標(biāo)[26]。本研究中兩種海南茶油的角鯊烯、豆甾醇、維生素E及β-香樹(shù)脂醇含量均顯著高于江西(蒸)茶油和湖南(蒸)茶油,推測(cè)海南氣候條件可能有助于這些次生代謝產(chǎn)物的生物合成,這與Wei等[18]的結(jié)論基本相一致。角鯊烯含量在海南(炒)茶油和海南(蒸)茶油中差異不顯著,可推測(cè)加工工藝并不是影響該物質(zhì)含量的重要因素,這與楊輝等[27]的實(shí)驗(yàn)結(jié)論不一致。此外,海南(炒)茶油提取物中表兒茶素含量約為海南(蒸)茶油的17倍,槲皮素含量為海南(蒸)茶油的近20倍,差異顯著,由此推測(cè)酚類(lèi)物質(zhì)含量可能會(huì)隨著茶油加工工藝的不同而產(chǎn)生差異,這與Moghaddam等[14]的研究結(jié)論相一致。廖義秀[10]發(fā)現(xiàn)不同品種茶油中酚類(lèi)物質(zhì)存在較大差異,海南(炒)茶油提取物中多酚含量顯著高于其他品種茶油,歸因于海南島獨(dú)特的自然條件,其所產(chǎn)茶油具有更高的藥用價(jià)值。
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為,呼吸作用、陽(yáng)光輻射及空氣污染等因素會(huì)在人體體內(nèi)生成自由基,而過(guò)量自由基會(huì)引起衰老或?qū)е掳┌Y的發(fā)生[28],但目前生物合成的自由基清除劑都存在一定毒副作用[29-30],因此,需從植物資源中開(kāi)發(fā)天然的抗氧化藥物[31]。本試驗(yàn)4種茶油提取物均具有不同程度的抗氧化活性,且量效關(guān)系明顯,其中海南(炒)茶油提取物的DPPH·清除能力顯著強(qiáng)于其他3種茶油;海南(蒸)茶油提取物對(duì)ABTS·的清除能力是4種茶油中最弱的,當(dāng)樣品提取液體積稀釋至20.00 mL時(shí),其清除率僅為4.558%;當(dāng)反應(yīng)體系中茶油溶液體積小于0.10 mL時(shí),其OH·清除能力具有較強(qiáng)的劑量依賴(lài)性,而在0.10-0.70 mL范圍內(nèi)趨于飽和,且不同樣品間存在較大差異;海南(炒)茶油提取物的還原能力顯著強(qiáng)于海南(蒸)茶油,推測(cè)加工工藝可能是影響其抗氧化能力的關(guān)鍵因素。
分析以上結(jié)果,我們還發(fā)現(xiàn)植物所含有的次生代謝產(chǎn)物與其抗氧化功能之間存在一定相關(guān)性,且這些活性物質(zhì)可能會(huì)隨著植物品種、產(chǎn)區(qū)環(huán)境、栽培方式、采收時(shí)間及加工工藝等條件的不同而產(chǎn)生差異[32-33]。Zhang等[34]認(rèn)為油茶蒲提取物中總多酚含量會(huì)直接影響其總還原能力;Rosa等[25]研究發(fā)現(xiàn)DPPH·清除作用與沒(méi)食子酸含量呈正相關(guān),而OH·清除能力受鞣花酸含量影響較大。故推測(cè)多酚類(lèi)成分可能是茶油中較為重要的抗氧化活性物質(zhì),且各成分之間協(xié)同或拮抗作用也可能會(huì)對(duì)自由基清除能力產(chǎn)生一定的影響。因此,對(duì)抗氧化機(jī)理進(jìn)行深入研究,可為天然活性物質(zhì)的挖掘、合成及結(jié)構(gòu)修飾等提供理論依據(jù)[35]。
綜上所述,本試驗(yàn)中的4種茶油提取物均具有一定程度的自由基清除能力與還原能力,故而該植物可作為潛在抗氧化劑的天然來(lái)源,此外,不同產(chǎn)地油茶加工后的產(chǎn)品(茶油)營(yíng)養(yǎng)活性成分含量豐富,尤其是海南油茶,其所產(chǎn)茶油富含不飽和脂肪酸,且兒茶素、表兒茶素、槲皮素、山茶甙等重要酚類(lèi)化合物及角鯊烯、β-谷甾醇、維生素E等次生代謝產(chǎn)物含量也顯著高于其他茶油,抗氧化功能也是所有供試材料中最強(qiáng)的,說(shuō)明此栽培種具有較高的選優(yōu)潛在經(jīng)濟(jì)價(jià)值,可作為除普通油茶外的重要食用油資源,若加以開(kāi)發(fā)利用和宣傳推廣,將有利于促進(jìn)海南油茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展,并為我國(guó)高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)適種油茶篩選培育提供參考依據(jù)。