• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    亞精胺對鎘脅迫下杞柳生長和生理特性的影響

    2019-10-23 06:00:58尹澤潤諸葛玉平婁燕宏崔秀敏馮文杰李亞平
    關(guān)鍵詞:杞柳精胺超氧

    尹澤潤,諸葛玉平*,婁燕宏*,潘 紅,崔秀敏,王 會,馮文杰,樊 平,李亞平

    (1.土肥資源高效利用國家工程實驗室,山東農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院,山東 泰安 271018;2.山東省現(xiàn)代創(chuàng)新發(fā)展促進(jìn)中心,濟(jì)南 250000;3.濱州市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,山東 濱州 256600)

    我國鎘污染農(nóng)田面積已超過2×105hm2,全國超過三分之一的省區(qū)存在土壤鎘污染現(xiàn)象[1-2]。據(jù)報道,已有多地生產(chǎn)的稻米不符合農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全標(biāo)準(zhǔn),成為了“鎘米”[3-4]。人體長期過量攝入鎘,會嚴(yán)重影響腎和肝的生理功能,影響鈣、鎂的吸收代謝,導(dǎo)致一系列疾病[5]。近年來,鎘污染事件頻發(fā),鎘污染土壤修復(fù)已經(jīng)迫在眉睫[6]。植物修復(fù)因其具有綠色、高效、低廉等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用,利用植物對重金屬的吸附、轉(zhuǎn)移、清除等作用實現(xiàn)污染土壤的生態(tài)修復(fù)。已有研究證明,柳屬植物多對鎘具有較強(qiáng)的耐受性,其中部分品種對鎘的富集能力較強(qiáng)[7-8]。杞柳(Salix integra)是柳屬(Salix)灌木,它的枝莖生長能力很強(qiáng),枝條產(chǎn)量高,尤其是細(xì)長而堅韌的柳條,去除掉表皮之后,是一種優(yōu)良的編織材料,也是我國栽培最廣泛的灌木柳,具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益。因此,探討杞柳修復(fù)鎘污染土壤的潛力,對于豐富用于植物修復(fù)的植物種類具有重要的意義。但是,在鎘脅迫下,杞柳生長勢必受到鎘的抑制作用而影響其修復(fù)效果,所以杞柳鎘耐受性的強(qiáng)化研究仍有待進(jìn)一步加強(qiáng)。

    亞精胺是廣泛存在于動植物體內(nèi)的一種內(nèi)源激素,可以提高RNA聚合酶活性,對蛋白質(zhì)與RNA的合成有一定的促進(jìn)作用[9],同時可延緩動植物衰老、提高抗氧化酶活性、增強(qiáng)蛋白質(zhì)表達(dá)[10]。當(dāng)前國內(nèi)外對于施用外源亞精胺來緩解植物非生物脅迫已有一定的研究。李軍等[11]利用外源亞精胺緩解了鹽脅迫對黃瓜幼苗光合作用的抑制。王學(xué)等[12]通過施用外源亞精胺提高了荇菜對汞脅迫的耐受性。張潤花等[13]研究了外源亞精胺對鹽脅迫下黃瓜幼苗體內(nèi)抗氧化酶活性的影響。但有關(guān)外源亞精胺能否緩解杞柳鎘脅迫的相關(guān)研究尚鮮見報道。因此,本試驗采用營養(yǎng)液培養(yǎng)的方法,使用扦插培育的柳苗進(jìn)行試驗,研究鎘脅迫對杞柳生長與根系構(gòu)型的影響,確定鎘脅迫對杞柳的半抑制濃度,明確施用外源亞精胺對緩解杞柳鎘脅迫的作用及其生理機(jī)制,為應(yīng)用杞柳進(jìn)行鎘污染土壤的修復(fù)奠定理論基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    供試杞柳(Salix integra)取自山東省臨沂市莒南縣,其品種經(jīng)鑒定為大青葉,將其枝條采用扦插的方式于山東農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗站進(jìn)行繁育保存,然后剪取枝條采用水培扦插的方式于溫室進(jìn)行試驗。

    1.2 試驗設(shè)計

    本試驗于2018年8—9月于山東農(nóng)業(yè)大學(xué)溫室(31±5℃)進(jìn)行,采用營養(yǎng)液培養(yǎng)試驗,將去掉頂端嫩芽的杞柳枝條剪至15 cm長,放入盛有1/2 Hoagland營養(yǎng)液的水培箱中進(jìn)行扦插培育。培養(yǎng)至生長出3~5條不定根與葉片嫩芽之后,選取長勢一致的柳苗進(jìn)行試驗。將柳苗移至新的水培箱中,以1/2 Hoagland營養(yǎng)液處理作為對照(S0),其余處理使用1/2 Hoagland營養(yǎng)液并加入相應(yīng)濃度的CdCl2(分析純),Cd2+處理分別為 S10(10 mg·L-1Cd2+)、S20(20 mg·L-1Cd2+)、S30(30 mg·L-1Cd2+)、S40(40 mg·L-1Cd2+),每個處理3次重復(fù)。處理7 d后將植株樣品取出,測量生物量,計算相對生長率。

    依據(jù)鎘脅迫下杞柳生物量的相關(guān)數(shù)據(jù),通過SPSS中的IC50分析,得出鎘脅迫對杞柳的半抑制濃度,再選取長勢一致的柳苗進(jìn)行試驗。將柳苗移至另一個水培箱中,加入1/2 Hoagland營養(yǎng)液,同時加入CdCl2(分析純)使Cd2+濃度達(dá)到半抑制濃度,以不噴施亞精胺的處理作為對照(C0),亞精胺購自Sigma(貨號為S2626),亞精胺處理分別為C01(0.1 mmol·L-1)、C02(0.2 mmol·L-1)、C04(0.4 mmol·L-1)、C08(0.8 mmol·L-1)、C16(1.6 mmol·L-1)。采用葉面噴施的方式進(jìn)行處理,每盆每日噴施5 mL亞精胺溶液,連續(xù)噴施7 d,C0處理噴施清水,每個處理3次重復(fù)。處理結(jié)束后將植株樣品取出檢測。

    1.3 測定指標(biāo)與方法

    1.3.1 生物量與相對生長率

    處理前后分別稱質(zhì)量,并計算相對生長率。

    相對生長率=(鎘脅迫或亞精胺處理始末生物量差值/鎘脅迫或亞精胺處理初始生物量)/(對照處理始末生物量差值/對照處理初始生物量)

    1.3.2 根系構(gòu)型

    將根系放入根系掃描儀Epson V700的玻璃槽中,注入1 cm的去離子水使根系充分散開,將掃描獲取的圖像導(dǎo)入Win RHIZO根系分析系統(tǒng)中進(jìn)行分析獲取數(shù)據(jù)。

    1.3.3 生理指標(biāo)

    在處理完成之后,準(zhǔn)確稱取0.1 g植株葉片樣品置于預(yù)冷處理的研缽中,用液氮研磨后,加入9 mL生理鹽水,轉(zhuǎn)移到離心管中,4℃離心10 min,收集上清液用于生理指標(biāo)的測定。采用H2O2含量檢測試劑盒(A064-1)、蛋白定量測試盒(A045-2)、超氧陰離子試劑盒(A052)、GR分析試劑盒(A062)進(jìn)行檢測,所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒說明書執(zhí)行。

    1.3.4 數(shù)據(jù)分析

    試驗所用數(shù)據(jù)為3次重復(fù)的平均值,使用Excel 2010進(jìn)行做圖和數(shù)據(jù)處理,采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行方差分析(多重比較方法為Duncan),比較不同處理間差異的顯著性水平(P<0.05)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 鎘脅迫對杞柳生長的抑制作用

    鎘脅迫顯著抑制杞枊的生長,4個Cd2+處理(S10、S20、S30、S40)杞柳的相對生長率較 S0分別下降18.29%、38.02%、72.33%、75.38%(圖1);S20顯著小于S10,同時S30、S40顯著低于S10和S20,但S30與S40之間差異不顯著。根據(jù)結(jié)果計算半抑制濃度,得出IC50為24.50 mg·L-1。雖然杞柳生長受到鎘脅迫的抑制,但當(dāng)Cd2+達(dá)到較高濃度時(30、40 mg·L-1),杞柳仍具有一定的相對生長率(24.62%~27.67%),表明杞柳對鎘脅迫具有較強(qiáng)的耐受性,且在應(yīng)用于鎘污染土壤修復(fù)方面潛力較大。

    2.2 亞精胺對鎘脅迫下杞柳的影響

    2.2.1 亞精胺對鎘脅迫下杞柳生長的影響

    施用亞精胺對杞柳鎘脅迫具有一定的緩解作用,5個處理(C01、C02、C04、C08、C16)杞柳的相對生長率均顯著大于C0(圖2),其增長幅度分別為44.97%、85.48%、102.76%、89.83%、76.78%。C04處理顯著大于C01、C02、C08、C16處理,且C08和C16處理顯著大于C01處理,而與C02處理間差異未達(dá)顯著水平;同時,C08處理顯著大于C16處理,C02處理顯著大于C01處理。由此可知,C04處理(0.4 mmol·L-1)提高鎘脅迫下杞柳相對生長率的效果最好,且亞精胺對鎘脅迫的緩解效應(yīng)并不隨其濃度增大而增強(qiáng)。

    圖1 不同鎘濃度處理下的杞柳相對生長率Figure 1 Relative growth rate of Salix integra under different cadmium treatments

    2.2.2 亞精胺對鎘脅迫下杞柳根系構(gòu)型的影響

    施用外源亞精胺可顯著緩解鎘脅迫對杞柳根系生長的抑制作用,但各根系指標(biāo)對亞精胺緩解作用的響應(yīng)濃度存在差異(圖3)。杞柳的根長、根系面積、表面積在C01濃度下就對亞精胺產(chǎn)生顯著響應(yīng)(圖4),且總根長與面積在C02處理時達(dá)到最高;C02、C04、C08處理根長、根系面積顯著大于C01和C16,且C16處理根系面積顯著大于C01(11.93%)處理;C02、C08、C16處理的根系表面積顯著大于C01處理,C02顯著大于C16;投影面積、平均直徑與根系體積在C02處理濃度即對亞精胺產(chǎn)生顯著響應(yīng),在C04處理時達(dá)到最高(表面積也為最高),且C0與C01間差異不顯著;C04、C16分別與C02、C08之間根系投影面積差異不顯著,C04顯著大于C16,C02、C08間差異不顯著。綜上可知,亞精胺雖然顯著緩解了鎘脅迫對杞柳根系生長的抑制,并在C04處理時達(dá)到最佳效果,但其緩解作用同樣不隨施用濃度的進(jìn)一步提高而增強(qiáng)。

    根系構(gòu)型是表征植物根系生長發(fā)育的重要指標(biāo),C02、C04、C08、C16處理根系連接數(shù)、節(jié)點(diǎn)數(shù)、分叉數(shù)、根尖數(shù)顯著大于C0、C01處理(表1),且C01處理下節(jié)點(diǎn)數(shù)、連接數(shù)、根尖數(shù)顯著大于C0處理,分別提高了26.80%、4.88%、5.06%。C02、C04、C08、C16處理的分叉數(shù)間均無顯著差異;而C04處理的連接數(shù)顯著大于C02、C08、C16處理;C04、C08、C16處理節(jié)點(diǎn)數(shù)顯著大于C02處理;C02、C04處理根尖數(shù)顯著大于C16處理。連接數(shù)、節(jié)點(diǎn)數(shù)、根尖數(shù)在C01濃度就對亞精胺的緩解產(chǎn)生響應(yīng),而分叉數(shù)則是在亞精胺濃度達(dá)到0.2 mmol·L-1(C02)后顯著響應(yīng),連接數(shù)與根尖數(shù)對于高濃度的亞精胺更為敏感,在亞精胺濃度大于0.4 mmol·L-1(C04)后,其緩解效應(yīng)降低。

    圖2 鎘脅迫下不同亞精胺處理杞柳相對生長率Figure 2 Relative growth rate of Salix integra treated with different spermidine levels under cadmium stress

    圖3 鎘脅迫下不同亞精胺處理的杞柳根系掃描圖Figure 3 Root scanning of Salix integra treated with different spermidine levels under cadmium stress

    圖4 鎘脅迫下不同亞精胺處理杞柳的根系生長情況Figure 4 Root growth of Salix integra treated with different spermidine levels under cadmium stress

    2.2.3 亞精胺對鎘脅迫下杞柳總蛋白、谷胱甘肽還原酶、產(chǎn)生超氧陰離子活力單位和過氧化氫含量的影響

    總蛋白是表征植物總代謝和生理活性的重要指標(biāo)。亞精胺顯著提高杞柳總蛋白含量(34.92%~117.46%),且C08、C16處理顯著大于C01、C02、C04處理,且C16處理顯著大于C08處理(圖5)。亞精胺處理顯著降低了谷胱甘肽還原酶(GR)、產(chǎn)生超氧陰離子活力單位和過氧化氫(H2O2)含量,C02、C04、C08和C16處理的GR活性顯著小于C01處理(降低了47.72%~73.90%),且C02、C04、C08和C16間差異不顯著。C08處理產(chǎn)生超氧陰離子活力單位顯著小于C01處理(降低了30.90%),而與其他亞精胺處理(C02、C04、C16)差異不顯著。C04處理H2O2含量顯著小于 C01、C02和 C16處理(降低了 23.38%~28.99%),而與C08處理間差異不顯著,且C01、C02、C08和C16間差異不顯著。因此,施加亞精胺通過降低過氧化物含量來緩解杞柳鎘脅迫,同時促進(jìn)了蛋白質(zhì)的合成,顯著提高了鎘脅迫下杞柳體內(nèi)的總蛋白含量。

    表1 鎘脅迫下不同亞精胺處理杞柳根系構(gòu)型Table 1 Root configuration of Salix integra treated with different spermidine levels under cadmium stress

    圖5 鎘脅迫下不同亞精胺處理的杞柳葉片酶活性Figure 5 Enzyme activity in leaves of Salix integra treated with different spermidine levels under cadmium stress

    3 討論

    杞柳因生長速率快、生物量高、易繁殖,同時其柳條去除表皮后可作為重要的編織材料,而被廣泛種植并應(yīng)用于工藝品編織。本研究表明,杞柳在40 mg·L-1的鎘溶液中仍能存活,其相對生長率為24.62%,表明杞柳應(yīng)用于鎘污染土壤修復(fù)具有巨大潛力。但在鎘脅迫下,杞柳生長也受到明顯的抑制(其相對生長率在24.50 mg·L-1的鎘脅迫營養(yǎng)液中下降50%),這又不利于其在鎘污染土壤修復(fù)中的廣泛應(yīng)用。因此,亟需尋找提高杞柳對鎘脅迫耐受性的強(qiáng)化措施。

    亞精胺是植物體內(nèi)最常見的內(nèi)源激素之一,是植物代謝過程中產(chǎn)生的次類代謝多胺物質(zhì)。已有研究表明,施用外源亞精胺可提高植物對鹽脅迫、Hg2+脅迫的耐受性[13-15]。本試驗結(jié)果表明,施用外源亞精胺對于緩解杞柳所受鎘脅迫也具有十分明顯的作用,其相對生長率在0.4 mmol·L-1的亞精胺處理下較對照提高102.76%,顯著促進(jìn)杞柳根系的生長發(fā)育,增加其總根長、表面積、體積來提高根系吸收能力,促進(jìn)杞柳的生長。這與魏國芹等[14]研究報道的植物所受脅迫緩解后的根系變化相一致。

    鎘脅迫會導(dǎo)致植物抗氧化能力的隱形喪失,影響植物抗氧化酶活性,增加H2O2的內(nèi)在積累進(jìn)而導(dǎo)致DNA和蛋白質(zhì)被破壞[16-17]。本研究發(fā)現(xiàn),在1.6 mmol·L-1的亞精胺處理下,總蛋白含量達(dá)到20.15 g prot·L-1(較C0提高了117.46%),這主要是由于亞精胺具有促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成功能,所以在緩解杞柳所受鎘脅迫的同時,隨著亞精胺施加濃度的提高而不斷提高蛋白質(zhì)合成速率,導(dǎo)致總蛋白含量持續(xù)顯著上升[17]。這與杜長霞等[18]研究發(fā)現(xiàn)的亞精胺顯著提升鹽脅迫下黃瓜幼苗總蛋白含量的結(jié)果一致。此外,GR作為植物重要的抗氧化酶之一,是通過還原氧化型谷胱甘肽(GS-SG)為谷胱甘肽(GSH)而發(fā)揮抗氧化和解毒作用[19-21]。GSH可通過與重金屬螯合來緩解植物所受脅迫,當(dāng)鎘脅迫被緩解后,植物體內(nèi)的GSH與GS-SG重新達(dá)到平衡,表明施用亞精胺緩解了杞柳所受鎘脅迫,從而使得GR的活性下降。這與張騰國等[21]在逆境脅迫下的GR活性上升結(jié)果相印證。同時,在脅迫條件下,植物葉片會產(chǎn)生積累大量的超氧陰離子自由基,H2O2與超氧陰離子過量都會對植株造成組織損傷[22]。本試驗發(fā)現(xiàn),0.4 mmol·L-1的亞精胺顯著緩解了杞柳鎘脅迫,其產(chǎn)生超氧陰離子活力單位與H2O2含量分別下降46.35%和67.39%。這與一氧化氮緩解水稻鑭脅迫的研究結(jié)果一致,在鑭脅迫下水稻葉片中的H2O2含量顯著增加,在施用一氧化氮緩解脅迫后,其H2O2含量顯著下降[23];田保華等[24]的研究發(fā)現(xiàn)鎘脅迫下H2O2含量上升。究其原因,H2O2作為一種較為穩(wěn)定的活性氧,并不會直接造成膜脂的氧化,而超氧陰離子可通過(H2O2+O-2→OH+O2)反應(yīng)生成OH-對細(xì)胞膜脂產(chǎn)生過氧化作用,還會通過特異性點(diǎn)位攻擊導(dǎo)致DNA斷裂[25],從而對植物產(chǎn)生毒害,而外源亞精胺的噴施通過降低產(chǎn)生超氧陰離子活力單位與H2O2含量,減輕了杞柳所受超氧陰離子與OH的過氧化危害,從而緩解了杞柳所受的鎘脅迫。

    4 結(jié)論

    (1)杞柳在鎘污染的修復(fù)中具有較強(qiáng)的潛力,在40 mg·L-1鎘濃度脅迫下仍保持較高的生長速率,其半抑制濃度為24.50 mg·L-1。

    (2)施加亞精胺可有效緩解杞柳所受鎘脅迫,促進(jìn)其根系生長發(fā)育、提高總蛋白質(zhì)含量、降低超氧陰離子與過氧化氫含量。其中,施加0.4 mmol·L-1的外源亞精胺對緩解杞柳鎘脅迫效果最佳。

    猜你喜歡
    杞柳精胺超氧
    不同激素對彩葉杞柳扦插的影響
    臨沭縣杞柳生產(chǎn)機(jī)械化收獲推廣應(yīng)用的必要性初探
    Statistics
    China Textile(2017年10期)2017-12-25 12:43:00
    二氧化鈦光催化產(chǎn)生超氧自由基的形態(tài)分布研究
    熒光/化學(xué)發(fā)光探針成像檢測超氧陰離子自由基的研究進(jìn)展
    腹腔注射亞精胺對小鼠卵巢組織多胺含量及代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響
    杞柳皮綜合開發(fā)與利用
    郯城迎來杞柳豐收季
    外源精胺對斷奶仔豬血液精胺含量、臟器發(fā)育和生產(chǎn)性能的影響
    辣椒素對茶油的抗氧化與清除超氧陰離子自由基活性研究
    中國釀造(2014年9期)2014-03-11 20:21:09
    99在线视频只有这里精品首页| 亚洲专区国产一区二区| 欧美潮喷喷水| 亚洲在线自拍视频| 99精品在免费线老司机午夜| 欧美丝袜亚洲另类| 久久精品影院6| 亚洲精品成人久久久久久| 国产一区二区在线观看日韩| 久久精品国产清高在天天线| 哪里可以看免费的av片| 国产精华一区二区三区| 成人美女网站在线观看视频| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 久久鲁丝午夜福利片| 日日啪夜夜撸| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 人妻少妇偷人精品九色| 看黄色毛片网站| 成人av一区二区三区在线看| 97超视频在线观看视频| 性色avwww在线观看| 内地一区二区视频在线| av天堂中文字幕网| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 午夜福利在线观看吧| 午夜福利成人在线免费观看| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 婷婷色综合大香蕉| 性插视频无遮挡在线免费观看| 晚上一个人看的免费电影| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 成人特级av手机在线观看| 国产淫片久久久久久久久| 日本一本二区三区精品| 两个人的视频大全免费| 亚洲国产欧美人成| 久久精品夜色国产| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 最新中文字幕久久久久| 中国美女看黄片| 别揉我奶头 嗯啊视频| 白带黄色成豆腐渣| 高清日韩中文字幕在线| 18禁在线无遮挡免费观看视频 | 99久久中文字幕三级久久日本| 午夜福利在线观看吧| 亚洲国产精品国产精品| 一级黄色大片毛片| 深夜精品福利| 免费在线观看成人毛片| 国产探花极品一区二区| 亚洲精品一区av在线观看| 男女边吃奶边做爰视频| 99热6这里只有精品| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 悠悠久久av| 天堂动漫精品| 亚洲国产精品成人久久小说 | 22中文网久久字幕| av在线天堂中文字幕| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 黄色欧美视频在线观看| 蜜臀久久99精品久久宅男| 欧美性感艳星| 精品久久久久久成人av| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 日韩精品有码人妻一区| 欧美一区二区国产精品久久精品| 国产精品女同一区二区软件| 久久久久久国产a免费观看| АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲内射少妇av| 男女之事视频高清在线观看| 51国产日韩欧美| 中出人妻视频一区二区| 欧美国产日韩亚洲一区| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 亚洲国产精品合色在线| 日韩欧美 国产精品| 亚洲av成人av| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 一a级毛片在线观看| 免费搜索国产男女视频| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 一级毛片aaaaaa免费看小| 午夜激情欧美在线| 国产亚洲91精品色在线| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲av免费高清在线观看| 国产v大片淫在线免费观看| av在线老鸭窝| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 国产单亲对白刺激| 最近最新中文字幕大全电影3| 成人一区二区视频在线观看| 亚洲欧美日韩东京热| 免费在线观看影片大全网站| 国内揄拍国产精品人妻在线| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 亚洲欧美日韩高清专用| 在线免费观看不下载黄p国产| 免费观看人在逋| 国产麻豆成人av免费视频| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 国产成人精品久久久久久| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 日日摸夜夜添夜夜爱| 国产69精品久久久久777片| 久久久精品大字幕| .国产精品久久| 欧美+亚洲+日韩+国产| 床上黄色一级片| 给我免费播放毛片高清在线观看| 91精品国产九色| 99热精品在线国产| 两个人的视频大全免费| 狠狠狠狠99中文字幕| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 大型黄色视频在线免费观看| 欧美日韩乱码在线| 日本在线视频免费播放| 又粗又爽又猛毛片免费看| 欧美性感艳星| 久久人妻av系列| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产高清有码在线观看视频| 99热这里只有是精品50| 欧美日本亚洲视频在线播放| 听说在线观看完整版免费高清| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲图色成人| 国产毛片a区久久久久| 久久亚洲精品不卡| 成人性生交大片免费视频hd| 91在线观看av| 久久99热这里只有精品18| 一本久久中文字幕| 精品国内亚洲2022精品成人| 日本五十路高清| 色播亚洲综合网| 十八禁国产超污无遮挡网站| 国产精品福利在线免费观看| 午夜免费激情av| 成人精品一区二区免费| 大型黄色视频在线免费观看| 精品久久国产蜜桃| 午夜福利视频1000在线观看| 亚洲国产精品久久男人天堂| 欧美人与善性xxx| 成人亚洲欧美一区二区av| 蜜臀久久99精品久久宅男| 久久精品影院6| 高清毛片免费观看视频网站| 精品久久久久久成人av| 久久鲁丝午夜福利片| 久久久久久久久大av| 国产精品嫩草影院av在线观看| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 久久中文看片网| 国产美女午夜福利| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 午夜老司机福利剧场| 一级av片app| 中文资源天堂在线| 老熟妇仑乱视频hdxx| 99在线人妻在线中文字幕| 男人的好看免费观看在线视频| 午夜精品国产一区二区电影 | 听说在线观看完整版免费高清| 欧美色视频一区免费| 国产在线男女| 99久久精品热视频| 秋霞在线观看毛片| 少妇熟女aⅴ在线视频| 日韩欧美精品v在线| 亚洲最大成人av| 亚洲最大成人手机在线| 欧美极品一区二区三区四区| 国产精品野战在线观看| 在线a可以看的网站| 少妇丰满av| 久久九九热精品免费| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产精品av视频在线免费观看| 99久国产av精品国产电影| 日韩在线高清观看一区二区三区| 久久中文看片网| 亚洲成a人片在线一区二区| 网址你懂的国产日韩在线| 天堂√8在线中文| 女人被狂操c到高潮| 国产老妇女一区| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 免费看av在线观看网站| 日韩大尺度精品在线看网址| 卡戴珊不雅视频在线播放| 插阴视频在线观看视频| 亚洲久久久久久中文字幕| 日韩国内少妇激情av| 亚洲成人精品中文字幕电影| 中国国产av一级| 国产成人aa在线观看| 少妇的逼水好多| 在线观看免费视频日本深夜| 亚洲精品日韩在线中文字幕 | 免费观看在线日韩| 欧美日韩精品成人综合77777| 日本免费a在线| 最新在线观看一区二区三区| 亚洲经典国产精华液单| 欧美一区二区国产精品久久精品| 日本一本二区三区精品| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 中文字幕av成人在线电影| 狠狠狠狠99中文字幕| 国产探花在线观看一区二区| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 熟女人妻精品中文字幕| 免费观看在线日韩| 亚洲高清免费不卡视频| 免费看光身美女| 床上黄色一级片| 国产精品久久电影中文字幕| 免费看a级黄色片| 俺也久久电影网| 中文资源天堂在线| 亚洲av成人av| 国产乱人偷精品视频| 两个人的视频大全免费| 色播亚洲综合网| 中文字幕久久专区| 久久99热这里只有精品18| 能在线免费观看的黄片| 久久鲁丝午夜福利片| 亚州av有码| 久久九九热精品免费| 亚洲成av人片在线播放无| 亚洲美女视频黄频| 国产中年淑女户外野战色| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 我的女老师完整版在线观看| 亚洲精品456在线播放app| 女同久久另类99精品国产91| 欧美一区二区国产精品久久精品| av黄色大香蕉| 日本与韩国留学比较| 亚洲高清免费不卡视频| 亚洲性久久影院| 免费电影在线观看免费观看| 国产精品久久久久久久久免| 日韩人妻高清精品专区| 69av精品久久久久久| 精品国内亚洲2022精品成人| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 国产精品一区www在线观看| 国产探花极品一区二区| 国产精品三级大全| 十八禁国产超污无遮挡网站| 久久精品国产自在天天线| 欧美色视频一区免费| 一个人看视频在线观看www免费| 久久久久久久久大av| 在线看三级毛片| 波野结衣二区三区在线| 日韩欧美免费精品| 可以在线观看毛片的网站| 久久国产乱子免费精品| 99在线视频只有这里精品首页| 少妇熟女aⅴ在线视频| 国产亚洲91精品色在线| 直男gayav资源| 又粗又爽又猛毛片免费看| 男女视频在线观看网站免费| 亚洲欧美成人精品一区二区| 村上凉子中文字幕在线| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 一个人看的www免费观看视频| 人人妻人人澡欧美一区二区| 99在线人妻在线中文字幕| 给我免费播放毛片高清在线观看| 十八禁国产超污无遮挡网站| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 国产精品免费一区二区三区在线| 久久久久九九精品影院| 国产在视频线在精品| ponron亚洲| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 国产成人freesex在线 | 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲乱码一区二区免费版| 久久久久九九精品影院| 伦理电影大哥的女人| 欧美一区二区国产精品久久精品| 久久久久久久亚洲中文字幕| 男人舔女人下体高潮全视频| 欧美色欧美亚洲另类二区| 国产精品亚洲一级av第二区| 69人妻影院| a级一级毛片免费在线观看| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 国产麻豆成人av免费视频| 国产精品亚洲一级av第二区| 亚洲五月天丁香| 亚洲,欧美,日韩| 成年女人永久免费观看视频| 美女被艹到高潮喷水动态| 黑人高潮一二区| 亚洲不卡免费看| www日本黄色视频网| 国产视频内射| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 日本一二三区视频观看| 99视频精品全部免费 在线| 卡戴珊不雅视频在线播放| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 色吧在线观看| 午夜久久久久精精品| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 国产麻豆成人av免费视频| 三级国产精品欧美在线观看| 给我免费播放毛片高清在线观看| 国产一级毛片七仙女欲春2| 午夜福利在线观看吧| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 一级av片app| 国产男靠女视频免费网站| 51国产日韩欧美| 欧美一区二区精品小视频在线| 男插女下体视频免费在线播放| 免费av不卡在线播放| 免费人成视频x8x8入口观看| 又黄又爽又免费观看的视频| av视频在线观看入口| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 亚洲性夜色夜夜综合| 看片在线看免费视频| 床上黄色一级片| 日韩大尺度精品在线看网址| 欧美成人免费av一区二区三区| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 联通29元200g的流量卡| 少妇的逼好多水| 国内精品久久久久精免费| 亚州av有码| 久久人妻av系列| 久久精品国产清高在天天线| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 99久久精品热视频| 最近最新中文字幕大全电影3| 99热网站在线观看| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 免费电影在线观看免费观看| 亚洲在线观看片| 久久中文看片网| 国产综合懂色| avwww免费| 成人性生交大片免费视频hd| 99久国产av精品| 亚洲在线自拍视频| 九九在线视频观看精品| 国产精品一及| 午夜福利成人在线免费观看| 99国产极品粉嫩在线观看| 免费人成视频x8x8入口观看| 淫妇啪啪啪对白视频| 日韩欧美精品v在线| 亚洲精品在线观看二区| 国产成人a∨麻豆精品| 99精品在免费线老司机午夜| 男人舔女人下体高潮全视频| 国产精品一区www在线观看| 大香蕉久久网| 色综合站精品国产| 国产精品永久免费网站| av在线观看视频网站免费| 男人的好看免费观看在线视频| 国产伦在线观看视频一区| 亚洲自偷自拍三级| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 我的老师免费观看完整版| 一级毛片久久久久久久久女| 精品久久久噜噜| 国产精品一区二区三区四区久久| 亚洲三级黄色毛片| 丰满乱子伦码专区| 色5月婷婷丁香| 日韩欧美免费精品| 成年版毛片免费区| 最近手机中文字幕大全| 亚洲一区二区三区色噜噜| 麻豆成人午夜福利视频| 99国产极品粉嫩在线观看| 最新在线观看一区二区三区| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲美女搞黄在线观看 | 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 一区福利在线观看| 国产乱人偷精品视频| 国产精品免费一区二区三区在线| 啦啦啦韩国在线观看视频| 少妇的逼好多水| 午夜视频国产福利| 日韩成人av中文字幕在线观看 | 日本欧美国产在线视频| 在线观看av片永久免费下载| 国产视频内射| 在线观看一区二区三区| 国产综合懂色| 国产精品三级大全| 欧美人与善性xxx| 亚洲av熟女| 国产高清不卡午夜福利| 久久九九热精品免费| 国产精品综合久久久久久久免费| 少妇熟女欧美另类| 日本色播在线视频| 亚洲图色成人| 国产av不卡久久| 久久久欧美国产精品| or卡值多少钱| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 亚洲av中文字字幕乱码综合| 一级毛片久久久久久久久女| 网址你懂的国产日韩在线| 国产成人影院久久av| 永久网站在线| 99热6这里只有精品| 深夜a级毛片| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产精品久久久久久精品电影| 久久人妻av系列| 精品久久久久久久久av| 在线播放无遮挡| 一区二区三区四区激情视频 | 免费av毛片视频| 丝袜喷水一区| 久久久精品94久久精品| 国产探花极品一区二区| 日韩欧美精品免费久久| 22中文网久久字幕| 国产人妻一区二区三区在| 国产精品久久久久久久电影| 午夜福利在线在线| 女同久久另类99精品国产91| 精品一区二区免费观看| 亚洲精品456在线播放app| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲欧美日韩高清专用| 亚洲第一区二区三区不卡| 国模一区二区三区四区视频| 99久久九九国产精品国产免费| 日韩欧美免费精品| 欧美激情国产日韩精品一区| 成人无遮挡网站| 1000部很黄的大片| 又爽又黄无遮挡网站| 婷婷六月久久综合丁香| 成人一区二区视频在线观看| 一个人免费在线观看电影| 黄色日韩在线| 日韩亚洲欧美综合| 人人妻人人澡欧美一区二区| 久久久久久久久久久丰满| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 亚洲性久久影院| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 欧美一区二区精品小视频在线| 美女高潮的动态| 99久久精品热视频| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 搡老妇女老女人老熟妇| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 日本 av在线| 天堂网av新在线| a级毛片a级免费在线| 免费看光身美女| 插阴视频在线观看视频| 神马国产精品三级电影在线观看| 内地一区二区视频在线| 九色成人免费人妻av| 国产午夜精品论理片| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 成人毛片a级毛片在线播放| 99热这里只有是精品在线观看| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 高清毛片免费看| АⅤ资源中文在线天堂| 欧美+日韩+精品| 一级毛片我不卡| 中文字幕av成人在线电影| 特大巨黑吊av在线直播| 亚洲av成人av| 天天一区二区日本电影三级| 男人和女人高潮做爰伦理| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 麻豆国产97在线/欧美| 天天一区二区日本电影三级| 国内精品宾馆在线| 少妇人妻一区二区三区视频| 亚洲人成网站高清观看| 国产精品精品国产色婷婷| 在线观看66精品国产| 国产人妻一区二区三区在| av国产免费在线观看| 淫妇啪啪啪对白视频| 亚洲av一区综合| 亚洲国产高清在线一区二区三| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 日本 av在线| 国产伦精品一区二区三区四那| 一区二区三区四区激情视频 | 变态另类丝袜制服| 又黄又爽又免费观看的视频| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 看非洲黑人一级黄片| 青春草视频在线免费观看| 天美传媒精品一区二区| 不卡一级毛片| 欧美成人精品欧美一级黄| 99热只有精品国产| 伦精品一区二区三区| 99久久精品国产国产毛片| av天堂在线播放| 级片在线观看| 18禁在线播放成人免费| 亚洲电影在线观看av| 成人鲁丝片一二三区免费| 成人国产麻豆网| 国产大屁股一区二区在线视频| 一a级毛片在线观看| 久久精品影院6| 黄色欧美视频在线观看| 99在线人妻在线中文字幕| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产亚洲91精品色在线| 欧美潮喷喷水| or卡值多少钱| 成人永久免费在线观看视频| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产伦一二天堂av在线观看| 深爱激情五月婷婷| 少妇熟女aⅴ在线视频| 日本免费一区二区三区高清不卡| 精品一区二区三区视频在线| 日韩av不卡免费在线播放| 久久精品国产亚洲网站| 亚洲乱码一区二区免费版| 成人二区视频| 亚洲成人精品中文字幕电影| 午夜福利成人在线免费观看| 国产精品久久久久久精品电影| av在线老鸭窝| 长腿黑丝高跟| 午夜日韩欧美国产| 精品免费久久久久久久清纯| 亚洲色图av天堂| av天堂在线播放| 春色校园在线视频观看| 精品一区二区三区人妻视频| 久久99热6这里只有精品| 一区福利在线观看| 内地一区二区视频在线| 最新中文字幕久久久久| 国产综合懂色| 久久久久久大精品| 国产毛片a区久久久久| 久久久久九九精品影院| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 老司机影院成人| 老熟妇仑乱视频hdxx| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 亚洲成人精品中文字幕电影| 校园春色视频在线观看| 国产私拍福利视频在线观看| 欧美潮喷喷水| 久久综合国产亚洲精品| 看免费成人av毛片| 美女内射精品一级片tv| 成年女人看的毛片在线观看| 午夜激情欧美在线| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 亚洲久久久久久中文字幕| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 国产在视频线在精品| 国产欧美日韩精品亚洲av| 97超碰精品成人国产| 欧美zozozo另类| 亚洲国产高清在线一区二区三| 国产美女午夜福利| 最好的美女福利视频网| 免费黄网站久久成人精品| 亚洲精品色激情综合| 日韩欧美在线乱码| 久久6这里有精品| 亚洲国产高清在线一区二区三| 最近的中文字幕免费完整| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产高清视频在线观看网站| 亚洲中文日韩欧美视频| 日本爱情动作片www.在线观看 | 成人特级av手机在线观看| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 欧美成人一区二区免费高清观看| 12—13女人毛片做爰片一| 干丝袜人妻中文字幕| www.色视频.com| 啦啦啦观看免费观看视频高清|