• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    亞精胺對鎘脅迫下杞柳生長和生理特性的影響

    2019-10-23 06:00:58尹澤潤諸葛玉平婁燕宏崔秀敏馮文杰李亞平
    關(guān)鍵詞:杞柳精胺超氧

    尹澤潤,諸葛玉平*,婁燕宏*,潘 紅,崔秀敏,王 會,馮文杰,樊 平,李亞平

    (1.土肥資源高效利用國家工程實驗室,山東農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院,山東 泰安 271018;2.山東省現(xiàn)代創(chuàng)新發(fā)展促進(jìn)中心,濟(jì)南 250000;3.濱州市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,山東 濱州 256600)

    我國鎘污染農(nóng)田面積已超過2×105hm2,全國超過三分之一的省區(qū)存在土壤鎘污染現(xiàn)象[1-2]。據(jù)報道,已有多地生產(chǎn)的稻米不符合農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全標(biāo)準(zhǔn),成為了“鎘米”[3-4]。人體長期過量攝入鎘,會嚴(yán)重影響腎和肝的生理功能,影響鈣、鎂的吸收代謝,導(dǎo)致一系列疾病[5]。近年來,鎘污染事件頻發(fā),鎘污染土壤修復(fù)已經(jīng)迫在眉睫[6]。植物修復(fù)因其具有綠色、高效、低廉等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用,利用植物對重金屬的吸附、轉(zhuǎn)移、清除等作用實現(xiàn)污染土壤的生態(tài)修復(fù)。已有研究證明,柳屬植物多對鎘具有較強(qiáng)的耐受性,其中部分品種對鎘的富集能力較強(qiáng)[7-8]。杞柳(Salix integra)是柳屬(Salix)灌木,它的枝莖生長能力很強(qiáng),枝條產(chǎn)量高,尤其是細(xì)長而堅韌的柳條,去除掉表皮之后,是一種優(yōu)良的編織材料,也是我國栽培最廣泛的灌木柳,具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益。因此,探討杞柳修復(fù)鎘污染土壤的潛力,對于豐富用于植物修復(fù)的植物種類具有重要的意義。但是,在鎘脅迫下,杞柳生長勢必受到鎘的抑制作用而影響其修復(fù)效果,所以杞柳鎘耐受性的強(qiáng)化研究仍有待進(jìn)一步加強(qiáng)。

    亞精胺是廣泛存在于動植物體內(nèi)的一種內(nèi)源激素,可以提高RNA聚合酶活性,對蛋白質(zhì)與RNA的合成有一定的促進(jìn)作用[9],同時可延緩動植物衰老、提高抗氧化酶活性、增強(qiáng)蛋白質(zhì)表達(dá)[10]。當(dāng)前國內(nèi)外對于施用外源亞精胺來緩解植物非生物脅迫已有一定的研究。李軍等[11]利用外源亞精胺緩解了鹽脅迫對黃瓜幼苗光合作用的抑制。王學(xué)等[12]通過施用外源亞精胺提高了荇菜對汞脅迫的耐受性。張潤花等[13]研究了外源亞精胺對鹽脅迫下黃瓜幼苗體內(nèi)抗氧化酶活性的影響。但有關(guān)外源亞精胺能否緩解杞柳鎘脅迫的相關(guān)研究尚鮮見報道。因此,本試驗采用營養(yǎng)液培養(yǎng)的方法,使用扦插培育的柳苗進(jìn)行試驗,研究鎘脅迫對杞柳生長與根系構(gòu)型的影響,確定鎘脅迫對杞柳的半抑制濃度,明確施用外源亞精胺對緩解杞柳鎘脅迫的作用及其生理機(jī)制,為應(yīng)用杞柳進(jìn)行鎘污染土壤的修復(fù)奠定理論基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    供試杞柳(Salix integra)取自山東省臨沂市莒南縣,其品種經(jīng)鑒定為大青葉,將其枝條采用扦插的方式于山東農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗站進(jìn)行繁育保存,然后剪取枝條采用水培扦插的方式于溫室進(jìn)行試驗。

    1.2 試驗設(shè)計

    本試驗于2018年8—9月于山東農(nóng)業(yè)大學(xué)溫室(31±5℃)進(jìn)行,采用營養(yǎng)液培養(yǎng)試驗,將去掉頂端嫩芽的杞柳枝條剪至15 cm長,放入盛有1/2 Hoagland營養(yǎng)液的水培箱中進(jìn)行扦插培育。培養(yǎng)至生長出3~5條不定根與葉片嫩芽之后,選取長勢一致的柳苗進(jìn)行試驗。將柳苗移至新的水培箱中,以1/2 Hoagland營養(yǎng)液處理作為對照(S0),其余處理使用1/2 Hoagland營養(yǎng)液并加入相應(yīng)濃度的CdCl2(分析純),Cd2+處理分別為 S10(10 mg·L-1Cd2+)、S20(20 mg·L-1Cd2+)、S30(30 mg·L-1Cd2+)、S40(40 mg·L-1Cd2+),每個處理3次重復(fù)。處理7 d后將植株樣品取出,測量生物量,計算相對生長率。

    依據(jù)鎘脅迫下杞柳生物量的相關(guān)數(shù)據(jù),通過SPSS中的IC50分析,得出鎘脅迫對杞柳的半抑制濃度,再選取長勢一致的柳苗進(jìn)行試驗。將柳苗移至另一個水培箱中,加入1/2 Hoagland營養(yǎng)液,同時加入CdCl2(分析純)使Cd2+濃度達(dá)到半抑制濃度,以不噴施亞精胺的處理作為對照(C0),亞精胺購自Sigma(貨號為S2626),亞精胺處理分別為C01(0.1 mmol·L-1)、C02(0.2 mmol·L-1)、C04(0.4 mmol·L-1)、C08(0.8 mmol·L-1)、C16(1.6 mmol·L-1)。采用葉面噴施的方式進(jìn)行處理,每盆每日噴施5 mL亞精胺溶液,連續(xù)噴施7 d,C0處理噴施清水,每個處理3次重復(fù)。處理結(jié)束后將植株樣品取出檢測。

    1.3 測定指標(biāo)與方法

    1.3.1 生物量與相對生長率

    處理前后分別稱質(zhì)量,并計算相對生長率。

    相對生長率=(鎘脅迫或亞精胺處理始末生物量差值/鎘脅迫或亞精胺處理初始生物量)/(對照處理始末生物量差值/對照處理初始生物量)

    1.3.2 根系構(gòu)型

    將根系放入根系掃描儀Epson V700的玻璃槽中,注入1 cm的去離子水使根系充分散開,將掃描獲取的圖像導(dǎo)入Win RHIZO根系分析系統(tǒng)中進(jìn)行分析獲取數(shù)據(jù)。

    1.3.3 生理指標(biāo)

    在處理完成之后,準(zhǔn)確稱取0.1 g植株葉片樣品置于預(yù)冷處理的研缽中,用液氮研磨后,加入9 mL生理鹽水,轉(zhuǎn)移到離心管中,4℃離心10 min,收集上清液用于生理指標(biāo)的測定。采用H2O2含量檢測試劑盒(A064-1)、蛋白定量測試盒(A045-2)、超氧陰離子試劑盒(A052)、GR分析試劑盒(A062)進(jìn)行檢測,所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒說明書執(zhí)行。

    1.3.4 數(shù)據(jù)分析

    試驗所用數(shù)據(jù)為3次重復(fù)的平均值,使用Excel 2010進(jìn)行做圖和數(shù)據(jù)處理,采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行方差分析(多重比較方法為Duncan),比較不同處理間差異的顯著性水平(P<0.05)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 鎘脅迫對杞柳生長的抑制作用

    鎘脅迫顯著抑制杞枊的生長,4個Cd2+處理(S10、S20、S30、S40)杞柳的相對生長率較 S0分別下降18.29%、38.02%、72.33%、75.38%(圖1);S20顯著小于S10,同時S30、S40顯著低于S10和S20,但S30與S40之間差異不顯著。根據(jù)結(jié)果計算半抑制濃度,得出IC50為24.50 mg·L-1。雖然杞柳生長受到鎘脅迫的抑制,但當(dāng)Cd2+達(dá)到較高濃度時(30、40 mg·L-1),杞柳仍具有一定的相對生長率(24.62%~27.67%),表明杞柳對鎘脅迫具有較強(qiáng)的耐受性,且在應(yīng)用于鎘污染土壤修復(fù)方面潛力較大。

    2.2 亞精胺對鎘脅迫下杞柳的影響

    2.2.1 亞精胺對鎘脅迫下杞柳生長的影響

    施用亞精胺對杞柳鎘脅迫具有一定的緩解作用,5個處理(C01、C02、C04、C08、C16)杞柳的相對生長率均顯著大于C0(圖2),其增長幅度分別為44.97%、85.48%、102.76%、89.83%、76.78%。C04處理顯著大于C01、C02、C08、C16處理,且C08和C16處理顯著大于C01處理,而與C02處理間差異未達(dá)顯著水平;同時,C08處理顯著大于C16處理,C02處理顯著大于C01處理。由此可知,C04處理(0.4 mmol·L-1)提高鎘脅迫下杞柳相對生長率的效果最好,且亞精胺對鎘脅迫的緩解效應(yīng)并不隨其濃度增大而增強(qiáng)。

    圖1 不同鎘濃度處理下的杞柳相對生長率Figure 1 Relative growth rate of Salix integra under different cadmium treatments

    2.2.2 亞精胺對鎘脅迫下杞柳根系構(gòu)型的影響

    施用外源亞精胺可顯著緩解鎘脅迫對杞柳根系生長的抑制作用,但各根系指標(biāo)對亞精胺緩解作用的響應(yīng)濃度存在差異(圖3)。杞柳的根長、根系面積、表面積在C01濃度下就對亞精胺產(chǎn)生顯著響應(yīng)(圖4),且總根長與面積在C02處理時達(dá)到最高;C02、C04、C08處理根長、根系面積顯著大于C01和C16,且C16處理根系面積顯著大于C01(11.93%)處理;C02、C08、C16處理的根系表面積顯著大于C01處理,C02顯著大于C16;投影面積、平均直徑與根系體積在C02處理濃度即對亞精胺產(chǎn)生顯著響應(yīng),在C04處理時達(dá)到最高(表面積也為最高),且C0與C01間差異不顯著;C04、C16分別與C02、C08之間根系投影面積差異不顯著,C04顯著大于C16,C02、C08間差異不顯著。綜上可知,亞精胺雖然顯著緩解了鎘脅迫對杞柳根系生長的抑制,并在C04處理時達(dá)到最佳效果,但其緩解作用同樣不隨施用濃度的進(jìn)一步提高而增強(qiáng)。

    根系構(gòu)型是表征植物根系生長發(fā)育的重要指標(biāo),C02、C04、C08、C16處理根系連接數(shù)、節(jié)點(diǎn)數(shù)、分叉數(shù)、根尖數(shù)顯著大于C0、C01處理(表1),且C01處理下節(jié)點(diǎn)數(shù)、連接數(shù)、根尖數(shù)顯著大于C0處理,分別提高了26.80%、4.88%、5.06%。C02、C04、C08、C16處理的分叉數(shù)間均無顯著差異;而C04處理的連接數(shù)顯著大于C02、C08、C16處理;C04、C08、C16處理節(jié)點(diǎn)數(shù)顯著大于C02處理;C02、C04處理根尖數(shù)顯著大于C16處理。連接數(shù)、節(jié)點(diǎn)數(shù)、根尖數(shù)在C01濃度就對亞精胺的緩解產(chǎn)生響應(yīng),而分叉數(shù)則是在亞精胺濃度達(dá)到0.2 mmol·L-1(C02)后顯著響應(yīng),連接數(shù)與根尖數(shù)對于高濃度的亞精胺更為敏感,在亞精胺濃度大于0.4 mmol·L-1(C04)后,其緩解效應(yīng)降低。

    圖2 鎘脅迫下不同亞精胺處理杞柳相對生長率Figure 2 Relative growth rate of Salix integra treated with different spermidine levels under cadmium stress

    圖3 鎘脅迫下不同亞精胺處理的杞柳根系掃描圖Figure 3 Root scanning of Salix integra treated with different spermidine levels under cadmium stress

    圖4 鎘脅迫下不同亞精胺處理杞柳的根系生長情況Figure 4 Root growth of Salix integra treated with different spermidine levels under cadmium stress

    2.2.3 亞精胺對鎘脅迫下杞柳總蛋白、谷胱甘肽還原酶、產(chǎn)生超氧陰離子活力單位和過氧化氫含量的影響

    總蛋白是表征植物總代謝和生理活性的重要指標(biāo)。亞精胺顯著提高杞柳總蛋白含量(34.92%~117.46%),且C08、C16處理顯著大于C01、C02、C04處理,且C16處理顯著大于C08處理(圖5)。亞精胺處理顯著降低了谷胱甘肽還原酶(GR)、產(chǎn)生超氧陰離子活力單位和過氧化氫(H2O2)含量,C02、C04、C08和C16處理的GR活性顯著小于C01處理(降低了47.72%~73.90%),且C02、C04、C08和C16間差異不顯著。C08處理產(chǎn)生超氧陰離子活力單位顯著小于C01處理(降低了30.90%),而與其他亞精胺處理(C02、C04、C16)差異不顯著。C04處理H2O2含量顯著小于 C01、C02和 C16處理(降低了 23.38%~28.99%),而與C08處理間差異不顯著,且C01、C02、C08和C16間差異不顯著。因此,施加亞精胺通過降低過氧化物含量來緩解杞柳鎘脅迫,同時促進(jìn)了蛋白質(zhì)的合成,顯著提高了鎘脅迫下杞柳體內(nèi)的總蛋白含量。

    表1 鎘脅迫下不同亞精胺處理杞柳根系構(gòu)型Table 1 Root configuration of Salix integra treated with different spermidine levels under cadmium stress

    圖5 鎘脅迫下不同亞精胺處理的杞柳葉片酶活性Figure 5 Enzyme activity in leaves of Salix integra treated with different spermidine levels under cadmium stress

    3 討論

    杞柳因生長速率快、生物量高、易繁殖,同時其柳條去除表皮后可作為重要的編織材料,而被廣泛種植并應(yīng)用于工藝品編織。本研究表明,杞柳在40 mg·L-1的鎘溶液中仍能存活,其相對生長率為24.62%,表明杞柳應(yīng)用于鎘污染土壤修復(fù)具有巨大潛力。但在鎘脅迫下,杞柳生長也受到明顯的抑制(其相對生長率在24.50 mg·L-1的鎘脅迫營養(yǎng)液中下降50%),這又不利于其在鎘污染土壤修復(fù)中的廣泛應(yīng)用。因此,亟需尋找提高杞柳對鎘脅迫耐受性的強(qiáng)化措施。

    亞精胺是植物體內(nèi)最常見的內(nèi)源激素之一,是植物代謝過程中產(chǎn)生的次類代謝多胺物質(zhì)。已有研究表明,施用外源亞精胺可提高植物對鹽脅迫、Hg2+脅迫的耐受性[13-15]。本試驗結(jié)果表明,施用外源亞精胺對于緩解杞柳所受鎘脅迫也具有十分明顯的作用,其相對生長率在0.4 mmol·L-1的亞精胺處理下較對照提高102.76%,顯著促進(jìn)杞柳根系的生長發(fā)育,增加其總根長、表面積、體積來提高根系吸收能力,促進(jìn)杞柳的生長。這與魏國芹等[14]研究報道的植物所受脅迫緩解后的根系變化相一致。

    鎘脅迫會導(dǎo)致植物抗氧化能力的隱形喪失,影響植物抗氧化酶活性,增加H2O2的內(nèi)在積累進(jìn)而導(dǎo)致DNA和蛋白質(zhì)被破壞[16-17]。本研究發(fā)現(xiàn),在1.6 mmol·L-1的亞精胺處理下,總蛋白含量達(dá)到20.15 g prot·L-1(較C0提高了117.46%),這主要是由于亞精胺具有促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成功能,所以在緩解杞柳所受鎘脅迫的同時,隨著亞精胺施加濃度的提高而不斷提高蛋白質(zhì)合成速率,導(dǎo)致總蛋白含量持續(xù)顯著上升[17]。這與杜長霞等[18]研究發(fā)現(xiàn)的亞精胺顯著提升鹽脅迫下黃瓜幼苗總蛋白含量的結(jié)果一致。此外,GR作為植物重要的抗氧化酶之一,是通過還原氧化型谷胱甘肽(GS-SG)為谷胱甘肽(GSH)而發(fā)揮抗氧化和解毒作用[19-21]。GSH可通過與重金屬螯合來緩解植物所受脅迫,當(dāng)鎘脅迫被緩解后,植物體內(nèi)的GSH與GS-SG重新達(dá)到平衡,表明施用亞精胺緩解了杞柳所受鎘脅迫,從而使得GR的活性下降。這與張騰國等[21]在逆境脅迫下的GR活性上升結(jié)果相印證。同時,在脅迫條件下,植物葉片會產(chǎn)生積累大量的超氧陰離子自由基,H2O2與超氧陰離子過量都會對植株造成組織損傷[22]。本試驗發(fā)現(xiàn),0.4 mmol·L-1的亞精胺顯著緩解了杞柳鎘脅迫,其產(chǎn)生超氧陰離子活力單位與H2O2含量分別下降46.35%和67.39%。這與一氧化氮緩解水稻鑭脅迫的研究結(jié)果一致,在鑭脅迫下水稻葉片中的H2O2含量顯著增加,在施用一氧化氮緩解脅迫后,其H2O2含量顯著下降[23];田保華等[24]的研究發(fā)現(xiàn)鎘脅迫下H2O2含量上升。究其原因,H2O2作為一種較為穩(wěn)定的活性氧,并不會直接造成膜脂的氧化,而超氧陰離子可通過(H2O2+O-2→OH+O2)反應(yīng)生成OH-對細(xì)胞膜脂產(chǎn)生過氧化作用,還會通過特異性點(diǎn)位攻擊導(dǎo)致DNA斷裂[25],從而對植物產(chǎn)生毒害,而外源亞精胺的噴施通過降低產(chǎn)生超氧陰離子活力單位與H2O2含量,減輕了杞柳所受超氧陰離子與OH的過氧化危害,從而緩解了杞柳所受的鎘脅迫。

    4 結(jié)論

    (1)杞柳在鎘污染的修復(fù)中具有較強(qiáng)的潛力,在40 mg·L-1鎘濃度脅迫下仍保持較高的生長速率,其半抑制濃度為24.50 mg·L-1。

    (2)施加亞精胺可有效緩解杞柳所受鎘脅迫,促進(jìn)其根系生長發(fā)育、提高總蛋白質(zhì)含量、降低超氧陰離子與過氧化氫含量。其中,施加0.4 mmol·L-1的外源亞精胺對緩解杞柳鎘脅迫效果最佳。

    猜你喜歡
    杞柳精胺超氧
    不同激素對彩葉杞柳扦插的影響
    臨沭縣杞柳生產(chǎn)機(jī)械化收獲推廣應(yīng)用的必要性初探
    Statistics
    China Textile(2017年10期)2017-12-25 12:43:00
    二氧化鈦光催化產(chǎn)生超氧自由基的形態(tài)分布研究
    熒光/化學(xué)發(fā)光探針成像檢測超氧陰離子自由基的研究進(jìn)展
    腹腔注射亞精胺對小鼠卵巢組織多胺含量及代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響
    杞柳皮綜合開發(fā)與利用
    郯城迎來杞柳豐收季
    外源精胺對斷奶仔豬血液精胺含量、臟器發(fā)育和生產(chǎn)性能的影響
    辣椒素對茶油的抗氧化與清除超氧陰離子自由基活性研究
    中國釀造(2014年9期)2014-03-11 20:21:09
    天堂8中文在线网| 精品第一国产精品| 国产亚洲欧美精品永久| 制服人妻中文乱码| 国产片内射在线| 多毛熟女@视频| 亚洲综合色网址| 高清av免费在线| 免费av中文字幕在线| 久久久国产一区二区| 婷婷丁香在线五月| 一区在线观看完整版| 这个男人来自地球电影免费观看| 视频在线观看一区二区三区| 国产成人精品久久二区二区91| 国产伦人伦偷精品视频| 天堂中文最新版在线下载| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 亚洲欧美一区二区三区黑人| 99精品久久久久人妻精品| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 欧美日韩精品网址| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 精品久久久久久久毛片微露脸| 久久久国产成人免费| 黑人欧美特级aaaaaa片| 欧美亚洲日本最大视频资源| 国产三级黄色录像| 精品国产一区二区久久| 脱女人内裤的视频| 激情视频va一区二区三区| 两个人免费观看高清视频| 国产成人精品无人区| 国产单亲对白刺激| 色老头精品视频在线观看| 搡老岳熟女国产| 欧美激情高清一区二区三区| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 少妇 在线观看| 日韩精品免费视频一区二区三区| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国产精品免费大片| 一二三四在线观看免费中文在| 成年动漫av网址| 亚洲一码二码三码区别大吗| 亚洲国产中文字幕在线视频| 女同久久另类99精品国产91| 欧美黄色片欧美黄色片| 超色免费av| 久久ye,这里只有精品| 国产精品免费视频内射| a级片在线免费高清观看视频| 久久免费观看电影| 亚洲精品国产色婷婷电影| 国产精品1区2区在线观看. | 色94色欧美一区二区| 69精品国产乱码久久久| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 最新的欧美精品一区二区| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 色老头精品视频在线观看| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 视频在线观看一区二区三区| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 日韩中文字幕欧美一区二区| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 国产精品偷伦视频观看了| 老司机福利观看| 91大片在线观看| 欧美成人午夜精品| 欧美激情极品国产一区二区三区| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 国产成人免费无遮挡视频| 老熟妇仑乱视频hdxx| 亚洲熟妇熟女久久| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产av一区二区精品久久| 久久久久久久久久久久大奶| 国产成人av教育| av国产精品久久久久影院| 精品少妇内射三级| 十八禁高潮呻吟视频| 久久中文字幕人妻熟女| 欧美成人免费av一区二区三区 | 亚洲精品中文字幕在线视频| 90打野战视频偷拍视频| 91麻豆av在线| 在线观看66精品国产| 国产欧美日韩一区二区三| 丝袜人妻中文字幕| 久久99热这里只频精品6学生| 999精品在线视频| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 后天国语完整版免费观看| 性少妇av在线| 日韩免费高清中文字幕av| 不卡一级毛片| 蜜桃在线观看..| 国产精品偷伦视频观看了| 精品国内亚洲2022精品成人 | 日韩制服丝袜自拍偷拍| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| svipshipincom国产片| 久热爱精品视频在线9| 国产欧美日韩一区二区三| 中文欧美无线码| av国产精品久久久久影院| 老熟女久久久| 69av精品久久久久久 | 99国产精品免费福利视频| 国产熟女午夜一区二区三区| 在线观看舔阴道视频| 波多野结衣av一区二区av| 久久99一区二区三区| 欧美中文综合在线视频| 不卡一级毛片| 午夜福利免费观看在线| 亚洲国产中文字幕在线视频| 美女视频免费永久观看网站| 成人亚洲精品一区在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 丝袜在线中文字幕| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 人人澡人人妻人| 欧美日韩亚洲高清精品| 男女免费视频国产| 天堂8中文在线网| 午夜视频精品福利| 久久精品国产亚洲av高清一级| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 亚洲熟女毛片儿| 日韩欧美三级三区| 亚洲人成伊人成综合网2020| 国产精品久久久久成人av| 亚洲国产看品久久| 成人手机av| 午夜免费鲁丝| 在线观看人妻少妇| 欧美日韩成人在线一区二区| 精品卡一卡二卡四卡免费| 日本欧美视频一区| 国产精品 国内视频| 国产精品久久久久久精品电影小说| 一区福利在线观看| 精品熟女少妇八av免费久了| 欧美精品啪啪一区二区三区| 国产高清激情床上av| 黄片大片在线免费观看| 国精品久久久久久国模美| 国产男靠女视频免费网站| 男女下面插进去视频免费观看| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 国产精品久久久久久精品古装| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 亚洲精品乱久久久久久| 国产亚洲一区二区精品| 久久国产精品大桥未久av| 一级片'在线观看视频| 亚洲三区欧美一区| 香蕉丝袜av| 夫妻午夜视频| 欧美+亚洲+日韩+国产| 天堂中文最新版在线下载| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 不卡一级毛片| 男女下面插进去视频免费观看| 亚洲情色 制服丝袜| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 日韩人妻精品一区2区三区| 久久人妻av系列| 韩国精品一区二区三区| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国产av国产精品国产| 丝袜喷水一区| 亚洲天堂av无毛| 99九九在线精品视频| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 欧美乱妇无乱码| 91九色精品人成在线观看| 一区福利在线观看| 性少妇av在线| 不卡一级毛片| 交换朋友夫妻互换小说| 中文字幕高清在线视频| 亚洲视频免费观看视频| 国产一区二区在线观看av| 欧美日韩av久久| 亚洲久久久国产精品| 色婷婷av一区二区三区视频| 国产一区二区三区视频了| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 精品第一国产精品| 国产淫语在线视频| 久久这里只有精品19| 97人妻天天添夜夜摸| 黄色视频不卡| 黄色丝袜av网址大全| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 国产黄频视频在线观看| 不卡av一区二区三区| 人妻一区二区av| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 在线观看www视频免费| 天天添夜夜摸| 国产高清国产精品国产三级| tube8黄色片| 青草久久国产| 亚洲专区字幕在线| 久久久水蜜桃国产精品网| 成年女人毛片免费观看观看9 | 欧美精品亚洲一区二区| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 国产精品久久久久成人av| 国产一区二区三区视频了| 亚洲久久久国产精品| 精品一区二区三区四区五区乱码| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产一卡二卡三卡精品| 美女主播在线视频| 亚洲成人手机| 极品少妇高潮喷水抽搐| 黄频高清免费视频| 国产成人av教育| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 999精品在线视频| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 超色免费av| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 亚洲免费av在线视频| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 在线观看www视频免费| 亚洲,欧美精品.| 超色免费av| 我的亚洲天堂| 蜜桃国产av成人99| 黄片小视频在线播放| 电影成人av| 国产精品 欧美亚洲| 曰老女人黄片| 成年动漫av网址| cao死你这个sao货| 精品欧美一区二区三区在线| 精品高清国产在线一区| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 捣出白浆h1v1| 中文字幕人妻熟女乱码| 淫妇啪啪啪对白视频| 亚洲成人免费电影在线观看| 另类亚洲欧美激情| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 国产熟女午夜一区二区三区| 一级毛片女人18水好多| 一二三四在线观看免费中文在| 少妇精品久久久久久久| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲国产欧美网| 18禁观看日本| 国产免费现黄频在线看| 精品国产乱码久久久久久小说| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 国产一区有黄有色的免费视频| 精品久久久久久久毛片微露脸| 国产精品 国内视频| 老司机午夜福利在线观看视频 | 欧美日韩亚洲高清精品| 午夜福利免费观看在线| 亚洲人成电影免费在线| 看免费av毛片| 妹子高潮喷水视频| a级片在线免费高清观看视频| 高清毛片免费观看视频网站 | 国产欧美日韩一区二区三区在线| 亚洲精品美女久久av网站| 麻豆av在线久日| 成人18禁在线播放| 97人妻天天添夜夜摸| 久久久水蜜桃国产精品网| 成年人黄色毛片网站| 亚洲情色 制服丝袜| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 欧美在线黄色| 极品教师在线免费播放| 亚洲国产av影院在线观看| 国产成人免费无遮挡视频| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 丝袜人妻中文字幕| 久久国产亚洲av麻豆专区| av天堂在线播放| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产一区二区激情短视频| 电影成人av| 热99re8久久精品国产| 亚洲精品国产色婷婷电影| av电影中文网址| videos熟女内射| 精品乱码久久久久久99久播| 母亲3免费完整高清在线观看| 在线观看免费午夜福利视频| 少妇的丰满在线观看| 色综合婷婷激情| 亚洲熟女毛片儿| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产精品九九99| 嫁个100分男人电影在线观看| 色综合欧美亚洲国产小说| 日日夜夜操网爽| 国产精品99久久99久久久不卡| 自线自在国产av| 蜜桃在线观看..| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 在线观看免费午夜福利视频| 国产高清videossex| 搡老熟女国产l中国老女人| 777久久人妻少妇嫩草av网站| videos熟女内射| 久久天堂一区二区三区四区| 久久久久久久精品吃奶| 99久久国产精品久久久| 香蕉久久夜色| 免费黄频网站在线观看国产| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 一区二区三区乱码不卡18| 麻豆乱淫一区二区| 一个人免费看片子| 成人免费观看视频高清| 麻豆国产av国片精品| 9色porny在线观看| 九色亚洲精品在线播放| 国产一区有黄有色的免费视频| 亚洲第一青青草原| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 美女主播在线视频| 最新美女视频免费是黄的| 欧美精品亚洲一区二区| 国产xxxxx性猛交| 免费高清在线观看日韩| 在线观看免费日韩欧美大片| www.熟女人妻精品国产| 中文字幕高清在线视频| 美女视频免费永久观看网站| 国产精品久久久av美女十八| 老汉色av国产亚洲站长工具| 亚洲一码二码三码区别大吗| 亚洲国产欧美在线一区| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 国产视频一区二区在线看| 国产又色又爽无遮挡免费看| 中文字幕人妻丝袜制服| 两人在一起打扑克的视频| 一级毛片精品| 久久久久久人人人人人| 久久久久久久国产电影| 99精品欧美一区二区三区四区| 久久九九热精品免费| 国产精品欧美亚洲77777| 精品欧美一区二区三区在线| 咕卡用的链子| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 三上悠亚av全集在线观看| 国产精品九九99| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 99九九在线精品视频| 免费在线观看影片大全网站| 久久久欧美国产精品| 又大又爽又粗| 色尼玛亚洲综合影院| 国产视频一区二区在线看| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 视频区欧美日本亚洲| 日本一区二区免费在线视频| 91精品国产国语对白视频| 涩涩av久久男人的天堂| 大型av网站在线播放| 大片电影免费在线观看免费| 欧美激情久久久久久爽电影 | 欧美午夜高清在线| 亚洲国产欧美一区二区综合| 狂野欧美激情性xxxx| 97人妻天天添夜夜摸| 亚洲精品一二三| a在线观看视频网站| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 好男人电影高清在线观看| 国产av精品麻豆| 狂野欧美激情性xxxx| 女同久久另类99精品国产91| 岛国毛片在线播放| 麻豆国产av国片精品| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 18禁观看日本| 国产精品av久久久久免费| 一本色道久久久久久精品综合| 国产精品久久久久久精品电影小说| 久热这里只有精品99| 男人操女人黄网站| 黄色怎么调成土黄色| 丝瓜视频免费看黄片| 免费观看av网站的网址| 搡老乐熟女国产| 老熟妇仑乱视频hdxx| kizo精华| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 香蕉久久夜色| av在线播放免费不卡| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 精品少妇内射三级| 一区福利在线观看| 亚洲精品自拍成人| 啦啦啦视频在线资源免费观看| av天堂在线播放| 黄色视频不卡| 久久久久国产一级毛片高清牌| 欧美成人午夜精品| 久久精品人人爽人人爽视色| √禁漫天堂资源中文www| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 国产精品久久久人人做人人爽| 香蕉国产在线看| 国产成+人综合+亚洲专区| 国产精品久久久人人做人人爽| 99香蕉大伊视频| 一区二区三区国产精品乱码| 日韩欧美国产一区二区入口| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 成人18禁在线播放| 国产成人欧美| 99国产综合亚洲精品| 高清在线国产一区| 国产在线一区二区三区精| 久久99一区二区三区| 国产成人av激情在线播放| 丁香六月天网| 久久亚洲真实| 丁香六月欧美| 日韩欧美一区视频在线观看| 中文字幕人妻熟女乱码| 老司机深夜福利视频在线观看| 国产伦理片在线播放av一区| av又黄又爽大尺度在线免费看| 国产在线一区二区三区精| 男人操女人黄网站| 亚洲午夜理论影院| 丝袜喷水一区| 久久99一区二区三区| 老司机午夜十八禁免费视频| 国产区一区二久久| www.熟女人妻精品国产| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产亚洲精品一区二区www | 精品国产乱码久久久久久小说| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 久久中文字幕人妻熟女| 亚洲天堂av无毛| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 欧美老熟妇乱子伦牲交| aaaaa片日本免费| 国产精品亚洲一级av第二区| 一个人免费在线观看的高清视频| 午夜成年电影在线免费观看| 三上悠亚av全集在线观看| 久久久久久久精品吃奶| 99精品在免费线老司机午夜| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 两性夫妻黄色片| 色老头精品视频在线观看| 黄色视频不卡| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲少妇的诱惑av| 亚洲人成电影观看| 一本久久精品| 99国产精品免费福利视频| 精品久久蜜臀av无| 悠悠久久av| 交换朋友夫妻互换小说| 99国产精品99久久久久| 在线永久观看黄色视频| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 国产视频一区二区在线看| 91av网站免费观看| 91大片在线观看| 国产成人系列免费观看| 欧美日韩视频精品一区| 一级黄色大片毛片| 99国产综合亚洲精品| 黄色a级毛片大全视频| avwww免费| aaaaa片日本免费| 久久久精品区二区三区| 18禁美女被吸乳视频| 在线观看免费高清a一片| 黄片小视频在线播放| 老司机福利观看| 久久精品国产a三级三级三级| 1024视频免费在线观看| 又黄又粗又硬又大视频| 欧美日本中文国产一区发布| 美女扒开内裤让男人捅视频| 99久久人妻综合| tocl精华| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 成人亚洲精品一区在线观看| 一级毛片电影观看| av线在线观看网站| 波多野结衣一区麻豆| 成年人午夜在线观看视频| 91成年电影在线观看| 国产成人av激情在线播放| 久久亚洲精品不卡| 久久久久视频综合| 久久精品国产a三级三级三级| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 成年版毛片免费区| 亚洲九九香蕉| 99国产精品99久久久久| 日本精品一区二区三区蜜桃| 777米奇影视久久| 岛国在线观看网站| 亚洲男人天堂网一区| 2018国产大陆天天弄谢| 99国产极品粉嫩在线观看| 69精品国产乱码久久久| 麻豆乱淫一区二区| 高清黄色对白视频在线免费看| 大片免费播放器 马上看| 99在线人妻在线中文字幕 | 日韩中文字幕视频在线看片| 久久精品国产a三级三级三级| 免费观看a级毛片全部| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲av第一区精品v没综合| 久久精品国产综合久久久| 天堂动漫精品| 久久ye,这里只有精品| av在线播放免费不卡| 成年女人毛片免费观看观看9 | 色视频在线一区二区三区| 亚洲精品在线观看二区| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 757午夜福利合集在线观看| 日韩视频一区二区在线观看| 中文字幕av电影在线播放| 精品人妻在线不人妻| 大片电影免费在线观看免费| 天天影视国产精品| 国产单亲对白刺激| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| av天堂在线播放| 国产一区二区在线观看av| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 两性夫妻黄色片| 久久久精品区二区三区| 免费看十八禁软件| 久久国产精品影院| 午夜福利在线观看吧| 午夜激情av网站| 啪啪无遮挡十八禁网站| 不卡av一区二区三区| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 精品卡一卡二卡四卡免费| 在线天堂中文资源库| 淫妇啪啪啪对白视频| 高清视频免费观看一区二区| 制服人妻中文乱码| 午夜福利,免费看| 国产精品一区二区免费欧美| 精品乱码久久久久久99久播| 国产精品一区二区在线不卡| 精品人妻在线不人妻| 午夜成年电影在线免费观看| 欧美黑人精品巨大| √禁漫天堂资源中文www| 两个人免费观看高清视频| www.精华液| 80岁老熟妇乱子伦牲交| av一本久久久久| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 99精品欧美一区二区三区四区| 亚洲色图综合在线观看| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 一级毛片女人18水好多| 国产在线视频一区二区| 一级毛片精品| 亚洲中文av在线| 精品少妇内射三级| 亚洲九九香蕉| 欧美人与性动交α欧美软件| 亚洲国产精品一区二区三区在线| www日本在线高清视频| 人成视频在线观看免费观看| 亚洲色图av天堂| 男女边摸边吃奶| 欧美成人午夜精品| 在线观看免费日韩欧美大片| 另类精品久久| 制服诱惑二区| 亚洲专区中文字幕在线| 女人精品久久久久毛片| 亚洲成人免费av在线播放| av又黄又爽大尺度在线免费看| 国产又爽黄色视频| 国产激情久久老熟女| 国产不卡一卡二| 高清在线国产一区| 日本精品一区二区三区蜜桃| 看免费av毛片| 91成年电影在线观看| 成人永久免费在线观看视频 | 亚洲精品av麻豆狂野| 国产在线免费精品|