抗生素對尿干化學蛋白檢測影響分析＊

趙 嫚 袁緒龍 李和樓 劉慶華 張 曼

1.山東第一醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院，山東 泰安 271000； 2. 首都醫(yī)科大學附屬北京世紀壇醫(yī)院，北京 100038； 3. 尿液細胞分子診斷北京市重點實驗室，北京 100038

尿蛋白是尿液化學成分檢查中的重要項目之一，對尿蛋白的檢測能夠對腎臟及全身其他系統的疾病進行早期排查。正常情況下，由于尿蛋白可被重吸收，因此在健康成人尿中含量很少，為30～130 mg/24 h，當含量異常增加時，能為腎臟、泌尿系統疾及腎臟外疾病的診斷提供較有價值的信息[1]。目前，臨床上檢查尿蛋白最為常用的方法是尿干化學法，但是這種檢測方法易受各種因素的影響而出現假性結果。且目前關于抗生素對尿干化學檢測尿蛋白影響的相關研究較少，因此本研究進行相關統計，結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

隨機收集2018年8月—2019年1月來我院就診并進行尿液檢查的患者尿液標本1242例，年齡12～78歲。其中，男性585例，女性657例。采樣過程嚴格按照操作規(guī)范完成，務必做到清潔，男性避免尿液標本中混入精液或前列腺液，女性避免混入陰道分泌物。送檢尿液按要求收集并倒進試管，貼好標簽，送到檢驗科，2 h內檢測完并報告。

1.2 檢驗方法

尿干化學試紙法：采用的儀器為尿干化學分析儀Mejer-700,嚴格按照尿干化學分析儀的使用操作說明進行規(guī)范操作，儀器做好日常保養(yǎng)及質控，結果分為-，+，2+，3+表示?；腔畻钏岱ǎ?1)取3～5 ml新鮮尿液加入試管。(2)滴加磺基水楊酸溶液3～4滴，形成界面。(3)立即觀察，如有渾濁，提示尿液中含有蛋白質，渾濁深淺表示含量的多少 ，結果分為-，+，2+，3+表示。尿全自動沉渣法：采用的儀器為尿沉渣分析儀Cobio-xs，尿沉渣分析儀按操作SOP操作文件進行，做好機器保養(yǎng)和質控。人工顯微鏡鏡檢法：使用顯微鏡為日本奧林巴斯顯微鏡BX-51, 按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》操作。尿液用一次性吸管反復吹打混勻，然后取一滴尿液滴于玻片上，將玻片置于顯微鏡下觀察計數。

1.3 觀察指標與評價標準

(1)干化學法：蛋白陰性；(2)磺基水楊酸法：陰性，清晰不顯渾濁；(3)尿沉渣分析儀法，管型 0～1/μl，超過此范圍視為陽性；(4)鏡檢法：管型 0～1 /μl，超過此范圍視為陽性。

1.4 統計學處理

以SPSS18.0統計學軟件進行數據分析，用χ2檢驗比較數據，以P≤0.05為差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 干化學法測蛋白、磺基水楊酸法測蛋白、尿沉渣自動分析儀和人工顯微鏡檢尿管型結果

干化學法測尿蛋白的陽性率為28.74%，磺基水楊酸法測尿蛋白陽性率為36.07%，尿沉渣儀測管型陽性率為13.12%，顯微鏡檢管型陽性率為7.97%，磺基水楊酸法測尿蛋白陽性率最高，顯微鏡測管型陽性率最低，見表1,差異有統計學意義(P<0.05)。

表1 4種檢測方法檢測尿液結果[n(%)]

2.2 干化學法與磺基水楊酸法測尿蛋白檢測結果的比較

在檢測的1242份隨機尿標本中，干化學檢測法陽性(1+～3+)、磺基水楊酸檢測法陰性的有12份；干化學檢測法陰性、磺基水楊酸檢測法陽性(1+～3+)的有103份，見表2，兩種方法的檢測結果之間差異有統計學意義(P<0.05)。

表2 干化學法與磺基水楊酸法尿蛋白檢測結果的比較 (n)

2.3 抗生素對尿干化學蛋白檢測的影響

選取尿干化學檢測法與磺基水楊酸檢測法均陽性,且使用頭孢抗生素治療的患者65例，分別在頭孢抗生素使用前、使用2 h、使用4 h、使用6 h后用尿干化學法和磺基水楊酸法檢測尿蛋白。使用頭孢抗生素2～4 h對干化學尿蛋白檢測會造成假陰性，6 h后影響作用消失。而使用頭孢抗生素2～6 h對磺基水楊酸法檢測尿液蛋白均沒有干擾作用，差異有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 抗生素對尿干化學蛋白的干擾 [n(%)]

3 討 論

干化學法檢測尿蛋白原理:是利用了pH指示劑蛋白質誤差法，在pH 3.2的條件下四溴酚藍產生陰離子，與帶陽離子的蛋白質結合發(fā)生顏色變化，顏色深淺與蛋白質含量成正比[2]?；腔畻钏岱y尿蛋白原理：蛋白質等電點原理，易促使蛋白形成不溶性沉淀，磺基水楊酸為微生物堿，在酸性條件下，其陰離子可與帶正電荷的蛋白質結合成不溶性蛋白鹽而沉淀[3-4]。本研究發(fā)現磺基水楊酸法測尿蛋白陽性檢出率明顯高于尿干化學蛋白檢測法，有文獻報道，尿干化學法對清蛋白敏感，對球蛋白不敏感，且可漏檢本周氏蛋白，而磺基水楊酸法與清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周氏蛋白等均能發(fā)生反應[5]。

管型是蛋白質、細胞及其崩解物在腎小管、集合管內凝固而成的圓柱形蛋白聚體[6]，它的檢測對腎臟實質性疾病診斷、治療和預后觀察均有重要意義。本研究發(fā)現造尿沉渣分析儀檢測管型假陽性率偏高，尿沉渣儀檢測管型是應用數碼照相機對每份標本捕捉一定數量的數字化畫面，然后由自動微粒識別軟件進行鏡檢圖像分析處理，模仿人工顯微鏡鏡檢方式[7-9]。人工顯微鏡檢法為鏡檢管型的確證方法，操作簡單，但是存在操作繁瑣，效率低下的缺點。造成尿沉渣分析儀檢測管型假陽性率偏高的原因多為上皮細胞、黏液絲、棉毛、麻纖維等類管型異物、細菌團、非晶形尿酸鹽結晶、非晶形磷酸鹽結晶和真菌菌絲等[10]，大量白細胞或紅細胞有時也可導致儀器病理管型檢測結果假陽性。

臨床上常常使用大劑量抗生素進行抗感染治療，頭孢類抗生素是廣泛使用的一種抗生素。頭孢菌素類分子中含有頭孢烯的半合成抗生素，屬于β-內酰胺類抗生素[11-12]，對細菌的選擇作用強，具有抗菌譜廣、抗菌作用強、耐青霉素酶、過敏反應少等優(yōu)點,是一類高效、低毒的重要抗生素。陳克[13]研究發(fā)現:使用頭孢抗生素1～24 h可以使尿蛋白檢測結果出現假陽性，而劉云芳[14]則報道:頭孢唑林可使尿蛋白測定結果陽性程度降低。本實驗研究發(fā)現，尿干化學檢測法中，頭孢類抗生素使用2～4 h后，尿蛋白陽性率明顯降低，在4 h后，假陰性率明顯升高，6 h后影響作用消失，但使用頭孢抗生素2～6 h對磺基水楊酸法檢測尿液蛋白均沒有干擾作用。這與劉云芳的研究相似：頭孢類抗生素可使尿蛋白陽性檢測結果假性降低或呈假陰性。

綜上所述，在進行尿蛋白檢驗時，應根據尿干化學、沉渣分析儀及顯微鏡檢共同判斷，對尿蛋白陽性的標本，無論尿沉渣分析儀有無管型提示均應鏡檢。而對尿蛋白陰性標本，尿沉渣分析儀提示有管型的標本也應鏡檢，必要時使用磺基水楊酸法進行確證。大劑量使用頭孢類抗生素后短時間內不進行尿蛋白的檢測，在消除藥物的干擾作用后進行檢測，提高檢測結果的準確性和可信度， 為臨床疾病的診斷提供更好的幫助。