3844份無償獻血者血液核酸檢測無效結果原因及對策分析

鄭州大學附屬南陽市中心醫(yī)院（473009）賈彥巍

核酸檢測包含艾滋病病毒的脫氧核糖核苷酸（DNA）和核糖核苷酸（RNA）檢測。它主要是通過破壞血細胞，并對其暴露出來的核酸進行聚合酶鏈式反應（PCR），通過抗原抗體抗體結合反應，呈現(xiàn)陽性者即為艾滋病病毒攜帶者。但血站接受血液樣品眾多，檢測任務繁重等原因均導致了較高的核酸檢測無效率，本研究通過對實驗室不同檢測年限工作人員操作情況進行比較，分析其對結果無效率的影響，現(xiàn)報告如下。

1 資料和方法

1.1 樣品資料 對2015年1月～2016年12月在本血站自愿獻血146473份血液樣品進行核酸檢測中3844份無效結果進行回顧性分析，數(shù)據(jù)均來自核酸實驗室。

1.2 儀器和方法

1.2.1 主要儀器 全自動實驗室樣品處理工作平臺Biomek?4000（貝克曼庫爾特生命科學事業(yè)部），3-18R臺式離心機（恒諾儀器），Li-swell實驗結果判斷軟件（煙臺海深威軟件有限公司）。

1.2.2 檢測試劑核酸檢測試劑盒（貨號：JD-7298，上海晶都生物技術有限公司）。

1.2.3 檢測方法 從所有血液樣品取6份混合，檢測結果為陽性時，再將該混合樣中6份逐一單獨檢測。

1.3 培訓方法 由經(jīng)驗豐富的檢驗人員對2年以下的工作人員進行核酸檢測步驟細節(jié)和注意事項進行培訓，培訓后讓其檢測部分樣品，對其操作的有效率進行評估。

1.4 統(tǒng)計學處理 所有數(shù)據(jù)均用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件進行分析，計數(shù)資料用百分率（%）表示，無效率用χ2檢驗。P＜0.05提示有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組人員核酸檢測結果無效原因比較 2年以下工作經(jīng)驗組因操作問題（細胞未破碎完全、操作不當被污染、更換下層液體后未卡緊接頭、標本離心不充分）等導致的結果無效率（68.76%）明顯高于2年以上組（31.24%），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見附表。

2.2 兩年經(jīng)驗以下人員培訓前、后核酸檢測結果無效原因比較 經(jīng)培訓后，2年檢測經(jīng)驗以下人員因操作原因導致的核酸檢測結果無效率（34.92%）明顯低于培訓前（52.97%），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

3 討論

核酸檢測的意義主要有三個方面：①核酸檢測可解決艾滋病毒的窗口期問題，大大降低了假陰性的發(fā)生率。②獻血人員均實名登記在冊，對其血液樣本進項核酸檢測可及早發(fā)現(xiàn)艾滋病攜帶者，勸其盡早用藥，防止感染其他人；③可快速判斷獻血者是否患有艾滋病，緩解其恐艾心理，排除恐艾隱患。大量研究發(fā)現(xiàn)，影響核酸檢測結果的因素可分為人為原因、試劑原因和檢測儀器原因三大類。

附表 兩組人員結果無效原因比較(單位:人份)

本研究結果發(fā)現(xiàn)，有2年檢測經(jīng)驗以上檢測人員出現(xiàn)細胞未破碎完全、操作不當被污染、更換下層液體后未卡緊接頭、標本離心不充分等人為操作原因引起的結果無效率（31.24%）明顯低于2年以下經(jīng)驗核酸檢測人員（68.76%），這說明核酸檢測經(jīng)驗不足會增加人為操作失誤，導致結果無效，丁威等[1]研究結果也發(fā)現(xiàn)，人為操作失誤造成的核酸檢測無效率較試劑原因高。本研究還發(fā)現(xiàn)，經(jīng)培訓后，2年以下經(jīng)驗核酸檢測人員因操作原因導致的核酸檢測結果無效率（34.92%）明顯低于培訓前（52.97%），這說明經(jīng)過系統(tǒng)的培訓和考核后，細胞未破碎完全、操作不當被污染、更換下層液體后未卡緊接頭、標本離心不充分等人為操作原因造成的核酸檢測結果無效率會降低。本研究中，核酸檢測結果無效率為2.62%，高于陳少彬等[2]研究結果中核酸檢測無效率（0.21%），這可能是因為本研究樣本量較少或檢測儀器及所用試劑盒不同所致。

綜上所述，本研究中的3844份無償獻血者血液核酸檢測無效結果多為人員操作失誤導致，給予檢測人員系統(tǒng)的培訓后可顯著降低核酸檢測結果無效率。