SRAP標(biāo)記在植物研究中的應(yīng)用

楊金華

摘 ? 要：SRAP標(biāo)記技術(shù)是現(xiàn)階段植物研究中應(yīng)用的新型分子標(biāo)記技術(shù)。SRAP與其他分子標(biāo)記技術(shù)相比具有操作便捷、數(shù)據(jù)精準(zhǔn)以及高效率等優(yōu)點(diǎn)。也正因如此，SRAP分子標(biāo)記技術(shù)在植物研究中迅速普及，其在植物育種品質(zhì)資源以及植物遺傳育種研究中起到了非常重要的作用。為此，對SRAP分子標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行了分析，并對其在植物研究中的應(yīng)用進(jìn)行了研究。

關(guān)鍵詞：SRAP標(biāo)記;植物研究;實(shí)際應(yīng)用

進(jìn)入21世紀(jì)以來，高新科學(xué)技術(shù)得到了快速發(fā)展，分子標(biāo)記技術(shù)也有了一定的進(jìn)步。特別是SRAP分子標(biāo)記技術(shù)的提出與應(yīng)用，對植物的研究起到了非常重要的作用，如植物基因定位與標(biāo)記、連鎖圖譜搭建、植物種群遺傳以及植物種子品質(zhì)鑒別等方面[1]。正因此，要對SRAP分子標(biāo)記技術(shù)實(shí)現(xiàn)進(jìn)一步的分析和研究，從而發(fā)揮出SRAP分子標(biāo)記技術(shù)的作用，推動(dòng)對于植物的研究。

1 ? SRAP分子標(biāo)記技術(shù)的原理以及特點(diǎn)分析

1.1 ? SRAP分子標(biāo)記技術(shù)的原理

SRAP分子標(biāo)記技術(shù)即序列擴(kuò)增多態(tài)性SRAP技術(shù)，是一種以PCR標(biāo)記技術(shù)為基礎(chǔ)的新型技術(shù)，其最早是在21世紀(jì)初由美國學(xué)者提出的。SRAP分子標(biāo)記技術(shù)主要是以引物設(shè)計(jì)為核心，以O(shè)RFS的序列擴(kuò)增為基礎(chǔ)。在SRAP分子標(biāo)記應(yīng)用中，長度為17bp的是上游引物，其中前10bp是由填充序列構(gòu)建成的5端，其余的便是由CCGG構(gòu)成的核心序列以及選擇堿基。長18bp的則是下游引物，其中前約11bp是前5端的填充序列，剩下的則是由AATT構(gòu)成的核心序列以及選擇堿基。其主要是利用不同物種或個(gè)體中內(nèi)含、間隔及啟動(dòng)等因素不同而產(chǎn)生的序列擴(kuò)增多態(tài)性進(jìn)行標(biāo)記。

1.2 ? SRAP分子標(biāo)記技術(shù)的特點(diǎn)

SRAP分子標(biāo)記技術(shù)的操作非常便捷，只需要利用50℃的退火溫度以及17bp或18bp的引物就能確保擴(kuò)增結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。另外，SRAP分子標(biāo)記技術(shù)可以利用對選擇堿基的改變，獲取多種引物。而且由于其上下游的引物擁有多種組合方式，既能提升引物的利用率又能降低投入成本。在進(jìn)行標(biāo)記測序時(shí)，因SRAP技術(shù)的引物比較長，其也比其他標(biāo)記技術(shù)更容易測序。所以，SRAP分子標(biāo)記技術(shù)除了操作便捷、穩(wěn)定性高以外，其還具有效率高、共顯性標(biāo)記明顯以及易測序、易分離條帶等特點(diǎn)。

2 ? SRAP分子標(biāo)記技術(shù)在植物研究中的應(yīng)用

2.1 ? 構(gòu)建精準(zhǔn)的植物遺傳基因圖譜

在進(jìn)行植物研究時(shí)，植物遺傳基因圖譜是非常重要的，其能夠?yàn)橹参锘蜓芯俊⒖茖W(xué)育種、種質(zhì)提升等提供科學(xué)依據(jù)。其詳細(xì)來說就是以植物遺傳基因分析研究得出的數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)，將植物遺傳基因在染色體的位置進(jìn)行準(zhǔn)確排列的圖譜。而SRAP標(biāo)記技術(shù)不僅能對RI系進(jìn)行圖譜構(gòu)建，還能將其中共線性分離狀態(tài)的標(biāo)記區(qū)分出來。另外，在用SRAP分子標(biāo)記技術(shù)構(gòu)建的遺傳基因圖譜與其他標(biāo)記技術(shù)構(gòu)建的圖譜對比時(shí)，可發(fā)現(xiàn)在引物多態(tài)性條帶數(shù)量及多態(tài)性引物比例上，SRAP分子標(biāo)記技術(shù)的應(yīng)用效果要高于其他標(biāo)記技術(shù)。

2.2 ? 分析植物遺傳的多樣性

對于植物而言，其遺傳與其他物種一樣都是具有多樣性的。所謂遺傳多樣性，就是指同物種不同群體或同群體不同個(gè)體間產(chǎn)生的基因突變。加強(qiáng)對于植物遺傳多樣化的研究，不僅能夠使人們更好地了解植物的基因結(jié)構(gòu)以及品種差異，還能促進(jìn)對于植物的保護(hù)以及對植物基因突變的研究?，F(xiàn)階段，常用的遺傳多樣性標(biāo)記技術(shù)主要就是AFLP以及SRAP技術(shù)，但就實(shí)際效果而言，SRAP分子標(biāo)記技術(shù)在進(jìn)行遺傳多樣性研究時(shí)所提供的信息可靠性以及精準(zhǔn)性要明顯高于AFLP標(biāo)記技術(shù)，而且利用SRAP分子標(biāo)記技術(shù)能夠?qū)χ参锏倪M(jìn)化歷史進(jìn)行更加全面的體現(xiàn)。

2.3 ? 協(xié)助進(jìn)行基因比較的研究

在進(jìn)行基因的比較時(shí)，首先就得利用SRAP分子標(biāo)記技術(shù)對植物內(nèi)的DNA標(biāo)記、利用，然后再對植物進(jìn)行遺傳試驗(yàn)，最后通過對分子標(biāo)記在不同植物基因中的比較，實(shí)現(xiàn)對植物基因排列特點(diǎn)的比較和研究。SRAP技術(shù)能夠使分子標(biāo)記在植物基因中清晰、準(zhǔn)確地標(biāo)出，協(xié)助其更好地完成對于基因比較的研究。

2.4 ? 協(xié)助構(gòu)建基因轉(zhuǎn)錄圖譜

基因轉(zhuǎn)錄圖譜作為現(xiàn)階段基因?qū)W研究的重要工具，其主要是利用PCR技術(shù)對編碼區(qū)的序列進(jìn)行多態(tài)性檢測的。而SRAP標(biāo)記技術(shù)則可以通過對引物的不同組合，對植物基因序列進(jìn)行檢測，利用其共顯性準(zhǔn)確、快速的特點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)對基因轉(zhuǎn)錄圖譜的科學(xué)、高效化構(gòu)建。

總之，SRAP分子標(biāo)記技術(shù)因其本身的優(yōu)勢和特點(diǎn)，對植物的研究起到了非常重要的作用。但對于SRAP分子標(biāo)記技術(shù)的應(yīng)用不能僅限于此，要對其進(jìn)行深入的了解和研究，使其能夠在未來為植物研究提供技術(shù)保障?，F(xiàn)階段要把SRAP分子標(biāo)記技術(shù)與其他分子標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行有效結(jié)合，通過各項(xiàng)技術(shù)的配合應(yīng)用，進(jìn)一步優(yōu)化對植物的研究和發(fā)展。

參考文獻(xiàn)：

[ 1 ] 詹海仙，裴香萍，劉計(jì)權(quán)，等.分子標(biāo)記在豆科藥食兼用植物研究中的應(yīng)用[J].山西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2018，4（6）：1049-1052.

（收稿日期：2019-05-28）