雙唑草腈原藥氣相色譜分析方法研究

萬宏劍，曹慶亮，王洪雷

（江蘇省農(nóng)藥研究所股份有限公司，南京 210046）

雙唑草腈（pyraclonil）是由德國(guó)拜耳公司發(fā)現(xiàn)的雙吡唑類除草劑，屬原卟林原氧化酶（PPO）抑制劑，對(duì)稗草、螢藺、牛毛氈、雨久花、陌上菜、野慈姑等雜草均具有較好的防效，而且能夠有效防除對(duì)磺酰脲類除草劑產(chǎn)生抗性的雜草。其開發(fā)代號(hào)為AEB 172391，化學(xué)名稱為1-(3-氯-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-5-[甲基(丙-2-炔基)氨基]吡唑-4-腈，分子式為C15H15ClN6，相對(duì)分子質(zhì)量為314.77，CAS登錄號(hào)為［158353-15-2］，結(jié)構(gòu)式見圖1[1-4]。

圖1 雙唑草腈的結(jié)構(gòu)式

本研究采用氣相色譜法對(duì)雙唑草腈原藥進(jìn)行定量分析，操作方便、快速、準(zhǔn)確，雜質(zhì)分離度較好，可為企業(yè)生產(chǎn)過程中的質(zhì)量控制和檢驗(yàn)檢測(cè)提供參考。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

氣相色譜：Agilent GC 7890B配7693 Auto Sampler自動(dòng)進(jìn)樣器，帶氫火焰離子化檢測(cè)器（FID），Agilent OpenLAB色譜處理工作軟件，色譜柱：Agilent DB-5毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）。

99.0%雙唑草腈標(biāo)準(zhǔn)品，和光純藥工業(yè)株式會(huì)社；97%雙唑草腈原藥，江蘇南方農(nóng)藥研究中心；三氯甲烷（分析純）。內(nèi)標(biāo)物：癸二酸二辛酯（無干擾分析雜質(zhì)）。內(nèi)標(biāo)物溶液的配制：稱取癸二酸二辛酯1.25 g于250 mL容量瓶中，加入200 mL三氯甲烷超聲溶解后，冷卻至室溫，定容至刻度，搖勻后備用。

1.2 氣相色譜操作條件

色譜操作條件：色譜柱溫度250℃，進(jìn)樣器溫度280℃，檢測(cè)器溫度280℃；載氣流速：1.8 mL/min；氫氣流速：30 mL/min；空氣流速：300 mL/min；分流比：39∶1；進(jìn)樣量：1 μL；保留時(shí)間：雙唑草腈約為6.2 min，內(nèi)標(biāo)物約為8.1 min。上述色譜條件是典型色譜條件，可根據(jù)操作條件做適當(dāng)調(diào)整，以獲得最佳分離效果。雙唑草腈標(biāo)樣和試樣色譜圖見圖2和圖3。

圖2 雙唑草腈標(biāo)樣氣相色譜圖

圖3 雙唑草腈試樣氣相色譜圖

1.3 測(cè)定步驟

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

稱取雙唑草腈標(biāo)準(zhǔn)品0.06 g（精確至0.000 2 g），置于25 mL容量瓶中，用10 mL移液管準(zhǔn)確加入10 mL內(nèi)標(biāo)物溶液，超聲溶解并冷卻后，用三氯甲烷定容至刻度，搖勻過濾后備用。

1.3.2 試樣溶液的配制

稱取試樣0.06 g（精確至0.000 2 g），置于25 mL容量瓶中，加入10 mL內(nèi)標(biāo)物溶液，超聲溶解并冷卻后，用三氯甲烷定容至刻度，搖勻過濾后備用。

1.3.3 測(cè)定

在上述測(cè)定條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針雙唑草腈標(biāo)樣的峰面積相對(duì)變化小于1.0%。按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

1.3.4 計(jì)算

將測(cè)量的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標(biāo)樣溶液中的雙唑草腈的峰面積與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比進(jìn)行平均，雙唑草腈的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w（%）按下式計(jì)算。

式中：A1為標(biāo)樣溶液中雙唑草腈與內(nèi)標(biāo)物峰面積比的平均值；A2為試樣溶液中雙唑草腈與內(nèi)標(biāo)物峰面積比的平均值；m1為標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2為試樣的質(zhì)量，g；P為標(biāo)樣中雙唑草腈的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與分析

2.1 內(nèi)標(biāo)物的選擇

為了快速準(zhǔn)確測(cè)定雙唑草腈的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，需要選擇合適的內(nèi)標(biāo)物。選用癸二酸二丁酯、磷酸三苯酯、癸二酸二辛酯等多種內(nèi)標(biāo)物進(jìn)行試驗(yàn)。結(jié)果表明，癸二酸二丁酯、磷酸三苯酯出峰在試樣前，干擾物較多；癸二酸二辛酯出峰在試樣后，與各組分雜質(zhì)干擾少，分離效果較好，峰形對(duì)稱且重復(fù)性好。故采用癸二酸二辛酯為內(nèi)標(biāo)物。

2.2 分析方法的線性相關(guān)性

分別稱取雙唑草腈標(biāo)準(zhǔn)品0.015 41、0.030 22、0.060 56、0.091 28、0.123 52 g于25 mL容量瓶中，用移液管準(zhǔn)確加入10 mL內(nèi)標(biāo)物溶液，超聲溶解并冷卻后，加入三氯甲烷定容至刻度，搖勻過濾后進(jìn)樣，在上述氣相色譜操作條件下進(jìn)行測(cè)定。分別以雙唑草腈與內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量比為橫坐標(biāo)，雙唑草腈與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比為縱坐標(biāo)繪制線性關(guān)系圖，得線性回歸方程y=0.756 3 x＋0.003 8，R=0.999 8，見圖4。

圖4 雙唑草腈線性關(guān)系圖

2.3 方法的精密度測(cè)定

分別稱取6份雙唑草腈試樣于25 mL容量瓶中，在上述氣相色譜操作條件下進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見表1。測(cè)得雙唑草腈標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.33，變異系數(shù)為0.34%。

2.4 方法的準(zhǔn)確度測(cè)定

分別稱取5份雙唑草腈試樣于25 mL容量瓶中，分別加入不同質(zhì)量的雙唑草腈標(biāo)樣，并加入10 mL內(nèi)標(biāo)物溶液，超聲溶解并冷卻后，加入三氯甲烷定容至刻度，搖勻過濾后進(jìn)樣，在上述氣相色譜操作條件下進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得平均回收率為100.20%，見表2。

表1 分析方法的精密度測(cè)定結(jié)果

表2 分析方法的準(zhǔn)確度測(cè)定結(jié)果

3 結(jié)論

本文以三氯甲烷為溶劑，癸二酸二辛酯為內(nèi)標(biāo)物，使用毛細(xì)管色譜柱和氫火焰離子化檢測(cè)器氣相色譜法測(cè)定雙唑草腈的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。本定量檢測(cè)方法的線性關(guān)系、精密度良好，準(zhǔn)確度高，操作簡(jiǎn)便快速，是一種較為實(shí)用的分析方法，可以滿足日常產(chǎn)品檢驗(yàn)的需要。