對比培養(yǎng)法和PCR法檢測泌尿生殖道感染患者解脲脲原體的比較研究

雷星　田松婭　雷英俊

【摘? 要】目的：比較聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR法）和培養(yǎng)法在泌尿生殖道感染患者解脲脲原體檢測中的診斷價值。方法：觀察對象為我院婦科、男性科從2018年6月到2019年6月間就診的、疑似為非淋球菌性尿道炎患者128例，采集所有患者尿道或者是宮頸拭子同時進(jìn)行解脲脲原體的液體培養(yǎng)和PCR法檢測，評估兩種方法的檢測結(jié)果。結(jié)果：128例患者中，解脲脲原體真陽性患者37例，女性感染率81.1%明顯高于男性感染率18.9%（P<0.05）;PCR法檢測的特異度98.9%、靈敏度100.0%均高于培養(yǎng)法的94.9%、61.2%，且靈敏度數(shù)據(jù)間的差異檢驗存在統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：PCR法與培養(yǎng)法都能用來檢測解脲脲原體，但PCR法較之于培養(yǎng)法有更高的靈敏度。

【關(guān)鍵詞】聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng);培養(yǎng)法;泌尿生殖道感染;解脲脲原體

【中圖分類號】R691.3????? 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A????? 【文章編號】1004-7484（2019）06-0060-01

解脲脲原體屬于原核細(xì)胞型的微生物，和不育癥、圍產(chǎn)期感染與泌尿生殖道感染的發(fā)生都密切聯(lián)系[1]，同時也是性傳播疾病的一個關(guān)鍵病原體[2]。近些年在臨床上，由于解脲脲原體所導(dǎo)致泌尿生殖道感染發(fā)生率愈漸提高，受到臨床學(xué)者的廣為關(guān)注。我們認(rèn)為，對疑似患者做解脲脲原體檢測意義重大。培養(yǎng)法是檢測解脲脲原體的傳統(tǒng)方法，隨著研究的深入，PCR法也被逐漸的應(yīng)用到臨床檢測中，本文便對其應(yīng)用價值進(jìn)行分析。

1資料來源和方法

1.1標(biāo)本來源

觀察對象為我院婦科、男性科從2018年6月到2019年6月間就診的、疑似為非淋球菌性尿道炎患者128例，其中男性患者57例、女性患者71例，患者年齡最小的是17歲、最大的是59歲，平均年齡為38.2±2.7歲，病程從1周到3周不等，平均病程為2.1±0.3周。所有男性患者皆有輕度的尿急、尿頻和尿道刺癢感表現(xiàn)，部分患者尿道口殘留有稀薄分泌物，女性患者則有外陰瘙癢、下腹不適、白帶增多等癥狀表現(xiàn)。排除掉近十天內(nèi)有抗生素、磺胺類藥物服用史者。

1.2方法

先進(jìn)行標(biāo)本的采集。叮囑受檢者于采樣前2h內(nèi)不能排尿。

男性：先用滅菌鹽水清潔尿道口，將男性用無菌拭子伸入尿道2-3cm，用力旋轉(zhuǎn)1-2圈，取出拭子;

女性：先清潔宮頸口過多的分泌物，將女性用無菌拭子伸入宮頸內(nèi)2-3cm，用力旋轉(zhuǎn)1-2圈，取出拭子，取出的分泌物應(yīng)略帶粘膜。

1.2.1PCR法

往樣品收集管中加入1ml無菌生理鹽水，充分震蕩混勻，然后把全部液體倒入1.5ml的滅菌離心管中，棉拭子靠近離心管壁擠干后丟棄。取所得溶液，以12000rpm持續(xù)離心5分鐘，除去上清液，于沉淀中摻入50ul的DNA提取液，混合均勻后，靜置10分鐘左右，將5ul上清液加入到含有解脲脲原體的Taq中做PCR反應(yīng)。

1.2.2培養(yǎng)法

收集到的標(biāo)本拭子插進(jìn)培養(yǎng)瓶，于接近液面上方的瓶壁處反復(fù)擠壓、旋轉(zhuǎn)拭子，促使拭子中的樣本有效滲入到培養(yǎng)瓶中?；旌暇鶆蛑螅?00ul加入檢測卡的各孔位中，滴2滴無菌礦物油，蓋上蓋，于35～37℃的環(huán)境下孵箱培養(yǎng)。48h后，若培養(yǎng)液顏色無改變，判斷為陰性，若培養(yǎng)基顏色由黃色變至紅色，判斷為陽性。

1.3判斷結(jié)果

①真陽性為：2種及2種以上的檢測所得結(jié)果皆為陽性;②真陰性為：2種及2種以上的檢測所得結(jié)果皆為陰性;③靈敏度為：真陽性例數(shù)/（真陽性例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100.0%;④特異度為：真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽性例數(shù)）×100.0%。

1.4統(tǒng)計方法

本次研究所有資料均由同一人錄入到EXCEL，保證資料準(zhǔn)確、無誤。將數(shù)據(jù)建立的EXCEL數(shù)據(jù)庫導(dǎo)入SPSS20.0軟件，用±s來代表計量資料，行t檢驗，P<0.05認(rèn)定為差異存在顯著性。

2結(jié)果

2.1檢測結(jié)果分析

128例患者中，解脲脲原體真陽性患者37例，占28.9%，男7例、女30例，分別占18.9%、81.1%，兩者差異比較存在統(tǒng)計學(xué)意義（x2=28.595，P<0.05）。

2.2培養(yǎng)法和PCR法檢測結(jié)果對比

由下表1中數(shù)據(jù)結(jié)果可見，PCR法檢測的特異度98.9%、靈敏度100.0%均高于培養(yǎng)法的94.9%、61.2%，且靈敏度數(shù)據(jù)間的差異檢驗存在統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

3討論

培養(yǎng)法和PCR法都是臨床檢測解脲脲原體的常用方法，其中培養(yǎng)法的操作簡單，同時還能做藥敏試驗，適用于基層醫(yī)院，但樣品中易混入其它微生物比如說念珠菌、變形桿菌等，可能會使假陽性結(jié)果提高[3]。PCR法則能快速、精準(zhǔn)且靈敏的檢出病原體中DNA，可有效避免由于污染而導(dǎo)致的假陽性，能更靈敏和精準(zhǔn)的反應(yīng)出病原體感染情況，有一定技術(shù)條件的醫(yī)院都能開展[4、5]。結(jié)合本文研究結(jié)果來看：PCR法檢測的特異度98.9%、靈敏度100.0%均高于培養(yǎng)法的94.9%、61.2%，且靈敏度數(shù)據(jù)間的差異檢驗存在統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）?？梢?，這兩種方法都能用來檢測解脲脲原體，但PCR法較之于培養(yǎng)法有更高的靈敏度，建議在實驗室條件較佳的醫(yī)療機構(gòu)著重推廣使用。

參考文獻(xiàn)：

[1]張欠欠，仵恒立，胡軍婷等.熒光定量PCR檢測淋球菌、沙眼衣原體和解脲脲原體結(jié)果分析[J].中國人獸共患病學(xué)報，2016，32（3）：312-314.

[2]張艷，華川，李蘇利等.解脲脲原體生物群分布與耐藥性差異研究[J].中國人獸共患病學(xué)報，2016，32（1）：45-50.

[3]胡盛君.泌尿生殖道感染病原體的核酸鑒定[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2014，33（21）：53.

[4]黃會，趙香依，吳多榮等.熒光定量PCR檢測女性生殖道解脲脲原體原體的應(yīng)用評價[J].海南醫(yī)學(xué)，2015，27（18）：2720-2722.

[5]金寧，劉文力，楊琳等.泌尿生殖道炎細(xì)小脲原體PCR檢測結(jié)果臨床研究[J].中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)雜志，2015，14（5）：304-307.